皮肤血管瘤组织中细胞周期素E的阳性面积率和平均光密度的表达

目的:探讨细胞周期素E(cyclinE)在皮肤血管瘤组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学(S-P法),检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织血管内皮细胞的cyclinE表达水平,利用图像分析技术检测不同时期血管瘤和正常皮肤组织的阳性面积率和平均光密度。结果:增生期血管瘤内皮细胞cyclinE表达水平明显高于退化期及正常皮肤组织,差异有显著性意义(P<0.01);退化期与正常皮肤组织血管内皮细胞cyclinE表达水平差异无显著性意义(P>0.05)。结论:血管瘤的发生、发展与细胞周期的调节密切相关。

血管瘤组织Bcl-2平均光密度和平均阳性面积率表达

为探讨 Bcl-2在血管瘤不同时期的表达状况及其意义 ,采用免疫组织化学方法检测人皮肤血管瘤增生期、退化期及正常皮肤组织中 Bcl-2的表达水平 ,并利用计算机图像分析技术测量了不同时期血管瘤组织和正常皮肤组织 Bcl-2表达的平均光密度和平均阳性面积。结果显示 ,Bcl-2在增生期血管瘤内皮细胞的表达明显高于退化期血管瘤内皮细胞和正常皮肤组织血管内皮细胞( P<0 .0 1) ;Bcl-2在退化期血管瘤内皮细胞的表达与正常皮肤组织血管内皮细胞相比 ,差异无显著性 ( P>0 .0 5 )。提示 Bcl-2参与了血管瘤的发生、发展和退化。

上皮性卵巢肿瘤中Bax表达的平均光密度和阳性面积率

为探讨 Bax在上皮性卵巢肿瘤中的表达 ,采用免疫组织化学方法 ( S-P法 )检测了人卵巢上皮性癌组织 2 0例、卵巢良性上皮性肿瘤 2 0例及周围正常卵巢组织中 Bax的表达水平。结果显示 ,发现 Bax在卵巢上皮性癌组织和卵巢良性上皮性肿瘤中的表达高于正常卵巢组织 ,差异有显著性意义。

膀胱移行细胞癌中P-gp170平均光密度值的表达

目的探讨P-gp170在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义。方法运用免疫组织化学S-P法检测9例正常膀胱粘膜组织和40例膀胱移行细胞癌组织中P-gp170的表达水平,利用图像分析技术测量阳性细胞的平均光密度值。结果膀胱移行细胞癌P-gp170的平均光密度值高于正常膀胱粘膜组织,差异有统计学意义(P<0.05);化疗后复发的移行细胞癌P-gp170的平均光密度值明显高于初发膀胱移行细胞(P<0.05)。膀胱移行细胞癌组织中P-gp170的平均光密度值与病理分级有关(P<0.05),与TNM分期无关(P>0.05)。结论P-gp170在膀胱移行细胞癌组织,特别在复发性移行细胞癌组织中高表达,可能与移行细胞癌化疗耐药性、发生及发展有关联,具有一定的临床意义。

整合平均光密度和面积比两种参数用于显微图像定量分析的初步研究

目的:探讨进一步提高免疫组织化学、原位杂交等显微图像定量分析的新方法。方法:从光密度和总面积两个因素综合考虑测试区域中阳性信号的强度,利用图像分析软件Image Pro Plus(IPP)分别将两者量化,综合使用阳性信号的平均光密度(MOD)和面积比(total per area,TPA)两个参数进行表征。结果:经过对大量免疫组织化学、原位杂交等典型显微图像的测试,发现"MOD×TPA"能够更准确地反映待测区域内阳性信号的相对强度,尤其适用于用户指定的任意不规则测试区域图像的定量分析。结论:基于对图像分析原理进行综合分析后所得到的以上优化参数可实现显微图像的相对定量分析,为体视学分析方法提供了新的参考。

