尿石素A脂质体的制备:稳定性及体外消化研究

尿石素A具有许多优良的生理活性,但其极低的水溶性和生物利用率限制了尿石素A的应用。为克服上述限制,该文采用pH驱动法结合高压均质技术制备尿石素A脂质体(urolithin A liposomes,UA-LPs),并考察其结构特性、稳定性及体外消化特性。结果表明,大豆卵磷脂为20 mg/mL所制得的UA-LPs的平均粒径为(97.46±0.83)nm,多分散系数为(0.27±0.01),Zeta电位为(-40.3±1.06)mV,包埋率为(98.11±0.26)%,负载率为(2.39±0.01)%。UA-LPs在原子力显微镜下为分布均匀的球状结构。热稳定性实验表明,不同大豆卵磷脂浓度的UA-LPs的包埋率均随热处理时间的延长有所下降,20 mg/mL的大豆卵磷脂制备的UA-LPs具有最好的热稳定性,其在80℃处理180 min后仍可保留45%的尿石素A,且粒径、多分散系数变化趋势较小。pH稳定性表明UA-LPs在酸性条件下包埋率较低,随着pH的升高,粒径、多分散系数变化不显著(P>0.05),20 mg/mL的大豆卵磷脂制备的UA-LPs的Zeta电位绝对值上升5.5,稳定性升高。体外模拟消化实验表明,UA-LPs能有效提高尿石素A的转化率以及生物可接受度,其中20 mg/mL大豆卵磷脂制备的UA-LPs的体外转化率相比游离的尿石素A增加了3.26倍,生物可接受度提高2.07倍。因此,利用pH驱动法可以成功制备出UA-LPs,且高大豆卵磷脂浓度的UA-LPs物理稳定性更好,以上研究结果为扩展尿石素A在食品工业及生物医药领域的应用提供依据。

尿石素A介导p38/MAPK通路抑制破骨细胞活性

背景:过度活跃的破骨细胞可破坏骨稳态,并在骨质疏松、脆性骨折、骨关节炎等相关性骨骼疾病的病理机制中起重要作用。研究证实,鞣花酸和鞣花单宁有抑制破骨细胞分化的潜能,尿石素A作为其天然代谢产物,具有抗氧化、抗炎、抗增殖及抗癌作用,但其对破骨细胞分化的影响及其潜在的分子机制尚不清楚。目的:探讨尿石素A对核因子κB受体活化因子配体诱导破骨细胞分化的影响及作用机制。方法:体外培养稳定生长的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7),使用细胞毒性MTS实验检测不同浓度尿石素A(0,0.1,0.5,1.5,2.5μmol/L)对RAW264.7细胞的毒性,筛选出安全作用浓度。再使用不同浓度的尿石素A干预核因子κB受体活化因子配体诱导的RAW264.7细胞体外分化过程,进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色和肌动蛋白环及细胞核染色,观察尿石素A对破骨细胞形成和功能的影响。最后通过Western Blot及RT-qPCR实验,观察尿石素A干预后丝裂原活化蛋白激酶信号通路中上下游基因和蛋白的表达情况。结果与结论:①尿石素A呈浓度依赖性地抑制体外破骨细胞分化及肌动蛋白环形成,2.5μmol/L的抑制作用最强;②尿石素A可抑制与破骨形成及骨吸收相关的Nfatc1、Ctsk、Mmp9、Atp6v0d2基因的表达及Nfatc1、Ctsk蛋白的合成;③尿石素A可通过抑制p38蛋白的磷酸化,抑制丝裂原活化蛋白激酶信号通路传导,从而抑制破骨细胞的活性。

