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RACE法分离团头鲂生长抑素全长cDNA及其序列测定 被引量:20
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作者 俞菊华 夏德全 +3 位作者 杨弘 贺艳辉 陈勇军 吴婷婷 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期533-539,共7页
生长抑素具有抑制脑垂体GH释放的作用,是调控鱼类生长的主要激素之一。本研究采用RT和RACE(rapid amplification of cDNA ends)法,分离和测定了团头鲂脑中生长抑素PSSI cDNA的全长核苷酸序列,并对该基因进行了结构和系统进化分析。3’R... 生长抑素具有抑制脑垂体GH释放的作用,是调控鱼类生长的主要激素之一。本研究采用RT和RACE(rapid amplification of cDNA ends)法,分离和测定了团头鲂脑中生长抑素PSSI cDNA的全长核苷酸序列,并对该基因进行了结构和系统进化分析。3’RACE扩增得到700bp左右的片段,5’RACE分离得到500bp左右的片段,把3’片段与5’片段拼接得到全长cDNA。cDNA全长735bp[不含poly(A)],5’端非翻译区有100nt,3’端290bP[不包含poly(A)],阅读框(open reading frame,ORF)345bp。该序列与金鱼PSSI cDNA序列同源性为90%,主要差异在5’端非翻译区。团头鲂生长抑素mRNA阅读框编码114个氨基酸,包括一些酶切位点,产生26个氨基酸的大分子态生长抑素,进一步加工成与人等结构相似的14个氨基酸的生长抑素;团头鲂生长抑素前体氨基酸序列与金鱼、虹鳟、鲶鱼、鮟鱇、蛙、牛、鼠、鸡、猴、人等的比较发现,它与金鱼的同源性最高达95%,与鮟鱇最低50%,与人68%。这说明生长抑素基因在长期的进化中相当保守,同时,也因为鱼类生活环境多样导致基因变异较大。 展开更多
关键词 RACE法 分离鉴定 团头鲂 生长抑素 CDNA 序列测定
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魁蚶线粒体16S rRNA和COI基因片段序列测定及其应用前景 被引量:22
2
作者 孔晓瑜 姜艳艳 +2 位作者 相建海 喻子牛 刘亚军 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第12期46-48,共3页
Mitochondrial gene(16S rRNA and COI) fragments of Bloody clam Scapharca broughtonii were amplified via PCR, the PCR products were ligated into T vectors, cloned and sequenced. 823 bp and 703 bp nucleotide sequences of... Mitochondrial gene(16S rRNA and COI) fragments of Bloody clam Scapharca broughtonii were amplified via PCR, the PCR products were ligated into T vectors, cloned and sequenced. 823 bp and 703 bp nucleotide sequences of partial 16S rRNA gene and partial COI gene were obtained respectively. The contents of A, T, G and C were 24.79%,23.57%,29.16% and 22.48% in 16S rDNA; 22.05%,33.85%,23.33% and 20.77% in COI. The potential uses of these two sequences were discussed for genetic variation, differentiation and relevant research of different geographic populations in the species. 展开更多
关键词 魁蚶 16SrDNA COI 序列测定 线粒体 基因片段 蚶科贝类
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鹅源新城疫病毒ZJ1株全基因组的序列测定 被引量:25
3
