猪种、牛种、羊种、绵羊种布鲁菌多重PCR检测方法的建立及应用

为建立在临床样本能够同时检测猪种、牛种、羊种、绵羊种布鲁菌的多重PCR方法,根据NCBI已收录的布鲁菌全基因,设计并合成4对特异性引物,通过优化多重PCR的反应条件,建立能够同时检测4种布鲁菌的多重PCR诊断方法。特异性试验结果表明,可以从4种布鲁菌以及4种细菌混合物中扩增出大小分别为276、494、733和976bp的特异性条带,对照组的检测结果为阴性;敏感性试验结果表明,对4种病原菌基因组DNA的检出量为猪种32.2pg、牛种21.3pg、羊种27.5pg、绵羊种43.2pg;人工模拟感染样本检测结果表明,能从混合感染的病料中特异地检测出4种病原菌。应用该方法对200份临床奶山羊乳样进行检测,结果检出4份阳性。建立的多重PCR方法具有特异性强、敏感度高、稳定性好的特点,可以有效地检测4种布鲁菌的感染。

中性粒细胞CD64指数在布鲁菌病中的临床应用价值

目的 探讨中性粒细胞CD64(nCD64)指数作为一种新型生物标志物在鉴别诊断急性期、慢性期布鲁菌病中的临床应用价值。方法 纳入2021年2月至2023年7月在新疆维吾尔自治区人民医院确诊的急性期布鲁菌病患者38例,慢性期布鲁菌病患者48例,收集患者外周血并通过流式细胞术进行nCD64指数检测,分析nCD64指数与疾病严重程度的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析nCD64指数鉴别诊断急性期、慢性期布鲁菌病的灵敏度和特异度,同时,以虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)作为对照,评价三者临床诊断参考价值。结果 急性期布鲁菌病患者的nCD64指数高于慢性期布鲁菌病患者(U=216.00,P<0.001),且该指数与疾病严重程度呈正相关(r=0.670,P<0.001)。ROC曲线结果显示,nCD64指数用于鉴别诊断急性期、慢性期布鲁菌病的曲线下面积为0.882(95%CI:0.811~0.952,P<0.001),最佳截断值为2.81,其灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为83.3%、81.6%、80.4%、81.9%和82.6%,nCD64指数鉴别诊断的效能明显优于RBPT、SAT两项定性试验。结论 nCD64指数在鉴别诊断急性期、慢性期布鲁菌病中具有良好的灵敏度和特异度,且倾向于反映疾病的严重程度,在鉴别诊断急性期布鲁菌病和慢性期布鲁菌病中具有临床参考价值,对布鲁菌病的早期诊断和治疗效果监测起到重要的作用。

血清铁蛋白作为急性时相反应蛋白在布鲁菌病中的应用

目的:比较急、慢性布鲁菌病(简称布病)患者治疗前和治疗中外周血铁蛋白水平,评估血清铁蛋白与急、慢性布病炎性反应和布病治疗转归的关系。方法:选取急、慢性期且未接受抗生素治疗的布病患者各36例作为治疗前组;抗生素治疗10 d左右的急、慢性期布病患者各36例作为治疗中组;选取健康体检者25例作为对照组。采用酶联免疫吸附试验测定各组样本的血清铁蛋白水平,统计分析血清铁蛋白水平在各组间的差异。结果:治疗前急、慢性期和对照组血清铁蛋白水平具有明显差异(P<0.01);急、慢性组铁蛋白水平均比对照组明显增高(P<0.01);急性铁蛋白水平比慢性组明显升高(P<0.01)。治疗中急、慢性期和对照组血清铁蛋白水平具有明显差异(P<0.01);急、慢性布病组铁蛋白水平均比对照组明显增高(P<0.01);急性布病铁蛋白水平比慢性布病明显降低(P<0.01)。治疗中急性期、慢性期布病铁蛋白水平均比治疗前明显降低(P<0.001)。结论:血清铁蛋白与布鲁菌病的炎症反应程度有关,可用于监测布鲁氏菌病的炎症反应程度和评估治疗效果。

