猪感染尼帕病毒的流行特点及防控

尼帕病毒病是一种新发人兽共患传染病,1998年在马来西亚首次出现。引起该病的病原为尼帕病毒(Nipah virus,NiV),其在猪群中具有高度传染性,人感染后死亡率达40%~75%。NiV主要通过猪只间的直接接触传播,也可通过设备、车辆、衣服、靴子以及犬、猫等机械携带传播;猪是NiV传播的放大器,主要通过呼吸道飞沫或被感染组织将病毒传播给人。果蝠是NiV的天然宿主,因此养猪场选址要远离果树种植区。目前还没有批准的人用或兽用尼帕病毒病疫苗或药物,但多种疫苗候选株在动物模型中显示出良好的保护效果,包括病毒活载体疫苗株、病毒糖蛋白亚单位疫苗株、颗粒样病毒疫苗株等;成功防控NiV感染的关键是做到早发现,在NiV传入高风险地区,对猪群持续进行血清学监测,并对猪场进行严格生物安全管理。本文结合已暴发的猪群尼帕病毒病疫情及人间疫情,探讨猪感染NiV的流行特点,并通过分析暴发原因提出防控措施,以期为猪群中防止该病发生及突发疫情时的应急处置提供参考。

尼帕病毒病疫苗研究进展

尼帕病毒病是一种人兽共患病,1998年在马来西亚首次出现。引起该病的病原为尼帕病毒,它是一种单负股RNA病毒,可感染猪、马、犬、猫等多种动物,对人的致死率可达75%以上。目前,尚无有效疫苗上市。该病毒的表面糖蛋白是目前疫苗研究的主要靶标。以此为靶标,已有多种候选疫苗在不同动物模型中表现出良好的免疫效果,其中亚单位疫苗、重组活载体疫苗和mRNA疫苗是当前研究热点,已有3种相关人用候选疫苗进入临床试验。目前尼帕病毒病兽用疫苗研究进展缓慢,而兽用疫苗的使用可以有效预防病毒的跨种传播,符合“同一健康”理念,因此应加大兽用疫苗的研发力度。本文对尼帕病毒病不同类型疫苗相关研究进展进行了综述,并探讨了疫苗研究中的问题,以期为尼帕病毒病疫苗研究提供参考。

尼帕病毒TaqMan探针荧光定量PCR检测方法建立

尼帕病毒病是一种人畜共患烈性传染病,为能够快速特异检测该病毒,本研究根据尼帕病毒(NiV)N基因序列保守区设计特异性引物和探针,建立一种针对NiV的TaqMan探针荧光定量PCR(qPCR)检测方法,该方法特异性好、敏感性高、稳定性强,可鉴别NiV与其他猪病病毒,扩增效率为102%,最低检测限14.8 copies/μL,敏感性高于常规PCR 10倍,该检测方法的建立可为NiV的快速检测提供技术手段,对促进猪类养殖业的健康发展具有重要意义。

尼帕病毒的环境存活能力及相关消毒剂研究现状

尼帕病毒(NiV)是一种高致病性病毒,其在环境中的存活能力及对消毒剂的敏感性对防控其人兽感染至关重要。NiV对温度、干燥、紫外线均较敏感,对pH的耐受范围较广;在适宜环境下,病毒在尿液和果汁中稳定性较高。季铵类、含氯类及高浓度醇类消毒剂等均可完全灭活NiV,但其有效浓度和消毒时间是确保病毒被完全灭活的关键因素,同时要现配现用。本文综述了NiV在不同环境因素下的存活能力及其相关消毒剂研究现状,以期为NiV感染防控提供参考。

尼帕病毒G蛋白的结构与功能及其应用研究进展

尼帕病毒(Nipah virus,NiV)是一种高致死性的人兽共感染副黏病毒,能引发严重呼吸道疾病和尼帕病毒性脑炎,目前临床上无批准的用于人类感染的疫苗或治疗药物。NiV基因组共编码6种蛋白,其中G蛋白作为其受体蛋白以及重要的免疫原性蛋白,参与病毒入侵等过程,能刺激机体产生中和性抗体。因此,G蛋白在NiV致病性研究以及疫苗和检测技术研发方面具有巨大的潜在价值。本文对NiV G蛋白的结构和生理功能以及基于G蛋白的疫苗和检测技术研究现状进行综述,并展望了G蛋白的应用研究方向,以期为阐明NiV的致病机制和疫苗研发提供重要参考。