基于miRNA155-5p介导的MAPK/NF-κB通路探讨尿石素A的抗炎机制

目的以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激RAW264.7炎症细胞模型为研究对象,基于miRNA155-5p调控的TLR4/MAPK/NF-κB通路探讨尿石素A(urolithin A,Uro A)的抗炎机制。方法通过转染过表达miR-155-5p-mimics及miR-NC至LPS诱导的RAW264.7细胞中,RT-qPCR法检测各组细胞miR-15-5p、p38 MAPK、JNK和ERK的mRNA表达。MTT法检测Uro A对细胞活力的影响;Griess法检测细胞上清液NO的含量;ELISA法检测细胞上清液PGE 2、IL-6、IL-1β和TNF-α的表达水平;Western blot法检测iNOS、COX-2、TLR4以及MAPK/NF-κB通路相关蛋白的表达水平。结果与miR-NC组比较,miRNA155-5p过表达组p38 MAPK、JNK和ERK mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组比较,Uro A能明显抑制LPS诱导的miRNA155-5p、NO、PGE 2和TNF-α、IL-1β、IL-6(P<0.01),降低iNOS、COX-2蛋白表达水平(P<0.01),且呈浓度依赖性;此外,Uro A明显抑制TLR4蛋白的表达水平以及p38 MAPK、JNK、NF-κB p65、IκBα蛋白的磷酸化水平(P<0.05),并呈浓度依赖性;但对ERK1/2蛋白磷酸化没有显示出明显的抑制作用。结论Uro A能够明显抑制LPS诱导的炎症反应,机制与miRNA155-5p介导的TLR4/MAPK/NF-κB信号通路有关。

尿石素A通过活化miR-136介导的Sirt1信号通路减轻呼吸道合胞病毒诱导的新生小鼠肺部感染

目的探讨尿石素A(UA)治疗呼吸道合胞病毒(RSV)引起的新生小鼠肺部感染的疗效及作用机制。方法将Babl/c小鼠(5~7 d)随机分为5组(n=10):正常对照(Control)组、RSV感染(RSV)组、低剂量UA(UA-L)组、中剂量UA(UA-M)组、高剂量UA(UA-H)组。BEAS-2B细胞同样分为Control组、RSV组、UA-L组、UA-M组和UA-H组。除正常对照组外,其余4组小鼠或细胞均给予RSV感染。RSV感染2 h后,UA-L组、UA-M组和UA-H组小鼠分别腹腔注射2.5、5和10 mg/kg的UA,1次/d,连续注射2周;UA-L组、UA-M组和UA-H组细胞分别用2.5、5和10μmol/L的UA处理48 h。HE染色评价肺组织病理学改变。收集支气管肺泡灌洗液用于炎症细胞计数和炎症因子检测。炎症、细胞活力、凋亡和自噬分别采用酶联免疫吸附实验、CCK-8实验、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记实验、流式细胞术、Western blotting和免疫荧光染色检测。qRT-PCR检测miR-136和Sirt1 mRNA的表达,双荧光素酶报告基因系统验证miR-136和Sirt1的相互关系。结果与Control组相比,RSV感染组小鼠肺组织病理评分、病毒荷载量、TUNEL阳性细胞数、LC3-II/I、Beclin-1和miR-136表达及BALF中总细胞数、炎症细胞数和炎症因子含量显著升高(P<0.0001),而p62和Sirt1表达显著减少(P<0.0001);与RSV组相比,UA处理则呈剂量依赖性逆转上述检测指标值(P<0.05)。与Control组相比,RSV组BEAS-2B凋亡细胞数、LC3B阳性细胞数及miR-136表达明显增多,Sirt1表达减少(P<0.01);与RSV组相比,UA处理剂量依赖性地减弱上述指标的改变(P<0.01)。与miR-NC组相比,miR-136组Sirt1-WT的荧光素酶活性显著降低,Sirt1表达减少(P<0.001),Sirt1-MUT的荧光素酶活性不变(P>0.05)。与RSV+UA组相比,RSV+UA+miR-136组和RSV+UA+Ex527组炎症因子含量和凋亡细胞数明显增加(P<0.05),LC3B表达显著减少(P<0.0001);miR-136与Ex527共处理进一步改变上述指标值(P<0.05)。结论UA通过活化miR-136介导的Sirt1信号通路减轻RSV诱导的新生小鼠肺部感染。