非牧区综合性医院布鲁菌性脊柱炎七例临床误诊分析

目的探讨布鲁菌性脊柱炎误诊脊柱结核的原因,以提高非牧区综合性医院布鲁菌性脊柱炎早期确诊率。方法回顾性分析2019年6月—2021年6月收治的布鲁菌性脊柱炎早期误诊脊柱结核7例的临床资料。结果7例均有近期牧区旅游史及牛羊接触史;1例有肺结核病史;病变部位:腰椎5例、胸椎2例;就诊前均曾自服解热镇痛药物。7例均持续性胸腰背疼痛伴活动受限、间断发热、乏力,全身关节游走性疼痛6例,食欲不振5例,脊柱局部压痛、叩击痛3例;肝脾大3例,颈淋巴结增大2例,睾丸疼痛1例。7例均初步诊断为脊柱结核。详细追问病史得知患者均有近期牧区旅游或出差史,行结核三项检查均阴性排除结核病,行布鲁菌血清学检测、虎红平板凝集试验及血清凝集试验均阳性,确诊布鲁菌性脊柱炎。误诊时间10~12 d。确诊后予利福平联合多西环素和(或)头孢曲松抗布鲁菌治疗患者症状均消失,随访半年预后良好。结论非牧区综合性医院布鲁菌性脊柱炎接诊率极低,接诊医师警惕性低,病史询问不详细,加之结核病史及解热镇痛类药物使用干扰诊断,使得容易误诊脊柱结核。非牧区综合性医院接诊医师应加强对该地区少见病的认识,提高警惕性,详细追问相关病史,尽早完善相关医技检查,综合分析病情,仔细鉴别诊断,以降低本病早期误诊率。

中医疗法治疗布鲁菌病的研究进展

布鲁菌病是由布鲁氏菌侵入机体而引起的一种人畜共患的急性或慢性传染病。布鲁菌病在世界上有广泛的流行,为全球性疾病。临床表现以发热、疲惫乏力、多汗、全身关节疼痛等症状为主,患者多于急性期就诊。布鲁菌病病情比较复杂,病程长且反复发作,缠绵难愈,常对患者的日常生活和心理造成了严重影响。近些年,中医疗法在治疗布鲁菌病方面取得了巨大的进展,可以有效改善布鲁菌病患者的症状和体征,提高临床治愈率。本文通过文献检索,总结了目前国内布鲁菌病的流行现状,探讨该病的临床特征和相关并发症,将各医家治疗布鲁菌病的中医疗法进行分析和归纳,希望能够增加临床医生对布鲁菌病的认识,并为临床治疗该病提供相关的研究参考。

Ⅰ期经后路病灶清除脊柱内固定术治疗腰椎布鲁菌病性脊柱炎

目的:探讨Ⅰ期行后路病灶清除脊柱内固定术在腰椎布鲁菌病性脊柱炎患者中的临床疗效及安全性。方法:对2017年10月至2022年10月收治的腰椎布鲁菌病性脊柱炎24例患者临床资料进行回顾分析,2例术后10个月失语,最终纳入22例,男13例,女9例,年龄33~63(52.00±6.89)岁,行Ⅰ期后路病灶清除、脊柱内固定术治疗。记录患者手术时间、术中出血量、随访时间、手术前后红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)及C反应蛋白(C-creactive protein,CRP);采用痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)、神经功能日本骨科协会(Japanese Orthopedic Association,JOA)评分、美国脊髓损伤学会(American Spinal Injury Assciation,ASIA)脊髓损伤分级和改良Macnab标准评价疗效。结果:22例患者获得随访,时间12~30(17.41±4.45)个月,手术时间70~155(116.59±24.32)min;术中出血量120~520(275.00±97.53)ml。术后1周及末次随访时CRP、ESR、水平较术前均下降(P<0.05)。术后1周及末次随访时VAS、JOA评分及ODI评分均较术前明显改善(P<0.05)。ASIA脊髓损伤分级术前与术后1周差异无统计学意义(P=0.18),术前与末次随访的差异有统计学意义(P<0.05)。末次随访改良MacNab疗效优21例,可1例,且随访期间均无复发。结论:Ⅰ期经后路病灶清除、脊柱内固定术,切口少、手术时间短,有助于神经功能恢复,预后符合临床要求,能够有效控制布鲁菌病性脊柱炎。

