右美托咪定对异氟醚致幼龄大鼠海马损伤的保护作用及其机制

为了探明右美托咪定(DEX)对异氟醚致幼龄大鼠海马损伤的保护作用及其机制,本试验选取60只SD幼龄大鼠随机均分为对照组、模型组、DEX干预组和DEX组。对照组未作处理,DEX干预组和DEX组大鼠分别腹腔注射25μg/(kg·bw)DEX;30 min后,模型组和DEX干预组大鼠持续灌注1.5%异氟醚,6 h后处死所有大鼠,分离海马组织,通过苏木素-伊红(H.E.)染色观察海马组织病理学变化,透射电子显微镜观察海马细胞超微结构,酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测海马组织中胱天蛋白酶3(Caspase-3)活性,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率,Western blot检测转化生长因子-β(TGF-β)蛋白表达,实时荧光定量PCR(qPCR)检测微小RNA 137(miR-137)表达。结果显示,与对照组相比,模型组大鼠海马神经元排列紊乱、细胞间隙增大,线粒体严重扭曲肿胀、嵴溶解消失,线粒体损伤评分极显著升高(P<0.01),Caspase-3活性显著升高(P<0.05),细胞凋亡率和TGF-β蛋白表达量均极显著升高(P<0.01),miR-137表达水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,DEX干预组大鼠海马神经元排列较整齐,仅见少量线粒体肿胀、嵴溶解消失,线粒体损伤评分极显著降低(P<0.01),Caspase-3活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率和TGF-β蛋白表达量极显著降低(P<0.01),miR-137表达水平显著升高(P<0.05);DEX组与对照组相比,所有指标均差异不显著(P>0.05)。结果表明,DEX可改善异氟醚诱导的幼龄大鼠海马损伤,可能与其调控miR-137,抑制TGF-β表达,遏制细胞凋亡的发生有关。

小儿复方鸡内金咀嚼片对幼龄大鼠28 d重复灌胃给药毒性研究

目的为小儿复方鸡内金咀嚼片临床安全用药的剂量设计和临床毒副反应监测提供参考。方法取幼龄SD大鼠120只,随机分为溶剂对照组(A组,羧甲基纤维素钠),小儿复方鸡内金咀嚼片低、中、高剂量组(B1组、B2组、B3组,六神曲鸡内金混合粉以生药计0.375,1.125,3 g/kg,相当于临床拟用剂量的6倍、18倍、48倍),按体质量每100 g灌胃给药1 mL,连续4周,恢复期30 d,给药结束和恢复期结束时剖杀,进行一般生理指标观察、临床病理学检查、组织病理学检查、神经行为测试。结果与A组比较,给药结束时雌鼠B1组的平均红细胞血红蛋白浓度显著降低(P<0.05);雌鼠B2组、B3组的甘油三酯均显著降低(P<0.05),雌鼠B3组的氯离子浓度显著升高(P<0.05),雌鼠B1组的钙离子浓度显著降低(P<0.05),雄鼠B1组的乳酸脱氢酶水平显著升高(P<0.05),雄鼠B3组的总胆固醇显著降低(P<0.05),雄鼠B1组、B3组的钠离子浓度均显著升高(P<0.05),但上述指标改变均无毒理学意义。各组大鼠组织病理学检查均未见与给药相关的蓄积性或延迟性毒性病理改变。结论小儿复方鸡内金咀嚼片未见明显毒性反应剂量为3 g/kg,相当于临床拟用剂量的48倍。