尿石素A对小鼠异氟醚麻醉所致术后认知功能障碍的改善作用及其机制

目的:探讨尿石素A(UA)对长时程异氟醚麻醉所致小鼠术后认知功能障碍(POCD)的改善作用,并阐明其可能的作用机制。方法:24只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、麻醉组和UA组,每组8只。UA组小鼠于麻醉前2 d每天腹腔注射200μL UA溶液,空白对照组和麻醉组小鼠给予等体积生理盐水,麻醉组和UA组小鼠制备长时程异氟醚麻醉模型,空白对照组小鼠不作处理。采用Y迷宫实验检测各组小鼠轮替正确率、移动距离和移动速度,条件恐惧实验检测各组小鼠僵直时间百分率,Western blotting法检测各组小鼠海马组织中白细胞介素(IL)-1β、IL-10和成熟脑源性神经营养因子(mBDNF)蛋白表达水平。结果:Y迷宫实验,与空白对照组比较,麻醉组小鼠轮替正确率明显降低(P<0.01);与麻醉组比较,UA组小鼠轮替正确率明显升高(P<0.01)。条件恐惧实验中情境记忆测试,与空白对照组比较,麻醉组小鼠僵直时间百分率明显降低(P<0.01);与麻醉组比较,UA组小鼠僵直时间百分率明显升高(P<0.05);线索记忆测试,各组小鼠僵直时间百分率比较差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting法,与空白对照组比较,麻醉组小鼠海马组织中IL-1β蛋白表达水平明显升高(P<0.01),IL-10和mBDNF蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与麻醉组比较,UA组小鼠海马组织中IL-1β蛋白表达水平明显降低(P<0.05),IL-10和mBDNF蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:UA可以改善小鼠的POCD,其作用机制可能与UA的抗炎活性可抑制POCD小鼠的中枢炎症且上调mBDNF蛋白表达有关。

尿石素A调节AKT/mTOR信号通路对三阴性乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:探究尿石素A(urolithinA,UA)对三阴性乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响以及对蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的调控机制。方法:采用CCK-8法对人正常乳腺上皮细胞株MCF-10A和三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231探索UA的安全性和毒性;将人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231随机分为MDA-MB-231组、MDA-MB-231细胞+尿石素A(UA)组、MDA-MB-231细胞+AKT激动剂(SC79)组、MDA-MB-231细胞+尿石素A+AKT激动剂(UA+SC79)组,采用平板克隆实验检测各组细胞的增殖活性;采用划痕实验和Tr-answell实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力;采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况;采用Western blot检测各组细胞中AKT/mTOR信号通路相关蛋白的活化水平。结果:确定7.5μmoL/L的UA既对正常乳腺细胞安全又对乳腺癌细胞有毒性,为本实验所用浓度。相比于MDA-MB-231组,UA组克隆形成数量(105.67±9.18)、细胞迁移率(12.92±2.13)、侵袭细胞数(56.33±3.68)以及细胞内p-AKT/AKT(0.12±0.02)和p-mTOR/mTOR值(0.16±0.03)均降低(P<0.05),而细胞凋亡率(22.1±1.75)升高(P<0.05);相比于MDA-MB-231组,SC79组克隆形成数量(222±17.57)、细胞迁移率(62.7±6.14)、侵袭细胞数(233.33±15.43)以及细胞内p-AKT/AKT(0.58±0.07)和p-mTOR/mTOR值(0.74±0.08)均升高(P<0.05),而细胞凋亡率(4.57±0.57)降低(P<0.05);SC79的加入逆转了UA对MDA-MB-231细胞恶性生物学行为的抑制作用(P<0.05)。结论:UA能够通过抑制AKT/mTOR信号通路抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭和抗凋亡等恶性生物学行为。