牛羊布鲁菌病综合防控策略

牛羊布鲁菌病是由布鲁菌引起的一种慢性传染病,主要危害牛羊等反刍动物,同时也对人类健康构成潜在威胁。该病在全球范围内广泛流行,对畜牧业生产和人类健康造成了严重影响,因其症状隐匿、易被忽视,给防控工作带来了一定的困难。在我国,虽然已经建立了一定的防控体系,但由于我国畜牧业发展不平衡、管理水平不一以及监管措施不到位等因素,牛羊布鲁菌病的发病率仍然较高,给畜牧业生产和人们的生活带来了不可忽视的隐患。

布鲁菌感染性主动脉瘤腔内修复术后近中期疗效研究

目的评估布鲁菌感染性主动脉瘤腔内治疗的近中期疗效。方法回顾性分析宁夏回族自治区人民医院和宁夏医科大学总医院2018年1月至2021年7月收治的21例布鲁菌感染性动脉瘤患者,患者均进行腔内修复治疗并随访2年。结果手术成功率100%,术后24个月支架通畅率为100%。1例患者术后2周再感染入院;1例患者术后23个月发生再感染并支架远端髂动脉瘤样扩张;1例患者术后6个月发生Ⅱ型内漏,均予以对症处理后恢复。其余患者在随访期间无不良事件发生。结论腔内修复布鲁菌感染性主动脉瘤的近中期疗效良好,是可行且有效的治疗方法。

组学技术在布鲁菌病诊断中的应用研究进展

布鲁菌病是一种严重的人畜共患病,其诊断一直是个难题。随着组学研究和技术的不断发展,越来越多的学者开始关注布鲁菌病的组学研究。在基因组学方面,利用测序技术获得基因组数据,可以更好地了解菌株之间的遗传差异和相似性,从而对菌株进行分型,宏基因测序已经应用于布鲁菌病的诊断。在转录组学方面,通过测序技术获取病原体在特定条件下的转录组数据,寻找对诊断布鲁菌病有价值的生物标志物。在蛋白质组学方面,通过质谱技术分析蛋白质在生物学过程中的表达、互作和调控,为开发布鲁菌病的新型诊断方法提供支持。在代谢组学方面,利用液相色谱串联质谱技术获得代谢物的代谢谱,基于代谢组数据可以鉴定代谢途径和代谢产物,更好地了解布鲁菌菌株之间的代谢差异,为布鲁菌病的诊断提供了新的方向。多组学联合可以构建出更加全面而准确的生物学信息,为布鲁菌病的诊断提供新的思路和方法。

布鲁菌IgM/IgG抗体检测试剂性能评估技术审评关注点

从技术审评的角度,简述布鲁菌IgM/IgG抗体检测试剂注册申报资料中产品风险管理、原材料的研究、企业参考品的设置、生产工艺及反应体系的研究、分析性能评估及阳性判断值确定等章节的关注点,包括研究方法及质量控制要求等,以便提高产品研发效率,推动行业发展。