环丙沙星对幼龄大鼠软骨的影响

随着喹诺酮类 (QNS)药物的广泛应用 ,QNS药物引起的不良反应也越来越引人们的重视 ,其中QNS类药物对儿童的软骨是否有损伤 ,是否会影响儿童的生长发育 ,至今还是一个争议较大的问题。在动物实验中 ,发现 QNS药物确实对幼龄动物的关节软骨引起损伤 ,主要见于负重关节 ,而且年龄越小损害程度越严重 ,并具有种属特异性。为确实 QNS药物对幼龄动物软骨的损伤、损伤的程度及损伤是否可逆 ,我们用微生物单层琼脂扩散法来监测环丙沙星 (CPL X)三个剂量组 [10 0 0、5 0 0、5 0 mg/ (kg· d) ]每天分 2次给药及空白组连续给药 10 d,停药后不同时间的膝关节的药物浓度及血中药物浓度 ,并对膝关节的软骨组织作了光、电镜观察。结果表明 ,环丙沙星对幼龄大鼠 (2 1d)的膝关节软骨有特异的亲和力 ,停药 2 4h后三个不同剂量组的软骨内的浓度均高于血药浓度 ,停药 6周后在膝软骨中还能测到药物浓度 ,三个不同剂量的膝软骨组织在光、电镜下均可见有明显的损伤 ,此病理损伤在停药 6周后还可见到。本实验再次表明 ,CPL X对幼龄动物软骨组织有明显的损伤作用。

大豆异黄酮对DMBA诱导高脂饮食幼龄大鼠乳腺肿瘤的作用

目的研究大豆异黄酮(Soy isoflavones,SI)对二甲基苯蒽(7,12-dimethylbenz(α)anthrancence,DMBA)诱导的高脂饮食幼龄SD雌性大鼠乳腺癌发病率的影响。方法将46只幼龄SD雌性大鼠随机分成模型组、SI组、高脂组及SI+高脂组。用DMBA灌胃诱导致癌后每天进行乳腺触诊、记录体质量和饲料摄入量。11周后处死大鼠,比较4组大鼠间血脂含量、乳腺癌发病率及免疫组织化学的表达情况。结果 SI组与模型组相比,SI+高脂组与高脂组相比,其乳腺肿瘤PCNA、C-erbB-2阳性表达面积显著降低(P<0.05)。结论补充摄入大豆异黄酮可降低DMBA诱导高脂饮食幼龄大鼠乳腺肿瘤的恶性程度。

鹅血红素对患缺铁性贫血症幼龄大鼠生长发育、铁代谢和器官组织元素分布的影响

本试验旨在研究不同水平鹅血红素对患缺铁性贫血症（ IDA）3～7周龄大鼠生长发育、铁代谢及其器官组织元素（铁、铜、锰、锌、硒）分布的干预修复作用,以确定鹅血红素的使用效果和适宜补充量。选取同期受孕母鼠开始造模,模型组孕鼠受孕15 d后,开始饲喂低铁饲粮,持续至哺乳期结束（分娩后21 d）,IDA模型建成后选取3周龄大鼠180只,随机分为5组（每组6个重复,每个重复6只）,即：缺铁组、FeSO4组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,各组分别每天灌注去离子水10 mL/kg BW,1% FeSO410 mL/kg BW和鹅血红素0.11、0.22、0.33 g/kg BW,均饲喂低铁饲粮。正常组自孕期开始一直饲喂基础标准对照饲粮。试验期28 d。结果表明：1）高剂量组幼龄大鼠的平均日增重、末重、器官指数（除心脏指数）与正常组无显差异著（ P＞0.05）。与缺铁组相比较,高剂量组幼龄大鼠血液中血红蛋白含量、红细胞数、红细胞压积、平均红细胞体积、血清铁、转铁蛋白饱和度显著或极显著升高（P＜0.05或P＜0.01）,红细胞分布宽度和总铁结合力显著或极显著降低（ P＜0.05或P＜0.01）,大鼠心脏铁、铜、锌含量显著升高（ P＜0.05）,肝脏铜、锰含量显著或极显著降低（ P＜0.05或P＜0.01）。2） FeSO4溶液作为补铁剂长期服用对幼龄大鼠缺铁模型的干预效果不明显。由此可见,鹅血红素摄入量为0.33 g/kg BW时能有效干预IDA幼龄大鼠的生长发育和造血能力,并能调控幼龄大鼠各器官组织内的元素分布趋于正常,效果优于FeSO4。

