干扰素调节因子2结合蛋白2在斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达谱分析

目的·探究干扰素调节因子2结合蛋白2(interferon regulatory factor 2 binding protein 2,irf2bp2)基因的2个横向同源物(irf2bp2a和irf2bp2b)在斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达异同。方法·选取发育不同时间点(胚胎期和幼虫期)的斑马鱼胚胎,通过mRNA全胚胎原位杂交技术明确irf2bp2a和irf2bp2b的时空表达谱,并通过实时定量PCR检测其表达水平。结果·irf2bp2a和irf2bp2b在神经系统、眼及胸鳍等部位都有着类似的高表达,而各自在肝脏或斯坦尼小体出现特异性表达,提示其在斑马鱼胚胎早期发育过程中具有独特的表达模式。实时定量PCR检测结果显示irf2bp2a和irf2bp2b在胚胎发育早期都有表达,但表达水平有所不同。结论·尽管斑马鱼irf2bp2a和irf2bp2b这2个横向同源物具有高度保守的功能结构域,但二者在胚胎早期发育过程中的表达谱不尽相同,提示其功能并不完全冗余。

红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)干扰素调节因子2基因的克隆及原核表达

干扰素调节因子(Interferon regulatory factor,IRF)是一种多功能的转录因子。采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和c DNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了红鳍东方鲀干扰素调节因子2(Interferon regulatory factor 2,IRF2)基因的全长c DNA。该基因全长为1 552 bp,其中5'非编码区(5'-UTR)187 bp,3'非编码区(3'-UTR)429 bp,编码区(CDS)为936 bp,共编码311个氨基酸。将IRF2的编码区序列连接到原核表达载体p ET32a(+),成功构建了重组体p ET32a(+)-IRF2。将重组体p ET32a(+)-IRF2转入大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,获得了重组表达IRF2的基因工程菌。经IPTG诱导,p ET32a(+)-IRF2在BL21中得到了融合表达。通过对表达产物的纯化和Western blotting检测,结果显示红鳍东方鲀IRF2基因在大肠杆菌中的表达效果较高,目的蛋白准确。

干扰素调节因子2在乳腺癌的表达及临床意义

目的探讨干扰素调节因子2(IRF2)的表达与乳腺癌增殖及侵袭的关系。方法 RT-PCR检测IRF2基因在乳腺癌细胞中和癌组织中的表达水平。Western blot检测IRF2蛋白在乳腺癌细胞和癌组织中的表达水平。结果 IRF2基因在5种乳腺癌细胞中的表达水平明显高于正常对照,差异有统计学意义(P<0.01);癌组织中IRF2基因的表达均高于其配对正常乳腺组织,IRF2基因在不同病理类型的乳腺癌组织中表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。IRF2蛋白在人胚乳腺细胞中未见表达,在5种乳腺腺癌细胞均有不同程度的表达;12例乳腺腺癌组织均表达IRF2蛋白,且表达水平均明显高于配对的正常乳腺组织。结论 IRF2在乳腺癌细胞系中表达水平增高,IRF2的过表达与乳腺癌的发生密切相关。