急、慢性布鲁菌病患者外周血PD-1、LAG-3表达及相关细胞因子水平的变化

目的探讨急、慢性布鲁菌病患者外周血CD8^(+)T细胞表面程序性死亡受体1(PD-1)、淋巴细胞活化基因3(LAG-3)表达和血清白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)水平的变化特点。方法选取2022年12月—2023年8月新疆维吾尔自治区人民医院布鲁菌病患者50例,其中急性期25例(急性期组)、慢性期25例(慢性期组);以同期健康体检者35名作为正常对照组。收集所有研究对象的临床资料和血清学检测结果,并检测外周血CD8^(+)T细胞表面PD-1和LAG-3的表达情况,以及血清IL-2和IFN-γ水平。采用Spearman相关分析评估PD-1和LAG-3表达的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各项指标区分布鲁菌病急性期和慢性期的效能。结果与正常对照组比较,急性期组和慢性期组PD-1^(+)CD8^(+)T细胞百分比、LAG-3^(+)CD8^(+)T细胞百分比、PD-1^(+)LAG-3^(+)CD8^(+)T细胞和血清IL-2、IFN-γ水平均显著升高(P<0.0001)。慢性期组PD-1^(+)CD8^(+)T细胞百分比、LAG-3^(+)CD8^(+)T细胞百分比均高于急性期组(P<0.01),PD-1^(+)LAG-3^(+)CD8^(+)T细胞百分比和血清IL-2、IFN-γ水平2个组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。Spearman相关分析结果显示,急性期和慢性期布鲁菌病患者PD-1^(+)CD8^(+)T细胞百分比与LAG-3^(+)CD8^(+)T细胞百分比呈正相关(r_(s)值分别为0.591、0.545,P<0.01)。PD-1^(+)LAG-3^(+)CD8^(+)T细胞百分比、LAG-3^(+)CD8^(+)T细胞百分比、PD-1^(+)CD8^(+)T细胞百分比、IFN-γ与病情严重程度均呈正相关(r_(s)值分别为0.726、0.425、0.368、0.395,P<0.05),IL-2与病情严重程度无相关性(r_(s)=0.235,P=0.113)。PD-1^(+)LAG-3^(+)CD8^(+)T细胞百分比、PD-1^(+)CD8^(+)T细胞百分比、LAG-3^(+)CD8^(+)T细胞百分比、IL-2和IFN-γ鉴别布鲁菌病急性期和慢性期的曲线下面积(AUC)分别为0.968、0.945、0.758、0.754、0.762。结论慢性布鲁菌病患者外周血CD8^(+)T细胞表面抑制性受体PD-1和LAG-3高表达,促炎因子IL-2和IFN-γ下调,慢性布鲁菌病患者可能发生了T细胞耗竭。

布鲁菌病患者骨关节系统损伤的临床特征分析

目的:分析布鲁菌病患者骨关节系统损伤的相关临床特征。方法:回顾性分析2022年1月至12月医院收治的布鲁菌病患者300例,按照是否存在骨关节系统损伤进行分组,存在骨关节系统损伤者纳入创伤组,不存在骨关节系统损伤者纳入对照组,对所有患者的资料进行分析调查(包含300例患者的基线资料,如年龄和性别分布情况;创伤组受累部位及年龄分布情况;创伤组与对照组临床表现及实验室检查结果)。结果:300例患者中出现布鲁菌病骨关节系统损伤共52例,占比17.33%,其中男性24例,占比46.15%,女性28例,占比53.85%;18岁~60岁群体布鲁菌病骨关节系统损伤人数最多,占比51.92%;其中脊柱关节炎、骶髂关节炎、外周关节炎占比依次为50.00%、23.08%、26.92%。脊柱关节炎中腰椎受累最常见,占比96.15%;骶髂关节炎中以单侧病变为主,占比83.3%;外周关节炎中以膝关节病变为主,占比50.00%。男性与女性受累部位占比最高的分别是骶髂关节炎、脊柱关节炎。60岁以上群体以脊柱关节炎最多。两组临床表现对比,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组发病至确诊时间相比,创伤组更长(P<0.05)。两组白细胞下降检出率对比,创伤组高于对照组(P<0.05)。结论:布鲁菌病患者骨关节系统损伤确诊病例临床特征多种多样,针对长时间合并关节疼痛群体,需了解其具体病史,随后按照影像学检查结果和流行病学资料制定有效诊治方案,保障患者安全。

5例神经型布鲁菌病的临床与实验室特征

目的通过对5例神经型布鲁菌病的临床资料进行分析,以提高对该病的临床和实验室诊断能力。方法回顾性分析2015年1月—2017年6月某院收治的5例神经型布鲁菌病患者的临床和实验室资料。结果5例患者均有牛羊接触史或牛羊制品食用史,就诊时均以反复发热伴有头痛为主要症状。脑脊液常规显示潘氏试验阳性、白细胞增多且以单核细胞为主;脑脊液生化显示蛋白含量均增高、氯化物均降低,3例患者葡萄糖降低;脑脊液免疫球蛋白IgA、IgG均高于正常值数倍以上;5例患者均培养出马耳他布鲁菌;4例患者脑部影像学检查显示异常。3例患者血常规白细胞计数略高,5例患者的肝功能(丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、γ-氨基转肽酶)均正常,4例患者超敏C反应蛋白正常,1例患者血清布鲁菌抗体试管凝集试验阳性。5例患者均使用多西环素联合利福平或利福霉素治疗2 W后,体温均恢复正常,头痛、头晕症状均有所改善;脑脊液白细胞计数和蛋白定量均有所下降。结论超敏C反应蛋白和血常规白细胞计数在神经型布鲁菌病诊断中未见特征性改变。神经型布鲁菌病临床表现形式多样,故易造成漏诊、误诊,应提高临床医务人员对该病的认识。

