左归降糖舒心方调控TLR4/NF-κB通路抑制糖尿病心肌病小鼠心肌纤维化的机制研究

目的 基于Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路探讨左归降糖舒心方对糖尿病心肌病MKR小鼠心肌纤维化及炎症因子的影响。方法 以8周龄雄性MKR小鼠为实验对象,采用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)40 mg/kg构建糖尿病心肌病模型,随机分为中药高剂量组[33.67 g/(kg·d)左归降糖舒心方2 g/mL]、中药低剂量组[16.84 g/(kg·d)左归降糖舒心方2 g/mL]、西药联合组[0.23 g/(kg·d)二甲双胍联合1.5 mg/(kg·d)依那普利]和模型组(等容量蒸馏水);另设FVB小鼠为空白对照组(等容量蒸馏水)。每组10只,连续给药8周后取材。收集尾静脉血液检测空腹血糖水平;采用HE、Masson染色观察心肌病理改变,电镜观察心肌组织超微结构变化;采用ELISA检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量;采用Western blot法检测TLR4、NF-κB p56、p-NF-κB p56/NF-κB p56蛋白表达情况;RT-qPCR及Western blot检测小鼠心肌组织Ⅰ型胶原(collagen type I,CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(collagen typeⅢ,CollagenⅢ)及α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达水平。结果 与空白对照组比较,模型组小鼠空腹血糖及血清中TNF-α、IL-1β含量增高(P<0.01);心肌细胞结构紊乱,胶原含量增加,心肌细胞重度退行性变;心肌组织中TLR4、NF-κB p56、p-NF-κB p56/NF-κB p56蛋白表达上调(P<0.01),CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA mRNA及蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01),中药高剂量组小鼠心肌组织CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白表达增加(P<0.01)。与模型组比较,中药高、低剂量组和西药联合组小鼠空腹血糖及血清中TNF-α、IL-1β含量均降低(P<0.01);心肌结构改善,胶原沉积减少;心肌组织中TLR4、NF-κB p56、p-NF-κB p56/NF-κB p56蛋白表达下调(P<0.01),CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA蛋白及mRNA表达下调(P<0.01)。与西药联合组比较,中药低剂量组小鼠空腹血糖及血清中TNF-α、IL-1β含量均升高(P<0.01),心肌结构无明显改善,胶原沉积无显著减少;心肌组织中TLR4、NF-κB p56、p-NF-κB p56/NF-κB p56蛋白表达上调(P<0.01),CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA蛋白及mRNA表达上调(P<0.01)。结论 左归降糖舒心方能抑制心肌炎性反应、改善心肌细胞结构,其作用机制可能与调控TLR4/NF-κB通路、下调细胞炎症因子表达、抑制心肌纤维化有关。

