深低温低流量体外循环心脏手术对幼猪肾功能的影响

[目的]评价长时间深低温低流量体外循环(CPB)心脏手术对幼猪肾功能的影响。[方法]北京长白幼猪15例,分为实验组(n=10)和对照组(n=5)。实验组麻醉后正中开胸,常规建立体外循环,体温降至25℃后,开始低流量循环(50mL·kg-1·min-1),主动脉阻断120min后开放,停机后观察120min取肾组织;对照组麻醉后单纯开胸。对照组在麻醉诱导后即刻(T1),实验组分别在麻醉诱导后即刻(T1)、停机后5min(T2)、120min(T3)取静脉血,检测半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cystatin C,CysC)、血肌酐(Serum Cratinine,SCr)、尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)。两组动物在实验结束时,测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG),取肾组织行病理检查。[结果]实验组1例死于CPB停机后心脏骤停,余9例和对照组5例完成至实验结束。对照组和实验组在T1时点各指标均无统计学差异(P>0.05);与T1的检测指标相比,实验组T2的CysC、SCr、BUN、IL-6、TNF-α分别升高33.84%(P<0.05)、22.79%(P>0.05)、30.17%(P>0.05)、55.95%(P<0.05)、44.12%(P<0.05);T3的CysC、SCr、BUN、IL-6、TNF-α分别升高77.16%、64.95%、77.37%、64.29%、35.29%(P均<0.05)。与对照组相比,实验组可见肾损伤病理学改变,尿NAG升高91.85%(P<0.05)。[结论]深低温低流量体外循环心脏手术可造成幼猪肾损伤,并证实炎症反应是肾损伤的可能机制之一。

2种用油酸诱导的幼猪急性肺损伤模型血流动力学变化的对比分析

目的：对比以“近似二次打击”的方法和传统方法构建的油酸诱导的幼猪急性肺损伤模型的血流动力学差异。方法：外科操作稳定30min后，12只幼猪随机分为传统诱导组（T组）和“近似二次打击”诱导组（H组），T组油酸连续经右心耳注射，H组采取近似于“近似二次打击”的方法，分2阶段间隔1h经右心耳连续注射油酸。于各时间点记录血流动力学指标，并取动脉血行血气分析检查。注射油酸后3h处死实验动物。结果：T组有2只幼猪死于油酸应用后发生的急剧的血压下降；T组血流动力学改变较H组剧烈，尤其以油酸注射后的5—30min最为剧烈。实验过程中2组左心房压无显著变化，油酸注射后肺动脉压力显著升高。结论：以油酸按“近似二次打击”法构建的急性肺损伤模型的血流动力学较传统法稳定，2种方法构建的模型均能达到急性肺损伤模型的标准。

不同剂量重组葡激酶治疗幼猪急性脑梗死对凝血和纤溶功能的影响

目的 研究重组葡激酶 (rSaK)治疗急性脑梗死对血液凝血及纤溶功能的影响。方法 幼猪 48头 ,分为对照组和 7个rSaK组 (剂量 0 4万～ 6 4万IU/kg) ,每组 6头。幼猪脑梗死 4h后静脉用rSaK ,对照组用安慰剂。治疗后 30、60、90min测凝血酶原时间 (PT)、部分凝血活酶时间 (APTT)、凝血酶时间 (TT)、纤维蛋白原 (Fg)、优球蛋白溶解时间 (ELT)、血浆纤溶酶原活性 (Plg :A)、D -二聚体 (DD)。结果 rSaK延长PT、APTT、TT ,缩短ELT ,增加DD ,剂量越大越明显 ,但对Fg、Plg :A影响很小。结论 rSaK能显著增强纤溶活性 ,对血液凝血功能影响较小。