作者 黄勇 万洪全 +2 位作者 刘红旗 吴艳涛 刘秀梵 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期348-354,共7页
依据GenBank上公布的新城疫病毒(NDV)的基因序列,自行设计了9对引物,运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获取覆盖NDV鹅源毒株ZJ1株全基因组的部分重叠片段。病毒RNA的5′及3′端的序列由cDNA末端快速扩增技术(RACE)获取。整个病毒基因组... 依据GenBank上公布的新城疫病毒(NDV)的基因序列,自行设计了9对引物,运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获取覆盖NDV鹅源毒株ZJ1株全基因组的部分重叠片段。病毒RNA的5′及3′端的序列由cDNA末端快速扩增技术(RACE)获取。整个病毒基因组序列由15192个碱基组成,比GenBank上公布的其它4个NDV毒株BeaudetteC、B1、Lasota及Clone-30的全基因组序列长6个核苷酸。这6个核苷酸位于核衣壳蛋白(NP)基因内,相对于NDV毒株Lasota株全基因序列的1647nt~1648nt位。其它10个NDV毒株中的9个毒株也被验证具有此特征,且它们分属于3个不同的基因型。 展开更多
关键词 新城疫病毒 基因组 鹅源 序列测定
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广西壮族自治区HIV-1流行毒株的基因序列测定和亚型分析 被引量:19
4
作者 陈杰 苏玲 +6 位作者 梁绍伶 刘伟 刘小良 梁富雄 邢辉 李荣建 邵一鸣 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期240-245,共6页
使用PCR技术对14份广西HIV-1阳性感染者外周血单核细胞(PBMCs)样品进行扩增,获得HIV-1膜蛋白(env)基因的核酸片段,并对其C2-V3及邻区350-450个核苷酸序列进行了测定和分析。结果表明,14份... 使用PCR技术对14份广西HIV-1阳性感染者外周血单核细胞(PBMCs)样品进行扩增,获得HIV-1膜蛋白(env)基因的核酸片段,并对其C2-V3及邻区350-450个核苷酸序列进行了测定和分析。结果表明,14份样品中9份为泰国B(B′)亚型,5份为E亚型毒株。其中B′亚型毒株的基因离散率为4.2%,与A-E参考亚型及部分B亚型代表株序列相比较,与包括泰国、缅甸及云南德宏在内的B亚型毒株序列十分接近,相互之间基因离散率在3.0%-4.4%的范围内;而E亚型毒株的基因离散率为2.1%,与国际E亚型毒株的基因离散率最近,为5.6%,与其它国际参考亚型基因离散率很远,在21.1%-27.3%。根据以上数据及其它资料提示,广西存在B′和E两种亚型的HIV-1的流行,且其B′亚型毒株的传入,与流行在云南德宏州的相同亚型HIV-1毒株密切相关。 展开更多
关键词 HIV-1 亚型 基因变异 序列测定
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太平洋牡蛎核糖体DNA转录间隔子和线粒体基因片段序列测定(英文) 被引量:21
5
作者 孔晓瑜 张留所 +2 位作者 喻子牛 刘亚军 王清印 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期304-308,共5页
以相应引物经PCR扩增了太平洋牡蛎 (Crassostreagigas)的核糖体转录间区域 (ITS 1和ITS 2 )及线粒体 16SrDNA和COI基因片段。PCR产物经T 载体连接后进行克隆和测序 ,分别得到长度为 5 4 3、791、5 30和 70 0bp的核苷酸序列。 4个DNA片段... 以相应引物经PCR扩增了太平洋牡蛎 (Crassostreagigas)的核糖体转录间区域 (ITS 1和ITS 2 )及线粒体 16SrDNA和COI基因片段。PCR产物经T 载体连接后进行克隆和测序 ,分别得到长度为 5 4 3、791、5 30和 70 0bp的核苷酸序列。 4个DNA片段的A、T、G和C碱基含量分别为 2 3.5 7%、2 0 .0 7%、2 9.4 7%和 2 6 .89% (ITS 1) ,2 7.4 3%、19.2 2 %、2 7.0 5 %和2 6 .30 % (ITS 2 ) ,2 9.2 5 %、2 9.2 5 %、2 3.0 2 %和 18.4 9% (16SrDNA) ,2 2 .71%、39.4 3%、2 0 .4 3%和 17.4 3% (COI)。实验证明ITS 1和ITS 2引物在贝类中通用性良好。文中同时讨论了 展开更多
关键词 太平洋牡蛎 核糖体 DNA转录 间隔子 线粒体 基因片段 序列测定