基于肠道菌群-代谢途径探讨左归降糖舒心方干预糖尿病动脉粥样硬化作用及机制

目的观察左归降糖舒心方对链脲佐菌素(STZ)联合高脂饮食诱导的ApoE^(-/-)小鼠糖尿病动脉粥样硬化的影响,探讨其调控肠道菌群及糖脂代谢干预糖尿病动脉粥样硬化的作用机制。方法以8周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠为研究对象,采用腹腔注射STZ(40 mg/kg)联合高脂饮食构建糖尿病动脉粥样硬化小鼠模型,将小鼠随机分为模型组、左归降糖舒心方组和二甲双胍组,每组5只,另将5只C57BL/6小鼠作为空白对照组。左归降糖舒心方组予左归降糖舒心方药液28.86 g/kg灌胃,二甲双胍组予二甲双胍溶液0.065 g/kg灌胃,模型组和空白对照组予等体积蒸馏水灌胃,连续8周。检测小鼠空腹血糖(FBG),全自动生化分析仪检测血清三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)含量,HE染色观察胰腺、主动脉及结肠组织形态。收集肠道内容物,采用16S rRNA扩增子测序检测肠道菌群变化。结果与空白对照组比较,模型组小鼠FBG、TG、TC含量明显升高(P<0.01);胰腺小叶结构紊乱,小叶间隔不清晰,大量腺泡萎缩;主动脉内膜增生,出现明显粥样斑块,管腔狭窄;结肠组织结构模糊,肠上皮黏膜糜烂,并伴有炎性细胞浸润。与模型组比较,左归降糖舒心方组和二甲双胍组小鼠FBG、TG、TC含量明显降低(P<0.01);胰腺组织结构改善,动脉粥样斑块和脂质沉积减少,结肠黏膜上皮修复,炎性细胞浸润减轻。Alpha和Beta多样性分析显示,各组样本能够显著分离,模型组肠道菌群物种总数和丰度较低;与空白对照组比较,模型组小鼠厚壁菌门、脱硫杆菌门、梭菌纲、脱硫弧菌纲、毛螺菌科相对丰度升高,拟杆菌门、拟杆菌纲、Muribaculaceae科、Muribaculaceaes属相对丰度降低(P<0.01);与模型组比较,左归降糖舒心方组小鼠厚壁菌门、脱硫杆菌门、梭菌纲、脱硫弧菌纲、毛螺菌科相对丰度降低,拟杆菌门、拟杆菌纲、Muribaculaceae科、Muribaculaceaes属相对丰度升高(P<0.05,P<0.01)。结论左归降糖舒心方可调节肠道微生态,抑制糖尿病动脉粥样硬化斑块形成,作用机制可能与调节肠道菌群结构、改善糖脂代谢、保护胰腺组织、修复肠黏膜屏障相关。

左归降糖舒心方含药血浆调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路抑制ox-LDL诱导J774A.1巨噬细胞焦亡的机制

目的基于NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)/Gasdermin D(GSDMD)通路探讨左归降糖舒心方含药血浆对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导J774A.1巨噬细胞焦亡的调控机制。方法将分化完全的J774A.1巨噬细胞分为空白血浆组、模型组、左归降糖舒心方含药血浆组、MCC950(NLRP3特异性抑制剂)组,每组6个复孔。除空白血浆组外,其余各组以100 mg·L^(-1)ox-LDL诱导细胞,构建细胞焦亡模型。空白血浆组、模型组、MCC950(50μmol·L^(-1))组以含10%空白血浆进行培养,左归降糖舒心方含药血浆组用10%含药血浆培养细胞24 h。采用CCK-8法测定各组细胞增殖情况,计算细胞增殖抑制率;采用LDH释放实验检测细胞膜完整性及细胞焦亡水平;采用ELISA法及免疫荧光法检测细胞白细胞介素(IL)1β、IL-18含量及蛋白表达情况;采用Western Blot法检测NLRP3、Caspase-1及GSDMD蛋白表达。结果与空白血浆组比较,模型组细胞的IL-18、IL-1β含量及LDH释放率明显增高(P<0.01),IL-1β、IL-18及NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达明显上调(P<0.01)。与模型组比较,左归降糖舒心方含药血浆组细胞的IL-18、IL-1β含量及LDH释放率明显下降(P<0.01),IL-1β、IL-18及NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论左归降糖舒心方含药血浆能够抑制ox-LDL诱导的J774A.1巨噬细胞焦亡状态及炎性反应,其作用机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路,下调细胞炎性因子IL-18、IL-1β表达有关。