尿石素A对高脂饮食老龄小鼠白色脂肪棕色化的影响

目的探讨尿石素A对高脂饮食老龄小鼠白色脂肪棕色化的影响。方法老龄小鼠18只随机分为对照组、高脂饮食组(HFD)和尿石素A干预组(UA),每组6只。UA组小鼠予尿石素A灌胃(吐温-80助溶),对照组和HFD组给予等剂量的吐温-80灌胃。实验结束后,记录各组小鼠的体质量和产热量,HE染色观察脂肪组织形态,qRT-PCR和Western blot检测棕色脂肪相关基因解偶联蛋白1(UCP1)、过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)与过氧化物酶体增殖体激活受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)的表达。结果与对照组相比,HFD组小鼠的体质量明显增加,日间产热量[(0.45±0.03)kcal/h vs.(0.62±0.05)kcal/h]和夜间产热量[(0.49±0.05)kcal/h vs.(0.73±0.06)kcal/h]均显著降低(P<0.05),脂肪细胞体积变大,UCP1、PPARγ与PGC-1α的转录表达降低(P<0.05)。而尿石素A干预降低高脂饮食小鼠的体质量,增加日间产热量[(0.57±0.03)kcal/h vs.(0.45±0.03)kcal/h]和夜间产热量[(0.69±0.07)kcal/h vs.(0.49±0.05)kcal/h],减小脂肪细胞体积,促进UCP1、PPARγ与PGC-1α的转录表达(P<0.05)。结论尿石素A促进高脂饮食小鼠白色脂肪棕色化。

尿石素A抗癌作用及其机制研究进展

尿石素A是天然药物鞣花鞣质在体内经肠道菌群多级代谢后产生的物质,研究表明其具有很好的抗肿瘤活性,因此,针对国内外关于尿石素A对膀胱癌、肝癌、乳腺癌、白血病、前列腺癌、结直肠癌等多种癌症的抗癌活性研究进行综述,可为尿石素A作为潜在抗癌药的临床研究提供参考。

尿石素A通过激活Nrf2/HO-1通路保护大鼠脑缺血再灌注损伤

目的探讨尿石素A对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及分子机制。方法连云港市第二人民医院全科医学科实验SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(Model)组、低剂量(Low-dose)组、中剂量(Middle-dose)组和高剂量(High-dose)组,每组15只。除Sham组外,其余各组均构建脑缺血再灌注(I/R)大鼠模型并给予不同剂量的尿石素A干预,剂量依次为0、5、10以及20mg·kg^(-1)。再灌注24h后,评估脑梗死体积,脑组织含水量以及神经行为;苏木精-伊红染色观察脑组织病理学变化;ELISA法分别测定白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等炎症因子的表达水平;同时,检测脑组织中丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)等活性;最后,Western blot法检测Nrf2和HO-1等相关蛋白的相对表达量。结果与Sham组相比,Model组的脑梗死体积,脑组织含水量以及神经功能学评分显著升高(^(均)P<0.05);苏木精-伊红染色显示,缺血侧脑组织病理损伤严重,神经细胞排列紊乱;各促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达显著升高(^(均)P<0.05);脑组织中MDA含量明显升高(P<0.01),而GSH、SOD、和GSH-PX含量明显降低(P<0.01);Western blot显示,Nrf2和HO-1蛋白的相对表达量显著降低(^(均)P<0.01)。与Model组相比,经不同剂量的尿石素A治疗后,脑损伤大鼠的脑梗死面积、脑组织含水量以及神经功能学评分显著降低(^(均)P<0.05);苏木精-伊红染色显示,缺血侧脑组织病理损伤情况得到明显改善;ELISA检测显示,IL-1β、IL-6和TNF-α等炎症因子表达水平降低(^(均)P<0.05);同时,脑组织中MDA含量明显降低(P<0.05),而GSH、SOD、和GSH-PX含量明显升高(^(均)P<0.05)另外,Western blot显示,Nrf2和HO-1蛋白的相对表达量显著增加(^(均)P<0.05)。结论尿石素A通过抗氧化作用对大鼠脑缺血模型再灌注损伤具有一定的保护作用,其或许与Nrf2/HO-1信号通路有关。