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狂犬病毒疫苗株CTN-1八代次N和G基因序列测定及分析 被引量:15
6
作者 孟胜利 徐葛林 +4 位作者 明平刚 孙文 吴杰 杨晓明 严家新 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期327-332,335,共7页
目的测定八个代次CTN-1疫苗株核蛋白(N)和糖蛋白(G)基因序列,并与代表性疫苗株和街毒株进行比较。方法用RT-PCR反应扩增八代次CTN-1的N和G基因,获得cDNA,进行序列测定。结果八个代次CTN-1的N和G基因序列与其它疫苗株比较,核苷... 目的测定八个代次CTN-1疫苗株核蛋白(N)和糖蛋白(G)基因序列,并与代表性疫苗株和街毒株进行比较。方法用RT-PCR反应扩增八代次CTN-1的N和G基因,获得cDNA,进行序列测定。结果八个代次CTN-1的N和G基因序列与其它疫苗株比较,核苷酸的同源性分别为82.7%~84.5%和86.6%~88.5%,氨基酸同源性分别为88.9%~92.5%和95.3%~98.2%;与在我国分离的街毒株相比,核苷酸的同源性分别为84.2%~95.0%和80.4%~94.3%,氨基酸同源性分别为92.1%~99.6%和88.7%~98.5%。CTN-1株八个代次之间的核苷酸序列几乎完全相同。结论CTN-1株在传代过程中N和G基因变异小,与中国流行的代表性街毒株的同源性高于其它疫苗株。 展开更多
关键词 狂犬病毒 传代 CTN-1 序列测定
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编码鸡IL-18成熟蛋白基因的分子克隆与序列测定 被引量:23
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作者 潘蔚绮 刘胜旺 +2 位作者 孔宪刚 李广兴 夏春 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期114-117,共4页
白细胞介素 18(IL_18)是一种能诱导IFN_γ产生的新型细胞因子 ,在调节Th1型细胞免疫应答中起重要作用。本研究根据已发表的鸡白介素 18(IL_18)cDNA基因序列设计引物 ,用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)技术从有丝分裂原ConA刺激 4 8小时... 白细胞介素 18(IL_18)是一种能诱导IFN_γ产生的新型细胞因子 ,在调节Th1型细胞免疫应答中起重要作用。本研究根据已发表的鸡白介素 18(IL_18)cDNA基因序列设计引物 ,用反转录_聚合酶链反应 (RT_PCR)技术从有丝分裂原ConA刺激 4 8小时活化的白来航鸡脾细胞中扩增出编码鸡IL_18成熟蛋白质的基因 ,并进行序列测定 ,并与结果进行了比较 ,发现本研究克隆到的鸡IL_18成熟蛋白编码基因序列在 4 82位为C ,而Schnieder等报道的序列为T ,这一核苷酸序列的变化导致了推导的对应氨基酸残基由苯丙氨酸变为丝氨酸。该处碱基变化的原因究竟是鸡IL_18本身存在多态性 ,还是反转录或PCR过程中的碱基错配所致 ,该处碱基的变化对于鸡IL_18蛋白的表达及其生物活性究竟有无影响等问题正在研究中。该基因为国内首次报道经序列测定证实的鸡IL_18基因 。 展开更多
关键词 鸡IL-18成熟蛋白基因 克隆 序列测定 白细胞介素8
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H9N2亚型禽流感病毒基因组全长序列测定和各基因的遗传分析 被引量:21
8
作者 卢建红 刘秀梵 +2 位作者 邵卫星 张评浒 韦栋平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期434-441,共8页
用RT PCR技术及cDNA末端快速扩增法获得禽流感病毒分离株A Chicken Shanghai F 98(H9N2 )代表基因组全长的 8个基因片段。基因组序列比较及遗传进化分析结果表明 ,Chicken Shanghai F 98的 8个基因均不属于Quail HongKong G1 97亚系 ,... 用RT PCR技术及cDNA末端快速扩增法获得禽流感病毒分离株A Chicken Shanghai F 98(H9N2 )代表基因组全长的 8个基因片段。基因组序列比较及遗传进化分析结果表明 ,Chicken Shanghai F 98的 8个基因均不属于Quail HongKong G1 97亚系 ,与香港禽流感事件没有直接关系。它与Chicken Beijing 1 94的HA、NA、M、NS基因同源率分别为 96 7%、96 4%、97 5 %和 98 0 % ,这 4个基因属于Chicken Beijing 1 94亚系 ,其中 ,NA基因与Duck HongKong Y2 80 97的同源率为 97 4% ,而且它们均在 2 0 5位后缺失 9个核苷酸。而PB2、PB1、PA和NP基因与已知的 3个亚系关系较远 ,分别在相应的进化树上另成分支。因此 ,Chicken Shanghai F 98是两个以上不同基因亚系间发生自然重排的产物。 展开更多