基于球切多面体和光密度的砂轮建模与测量

针对金刚石砂轮磨粒形状的不规则性、尺寸的变化性以及空间位置随机分布的特点，采用基于球坐标的随机点产生的空间平面切分实体的方法，建立更接近实际的虚拟多面体磨粒，并建立金刚石砂轮模型；从类似机床刀具切削刃的磨刃二面角出发，运用仿生物学中光密度以及计算机数字图像处理的方法，提出了基于光密度、积分光密度、平均积分光密度的一种新的砂轮形貌评价方法，并通过试验测量研究了磨刃二面角与积分光密度值之间的关系。研究结果表明，磨刃二面角越大，积分光密度值越大，在0-200之间变化。最后结合砂轮表面面积密度、磨粒平均个数、出刃高度、积分光密度值等参数验证了所建立的虚拟多面体磨粒和砂轮模型的有效性。

纳米银薇乔线在小鼠皮内连续缝合线道周围近期抗炎疗效的观察研究

目的探索纳米银薇乔线用于小鼠背部皮内连续缝合线道周围炎性细胞和炎性蛋白的表达情况,分析其近期抗炎疗效。方法对4-0普通薇乔线采用化学涂层技术制备纳米银薇乔线。18只10~12周Balb/C小鼠随机分为3组(每组各6只),剃除小鼠背部毛发,纵行切开15 mm皮肤全层切口。分别采用4-0带针普通薇乔线、抗生素薇乔线、纳米银薇乔线行皮内连续缝合。术后5 d,以纵形切口为中心,取材全层皮肤组织。采用免疫组织化学染色方法比较线道周围中性粒细胞、巨噬细胞、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达水平,并计算平均光密度(mean optical density,MOD)。原位末端转移酶标记(mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)染色了解线道周围细胞凋亡情况。Masson染色了解线道周围胶原蛋白沉积情况。统计学方法采用单因素方差分析和student’s t检验。结果免疫组织化学染色显示,普通薇乔线、抗生素薇乔线和纳米银薇乔线的中性粒细胞MOD值为0.523±0.137、0.412±0.122、0.229±0.079;巨噬细胞MOD值为1.125±0.126、0.585±0.142、0.209±0.078;IL-6的MOD值为1.137±0.168、0.652±0.131、0.227±0.086;TNF-α的MOD值为1.219±0.124、0.573±0.109、0.179±0.045,纳米银薇乔线线道周围炎性细胞浸润、IL-6和TNF-α的表达最轻微,普通薇乔线表达最明显,3组间比较差异均有统计学意义(P值均<0.001)。TUNEL染色显示,普通薇乔线、抗生素薇乔线和纳米银薇乔线凋亡细胞的MOD值为0.167±0.035、0.478±0.151、0.125±0.035,纳米银薇乔线线道周围凋亡细胞最少,抗生素薇乔线凋亡细胞最多,3组间比较差异均有统计学意义(P值均<0.001)。Masson染色显示,纳米银薇乔线线道周围胶原蛋白沉积显著,抗生素薇乔线线道周围未见胶原蛋白沉积。结论在小鼠皮内连续缝合模型上,纳米银薇乔线的近期抗炎疗效优于抗生素薇乔线和普通薇乔线,纳米银薇乔线线道周围细胞毒性弱,但其临床应用价值仍需进一步评估。

Myogenin蛋白在五指山猪和长白猪骨骼肌中的表达

本研究采用免疫荧光及免疫组化DAB显色技术来检测Myogenin蛋白在五指山猪和长白猪胎儿和成年猪的骨骼肌中的定位和表达情况,并通过平均光密度统计分析Myogenin蛋白在五指山猪和长白猪胎儿和成年猪骨骼肌中表达水平。结果表明:Myogenin蛋白表达定位于骨骼肌细胞核表达;在五指山猪和长白猪胎儿和成年猪的腿部骨骼肌和背部骨骼肌中均检测到阳性产物,在猪胎儿期间骨骼肌中Myogenin蛋白的表达水平高于其在成熟猪骨骼肌中的表达;且在同种猪腿部骨骼肌中的表达水平显著高于其在背部骨骼肌中的表达;此外还检测到Myogenin蛋白在五指山猪骨骼肌中表达均显著高于其在长白猪骨骼肌中的表达(p<0.05)。本研究得到的Myogenin蛋白在五指山猪和长白猪骨骼肌中存在显著的表达差异结果,为今后研究不同猪种间骨骼肌发育差异及探讨五指山猪矮小机制和发育机理提供了理论基础。