尿石素A通过TLR4/NF-κB信号通路对重症急性胰腺炎的保护作用及机制

目的探讨尿石素A(UroA)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺损伤的保护作用及机制。方法36只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、SAP组及UroA组,每组12只。采用逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠溶液的方法构建SAP大鼠模型。UroA组于SAP造模后灌胃UroA溶液(10 mg/kg),每6 h灌胃给药1次,共4次。建模24 h后,统计各组大鼠腹水量,检测血清脂肪酶(LPS)水平,酶联免疫吸附试验检测血清白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,HE染色观察胰腺组织病理损伤情况;实时荧光定量PCR分析胰腺组织IL-6、TNF-α、Toll样受体4(TLR4)、MyD88、核转录因子(NF)-κB mRNA表达水平;蛋白质免疫印迹法检测胰腺组织TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平。结果与Sham组相比,SAP组大鼠血清LPS、IL-6、TNF-α水平升高,腹水量及胰腺病理学评分增加(P<0.05),胰腺IL-6、TNF-α、TLR4、MyD88、NF-κB的mRNA水平升高(P<0.05),TLR4、MyD88、NF-κB p65的蛋白水平升高(P<0.05);与SAP组比较,UroA组大鼠胰腺病理损伤改善,血清LPS、IL-6、TNF-α水平降低,TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及mRNA水平降低(P<0.05)。结论UroA应用可改善SAP大鼠胰腺病理损伤,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路活化,从而抑制炎症反应有关。

尿石素A对转化生长因子-β1诱导的人近端肾小管上皮细胞纤维化的影响

为探究尿石素A(urolithin A,UA)对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化的干预效果和潜在作用机制,本研究建立转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的HK-2纤维化模型,考察对照组、TGF-β1模型组(4 ng/mL处理48 h)、UA低浓度组(5μg/mL UA+4 ng/mLTGF-β1)、UA高浓度组(10μg/mL UA+4 ng/mLTGF-β1)对HK-2细胞的影响。试验结果表明:UA干预能改善TGF-β1引起的HK-2形态变化并显著降低细胞纺锤体指数(P<0.01);降低纤维化标物Col I、Col III、Vimentin、Snail和Slug和炎症标志物IL-1β、IL-6、MCP-1、NLRP3的表达(P<0.01);下调MAPK和TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的相对表达(P<0.01)。上述研究表明UA能减轻TGF-β1诱导的HK-2细胞纤维化,其作用的机制可能是通过下调MAPK和TGF-β1/Smads信号通路来实现的。本研究能为开发天然活性成分UA用于延缓肾纤维化提供新方法。

尿石素A抑制BMMs向破骨细胞分化

目的探究尿石素A对小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow derived macrophages,BMMs)向破骨细胞分化的影响。方法提取小鼠骨髓腔BMMs,通过CCK-8法检测尿石素A对BMMs的增殖毒性,使用核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)诱导BMMs向破骨细胞分化并与浓度梯度尿石素A共培养,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色检测破骨细胞数量和面积大小,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测破骨分化相关基因水平表达,2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2′,7′-Dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果CCK-8法检测结果显示,尿石素A在16μmol/L范围内对BMMs无明显毒性;TRAP染色结果表明,尿石素A显著抑制了BMMs向破骨细胞分化,成熟破骨细胞数目和面积减少(P<0.01);RT-qPCR检测结果显示,尿石素A明显抑制了破骨分化相关基因(C-FOS、CTSK、MMP9、ACP5)的相对表达水平(P<0.01);DCFH-DA检测结果显示,尿石素A明显降低了RANKL诱导的高ROS水平。结论尿石素A能抑制RANKL诱导的BMMs向破骨细胞分化,并降低分化过程中的ROS,有望作为骨质疏松治疗的潜在药物。

抗衰老药物尿石素A合成工艺优化研究

尿石素A具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗癌等作用。目前报道的合成方法存在一定的不足,因此开发高效、简便的合成方法仍有待进一步研究。在综合考察原料成本、反应产率等因素的基础上,选取合适的合成路线,并对关键步骤(环化反应)进行优化。当2-溴-5-羟基苯甲酸和间苯二酚的物质的量比为6∶1,NaOH溶液的质量分数为5%,CuSO4溶液的质量分数为15%时,环化反应有效进行,以86%的产率获得目标产物尿石素A。