猪尼帕病毒的诊断、治疗和疫苗研发情况

尼帕病毒病(Nipah或Nee-pa)是一种由尼帕病毒(Nipah virus)引起的人畜共患病,尼帕病毒属于副粘病毒科Henipavirus属。在人类中,该病毒导致快速发展成严重疾病,其特征可能是严重的呼吸道疾病或致命的脑炎。6月龄以下的猪感染可能会出现呼吸道疾病和神经症状。尼帕病毒在人类和猪中的高致病性,但当下仍缺乏对抗这种病毒感染的疫苗或治疗方法,这已经引起了全世界研究人员的关注。

尼帕病毒的最新研究进展

尼帕病毒是一种有包膜的多形性病毒,直径40~600nm,属于亨尼帕病毒属,副黏病毒科,单股负链RNA病毒目。病毒能引起人兽共患病,可在人际间传播,并在南亚、东南亚等地多次暴发流行。尼帕病毒主要侵害呼吸系统和中枢神经系统,引起急性发热、头痛和不同程度的意识障碍,病死率高达40%~75%。尼帕病毒已被世界卫生组织列入其重点病原体蓝图清单,作为8种最危险的病原体之一,需要监测并准备应对措施以防止大流行。然而目前尚缺乏有效的预防疫苗和特效的抗病毒药物,治疗主要依靠系统性对症支持疗法。本文就尼帕病毒在病毒学、致病机制、尼帕病毒感染的临床特征、诊断学、抗病毒药物、疫苗研发和流行病学等方面的最新研究进展展开综述,旨在为未来的研究和防控提供参考。

尼帕病毒病的流行现状与防治研究进展

尼帕病毒病(Nipah virus disease, NVD)是一种急性接触性、高致死性人兽共患传染病。临床症状主要表现为发热、头痛、脑炎及咳嗽等。1998年在马来西亚和新加坡先后出现,1999年分离并确诊其病原为尼帕病毒。之后该病在印度、孟加拉国多次暴发。2018年5月,印度再次暴发NVD疫情,给人们造成了极大恐慌。本文以该病的流行情况和防治研究进展为重点,从病原学、流行病学、临床症状、病理变化、实验室诊断及防治等方面介绍其研究进展。

尼帕病毒的研究现状

尼帕病毒是一种近10年来东南亚和南亚新发现的传染性极强的人兽共患病病毒,本文简要介绍了尼帕病毒的流行情况,国内外在基础、临床、预防医学和诊断技术上的研究进展,并根据目前对该病毒研究状况,提出了预防策略。

尼帕病毒病研究进展

尼帕病毒病是近几年才发现的一种严重危害畜牧业和人类健康的传染病,已引起重大的经济损失和人员死亡。本文结合最新研究材料,简要介绍了该病的病原学、流行病学、临床症状、发病机理、病理变化以及诊断和防治,旨在防患未然。

尼帕病毒F糖蛋白在重组牛痘病毒中的表达及鉴定

尼帕病毒(NiV)F蛋白在病毒侵入细胞和诱导中和抗体等方面具有重要作用。通过over-lapping PCR合成密码子优化的F蛋白基因构建了表达NiV F蛋白的重组牛痘病毒(WR株)rWR-NiV-F。利用兔抗NiV血清为检测抗体,通过间接免疫荧光(IFA)检测到了F蛋白在重组病毒感染细胞中的表达。SDS-PAGE和Western blot检测证明重组蛋白F0被裂解为F1和F2。以rWR-NiV-F感染瞬时转染共表达NiV受体结合囊膜糖蛋白G的BHK细胞,可诱导细胞膜融合及合包体形成,证明该重组病毒表达F蛋白保持良好的抗原性及生物学活性,为NiV诊断及重组活载体疫苗研究奠定了重要基础。