左归降糖舒心方调控自噬对糖尿病转基因MKR鼠心肌损伤的影响

目的 通过观察左归降糖舒心方对骨骼肌胰岛素样生长因子1及胰岛素双受体功能缺失(mouse overexpressing a dominant-negative IGF-I receptor specifically in muscle,MKR)糖尿病心肌病小鼠的自噬标志蛋白Beclin-1表达的影响,研究调控自噬水平对糖尿病心肌损伤的保护作用机制。方法 C57 BL小鼠设作正常组,普通饲料喂养,MKR小鼠采用高脂饲养(high-fat diet,HFD)联合多次链脲佐菌素(streptozocin,STZ)腹腔注射造模后,随机分为模型组、左归降糖舒心方组(中药组)、雷帕霉素组、3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)组、盐酸二甲双胍片+马来酸依那普利片组(西药组),药物干预28 d。记录小鼠一般情况及空腹血糖(fasting blood glucose,FBG);ELISA检测肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)和肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes,CKMB)以评价心肌损伤程度;透射电镜观察心肌形态结构的改变及自噬体;免疫组化检测心肌胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ以评估心肌纤维化程度;免疫荧光检测自噬标志蛋白Beclin-1表达。结果 与正常组比较,模型组小鼠多饮多食多尿,FBG升高明显(P<0.01),cTnI、CK-MB水平及胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ的阳性表达均显著升高(P<0.01),Beclin-1蛋白表达明显下降(P<0.01);电镜下心肌细胞紊乱,各细胞器形态显著改变。与模型组比较,中药组小鼠FBG降低(P<0.01),cTnI、CK-MB水平与胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ表达均下降(P<0.01),Beclin-1蛋白表达增强(P<0.01);心肌细胞形态明显改善。中药组小鼠胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ表达显著低于西药组(P<0.01)。与模型组比较,3-MA组小鼠Beclin-1蛋白表达减弱(P<0.01), cTnI、CK-MB水平及胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ表达水平升高(P<0.01)。与模型组比较,雷帕霉素组小鼠Beclin-1蛋白表达增强(P<0.01), cTn I、CK-MB水平及胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ表达水平下降(P<0.01)。结论 左归降糖舒心方可能通过上调自噬水平,减轻MKR糖尿病心肌病小鼠的心肌纤维化、改善心肌损伤,延缓糖尿病心肌病的进展。

超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱快速鉴定左归降糖舒心方化学成分

建立了一种基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术(UHPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)的左归降糖舒心方化学成分的快速分析方法。左归降糖舒心方水煎液高速离心后取上清液,以Xbridge BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.6μm)分离,0.1%甲酸水和乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱在电喷雾正、负离子模式下进行检测,Xcalibur 4.3和Compound Discoverer 3.2软件进行数据处理。从左归降糖舒心方水煎液中共鉴定出290个化学成分,包括224个已知的化学成分,涵盖黄酮类、苯丙素类、酚类、皂苷类、有机酸类、生物碱类、核苷类、环烯醚萜类、寡糖等9种主要结构类型,此外66个化合物为新发现的成分,主要为氨基酸/小肽类结构类型。该方法可快速、准确地鉴定左归降糖舒心方水煎液中的化学成分,为进一步研究左归降糖舒心方的药效物质基础,指导临床合理用药以及后期实验研究提供参考依据。