不同时间异氟醚麻醉对幼龄大鼠海马神经元凋亡及自噬的影响

相关研究发现异氟醚可引起幼龄大鼠广泛的脑神经元凋亡,且近期发现异氟醚还可以介导海马神经元发生自噬。在前期试验的基础上,选取40只7日龄(P7)SD大鼠幼鼠,随机分为对照组和1.5%异氟醚麻醉2、3、4、6h组,建立实验模型。待麻醉结束后将大鼠安乐死,取脑并分离海马组织。用TUNEL染色、LC3-II免疫组化及Western blot检测等方法检测海马神经元自噬及凋亡情况。试验结果显示,随着异氟醚作用时间的增加,TUNEL染色结果显示,麻醉4h后海马阳性细胞率明显增多,而LC3-II免疫组化结果显示在3、4h时阳性率较高,6h有所下降;与对照组相比,活化的Caspase-3表达量逐渐增加;Bcl-2表达量逐渐降低。Beclin-1和LC3-II/I表达量先升高后下降,并且在异氟醚作用3h时表达量明显升高(P<0.05);此外,与异氟醚麻醉3、4h时相比,Beclin-1在麻醉6h时表达量明显下降,而Caspase-3表达量明显升高(P<0.05)。试验结果表明,异氟醚不仅可以引起幼龄SD大鼠海马神经元广泛凋亡,而且还能诱导海马神经元自噬,凋亡水平随麻醉时间延长逐渐加强,而自噬水平先升高后降低。自噬在异氟醚诱导的海马区神经元凋亡中可能发挥着保护性作用。

益智合剂及针刺百会影响幼龄大鼠学习记忆能力及AchE活性的实验研究

目的：探讨益智舍剂的益智作用及益智机理。方法：将40日龄SD大鼠分为假手术组、模型组、阳性西药组、中药小剂量组、中剂量组、大剂量组、针刺组、针药组共8组，分别灌胃针刺。结果：模型组与假手术组比较，学习记忆能力明显降低（P〈0．01～0．001），AchE活性升高（P〈0．001）；各观察组与模型组比较，学习记忆障碍均有不同程度改善（P〈0．05～0．01），AchE活性降低（P〈0．05～0．01）。结论：益智合剂及针刺百会具有益智作用，其机制可能与降低大脑皮质AchE活性有关。

复方三维右旋泛酸钙糖浆对幼龄大鼠厌食症的治疗作用及机制研究

目的:采用幼年大鼠厌食症模型,评价复方三维右旋泛酸钙糖浆的治疗作用,探讨作用机制。方法:构建幼龄大鼠厌食症模型,按剂量分组,给药2周,检测进食量、体质量、血清琥珀酸脱氢酶(SDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、丙酮酸激酶(PK)、生长抑素(SS)、胃泌素(gastrin)及饥饿素(ghrelin),然后进行胃肠运动和胃消化功能试验。结果:灌胃给药后,幼龄厌食症大鼠体质量显著增加,血清MDH与SDH活力升高,gastrin含量增加,ghrelin含量降低,胃液分泌、总酸及游离酸的排出量增加,胃蛋白酶活力升高。结论:复方三维右旋泛酸钙糖浆对幼龄大鼠厌食症有明显的治疗作用,主要机制是增加食欲,促进食物的消化吸收。

西那沙星对幼龄大鼠的软骨毒性

目的:观察西那沙星(sinafloxacin)静脉注射对幼龄大鼠关节软骨的影响。方法:40只大鼠,雌雄各半,按照体重随机分为西那沙星低、高剂量组(iv,10和60 mg·kg^(-1))、加替沙星阳性对照组(iv,60 mg·kg^(-1))和空白对照组(iv生理氯化钠溶液10 mL·kg^(-1))。各组连续给药7 d。d7给药后24 h处死动物取完整膝、髋关节进行病理组织学检查。结果:西那沙星可使幼龄大鼠膝、髋关节软骨表层幼稚软骨细胞数量减少,骨骺软骨细胞变性坏死,且存在量效关系。结论:西那沙星10～60 mg·kg^(-1)连续iv 7 d对幼龄大鼠关节软骨有破坏作用。