乌司他丁对幼猪深低温低流量体外循环心脏手术肾损伤的影响

目的:评价乌司他丁对幼猪深低温低流量体外循环(CPB)心脏手术肾损伤的影响。方法:北京长白幼猪15例,分为乌司他丁组(U组,n=5)、对照组(C组,n=5)和假手术组(S组,n=5)。U组和C组麻醉后正中开胸,常规建立CPB,体温降至25℃后,开始低流量循环(50 mL·kg-1·min-1),主动脉阻断120 min后开放,停机后观察120 min,U组在CPB开始和循环开放即刻分别给予乌司他丁1.2万IU·kg-1,C组给予等量0.9%氯化钠溶液。S组麻醉后单纯开胸。实验动物在麻醉诱导后即刻(T1)、U组和C组在停机后5 min(T2)、120 min(T3)取静脉血,检测胱抑素C(CysC)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。三组动物在实验结束时,测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG),取肾组织行病理检查。结果:三组动物均完成至实验结束。三组动物在T1时点的CysC、SCr、BUN、IL-6、TNF-α差异均无统计学意义(均P>0.05);在T2时点,U组的CysC、SCr、BUN、IL-6、TNF-α比C组分别降低12.50%(P>0.05)、2.97%(P>0.05)、0.37%(P>0.05)、26.28%(P<0.05)、10.81%(P<0.05);在T3时点,U组的CysC、SCr、BUN、IL-6、TNF-α分别比C组降低24.37%(P<0.05)、17.20%(P<0.05)、16.82%(P<0.05)、18.12%(P<0.05)、8.57%(P>0.05)。与C组相比,U组尿NAG降低51.17%(P<0.05)。C组和U组均可见肾损伤,U组较轻,S组未见肾损伤。结论:深低温低流量CPB心脏手术对幼猪存在肾损伤,乌司他丁可通过抑制炎症反应来达到对抗肾损伤(肾保护)的作用。

连续性血液透析滤过治疗肠穿孔腹膜炎SIRS幼猪疗效观察

目的全身炎症反应综合征（SIRS）是各种原因引起多脏器功能障碍综合征的共同通路，目前临床缺乏有效的治疗措施。该研究旨在对肠穿孔腹膜炎诱导的SIRS幼猪行早期连续性血液透析滤过，观察SIRS动物的体温、心率、呼吸、血压、血气分析和外周血细胞计数，为临床治疗提供实验依据。方法12只上海种小白猪，体重7～9kg，雌雄不限。随机分为2组：对照组（n=6）；治疗组（n=6，连续性血液透析滤过，CVVHDF）。以盲肠穿孔术诱导SIRS，造模成功后治疗组行CVVHDF6h，血流速度20mL／min，透析液速度600mL／h，置换液速度300mL／h，零平衡。于动物基础状态、成模时、成模后2，4，6h分别记录两组动物的心率、呼吸、血压、体温、外周血细胞计数和血气分析结果。结果所有动物经造模后均出现心率、呼吸频率上升，血压、动脉血氧分压、白细胞计数下降。成模时对照组动物心率和呼吸增快在6h内持续保持较高水平；治疗组动物成模2h后心率下降，6h后呼吸频率下降与对照组相比差异有显著性，P〈0．05。对照组动物成模4h后平均动脉压下降，与治疗组比较差异有显著性，P〈0．05。两组动物成模后动脉血氧分压均较基础状态降低，6h内对照组动物保持低水平，治疗组动物动脉血氧分压有上升趋势，但组间差异无显著性。实验中动物体温及外周血细胞计数变化组间比较差异无显著性。结论早期CVVHDF可稳定肠穿孔腹膜炎诱导的SIRS幼猪血流动力学，改善血氧分压，可能对改善疾病预后有益。

连续性血液透析滤过治疗对急性肺损伤幼猪凝血功能的影响

目的对内毒素诱导急性肺损伤(ALI)幼猪行连续性血液透析滤过治疗,观察其对凝血功能的影响。方法18头小白猪随机分为对照组、肝素组和治疗组,每组各6头。予内毒素150μg/kg静脉注射诱导肺损伤。成模后治疗组行连续性血液透析滤过6 h,血流速度50 ml/min,透析液速度600 ml/h,置换液速度300 ml/h,肝素持续泵入保持活化凝血时间(ACT)180～250 s。成模后肝素组予肝素静脉维持保持ACT 180～250 s。于动物基础状态(B)、成模(A0h)、成模后2 h(A2h)、4 h(A4h)、6 h(A6h)分别采静脉血行外周血细胞计数、凝血酶原时间(PT)、白陶土部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FiB)、D-二聚体(D-D),采动脉血行血气分析。记录心率(HR)、呼吸(RR)、血压(MABP)、肺动态顺应性(Cdyn)。结果各组动物A0h改良氧合指数(P/F)、Cdyn、MABP较B下降,HR、RR较B上升,PT和APTT延长,FiB下降,D-D增加,组间比较差异无统计学意义;A6h治疗组动物P/F、Cdyn、HR、MABP与对照组和肝素组比较差异有统计学意义。实验中PT、APTT进行性延长,组间比较PT差异无统计学意义,治疗组A2h、A4h、A6h APTT与对照组比较差异有统计学意义,肝素组A6h APTT与对照组比较差异有统计学意义。A6h治疗组和肝素组纤维蛋白原较对照组有明显改善。治疗组A2h、A4h、A6h D-D均较对照组改善,肝素组A4 h、A6h D-D较对照组改善,差异有统计学意义(P<0.05)。结论连续性血液透析滤过可改善肺损伤动物的氧合、呼吸力学,对动物的凝血状态无不利影响。