miR-1290通过抑制干扰素调节因子-2调控非小细胞肺癌的增殖

目的:探讨微小RNA-1290(miR-1290)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其相关调控机制。方法:采用实时荧光定量PCR检测成都市双流区第一人民医院2014年6月至2017年6月41例NSCLC患者癌组织、癌旁组织以及NSCLC细胞株A549、H460及正常支气管上皮细胞BEAS-2B中miR-1290表达;qPCR、Western blot检测癌组织、癌旁组织IRF2 mRNA和蛋白表达;将A549和H460细胞分为miR-1290 mimic组(转染miR-1290 mimic)、miR-1290 inhibit组(转染miR-1290 inhibit)和miR-1290 NC组(不转染)。分别于转染24、48、72、96 h后采用CCK-8法检测细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成数,Transwell小室检测细胞侵袭数,双荧光素酶报告基因实验检测miR-1290与干扰素调节因子-2(interferon regulatory factor,IRF2)3′-UTR结合情况,qPCR检测不同miR-1290表达水平的A549和H460细胞IRF2 mRNA表达。结果:癌组织miR-1290相对表达量明显高于癌旁组织,IRF2 mRNA和蛋白相对表达量明显低于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05);NSCLC组织miR-1290表达与IRF2 mRNA、蛋白表达呈显著负相关(P<0.05)。NSCLC患者中,淋巴结转移者miR-1290表达明显高于无淋巴结转移者,Ⅲ/Ⅳ期患者miR-1290表达明显高于Ⅰ/Ⅱ期,差异具有统计学意义(P<0.05)。转染72、96 h后,A549和H460细胞miR-1290 mimic组增殖能力明显高于miR-1290 NC组,miR-1290 inhibit组增殖能力明显低于miR-1290 NC组,差异具有统计学意义(P<0.05)。A549和H460细胞中miR-1290mimic组细胞克隆数和侵袭细胞数明显高于miR-1290 NC组,miR-1290 inhibit组克隆数和侵袭细胞数明显低于miR-1290 NC组,差异具有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示miR-1290能与IRF2 3′-UTR结合,明显降低荧光值(P<0.05)。A549和H460细胞中,miR-1290 mimic组IRF2相对表达量明显低于miR-1290 NC组,miR-1290 inhibit组IRF2相对表达量明显高于miR-1290NC组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-1290在NSCLC组织和细胞中高表达,miR-1290可能通过与IRF2结合,促进肿瘤细胞的增殖和侵袭。

急性缺血性脑卒中患者血清VEZF1 mRNA、IRF2BP2蛋白表达变化及其与静脉溶栓预后的关系

目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清血管内皮锌指蛋白1(VEZF1)、干扰素调节因子2结合蛋白2(IRF2BP2)表达变化及其与静脉溶栓预后的关系。方法选取拟行静脉溶栓的AIS患者266例(AIS组),根据NIHSS评分评估病情,分为轻度94例、中度119例、重度53例;另选择健康体检者133例作为对照组。AIS组入院时、对照组查体时采集静脉血,采用实时荧光定量PCR法检测血清VEZF1 mRNA,ELISA法检测IRF2BP2蛋白,比较两组及不同程度AIS患者的血清VEZF1 mRNA、IRF2BP2蛋白水平。采用Spearman相关法分析AIS患者血清VEZF1mRNA、IRF2BP2蛋白与NIHSS评分的相关性。AIS患者接受重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓,术后随访3个月,根据改良Rankin量表评价患者预后,采用多因素非条件Logistic回归模型分析AIS静脉溶栓患者预后不良的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评价血清VEZF1 mRNA、IRF2BP2蛋白对预后不良的预测效能。结果与对照组比较,AIS组血清VEZF1 mRNA、IRF2BP2蛋白表达降低,其中重度患者低于轻度、中度患者,中度患者低于重度患者(P均<0.01)。血清VEZF1 mRNA、IRF2BP2蛋白与NIHSS评分呈负相关(rs分别为-0.770、-0.798,P均<0.01)。AIS患者术后3个月预后良好194例,预后不良72例。梗死体积大、NIHSS评分高是AIS患者预后不良的独立危险因素,VEZF1 mRNA高、IRF2BP2蛋白高是独立保护因素(P均<0.01)。血清VEZF1 mRNA联合IRF2BP2蛋白预测AIS静脉溶栓患者不良预后的曲线下面积大于单一指标(P均<0.05)。结论血清VEZF1 mRNA、IRF2BP2蛋白水平降低与AIS病情加重和预后不良有关,血清VEZF1 mRNA联合IRF2BP2蛋白检测能够较好地预测AIS静脉溶栓患者的不良预后。