姜黄、生姜组方抑制幼龄大鼠前列腺生长的作用研究

目的观察姜黄、生姜组方乙醇提取物对正常幼龄大鼠前列腺生长的影响。方法将30只大鼠随机分为正常组(A组)、己烯雌酚组(B组)、姜黄生姜组(C组)、姜黄生姜蒲黄南瓜籽组(D组)、蒲黄南瓜籽组(E组),每组6只。除A组及B组外,C、D、E组分别饲以混有相应组乙醇提取物的饲料(10 g/d);B组每次按1.0 mg/kg体质量皮下注射己烯雌酚注射液,每周2次,连续3周,上述各组与A组均自由进食,连续3周。于末次给药24 h后处死动物,分离前列腺各叶、精囊腺和睾丸,分别称量,计算各腺体指数;并检测各组大鼠血清酸性磷酸酶水平。结果C组大鼠的前列腺背叶、侧叶、腹叶指数与A组相比减小,其中侧叶、背叶指数显著减小(P均<0.01),而睾丸指数区别不明显;D组前列腺背叶、侧叶、腹叶指数均减小,睾丸质量减轻。结论姜黄、生姜组方乙醇提取物能有效地降低大鼠前列腺的质量,对睾丸的生长无明显影响。

银黄清肺胶囊对幼龄大鼠流感病毒肺炎的保护作用及机制研究

目的研究银黄清肺胶囊对幼龄大鼠流感病毒肺炎的保护作用及其机制。方法 21日龄SD大鼠60只,雌雄各半,随机分为6组,即正常对照组,模型组,银黄清肺胶囊低、中、高剂量组和阳性药百蕊胶囊组。除正常对照组外,其余5个组动物经鼻腔接种甲型流感病毒,连续3 d,建立流感病毒感染的肺炎模型。除了模型组和正常对照组外,其余组造模当日开始每日灌胃给予银黄清肺胶囊药液(100、200和400 mg·kg^(-1))或百蕊胶囊药液(600 mg·kg^(-1)),每日1次,连续7 d。观察各组大鼠的一般状态;HE染色观察肺组织病理学改变,ELISA检测肺泡灌洗液中成纤维细胞生长因子-2(FGF2)水平;Western Blot检测肺组织成纤维细胞生长因子受体-1(FGFR1)表达。结果与正常对照组比较,经鼻流感病毒感染的模型组动物饮食进水量显著减少,活动量减少,精神状态差,呼吸频率加快,肺组织灌流液中FGF2含量增加,肺组织中FGFR1蛋白表达显著降低;银黄清肺胶囊(400和200 mg·kg-1)能显著改善幼龄大鼠流感病毒肺炎动物的一般情况,减轻肺组织病理学改变,增加肺组织灌流液中FGF2含量和上调肺组织FGFR1蛋白表达。结论银黄清肺胶囊对幼龄大鼠流感病毒肺炎具有较好的保护作用,其机制与调节肺组织中FGF2/FGFR1通路有关。

淫羊藿苷对CVB3诱导的幼龄大鼠心肌炎的作用

目的探究淫羊藿苷(Icariin)对柯萨奇B3病毒(coxsackievirus B3,CVB3)诱导的幼龄大鼠心肌炎的作用及作用机制。方法将幼龄SD大鼠随机分为对照组(Ctrl组)、Icariin组、CVB3组和CVB3+Icariin组,CVB3组和CVB3+Icariin组大鼠腹腔注射CVB3复制心肌炎模型。HE染色检测心肌组织病理改变,Western blot检测Caspase-3和Caspase-9的表达,试剂盒检测心脏功能指标肌红蛋白(myoglobin,Mb)、肌酸激酶同工酶(Creatine kinase MB,CK-MB)、肌钙蛋白I(Cardiac troponin I,c Tn I)、氧化应激指标超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的浓度,ELISA检测炎症因子白介素-6(Interleukin-6,IL-6)和IL-1β的浓度。结果与Ctrl组相比,CVB3组大鼠心肌组织病理损伤加重;与CVB3组相比,CVB3+Icariin组大鼠心肌组织病理损伤明显减轻;同时,CVB3组Caspase-3和Caspase-9的表达水平明显高于Ctrl组,差异有统计学意义(P<0.01),CVB3+Icariin组大鼠Caspase-3和Caspase-9表达水平均低于CVB3组,差异有统计学意义(P<0.01); CVB3能明显升高大鼠血清Mb、CK-MB和c Tn I的浓度(P<0.01),Icariin能降低模型大鼠Mb、CK-MB和c Tn I的浓度,差异有统计学意义(P<0.01);与Ctrl组相比,CVB3组大鼠血清SOD浓度明显降低(P<0.01),MDA浓度明显升高(P<0.01),而Icariin能减弱CVB3对SOD和MDA的调控作用,差异有统计学意义(P<0.01);此外,CVB3能升高模型大鼠血清中IL-6和IL-1β的浓度(P<0.01),Icariin能降低IL-6和IL-1β的浓度(P<0.01)。结论 Icariin能通过抑制氧化应激和炎症反应减轻CVB3诱导的幼龄大鼠心肌炎。