左归降糖舒心方对糖尿病心肌病MKR鼠心肌细胞损伤和凋亡的影响

目的观察左归降糖舒心方对糖尿病心肌病(Diabetic cardiomyopathy,DCM)模型鼠心肌细胞损伤和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法以转基因2型糖尿病小鼠(MKR鼠)为实验对象,通过链脲菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射+持续高脂喂饲建立DCM模型,分为模型组、中药组、阳性药物组,另设C57小鼠为空白对照组。中药组给予左归降糖舒心方14.27 g生药/(kg·天)灌胃,阳性药物组给予二甲双胍250 mg/(kg·天)+依那普利4.5 mg/(kg·天)灌胃,连续给药4周。采用电化学法血糖仪测定空腹血糖(fasting blood glucose,FBG),光镜和透射电镜观察小鼠心肌组织形态学变化,ELISA法检测血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponinⅠ,cTnⅠ)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)水平,免疫组化法检测Ⅰ型胶原蛋白(Collagen-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Collagen-Ⅲ)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)的蛋白表达,TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果模型组FBG较空白对照组显著升高,经左归降糖舒心方干预后明显降低(P<0.01)。与模型组比较,中药组和阳性药物组的心肌组织病理形态明显改善,Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ蛋白表达减弱(P<0.01),血清cTnⅠ、LDH水平明显降低(P<0.01),细胞凋亡阳性表达减弱(P<0.01),Bax、Caspase-9表达减弱(P<0.01),Bcl-2表达增强(P<0.01)。中药组下调Collagen-Ⅰ和Collagen-Ⅲ表达、减少心肌细胞凋亡、下调Bax和Caspase-9表达等作用弱于阳性药物组(P<0.01),但上调Bcl-2表达的作用强于阳性药物组(P<0.01)。结论左归降糖舒心方对糖尿病心肌病MKR鼠的心肌细胞损伤和凋亡具有保护作用,其作用机制可能与降糖、改善心肌纤维化、抑制促凋亡因子Bax和Caspase-9表达、促进抗凋亡因子Bcl-2表达等有关。

左归降糖舒心方对糖尿病心肌病MKR鼠Foxo1/β-MHC的影响

目的探讨左归降糖舒心方通过Foxo1/β-MHC信号通路调控心肌肥大、收缩,进而对糖尿病心肌病进行干预。方法4周龄MKR小鼠随机分为4组:模型组、二甲双胍组、左归降糖舒心方低剂量组、左归降糖舒心方高剂量组,每组各10只。对照组选取同周龄FVB鼠6只。造模8周后进行药物干预治疗,定期检测空腹血糖(FBG)值,眼球取血处死小鼠,留取血样,取出小鼠心脏组织。HE染色分析心脏组织形态学变化;荧光定量PCR检测各组小鼠心脏组织Foxo1,ANP,β-MHC的mRNA表达水平;Western blot检测各组小鼠心脏组织Foxo1的磷酸化水平,ANP和β-MHC的蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,模型组血糖明显上升,上调Foxo1、ANP、β-MHC的mRNA及蛋白表达水平。与模型组相比,中药组及阳性西药组能有效降低血糖,下调Foxo1、ANP、β-MHC的mRNA及蛋白表达水平,同时改善心肌组织病理形态。结论左归降糖舒心方干预糖尿病心肌病MKR鼠心肌肥大,其可能的作用机制是抑制Foxo-1的磷酸化,进而下调ANP、β-MHC的表达有关。

左归降糖舒心方含药血浆对ox-LDL诱导小鼠巨噬细胞泡沫化和凋亡的影响

目的探讨左归降糖舒心方含药血浆对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞泡沫化和凋亡的影响及其作用机制。方法将巨噬细胞J774A.1随机分为正常组、模型组、牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)组、左归降糖舒心方含药血浆组、西药联合含药血浆组,每组5个复孔。除正常组外其余各组以ox-LDL(100 mg/L)处理构建巨噬细胞泡沫化模型。正常组和模型组正常培养,其余各组分别用10%相应含药血浆培养24 h。CCK-8法比较各组J774A.1细胞增殖情况,计算细胞抑制率;油红O染色检测细胞内脂质蓄积水平;Western blot检测双链RNA样内质网激酶(PEPK)、活化转录因子4(ATF4)、真核翻译起始因子2α(eIF2α)、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)及半胱氨酸蛋白酶蛋白-12(Caspase-12)的表达水平。结果与正常组比较,模型组细胞抑制率增高,在ox-LDL浓度为100 mg/L时细胞抑制率为(50.06±0.09)%,有明显的脂质颗粒蓄积(P<0.01)。与模型组比较,各药物干预组细胞抑制率降低,可有效阻断ox-LDL的摄入及脂质堆积,其中左归降糖舒心方含药血浆组优于西药联合含药血浆组,与TUDCA组作用效应相当。ox-LDL可诱导细胞内质网应激相关蛋白p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP与Caspase-12表达上调。左归降糖舒心方含药血浆可显著抑制100 mg/L ox-LDL所致的p-PERK、p-eIF2α、ATF4的上调,降低内质网相关凋亡蛋白CHOP与Caspase-12的表达(P<0.01),和TUDCA组作用相当(P>0.05),其效果较西药联合含药血浆组明显(P<0.01)。结论左归降糖舒心方含药血浆能有效改善ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化、细胞凋亡及内质网应激状态,其作用机制可能与调控内质网应激信号通路PERK/eIF2α/ATF4通路,降低细胞内CHOP与Caspase-12表达有关。