我国人畜间布鲁菌病流行现状及诊断方法研究进展

布鲁菌病(Brucellosis)是由布鲁菌(Brucella)引起的一种以发热、流产和慢性、变态反应炎症为特征的人兽共患传染病。该病在世界范围内广泛流行,对人类健康和畜牧业造成严重影响,是全球面临的公共卫生问题。鉴于目前疫情防控形势,本文对我国人间和畜间布鲁菌病的流行现状及诊断方法的研究进展进行了总结。数据分析表明,布鲁菌病在我国人和动物间广泛流行,2021年上升到发病人数的高峰值,至今仍居高不下。布鲁菌抗体阳性动物以牛、羊为主,宠物群体的感染情况说明人与伴侣动物的接触存在感染风险。在诊断方法方面,除经典的细菌培养、平板凝集试验等方法外,CRISPR/Cas12a结合重组酶聚合酶扩增技术(CPA-CRISPR/Cas12a)及可视化环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,为现场快速检测提供了新的可能。此外,二代测序技术在中枢神经系统感染的鉴别诊断中显示出独特优势。本文还探讨了布鲁菌病的诊断标志物研究进展,包括miRNAs、lncRNA、免疫原性蛋白等潜在标志物的发现,为疾病的早期诊断和治疗提供了新的思路。

1950-2015年中国布鲁菌病空间流行病学分析

目的:分析布鲁氏菌病(布病)流行趋势,包括地区和空间分布特征,为布病的早期防治提供依据。方法:采用Excel 2010构建1950-2015年布病数据库,绘制60年间布病发病率、死亡率和月平均发病例数趋势图作趋势分析。通过Arcgis 10.2软件空间统计工具,对2000-2015年布病发病率作空间自相关分析。结果:1950-2009年60年间,中国共报告布病发病927987例,死亡547例,年平均发病率为0.2012(1/100000),年平均死亡率为0.0003(1/100000);布病发病率较高的为内蒙古、黑龙江、山西、新疆等省、自治区;2008-2013年中国布病发病情况的全局空间分布关系为离散模式(Moran′s I<0,P<0.05),2014-2015发病情况的全局空间分布关系为随机模式(P>0.05);高高空间关联模式存在于山西、新疆和宁夏,高低空间关联模式多存在于内蒙古和山西。结论:中国布病发病呈现全局空间负相关关系,高低空间关联模式多存在于内蒙古,高高空间关联模式多存在于山西、新疆和宁夏,应加大对这几个省和自治区布病的监控和防治。

儿童布鲁菌病37例临床特征分析

布鲁菌病是由布鲁氏菌感染引起的一种人兽共患传染病,在世界各地都很常见,全球每年约新增50万病例^([1]),给人类健康和畜牧业发展带来巨大的影响。布鲁菌病在我国主要分布于西北、内蒙地区,自90年代中期起,布鲁菌病成为发病率上升最快的传染病之一^([2])。相比成人而言,儿童布鲁菌病的报道相对较少,但儿童布鲁菌病临床症状复杂多样,易误诊漏诊,导致多种并发症发生,甚至导致死亡^([3])。因此,儿童布鲁菌病早期诊断和及时治疗非常重要。本研究收集阿克苏地区第一人民医院收治的37例儿童布鲁菌病患儿的临床资料,回顾性分析其流行病学、临床表现、实验室检查结果、影像资料及诊治情况,现报道如下。