人前脑啡肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株的构建

目的构建人前脑啡肽原(hPPE)基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株。方法采用DNA重组技术将质粒pCMVhPPE.SEQ中的人前脑啡肽原基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,经酶切鉴定和测序分析后,采用脂质体介导法将重组质粒pcDNA3.1(+)hPPE和空质粒pcDNA3.1(+)分别转染永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST)。经G418(600μg/ml)筛选,挑选阳性克隆并扩大培养。采用免疫细胞化学法、RTPCR和放射免疫法检测转染细胞亮氨酸脑啡肽(LEK)的表达及分泌,同时检测Neo基因的存在以证实转染成功。结果重组质粒经酶切后分别出现5.4kb和950bb片段,测序分析与文献报道结果一致,表明重组质粒pcDNA3.1(+)hPPE亚克隆成功。Neo基因检测显示重组质粒和空质粒已成功转染至IAST中,筛选获得IAST/hPPE和IAST/Neo两个细胞株,LEK免疫染色均阳性,但平均光密度结果显示IAST/hPPE的LEK表达明显强于IAST/Neo和IAST(P<0.01)。IAST/hPPE细胞与IAST/Neo和IAST细胞相比,hPPEmRNA表达水平和培养上清液中LEK的分泌量明显增高(P<0.01),而IAST与IAST/Neo细胞相比无显著性差异(P>0.05)。结论成功构建了人前脑啡肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST/hPPE),为该细胞移植用于镇痛的研究奠定了基础。

便塞通合剂对便秘大鼠模型AQP3表达的影响

目的:采用复方地芬诺酯灌胃建立慢性便秘大鼠模型,观察便塞通合剂对慢性便秘模型大鼠AQP3表达的影响。方法:健康SD大鼠60只,随机分为5组,空白对照组、模型组、麻仁丸治疗组、莫沙比利治疗组、便塞通合剂治疗组。模型组及各治疗组采用配制好的含复方地芬诺酯10 mg/kg混悬液4 mL灌胃,建立大鼠慢性便秘模型。正常对照组则以等量生理盐水替代复方地芬诺酯进行灌胃。模型建立后,治疗组分别以麻仁丸、莫沙比利和便塞通合剂灌胃治疗。治疗结束后,采用免疫组织化学SP法检测正常对照组、模型组及治疗各组AQP3在结肠的分布和表达情况,应用彩色病理图像分析系统对阳性表达的平均光密度值(MD)进行半定量比较分析。结果:①发现在正常对照组和慢传输便秘模型组大鼠的结肠黏膜层均有AQP3表达;②模型组AQP3平均光密度值高于空白对照组,两组比较有显著差异(P<0.05)。③与模型组相比,便塞通合剂治疗组能能抑制AQP3在大鼠结肠黏膜层的表达(P<0.05)。结论:便塞通合剂能抑制AQP3在大鼠结肠黏膜层的表达,其表达降低可能导致结肠对水分的吸收减少和(或)肠液分泌增加,从而治疗慢性便秘。

免疫过氧化物酶显色方法的改进及应用

免疫过氧化物酶显色方法的改进及应用熊正文苏红胡海霞李春光冯骥良张家口解放军二五一医院病理科０７５０００免疫组化染色技术以其敏感性高，特异性强，方法步骤统一等优点能将形态、机能和代谢密切结合起来，已广泛用于临床病理诊断和研究之中。目前较常用的ＰＡＰ、Ａ...

声脉冲辐射力成像对乳腺肿瘤的诊断价值

目的评价声脉冲辐射力成像(ARFI)技术对乳腺良恶性病变的鉴别诊断价值。方法选取84例患者共87个肿块进行常规超声、声触诊组织成像(VTI)及声触诊组织量化(VTQ)检查,得出剪切波速度值,并运用image J软件对VTI图像进行后处理得出肿块的平均光密度值,以病理结果为金标准,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评价ARFI的意义。结果经手术病理证实,87个乳腺肿块中良性病灶56个、恶性病灶31个。恶性病灶VTQ≥3.49m/s(临界值)的病灶数为21个,<3.49m/s为10个。良性病灶VTQ≥3.49m/s病灶数为3个,<3.49m/s为53个。恶性病灶平均光密度值大于或等于202.25(临界值)的病灶数为28个,<202.25为3个。良性病变平均光密度值大于或等于202.25的病灶数6个,<202.25为50个。乳腺良恶性病灶VTQ剪切波速度及VTI平均光密度值比较,差异均有统计学意义(P=0.000)。关于乳腺肿瘤的诊断灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确率及约登指数,常规超声分别为96.8%、67.8%、62.5%、97.4%、78.2%、0.645;ARFI分别为93.5%、98.2%、96.7%、96.5%、96.6%、0.917。结论 ARFI成像对乳腺肿瘤诊断的特异度、准确率优于常规超声。