外源性一氧化氮对快速进入高原现场幼猪氧代谢动力学的影响观察

目的了解吸入外源性一氧化氮(Nitric OXide,NO)对快速进入高原现场幼猪(其情形近似于急性高原病患者)氧代谢动力学的影响。方法利用右心漂浮导管法对快速进入高原现场幼猪吸入外源性NO前后氧代谢动力学的变化情况进行比较观察。结果吸入NO后,快速进入高原现场幼猪肺动脉平均压(mPAP)、肺血管阻力(PVR)、肺内分流(Qs/Qt)显著降低;心输出量(CO)、氧输送量(DO2)、氧消耗量(VO2)、动脉血氧饱和度(SaO2)显著升高;以上各指标均P<0.01;氧摄取率(O2Ext)无明显变化。结论吸入外源性NO能显著降低快速进入高原幼猪的PVR,并通过增加CO而提高组织的DO2、VO2和SaO2,从而显著改善幼猪机体组织因缺氧引起的氧代谢障碍,其对急性缺氧有着积极的治疗作用。

高肺血流致肺动脉高压幼猪模型中血清内皮素水平的变化

目的研究高肺血流幼猪模型肺动脉血流动力学及组织学变化与血清内皮素的关联性。方法采用生后2-3月龄的幼猪,体重10-12kg,分为两组,每组12只。正常对照组(control group,n=12):即假手术组,只开胸无手术处理;高肺血流组(shunt group,n=12):全部行左侧开胸,降主动脉与左肺动脉搭桥术。所有动物正常饲养3个月。然后正中开胸,检测肺动脉收缩压(PASP)、肺血管阻力(PVR),观察肺动脉标本的结构和组织学变化。Elisa检测血清内皮素水平。结果高肺血流组,肺动脉收缩压(PASP)、肺血管阻力(PVR)显著升高(P<0.01);左肺动脉出现平滑肌细胞显著增生,部分血管中膜及内膜增厚,官腔狭窄;血清内皮素水平升高。结论在幼猪动物模型中,高肺血流可导致肺动脉结构重塑,可导致肺动脉压力的升高,与血清内皮素变化呈正相关。

慢性发绀型肺血减少先天性心脏病幼猪模型的建立与病理学观察

目的:采用人工血管肺动脉(PA)-左心房(LA)分流与肺动脉环缩的方法建立慢性发绀型肺血减少先天性心脏病(先心病)幼猪模型。方法:将6～8 w龄幼猪分2组,肺血减少组7只,行人工血管PA-LA分流及PA远端环缩;对照组6只,仅开胸。饲养4 w后行二次手术,评估建模效果。结果:对照组均存活,肺血减少组存活6只。肺血减少组跨肺动脉环缩处收缩压差由(10.33±6.09)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)增至4 w后的(19.67±4.76)mmHg,P=0.011。与对照组比较,肺血减少组动脉血氧饱和度(SaO2)、动脉氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、血红蛋白含量(Hb)和血细胞比容(Hct)差异均有统计学意义(P<0.05)。2组幼猪肺脏、心脏组织比较有明显的病理学特征差异。结论:应用人工血管PA-LA分流与PA环缩的方法成功建立慢性发绀型肺血减少先心病动物模型,创伤小、可重复性高。

高肺血流幼猪模型的建立及其肺动脉血流动力学和肺组织学变化

目的研究高肺血流幼猪动物模型的建立的方法及探讨肺动脉血流动力学与结构关系。方法采用生后2-3月龄的幼猪,体重8-10kg,分为两组,每组6只。对照组(Control-group,n=6):即假手术组,只开胸无手术处理;高肺血流组(shunt-group,n=6):全部行左侧开胸,降主动脉与左肺动脉搭桥术。所有动物正常饲养3个月。然后正中开胸,检测肺动脉收缩压(PASP)、肺血管阻力(PVR),观察肺动脉标本的结构和组织学变化。结果 高肺血流组肺动脉收缩压(PASP)、肺血管阻力(PVR)显著升高(P<0.01);左肺动脉出现平滑肌细胞显著增生,部分血管中膜及内膜增厚,官腔狭窄。对照组无明显变化。结论在幼猪动物模型中,高肺血流可导致肺动脉结构重塑,可导致肺动脉压力的升高。为进一步研究高肺血流先天性心脏病肺动脉高压的形成过程,以期在治疗上提供新的方法。