以尿频尿急及腰痛伴发热为表现的布鲁菌病1例报道

布鲁菌病是由布鲁氏菌引起的一种世界性的人畜共患传染病[1],主要传染源是患病的羊和牛等疫畜。在全球,布鲁菌病每年新发约50万例[2],我国布鲁菌病主要发生在内蒙古、新疆、山西、河北、陕西等北方农业省份[3-4],以羊种布鲁菌病为主[4]。布鲁菌病可累及骨关节系统、泌尿生殖系统、神经系统、血液系统、呼吸系统等,临床表现无特异性[5]。

布鲁菌病的综合防控措施

布鲁菌病是由布鲁菌属的细菌侵入机体引起传染-变态反应性的人畜共患传染病。布鲁菌病在世界各地都有广泛流行,每年因此造成的经济损失高达数亿美元,而且此病还会对人类健康造成严重威胁。由于带菌动物是其他动物和人类布鲁菌病的主要传染源,因此,对动物布鲁菌病的防治就成为本病防控的关键。

布鲁菌病44例临床特征分析

目的分析大庆地区44例布鲁菌病患者临床表现及实验室相关指标的变化,为临床诊治提供依据。方法回顾性分析大庆油田总医院2014年2月-2018年8月44例布鲁菌病患者的临床特征。结果大庆地区布鲁菌病患者以农牧民(25例,56.8%)和30岁以上患者(31~69岁,93.2%)为主,临床主要表现为贫血30例(68.2%)、发热23例(52.3%)、胆囊疾病9例(20.5%)、脾肿大9例(20.5%)、胃炎7例(15.9%)、关节炎关节痛6例(13.6%)、睾丸附睾炎4例(9.1%)、心包积液4例(9.1%)、全血细胞减少2例(4.5%)、胸壁脓肿1例(2.3%)。实验室相关指标中,降钙素原(PCT)升高31例(31/32,96.9%),C反应蛋白(CRP)升高33例(33/35,94.3%),红细胞沉降率(ESR)增快11例(11/13,84.6%),44患者中白蛋白减少37例(84.1%),肝功能异常27例(61.4%),单核细胞增多23例(52.3%),白细胞升高10例(22.7%),血小板减少7例(15.9%)。结论布鲁菌病随受累器官不同临床表现多样,除常见症状外,胆囊病变也是其可能出现的临床特征;在实验室相关指标中,可出现单核细胞增多及血小板减少,PCT普遍升高且以轻度升高为主。临床医师应加强对该病的认识,以做到早期诊断和治疗。

2009～2018年北京协和医院布鲁菌感染的临床与实验室特点分析

目的分析布鲁菌感染的临床与实验室特点,为其临床诊治提供依据。方法回顾性分析2009~2018年北京协和医院134例布鲁菌感染患者的临床和实验室资料,对其流行病学特征(包括年龄、性别、接触史、时间分布)、临床表现和疗效进行分析。结果 134例患者中男性88例,女性46例,平均年龄48岁(1~78岁)。50%患者有明确生活在疫区、接触牲畜、生牛羊肉及食用未灭菌奶制品等方面接触史。布鲁菌感染临床表现前三位的症状和体征为发热(66例)、关节痛和/或肌肉痛伴乏力(23例)、心脏疾病(10例)。布鲁菌感染急性期经规范治疗多可治愈,若治疗不及时或不规范可转为慢性。206例送检阳性标本,住院99例、门诊62例和急诊45例。布鲁菌分离前三位的科室为感染内科(49例)、急诊科(34例)和普通内科(11例)。外周血送检比率最高,需氧血培养瓶阳性报警时间均值为88.12h(2~481h)。其他培养阳性标本包括组织、骨髓、脑脊液、关节液和玻璃体等。布鲁菌培养与血清凝集实验结果一致性高,两种方法均送检的有83例,其中82例两种方法均阳性,仅1例培养阳性,血清凝集实验阴性。十年间布鲁菌培养阳性分离率最高的年度是2015~2017年,阳性分离率最高的季节是4月至7月。结论布鲁菌感染的临床表现复杂,分离出布鲁菌是确诊的依据之一,需要综合考虑患者的基本情况和药物的毒副作用选择药物。掌握布鲁菌感染的临床和实验室特征十分重要。