左归降糖舒心方含药血浆对脂多糖诱导巨噬细胞损伤及焦亡的影响

目的基于TLR4/NF-κB/NLRP3通路探讨左归降糖舒心方含药血浆对脂多糖(LPS)诱导小鼠J774A.1巨噬细胞损伤及焦亡的作用及机制。方法将分化完全的J774A.1巨噬细胞随机分为空白对照组(10%空白血浆)、模型组(10μg·mL^(-1)LPS+10%空白血浆)、5%中药含药血浆组(10μg·mL^(-1)LPS+5%左归降糖舒心方含药血浆)、10%中药含药血浆组(10μg·mL^(-1)LPS+10%左归降糖舒心方含药血浆)。除空白对照组外,其余各组以10μg·mL^(-1)LPS处理,诱导巨噬细胞炎性损伤及细胞焦亡。按照分组条件干预后,采用ELISA法检测细胞上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素18(IL-18)含量;免疫荧光法检测细胞中NLRP3、ASC蛋白共表达情况;Western Blot法检测细胞TLR4/NF-κB/NLRP3通路及焦亡相关蛋白的表达水平。结果与空白对照组比较,模型组J774A.1细胞上清液中的TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18含量均显著升高(P<0.01);细胞的NLRP3、ASC荧光强度显著增强,蛋白共表达明显上调;TLR4、p-NF-κBp65、NLRP3、GSDMD-N、IL-1β蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型组比较,5%、10%中药含药血浆组细胞上清液中的TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18含量均显著降低(P<0.01);细胞的NLRP3、ASC荧光强度均明显减弱,蛋白共表达明显下调;TLR4、p-NF-κBp65、NLRP3、GSDMD-N、IL-1β蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论左归降糖舒心方含药血浆能够抑制LPS诱导的J774A.1巨噬细胞损伤及炎症反应,其作用机制可能与调控TLR4/NF-κB/NLRP3炎症通路,抑制细胞焦亡及炎症因子表达有关。

左归降糖舒心方对转基因2型糖尿病MKR鼠心肌损伤的保护作用

目的研究左归降糖舒心方对转基因2型糖尿病MKR鼠心肌损伤的保护作用。方法以MKR鼠为研究对象,ig左归降糖舒心方对其进行30 d治疗,设野生C57BL/6鼠同期对照。用透射电镜观察小鼠心肌形态学改变;比色法测定心肌中丙二醛(MDA)的量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性;全自动生化分析仪检测心功能指标肌酸激酶同工酶(CKMB)和乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果经左归降糖舒心方治疗后,MKR鼠心肌组织形态学病变减轻,心肌细胞线粒体嵴部分消失,肌纤维排列较整齐;心肌组织MDA量下降(P<0.05、0.01),SOD活性升高(P<0.01),且呈剂量依赖性;血清CKMB和LDH活性下降(P<0.05、0.01),且呈剂量依赖性。结论左归降糖舒心方可通过抗脂质过氧化,对MKR转基因2型糖尿病MKR鼠心肌产生保护作用。