幼龄大鼠给予芩暴红止咳口服液的非临床安全评价

目的:从多指标观察幼龄大鼠连续灌胃给予芩暴红止咳口服液13周可能引起的毒性反应和毒性靶器官,为临床应用提供参考。方法:120只雌、雄大鼠1:1同笼交配,记录仔鼠出生日期,至仔鼠出生20 d,取同日出生的仔鼠,按体质量随机分为对照组和芩暴红止咳口服液12.3、24.6、49.2 g·kg-1(以生药量计)组,每组40只,雌雄各半。仔鼠出生21 d开始,给予相应剂量的芩暴红止咳口服液,对照组给予超纯水,给药体积为10 mL·kg-1,每天给药2次,连续给药13周。观察动物的一般症状,进行体质量、摄食量、身体发育指标和生殖器官发育检查。分别于给药4周、13周和恢复期处死大鼠,检测相关指标,包括神经行为学、骨密度、免疫、眼科、尿常规、血液学指标、血液生化学指标、脏器系数和组织病理学。结果:与对照组比较,芩暴红止咳口服液低、中、高剂量组大鼠感觉功能、运动协调能力、学习记忆能力、骨密度、免疫功能、生殖器官发育及功能、眼科、尿常规、血液学指标、血液生化学指标、脏器系数和组织病理学均未见明显异常。结论:以多时间点、多指标体系可对中药复方制剂芩暴红止咳口服液进行较为全面的非临床安全评价,高剂量暴露量可达幼儿临床剂量的31.5倍;重复给药13周,未见明显毒性反应。

幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型中血液学和肠道黏膜免疫指标的观察

为了解幼龄大鼠环磷酰胺免疫抑制模型血液学和肠道黏膜免疫相关指标的变化特点,本研究观察与比较了4周龄雌性SD大鼠在体重、临床表现、血液学、血清生化指标以及肠道黏膜免疫等方面的变化。与对照组相比,幼龄大鼠体重增长缓慢(P<0.05);外周血白细胞总数、嗜中性粒细胞数、淋巴细胞数、单核细胞数与网织红细胞数显著降低(P<0.05);血清球蛋白含量显著减少(P<0.05);小肠派氏结数、杯状细胞数、肠道内淋巴细胞数和分泌型Ig A量均显著减少(P<0.05);其余血清生化指标以及肠道绒毛发育未见显著影响。研究表明,幼龄大鼠固有免疫与获得性免疫水平在模型中均受到显著抑制,后期固有免疫较获得性免疫恢复程度好。免疫指标中外周血细胞数及小肠派氏结数推荐在模型应用中优先选择。

增食灵口服液对幼龄大鼠胃排空及血浆胃动素的影响

目的:观察增食灵口服液对幼龄大鼠胃排空及血浆胃动素穴MOT雪水平的影响。方法:50只幼龄大鼠随机分为正常对照组,增食灵口服液大、中、小剂量组,吗丁啉组共5组。分别用0.9%NaCl溶液及各组药物灌胃7d后,利用酚红法测定胃排空率;同时测定血浆MOT水平。结果:除小剂量组外,各用药组的胃排空率均显著快于正常对照组穴P<0.05雪,各用药组之间,两两比较差异无显著性意义;除吗丁啉组和小剂量组外,其余各用药组的MOT含量均显著高于正常对照组穴P<0.05雪。结论:增食灵口服液能显著促进大鼠胃排空及提高血浆MOT水平,且与剂量大小相关。