金雀异黄酮对去卵巢大鼠海马突触体素表达的影响

目的:研究金雀异黄酮对去卵巢大鼠海马突触体素的影响,以探讨金雀异黄酮对女性更年期后中枢神经系统退行性变的作用机制。方法:用免疫组化结合图像分析的方法,测量分析去卵巢后不同时间点以及给予金雀异黄酮替代治疗后海马CA1～3区辐射层和齿状回分子层突触体素免疫阳性产物的平均光密度变化。结果:去卵巢后大鼠CA1～3区辐射层和DG分子层突触体素免疫阳性产物的平均光密度值逐渐降低,4周后与假手术组和苯甲酸雌二醇组相比有显著差异;金雀异黄酮组治疗后海马突触体素免疫阳性产物平均光密度恢复。结论:金雀异黄酮能恢复去卵巢大鼠海马突触密度,延缓女性更年期后中枢神经系统的退行性变。

AP-1及其相关基因uPA、uPAR在肺癌中的表达及其意义

研究AP-1及其相关基因uPA、uPAR在人肺癌中的表达及其与肺癌临床病理特征的关系.通过免疫组织化学方法检测101例肺癌组织及7例正常肺组织中AP-1、uPA、uPAR的表达情况,利用CMIAS2000型多功能真彩病理图像分析系统测量计算各病例中c-jun、c-fos、uPA、uPAR蛋白阳性细胞的平均光密度(DAO)和积分光密度(DIO).c-jun、c-fos在肺癌组织中表达的阳性率及其共表达率均显著高于正常肺组织;二者在NSCLC的表达显著强于SCLC;不同组织学类型肺癌中二者表达具有显著性差异,腺癌中表达最强,小细胞肺癌中表达最弱;c-jun、c-fos与肺癌分级、合并分期、淋巴结转移均呈显著正相关.uPA、uPAR与肺癌淋巴结转移密切相关,与合并分期呈显著正相关;uPAR与肺癌分级呈显著正相关;各指标之间均存在显著正相关关系.研究结果表明uPA、uPAR参与了肺癌侵袭转移,AP-1信号传导通路在该过程中起了重要调节作用.

IgA肾病患者肾组织内synaptopodin的表达对肾功能评价的临床意义

目的观察synaptopodin在IgA肾病患者肾组织中的表达,并探讨其在肾功能评价中的意义。方法分析202例IgA肾病患者的肾活检组织标本,按Lee分级系统分为Ⅰ～Ⅴ5级,采用99mTc-DTPA清除率测定肾小球滤过率。对选取的样本经抗人synaptopodin单克隆抗体间接免疫荧光染色。用免疫荧光显微镜观察及图像分析软件定量分析肾组织中synaptopodin的表达情况,测量平均光密度值,然后进行统计学分析。结果 5级IgA肾病患者肾组织中synaptopodin所表达的平均光密度值组间差异有统计学意义(P<0.01),病理组织中synaptopo-din所表达的平均光密度值与肾小球滤过率呈正相关(r=0.962,P<0.01)。结论与传统的评估指标比较s,yn-aptopodin在Ⅰ～Ⅴ级IgA肾病肾脏病理组织中的表达逐渐减少,其表达与肾小球滤过率呈正相关。synaptopodin在肾组织中的表达可评价肾功能的变化。