尿石素A治疗骨性关节炎的作用机制研究进展

在全球人口老龄化以及肥胖加剧的现状下,骨关节炎(OA)的患病率居高不下。这不仅会造成巨大的社会经济负担,也会在很大程度上降低老年人日常生活幸福指数以及增加老年残疾率。虽然疾病的诊疗正在不断的优化,但目前还没有药物能同时改变OA症状和疾病的进展,药物治疗多是仅限于疼痛管理。经研究证实,尿石素A(UroA)具有多方面的作用,例如抗炎、抗衰老、改善线粒体健康、减少软骨变性、有益的改善肌肉健康等,这与OA的发生发展因素相互匹配。

尿石素A对巨噬细胞极化及巨噬-泡沫细胞形成的作用

旨在探究尿石素A对巨噬细胞极化及对巨噬-泡沫细胞形成的影响及相关的分子机制。结果发现,尿石素A通过调控不同标志基因的表达,不仅能够抑制RAW264.7小鼠巨噬细胞向促炎的M1型巨噬细胞极化,还能促进自然状态巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化;油红O染色发现尿石素A能够显著抑制巨噬-泡沫细胞形成,实时荧光定量聚合酶链式反应检测说明尿石素A能够抑制胆固醇合成基因羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶和脂肪酸合成酶基因的转录;此外,尿石素A显著上调三磷酸腺苷结合盒转运蛋白A1和G1基因的表达,该两个基因表达与促进了胆固醇的排出相关。本研究证明了尿石素A对巨噬细胞极化具有调控作用,同时尿石素A能够抑制巨噬-泡沫细胞形成和胆固醇合成。这些结果揭示了尿石素A具有潜在的抗动脉粥样硬化的作用,为之后深入研究提供了理论参考。

尿石素A对1型糖尿病小鼠血糖的影响及其机制

目的观察尿石素A抗小鼠1型糖尿病作用及其可能的机制。方法雄性昆明小鼠腹腔注射低剂量链脲佐菌素(STZ)5次,建立1型糖尿病模型后分为糖尿病模型组(M),尿石素A干预组(UA),尿石素A和自噬抑制剂氯喹干预组(UA+CQ),另设正常对照组,每组10只。药物干预8周,给药期间检测饮水量、体质量、空腹血糖和口服糖耐量,实验结束后测定糖化血清蛋白(GSP),血清胰岛素(INS)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,在光学显微镜下观察胰腺组织病理结构,透射电镜下观察胰腺组织超微结构。结果给药2、4、6、8周,UA组空腹血糖均低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,UA组GSP、INS、IL-1β和TNF-α水平均显著降低(P<0.01)。UA组血糖值均低于模型组,在60、120 min差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.05)。UA组小鼠胰岛尚小,但是形状已基本规则,胰岛与外分泌部界限比较清晰,胰岛细胞数目比模型组增多。透射电镜观察发现UA组小鼠胰腺超微结构损伤较少,可观察到已被降解的自噬空泡,而在糖尿病模型组和UA+CQ组小鼠的细胞中观察到更多包含未降解物的自噬泡。结论尿石素A对1型糖尿病小鼠有降糖、抗炎、改善胰岛和β细胞形态等抗糖尿病作用,其机制可能与激活细胞自噬有关。