甘草甜素对幼龄大鼠实验性肝纤维化疗效的研究

目的观察甘草甜素抗幼龄大鼠实验性肝纤维化的效果,探讨甘草甜素对儿童肝纤维化治疗及预防的作用。方法制备幼龄大鼠实验性肝纤维化模型,用甘草甜素治疗,同步预防,观察幼龄大鼠一般情况、肝组织形态、光镜下病理变化。结果甘草甜素治疗组在幼龄大鼠一般情况和光镜下病理学分级中,明显优于同步预防组和肝纤维化对照组,而同步预防组又优于肝纤维化对照组,且疗程越长,效果越明显。结论甘草甜素对幼龄大鼠肝纤维化有明显治疗及预防作用。

白藜芦醇对正常幼龄大鼠前列腺的影响研究

目的探讨白藜芦醇对正常幼龄大鼠前列腺的影响。方法将大鼠随机分组,灌饲不同剂量的白藜芦醇(剂量分别为5 mg/kg、1 mg/kg0、.5 mg/kg),连续3周,阳性对照组皮下注射己烯雌酚1 mg/kg,每周3次(周一,三,五)。于第22天杀剖,分离前列腺、精囊和睾丸,称体质量,计算各腺体指数。结果白藜芦醇5 mg/kg组的前列腺指数与正常对照组相比减少(P<0.05)。精囊腺前列腺全质量指数较之正常对照组减少(P<0.05)。各白藜芦醇给药组的睾丸质量和指数与正常对照组相比无明显统计学差异,对正常幼龄大鼠睾丸生长无明显影响。白藜芦醇对体质量无明显影响。结论白藜芦醇对正常幼龄大鼠的前列腺、精囊腺的生长有一定的抑制作用,对体质量、睾丸生长无明显影响。

幼龄大鼠颅骨缺损及钛网修补后对其颅骨生长和智力发育的影响

目的:针对目前小儿颅骨缺损的多种治疗观念及课题组前期研究提出的“滑行理论”,利用幼龄SD大鼠模型探究颅骨缺损及钛网修补后对其颅骨生长和智力发育的影响。方法:将3周幼龄SD大鼠随机分成假手术对照组(SOC)、颅骨缺损组(SD)和钛网修补组(TMR),术前排除组间差异,术后同环境下饲养至性成熟进行旷场实验和Morris水迷宫实验后处死,测量体质量、颅骨径线、颅骨厚度、缺损内径和脑容积等指标。结果:术前体质量及颅骨径线显示三组间差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性;性成熟时体质量、颅骨径线、脑容积三组间均无差异(P>0.05),仅SOC组平均颅骨厚度较大(P<0.05);缺损内径方面SD组与TMR组无差异(P>0.05),且与术前相比均呈狭长形变;旷场实验中总路程、平均速度和静止时间及部分区域数据方面SD组与其他组有差异(P<0.05);Morris水迷宫实验显示第5天逃避潜伏期、首次穿越平台时间和目标象限时间占比等SD组与其他组均有差异(P<0.05)。结论:颅骨缺损未行修补对幼龄大鼠颅骨的正常生长无明显影响,但可能影响其智力发育;钛网修补并不会限制幼龄颅骨的生长,反而避免了未行修补可能对智力发育的不利,丰富了“滑行理论”的同时为小儿颅骨缺损的“早期修补观念”提供了一定的依据。