非小细胞肺癌组织miR-1290和干扰素调节因子-2表达及意义

目的观察非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者癌组织miR-129、干扰素调节因子-2(interferon regulatory factor-2, IRF-2)表达变化,探讨其与NSCLC患者临床病理特征及预后的关系。方法 NSCLC患者84例,均行胸腔镜下肺叶切除+淋巴结清扫术,术后采用吉西他滨联合顺铂方案化疗6个周期。采用实时荧光定量PCR法检测手术切除癌组织及癌旁组织miR-1290、IRF-2 mRNA相对表达量;比较不同临床病理特征NSCLC患者癌组织miR-1290、IRF-2 mRNA相对表达量;Pearson相关法分析NSCLC患者癌组织miR-1290与IRF-2表达的相关性。依据癌组织miR-1290、IRF-2 mRNA相对表达量中位数,将NSCLC患者分为miR-1290高表达组(miR-1290相对表达量≥3.06)43例和miR-1290低表达组(miR-1290相对表达量<3.06)41例,IRF-2高表达组(IRF-2 mRNA相对表达量≥0.72)40例和IRF-2低表达组(IRF-2 mRNA相对表达量<0.72)44例。随访3年,比较miR-1290和IRF-2高、低表达组NSCLC患者的生存情况。结果癌组织miR-1290相对表达量(3.05±0.96)高于癌旁组织(1.12±0.37)(P<0.05),IRF-2 mRNA相对表达量(0.73±0.24)低于癌旁组织(1.89±0.52)(P<0.05);有淋巴结转移(5.12±1.83)、临床分期Ⅲ~Ⅳ期(3.94±2.03)者癌组织miR-1290相对表达量分别高于无淋巴结转移、临床分期Ⅰ~Ⅱ期者(2.77±1.16、2.63±0.99)(P<0.05);有淋巴结转移(0.18±0.06)、临床分期Ⅲ~Ⅳ期(0.56±0.04)者癌组织IRF-2 mRNA相对表达量分别低于无淋巴结转移、临床分期Ⅰ~Ⅱ期者(0.80±0.23、0.81±0.34)(P<0.05);不同年龄、性别、肿瘤直径、病理类型、分化程度及有无吸烟史者癌组织miR-1290、IRF-2 mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。NSCLC组织miR-1290表达与IRF-2 mRNA表达呈负相关(r=-0.742,P<0.001)。84例NSCLC患者3年总生存率为42.86%;miR-1290高表达组3年总生存率(27.91%)低于miR-1290低表达组(58.54%)(P<0.05),IRF-2低表达组3年总生存率(29.55%)低于IRF-2高表达组(57.50%)(P<0.05)。结论 NSCLC患者癌组织miR-1290表达升高,IRF-2 mRNA表达降低,提示NSCLC患者有淋巴结转移、临床分期晚,且预后较差。

胸腔镜辅助小切口肺切除术对肺癌患者血清趋化因子、炎症因子和生活质量的影响

目的 探讨胸腔镜辅助小切口肺切除术对肺癌患者血清趋化因子、炎症因子和生活质量的影响。方法 采用随机数字表法将80例肺癌患者分为对照组和观察组,每组40例,对照组患者给予传统开胸手术,观察组患者给予胸腔镜辅助小切口肺切除术。比较两组患者的手术相关指标、血清趋化因子[调节激活正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、干扰素诱导蛋白-10(IP-10)]、炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))]、干扰素调节因子2(IRF2)水平和生活质量[健康调查简表(SF-36)]。结果 观察组患者手术时间、术后置管时间、下床活动时间、术后住院时间均明显短于对照组,术中出血量明显少于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。术后3天,两组患者RANTES、MCP-1、IP-10、IL-6、IL-8、PGE_(2)水平均高于本组术前,观察组患者RANTES、MCP-1、IP-10、IL-6、IL-8、PGE_(2)水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05);术后5天,两组患者RANTES、MCP-1、IP-10、IL-6、IL-8、PGE_(2)水平均低于本组术后3天,观察组患者RANTES、MCP-1、IP-10、IL-6、IL-8、PGE_(2)水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。术后3、5天,两组患者IFR2水平均高于本组术前,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。术后6个月,两组患者SF-36量表各维度评分均高于本组术前,观察组患者SF-36量表各维度评分均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论 胸腔镜辅助小切口肺切除术可显著减少肺癌患者的术中出血量,缩短手术时间,并能更好地控制炎症因子和趋化因子水平,提高生活质量。