尼帕病毒融合蛋白、受体结合蛋白的表达及特异性高免血清制备

尼帕病毒膜融合蛋白F和受体结合蛋白G在病毒感染和诱导机体产生保护性免疫中起重要的作用。通过PCR扩增获得尼帕病毒F1和G基因片段(均去掉信号肽和跨膜区),克隆至原核表达载体,IPTG诱导大肠杆菌表达目的蛋白,Western blot表明重组F1、G蛋白与兔抗尼帕病毒血清具有良好的反应原性;同时将F1和G基因克隆至经改造过的杆状病毒表达载体,获得了含有目的基因的重组杆状病毒,接种sf9单层细胞,间接免疫荧光检测表明F1、G蛋白在杆状病毒中正确表达,并与抗尼帕病毒血清具有良好的反应原性。以纯化原核表达的F1、G蛋白免疫兔获得了抗F1和抗G重组蛋白的特异血清,Western blot和间接免疫荧光检测表明所制备的血清具有特异性。试验所表达的抗原和制备的特异血清可用于尼帕病的诊断。

我国尼帕病毒病风险与防控措施初步分析

1 尼帕病毒病概况[1-5] 1998年9月到1999年4月,马来西亚出现260多例流行病学异常的脑炎病人,死亡100多人,死亡率高达48%,康复的病人多数有一定的神经性后遗症.后来研究确诊这是一种新的副粘病毒感染导致的疾病.

尼帕病毒和亨得拉病毒核蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

尼帕病毒（Nipahvirus，NiV）和亨得拉病毒（Hendravirus，HeV）是近年来出现的2种新的高致病性副粘病毒，在我国尚未发现。为防范2种病毒在我国的出现，本研究开展了前瞻性工作，成功研制了针对2种病毒核蛋白（N）的单克隆抗体，可用于病毒监测与诊断。首先利用大肠杆菌表达的2种病毒N蛋白免疫BALB／c小鼠，细胞融合后应用间接免疫荧光的方法对杂交瘤细胞克隆进行筛选，获得了5株N蛋白特异单抗。单抗腹水的抗体效价均超过2×10^5，培养上清抗体效价1：64～1：256。Western—blot和间接免疫荧光试验证明，5株单抗均特异针对N蛋白，其中1株（H4D11）只与HeVN蛋白反应，而不与NiVN蛋白反应，表明它具有鉴别2种病毒的能力。所研制的单抗对建立2种病毒的检测技术，用于动物监测，以防范2种新发传染病在我国流行具有重要意义。

尼帕病毒病及其病原的研究进展

概述了尼帕病毒病在国外的流行状况、尼帕病毒(Nipah virus,NiV)的变异及我国的研究现状,着重阐述了近年来在其基础病毒学、诊断技术及防治方面的研究进展,主要包括病毒蛋白的功能及其相互作用、受体的发现、动物模型、荧光PCR及ELISA诊断技术、抑制NiV感染及治疗等方面的研究成果,为该病的深入研究提供了参考。

表达尼帕病毒G囊膜糖蛋白重组牛痘病毒的研究

采用牛痘病毒WR株,构建了表达哺乳动物密码子优化的NiV G蛋白基因的重组病毒rWR-NiV-G。Westernblot证实大小为66kDa的重组G蛋白在rWR-NiV-G感染的Hela细胞中获得表达;采用兔抗NiV高免血清间接免疫荧光检测重组痘病毒表达G蛋白显示出良好的特异免疫反应原性。rWR-NiV-G感染NiV敏感的BHK细胞系,并与NiV融合蛋白F共同表达,可形成强烈细胞融合现象。rWR-NiV-G感染免疫BALB/c小鼠,可诱导显著的NiV G蛋白特异体液免疫反应。以原核表达NiV G蛋白片段为包被抗原,间接ELISA检测rWR-NiV-G感染免疫小鼠血清中的G蛋白特异抗体,具有良好的敏感性和特异性。同时,rWR-NiV-G感染免疫小鼠血清中的G蛋白特异抗体可有效中和NiV囊膜蛋白F和G介导的伪型VSV重组病毒侵入NiV易感宿主细胞的感染性。结果表明,重组牛痘病毒表达的NiV G蛋白有良好的免疫原性和生物学活性功能,为进一步深入研究NiV G蛋白生物学功能、免疫原性及重组活载体疫苗研究奠定了重要基础。