上调miR-24对急性肺损伤幼龄大鼠炎症反应的影响及作用机制

目的 探究微小型RNA-24(microRNA-24,miR-24)对急性肺损伤(acute lung injury, ALI)幼龄大鼠炎症反应的影响及作用机制。方法 将幼龄大鼠分为Control、ALI、ALI+miR-24 mimic mock及ALI+miR-24 mimic组,利用脂多糖(LPS)建立幼龄大鼠ALI模型。miR-24 mimic mock及ALI+miR-24 mimic分别处理模型大鼠后,计算大鼠肺组织干湿重比,qRT-PCR检测miR-24的mRNA表达,HE染色观察大鼠肺组织病理变化,Tunel检测肺组织细胞凋亡情况,Western blot检测肺组织中磷酸化核因子κB p65(nuclear factor κB p65, NF-κB p65)、磷酸化核因子κB抑制蛋白(phosphorylation inhibitor of NF-κB, p-IκBα)及IκBα激酶(IκBα kinase, p-IKK)的表达。将大鼠肺泡巨噬细胞分为Control、LPS、LPS+miR-24 mimic、LPS+pcDNA-IL-1α(pc-IL-1α)及LPS+miR-24 mimic+pc-IL-1α组,利用LPS刺激细胞。miR-24 mimic及pc-IL-1α分别或同时转染细胞后,qRT-PCR检测miR-24的mRNA水平,生物信息预测miR-24与IL-1α的靶向关系,并利用荧光素酶报告试验检测。ELISA检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor, TNF-α)、白介素-6(interleukin-6, IL-6)、IL-1α和IL-1β在各组幼龄大鼠血清中及各组大鼠肺泡巨噬细胞培养上清中的浓度。结果 miR-24在ALI幼龄大鼠肺组织的mRNA水平降低,miR-24 mimic可上调miR-24 mRNA表达。与Control组比较,ALI组幼龄大鼠肺泡内充满炎性细胞,肺干湿重比值增大,肺组织凋亡细胞百分比升高。与ALI组比较,ALI+miR-24 mimic mock组无统计学差异,ALI+miR-24 mimic组肺泡内炎性细胞明显减少,肺干湿重比值减小,凋亡细胞百分比降低。miR-24 mimic可降低ALI幼龄大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1α和IL-1β的浓度,减少肺组织中 p-IKK 、p-IκBα及NF-κB p65的表达。miR-24在经LPS处理大鼠肺泡巨噬细胞中的mRNA水平降低。miR-24 mimic减弱野生型IL-1α质粒(IL-1α wt)的荧光素酶活性,并可降低经LPS处理大鼠肺泡巨噬细胞上清中炎症因子 TNF-α、IL-6、IL-1α和IL-1β的浓度,而pc-IL-1α可提高这些炎症因子,并减弱miR-24 mimic对炎症反应的抑制作用。结论 miR-24 mimic可通过靶向IL-1α及抑制NF-κB激活,减轻ALI幼龄大鼠肺组织的炎症反应。

荷泽颗粒对高脂饮食诱导的肥胖幼龄大鼠糖脂代谢的影响及机制研究

目的探究荷泽颗粒对高脂饮食诱导的肥胖幼龄大鼠糖脂代谢的影响及机制。方法取刚断乳的3周龄SD雄性大鼠通过高脂饲料喂养建立肥胖模型,随机分成模型组、荷泽颗粒低、中、高剂量组、荷泽颗粒高剂量+LY294002组,每组12只,另选12只刚断乳的3周龄SD雄性健康大鼠通过普通饲料喂养作为对照组,以荷泽颗粒不同剂量和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号抑制剂LY294002分组处理后,检测大鼠体质量、脂体比和糖脂代谢;以HE和油红O染色分别检测大鼠肝组织病理损伤及脂肪变性;以ELISA试剂盒检测大鼠血清促炎因子白细胞介素(IL)-18、环氧化酶-2(COX-2)、IL-17水平;以免疫印迹法检测大鼠肝组织PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠肝组织病理损伤及脂肪变性严重,体质量、脂体比、总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)水平、空腹血糖、血清IL-18及COX-2、IL-17水平显著升高(P<0.05),肝组织p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,荷泽颗粒低、中、高剂量组大鼠肝组织病理损伤及脂肪变性均减轻,体质量、脂体比、TC及TG、LDL水平、空腹血糖、血清IL-18及COX-2、IL-17水平均降低(P<0.05),肝组织p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平均升高(P<0.05),且呈剂量依赖性;与荷泽颗粒高剂量组比较,荷泽颗粒高剂量+LY294002组大鼠肝组织病理损伤及脂肪变性加重,体质量、脂体比、TC及TG、LDL水平、空腹血糖、血清IL-18及COX-2、IL-17水平升高(P<0.05),肝组织p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平降低(P<0.05)。结论荷泽颗粒可能通过激活PI3K/AKT信号通路而抑制炎症反应,从而改善高脂饮食诱导的大鼠糖脂代谢,降低其血糖血脂水平,缓解其肥胖症状。