幼猪深低温体外循环流量和预充液的改进

利用幼猪复制深低温体外循环模型，研究２ 种流量和２ 种预充液配方对幼猪体温变化速率、体液平衡以及转流液中红细胞压积和胶体渗透压的影响。结果表明８０ｍ ｌ·ｋｇ－ １·ｍ ｉｎ－ １ 的流量以及全血预充液明显优于１００ｍ ｌ·ｋｇ－ １ ·ｍ ｉｎ－ １ 的流量和晶胶混和预充液。

大量幼猪原代肝细胞的分离与培养

研究分离幼猪原代肝细胞培养过程中肝细胞的数量和功能活性。方法采用本地幼猪肝脏供体,应用体外胶原酶灌流法分离猪肝细胞,采用台盼蓝拒染法测定肝实质细胞活性,在质量浓度为10%FCS(灭活胎牛血清)的培养液中培养,在光镜及电镜下观察培养过程中肝细胞形态学变化,检测不同时期培养上清液中白蛋白和尿素氮BUN的浓度。结果每只猪肝脏平均肝细胞产量为1.55×10个,即时活性为90.2%±2.5%,24h后85%以上的肝细胞形成10肝细胞球,并可保持细胞功能活性达7天,其中前3天活性最高。结论本法分离获取的肝细胞产量高、功能活性好,可作为生物型人工肝的生物材料。

先天性心脏病室间隔缺损幼猪模型手术配合体会

猪的生物学特性和解剖生理特点与人类十分接近 ,使用幼猪制备先天性心脏病的动物模型非常合适。本文就幼猪先天性心脏病模型制备的各种工作 ,如 :动物选择、手术室及人员准备、麻醉、术前术后配合以及手术动物的实验管理等方面进行了阐述。笔者认为 ,一个动物模型的成功制备 ,与各方面的配合工作密不可分。

幼猪开胸深低温体外循环模型的建立研究

目的:建立幼猪深低温低流量、深低温停循环体外循环模型,为研究深低温体外循环对自身脏器损伤的研究提供动物模型。方法:16只健康幼猪,平均年龄(24.1±2.7)d,体质量(6.5±0.5)kg,采用开胸体外循环转流降温。16只幼猪随机分为两组,即A组:深低温低流量60 min;B组:深低温停循环60 min,术中进行心电图监测、动脉混合静脉血气分析和血流动力学观察。结果:16只幼猪均成功建立体外循环模型,体外循环后幼猪心肺功能均顺利恢复,血气指标分析均在正常范围,血流动力学在正常范围。结论:开胸成功建立幼猪深低温体外循环模型,为研究深低温体外循环自身脏器损伤提供了动物模型。

高肺血流幼猪模型中肺动脉血流动力学及组织学变化对血清基质金属蛋白酶的影响

目的研究高肺血流幼猪模型肺动脉血流动力学及组织学变化与血清基质金属蛋白酶的关联性。方法采用生后2-3月龄的幼猪,体重7-10kg,分为两组,每组12只。对照组(control group,n=12):即假手术组,只开胸无手术处理;高肺血流组(shunt group,n=12):全部行左侧开胸,降主动脉与左肺动脉搭桥术。所有动物正常饲养3个月。然后正中开胸,检测肺动脉收缩压(PASP)、肺血管阻力(PVR),观察肺动脉标本的结构和组织学变化。Elisa检测血清基质金属蛋白酶水平。结果高肺血流组肺动脉收缩压(PASP)、肺血管阻力(PVR)显著升高(P<0.01);左肺动脉出现平滑肌细胞显著增生,部分血管中膜及内膜增厚,官腔狭窄;血清基质金属蛋白酶水平升高。结论在幼猪动物模型中,高肺血流可导致肺动脉结构重塑,可导致肺动脉压力的升高,与血清基质金属蛋白酶变化呈正相关。为进一步研究高肺血流先天性心脏病肺动脉高压的形成过程提供实验依据以及实验平台,以期在治疗上提供新的方法。