尿石素A预处理对肝缺血再灌注损伤大鼠模型的保护作用

目的探讨尿石素A(Uro-A)对肝缺血再灌注损伤(HIRI)大鼠模型的保护作用。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、Uro-A低剂量组(1 mg/kg)和Uro-A高剂量组(3 mg/kg),每组10只。造模前Uro-A低剂量和高剂量组每天灌胃药物1次,持续5 d。动物麻醉后造模,恢复血流后6 h检测血清中ALT、AST与乳酸脱氢酶(LDH)的含量,ELISA法检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、IL-1β、IL-6和TNFα含量,观察肝脏病理损伤与肝细胞凋亡情况,Western Blot法检测肝脏中内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、下游应激转录因子(CHOP)和凋亡蛋白家族(Caspase-12)的表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果Uro-A高剂量组ALT、AST、LDH、MDA、CAT、IL-1β、IL-6、TNFα、CHOP、GRP78、Caspase-12水平及凋亡率均较模型组降低,SOD含量较模型组升高,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。模型组肝脏结构破坏严重,阳性率90%,Uro-A高剂量组肝脏结构完好,未见明显组织增生与炎性细胞增多,阴性率80%。与Uro-A高剂量组相比,Uro-A低剂量组ALT、AST、LDH水平和细胞凋亡率均显著升高(P值均<0.05)。结论Uro-A预处理可降低大鼠肝脏缺血再灌注造成的损伤,减少氧化损伤与炎症因子的释放,其机制与通过抑制内质网应激通路减少肝细胞的凋亡有关。

尿石素A对2型糖尿病小鼠脂肪组织胰岛素抵抗的影响

目的探讨尿石素A对2型糖尿病小鼠脂肪组织胰岛素抵抗的影响。方法 40只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、尿石素A组、尿石素A+氯喹组,给药2月后检测各组小鼠体质量、体脂比、血浆TG、LDL、HDL、FINS、FFA、ADPN、Resistin水平,计算脂肪组织胰岛素抵抗指数(FIRI),HE染色观察脂肪组织病理学改变,Western blot法检测脂肪组织胰岛素信号通路蛋白和自噬蛋白表达。结果与模型组比较,尿石素A组小鼠血浆LDL、FFA、Resistin水平及FIRI降低(P<0.01),HDL、ADPN水平增高(P<0.01),脂肪细胞不饱满,细胞膜皱缩,IRS1、p-Akt、Glut4及p62蛋白表达增强(P<0.01),LC3II/I、Beclin1表达减弱(P<0.05)。与单独尿石素A组比较,尿石素A+氯喹组小鼠终体质量、TG水平降低(P<0.01),IRS1、p-Akt、Glut4表达更弱(P<0.05),Beclin1、p62蛋白表达更弱(P<0.05)。结论尿石素A可改善脂肪组织病理状态,调节脂肪细胞因子及血脂紊乱,可能通过纠正脂肪组织过度自噬和激活胰岛素信号通路来改善2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗。

肠道菌群代谢物尿石素A作为抗肿瘤药物的研究与开发

尿石素A是一种食用酚类的肠道菌群代谢物,其具有多种药理作用如抗衰老、抗氧化、抗炎等。近年来,国内外大量研究学者发现肠道菌群代谢物尿石素A对多种癌症有效。本文对尿石素A抗肿瘤作用的研究进展进行综述,以期为尿石素A的进一步开发和研究奠定基础。

尿石素A通过促进线粒体自噬保护糖尿病小鼠心脏损伤的作用研究

目的探讨尿石素A(urolithin A,UA)对糖尿病小鼠心脏的保护作用及其机制。方法健康♂C57BL/6小鼠连续6 d腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型,UA连续灌胃11周,并定期检测体质量和随机血糖。在第17周行超声检测心功能,Western blot法测定心肌组织内间质胶原蛋白的变化。高糖33.3 mmol·L^-1刺激心肌成纤维细胞,并给予UA进行处理。荧光探针和Western blot法检测线粒体自噬及极性受损线粒体含量的变化情况。结果UA对小鼠的体质量、血糖、糖耐量、心功能均无明显影响。但能明显改善糖尿病小鼠心脏舒张功能障碍、减少心肌组织内FN和CollagenⅠ蛋白的表达。UA可激活心肌成纤维细胞内被高糖抑制的线粒体自噬。同时UA减少了极性受损线粒体的含量。UA的保护作用被线粒体自噬抑制剂Mdivi-1逆转。结论UA通过诱导细胞内的线粒体自噬,发挥了改善糖尿病小鼠心脏损伤的作用。