尼帕病毒和亨得拉病毒核蛋白基因在杆状病毒表达系统的表达及反应原性鉴定

利用改造的昆虫杆状病毒表达系统转移载体，成功地对尼帕病毒（NiV）和亨得拉病毒（HeV）的核蛋白基因进行了分泌表达。重组蛋白表达的时效性分析结果显示，Sf9细胞感染重组病毒72～96h后，蛋白的表达量达到高峰，大规模表达可分别获得2．3～2．4mg／L纯化的目的蛋白。应用Western blot、间接ELISA和间接免疫荧光（IFA）对两种重组N蛋白与兔抗NiV和HeV阳性血清的反应性进行鉴定，结果表明两种重组N蛋白和阳性血清有很好的反应性，并且在血清学上有交叉反应。该研究为今后开展流行病学调查和诊断试剂的研制打下了基础。

尼帕病毒病

尼帕病毒病首先于1998年在东南亚的马来西亚流行,此后东南亚的新加坡、南亚的孟加拉国和印度相继流行,尼帕病毒病的疫情报告虽然不多,但该病病死率高,对人类安全造成威胁。尼帕病毒的天然储存宿主为Pteropus属蝙蝠,我国目前尚未有尼帕病毒病报道,但我国南方部分地区处在Pteropus属的地域分布区内,在地理位置上毗邻东南亚和南亚疫情国家,存在较高的输入风险,从实验室监测中也发现尼帕病毒抗体。因此,应该加强对该病的病原学监测,以及进行防控等研究。

一种新的人兽共患副黏病毒病——尼帕病毒病

一种新的病毒———尼帕病毒,在马来 西亚和新加坡导致了与猪密切接触的人群暴 发病毒性脑炎,从1998年9月至1999年6月 期间,在马来西亚共有265名养猪工人发病, 105人死亡,在新加坡,有11人发病,1人死 亡。2004年1月至2月又在孟加拉国暴发, 导致29人发病,22人死亡。经电镜、血清学 和基因研究发现它属于副黏病毒属,文章就 尼帕病毒病的病原学、流行病学、临床症状、 病理变化、诊断及防制进行了概述。

尼帕病毒融合蛋白和受体结合蛋白基因DNA免疫的研究

构建了表达哺乳动物密码子优化的NiV囊膜蛋白F和G基因的真核表达质粒pCAGG-NiV-F和pCAGG-NiV-G。细胞融合试验表明,重组NiV融合蛋白F和受体结合蛋白G在pCAGG-NiV-F、pCAGG-NiV-G共转染BHK细胞中获得表达,并具有良好生物学活性。真核表达质粒pCAGG-NiV-F、pCAGG-NiV-G和pCAGG-NiV-F+pCAGG-NiV-GDNA分别按100μg/只的剂量肌肉注射免疫6周龄BALB/c小鼠,间隔4周加强免疫,第二次加强免疫3周后采血,分离血清备用。分别以重组杆状病毒感染Sf9细胞表达的重组NiV融合蛋白(rNF)和受体结合蛋白(rNG)为包被抗原,应用间接ELISA检测上述质粒DNA免疫血清中的特异性抗体,具有较高的敏感性和特异性。另外,中和试验结果表明,DNA免疫小鼠产生的特异抗体可有效中和NiV囊膜蛋白F和G介导的伪型VSV重组病毒侵入NiV易感宿主细胞的感染性,并且受体结合蛋白G基因DNA诱导中和抗体的滴度高于融合蛋白F基因DNA。结果表明,DNA疫苗具有防制尼帕病毒性脑炎的潜力。