左归降糖舒心方对高脂饮食MKR小鼠糖脂代谢及炎症反应的影响

目的探讨左归降糖舒心方对高脂饮食转基因2型糖尿病MKR小鼠糖脂代谢及炎症反应的影响。方法用左归降糖舒心方干预治疗高脂饮食转基因2型糖尿病MKR小鼠,采用电化学法测定空腹血糖浓度,采用全自动生化分析仪检测血脂和炎症因子超敏C反应蛋白(hs-CRP),采用ELISA法检测血清胰岛素与肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果高脂饲料喂养的MKR小鼠空腹血糖高于MKR组,但无统计学意义(P>0.05);血清胰岛素、血脂(TC、LDL-C、HDL-C)、血清hs-CRP和TNF-α水平高于MKR组(P<0.01),而三酰甘油(TG)下降,低于MKR组(P<0.01)。经左归降糖舒心方或文迪雅干预治疗后,除左归降糖舒心方低剂量组血糖和hs-CRP下降不显著(P>0.05),其他各组MKR小鼠血糖、血清胰岛素、TG、血清hs-CRP和TNF-α水平显著下降(P<0.05、0.01),TC和LDL-C下降无统计学意义(P>0.05);左归降糖舒心方高剂量组HDL-C显著上升(P<0.01),而文迪雅组升高不显著(P>0.05)。左归降糖舒心方作用呈剂量依赖性。结论左归降糖舒心方能调节高脂饮食MKR小鼠糖脂代谢、减少炎症因子的产生、保护血管、降低糖尿病并发血管病变的风险。

左归降糖舒心方含药血浆对ox-LDL诱导J774A.1巨噬细胞焦亡及凋亡的影响

目的研究左归降糖舒心方含药血浆对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞焦亡及凋亡状态的影响,探讨该方治疗糖尿病动脉粥样硬化斑块的新靶点。方法 SD大鼠随机分成3组,连续5 d灌胃相应的药物制备含药血浆:空白组(灭菌超纯水)、左归降糖舒心方组(25.92 g/kg)、西药联合用药组(二甲双胍0.83 g/kg+阿托伐他汀钙12.45 mg/kg)。应用ox-LDL诱导细胞焦亡及凋亡状态。通过CCK-8法比较各组J774A.1细胞增殖情况,计算细胞存活率,筛选含药血浆及ox-LDL干预浓度。将分化完全的J774A.1巨噬细胞随机分为空白血浆组、模型组、左归降糖舒心方含药血浆组、西药联合含药血浆组,每组6个复孔。诱导及给药24 h后,LDH释放实验检测细胞膜完整性及细胞焦亡水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测焦亡相关蛋白NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、gasdermin D(GSDMD)蛋白、凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及B细胞白血病淋巴瘤相关蛋白基因(Bax)蛋白的表达水平。结果含药血浆及空白血浆在浓度为10%水平对细胞增殖无明显抑制作用,作为含药血浆实验干预浓度。ox-LDL在100 mg/L浓度下,可明显降低细胞存活率,故考虑以100 mg/L ox-LDL为诱导细胞焦亡及凋亡的造模浓度。与空白组比较,模型组细胞存活率明显降低,LDH释放率增高(P<0.01);同时细胞凋亡明显增多(P<0.01);模型组在ox-LDL诱导下,细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、GSDMD表达上调,促进凋亡相关因子Caspase-3及Bax表达增强(P<0.01)。与模型组比较,左归降糖舒心方含药血浆组细胞存活率增高,LDH释放率及细胞凋亡率明显降低(P<0.01);左归降糖舒心方含药血浆可显著抑制ox-LDL所致的NLRP3、Caspase-1、GSDMD、Caspase-3及Bax表达水平上调(P<0.01)。而且,左归降糖舒心方含药血浆组阻断ox-LDL引起的焦亡过程细胞膜破坏及凋亡的作用效应优于西药联合含药血浆组(P<0.01)。结论在体外左归降糖舒心方含药血浆可有效维持巨噬细胞正常功能状态,其作用机制可能与调控NLRP3、Caspase-1、GSDMD、Caspase-3及Bax表达,抑制细胞内焦亡及凋亡过程有关。