IRF-2在实体肿瘤中的研究进展

干扰素调节因子2(interferon regulatory factor 2,IRF-2)是干扰素家族中的成员,在抗病毒、细胞生长、凋亡及肿瘤发生过程中发挥重要作用。研究发现IRF-2在多种肿瘤中高表达,并与肿瘤发生发展、治疗等关系密切,有望成为临床治疗肿瘤的新靶点。该文从IRF-2分子结构及生物学功能、肿瘤中的表达情况及免疫调控效应等方面对IRF-2在实体肿瘤中的研究进展作一综述。

IRF2BP2及融合基因在实体肿瘤发生发展中作用的研究进展

干扰素调节因子2结合蛋白2(IRF2BP2)作为新型转录调节因子,是干扰素调节因子2结合蛋白(IRF2BP)转录调节家族中的重要成员之一。IRF2BP2广泛存在于不同生物体中,充当着正负反馈调节器的角色,参与细胞功能的调节,如细胞凋亡、细胞增殖、细胞免疫等,从而调节肿瘤微环境,影响着肿瘤的发生发展。同时,IRF2BP2基因还可以和其他类型基因发生基因融合,成为IRF2BP2/NTRK1、IRF2BP2/CDX1、IRF2BP2/RARA等,共同影响肿瘤的发生发展。

靶向IRF2的miR-1290对非小细胞肺癌细胞增殖、侵袭的调控作用及其机制研究

背景与目的:miR-1290可以调节干扰素调节因子-2(interferon regulatory factor-2,IRF2)的表达,调节非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的恶性生物学行为,但其具体作用机制目前尚不清楚,因此,探讨miR-1290靶向IRF2对NSCLC细胞增殖、侵袭的调控作用及相关机制。方法:将体外培养的A549细胞分为miR-1290 mimic组、miR-1290 inhibitor组和NC组;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞miR-1290和IRF2的表达,采用荧光素酶实验进一步验证靶向关系。将体外培养的A549细胞分为NC组(转染空白质粒)、miR-1290组(转染miR-1290)、IRF2组(转染IRF2)和miR-1290+IRF2组(转染miR-1290+IRF2);细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测各组细胞的增殖活性;Transwell实验检测各组细胞的侵袭,划痕实验检测细胞迁移,Western blot检测各组细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、E-钙黏着蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和Ki-67。结果:miR-1290可以靶向负调控IRF2的表达;与NC组相比,miR-1290组miR-1290的表达明显上调(P<0.05),IRF2的表达明显下调(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭力和迁移率明显上调(P<0.05),VEGF、MMP-2和Ki-67明显上调(P<0.05),E-cadherin水平明显下调(P<0.05),IRF2组IRF2的表达明显上调(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭力和迁移率明显下调(P<0.05),VEGF、MMP-2和Ki-67明显下调(P<0.05),E-cadherin水平明显上调(P<0.05);与IRF2组相比,miR-1290+IRF2组miR-1290的表达明显上调(P<0.05),IRF2的表达明显下调(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭力和迁移率明显上调(P<0.05),VEGF、MMP-2和Ki-67明显上调(P<0.05),E-cadherin水平明显下调(P<0.05)。结论:miR-1290可能通过靶向负调控IRF2的表达,促进NSCLC细胞的增殖和侵袭。