慢性束缚应激大鼠海马CA1区L-ENK的变化及逍遥散的调节作用

目的:研究慢性束缚应激时大鼠海马CA1区L-ENK的变化以及逍遥散的调节作用。方法:用特制束缚架连续束缚7d与21d,每天3h的方法制作大鼠束缚应激模型,用免疫组织化学方法结合图像分析检测中枢(海马CA1区、齿状回、大脑皮层)L-ENK的变化。结果:大鼠海马CA1区L-ENK免疫反应阳性细胞的平均光密度、积分光密度、平均总面积、面密度和数密度等在造模7d时都有不同程度的增强,到造模21d时大鼠海马CA1区L-ENK有极显著性增强;7d与21d两模型组、四君子汤组及金匮肾气丸组大鼠CA1区L-ENK免疫反应积分光密度与逍遥散组比较显著增强,而逍遥散组和正常对照组相比则没有明显差异;可见逍遥散组对大鼠海马CA1区L-ENK的积分光密度有显著的影响。结论:逍遥散、四君子汤和金匮肾气丸对慢性束缚应激时海马CA1区有不同程度的调节作用,而以逍遥散作用为优。

声脉冲辐射力成像在新版BI-RADS分级诊断乳腺肿瘤中的价值

选取122例患者共124个肿块进行常规超声、声触诊组织量化(VTQ)、声触诊组织成像(VTI)检查及BI-RADS分级,得出肿块的剪切波速度值及平均光密度值,以病理结果为金标准,绘制ROC曲线,比较VTQ、VTI及声脉冲辐射力成像(ARFI)与BI-RADS分级联合这三种方法的诊断价值,评价ARFI在新版BI-RADS分级中的意义。经病理证实,124个乳腺肿块中恶性病灶50个、良性病灶74个。VTQ的ROC曲线下面积(AUC)为0.900,所对应的界值为3.49 m/s,VTI的平均光密度值的AUC为0.923,所对应的界值为202.20。恶性病灶VTQ≥3.49 m/s个数为38,<3.49 m/s个数为12。良性病灶VTQ≥3.49 m/s个数为3,<3.49 m/s个数为71(P=0.000)。恶性病灶平均光密度值≥202.20的个数为45,<202.25的个数为5。良性病变平均光密度值≥202.20的个数为7,<202.25的个数为67(P=0.000)。三者联合方法在诊断乳腺肿瘤的敏感度(92.0%)、特异度(93.2%)、阳性预测值(88.5%)、阴性预测值(94.5%)、准确率(92.7%)及约登指数(0.917)。声脉冲辐射力成像联合超声BI-RADS分级诊断乳腺肿瘤有较高的应用价值。

ABC-ELISA检测华支睾吸虫抗体的动态研究

本文报道了用ABC-ELISA观察人工感染华支睾吸虫家兔血清特异性抗体的变化。结果表明,抗体最早出现阳性时间在感染后第14d,轻、重感染组抗体高峰时间分别在第10周和第8周,以后呈下降趋势。抗体水平与虫卵计数呈直线正相关,重感染组平均阳性时间提前,平均光密度值(OD)高。实验结果还表明,抗体应答表现与宿主个体反应性有关,但主要取决于感染度。

自然条件下盐酸吗啡对肥须亚麻蝇幼虫发育积温和头咽骨的影响

目的观察自然条件下盐酸吗啡对石家庄地区优势蝇种肥须亚麻蝇(Parasarcophaga crassipalpis)幼虫发育积温和头咽骨的影响,探讨利用尸源性蝇类头咽骨形态学指征和积温推测尸体死后间隔时间的可行性。方法自然条件下,用含吗啡的兔肉(取自用不同剂量盐酸吗啡注射后处死的兔)饲养肥须亚麻蝇幼虫,每隔12h留取幼虫标本,直至离食期。将幼虫烫死并保存。将实验期间的日均温累加计算积温。体视显微镜下分离出幼虫头咽骨并在光学显微镜下观察、拍照。利用计算机图像分析系统对头咽骨的形态学指征进行测定。结果 (1)自然条件下,盐酸吗啡一定程度上改变了肥须亚麻蝇幼虫的积温和历期。(2)自然条件下,幼虫口钩和咽骨的面积进入三龄期后维持基本恒定,而头咽骨骨化面积和平均光密度均随积温的增加而逐渐增高,直至三龄期结束。幼虫口钩、咽骨的骨化面积和平均光密度达到最大值的积温明显大于二者面积达到最大值的积温。结论自然条件下,盐酸吗啡显著改变了肥须亚麻蝇幼虫发育积温,但肥须亚麻蝇幼虫口钩和咽骨的骨化面积、平均光密度均随积温的增加而增加,呈现良好的线性趋势,并一直维持到三龄期后,它们结合积温可推测死后间隔时间。