关键词 H9N2亚型禽流感病毒 基因组 序列测定 遗传分析
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蓖麻蚕线粒体cox2基因的克隆、序列测定和分子系统学分析 被引量:15
9
作者 陈复生 魏兆军 +2 位作者 李庆宝 鲍先巡 汪泰初 《蚕业科学》 CAS CSCD 2004年第1期38-43,共6页
利用兼并性引物克隆出蓖麻蚕线粒体cox2基因、tRNA Leu基因和cox1基因的部分片段。cox2基因编码框包含 6 85个核苷酸 ,编码 2 2 8个氨基酸的蛋白质 ;起始密码子为ATG ,终止密码子仅有 1个T组成 ;蓖麻蚕mtDNA的cox2基因中富含AT ,含量为 ... 利用兼并性引物克隆出蓖麻蚕线粒体cox2基因、tRNA Leu基因和cox1基因的部分片段。cox2基因编码框包含 6 85个核苷酸 ,编码 2 2 8个氨基酸的蛋白质 ;起始密码子为ATG ,终止密码子仅有 1个T组成 ;蓖麻蚕mtDNA的cox2基因中富含AT ,含量为 75 77% ,GC的含量为 2 4 2 3%。通过同源性比较 ,发现蓖麻蚕的cox2与柞蚕cox2同源性最高 ,核苷酸和氨基酸序列同源性分别是 89 0 %和 96 0 %。根据cox2氨基酸序列进行了 12种昆虫的分子系统学分析探讨。 展开更多
关键词 蓖麻蚕 线粒体 cox2基因 克隆 序列测定 聚类分析
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中国柯萨奇病毒A组16型部分VP1区序列测定及系统进化分析 被引量:19
10
作者 卫灿东 李琳琳 +3 位作者 何雅晴 徐星晔 薛颖 金奇 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期223-227,共5页
利用1999~2004年连续6年从中国深圳及北京地区分离的柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,Cox.A16)毒株的部分VP1区基因序列进行分析和研究,试图找出中国Cox.A16的种系进化规律和分型依据.6株Cox.A16病毒部分VP1区核苷酸和氨基酸同... 利用1999~2004年连续6年从中国深圳及北京地区分离的柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,Cox.A16)毒株的部分VP1区基因序列进行分析和研究,试图找出中国Cox.A16的种系进化规律和分型依据.6株Cox.A16病毒部分VP1区核苷酸和氨基酸同源性均较高,相互间核苷酸同源性为94.5%~98.0%,氨基酸同源性为97.8%~100%.6株中国分离株与Cox.A16国际参考株相比,部分VP1区核苷酸同源性高于78.2%,氨基酸同源性高于为93.3%.基因系统进化分析表明,中国大陆分离的6株Cox.A16与中国台湾流行株Tainan-5079-98(AF177911),与4株日本分离株、瑞典株及美国株GA95-2095(AF081613)、PA94-5753(AF081628)的关系均较近,核苷酸同源性大于93.3%.了解我国Cox.A16流行株的遗传学背景和种系进化关系,对有效地预防和控制Cox.A16流行有重要意义. 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组16型 手足口病 系统进化分析 VP1区 序列测定 中国分离株 儿童
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我国棉花枯萎菌生理小种特异性DNA扩增片段的筛选及序列测定 被引量:20
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作者 冯洁 孙文姬 +1 位作者 石磊岩 马存 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期35-41,共7页
利用 RAPD技术 ,以随机引物对我国棉花枯萎菌的 3个生理小种 (3、7、8号小种 )共 2 6个菌株进行 PCR扩增 ,从产生的 140个 RAPD分子标记中寻找到了不同小种的特征性条带 ,OPF- 10 513 (3号小种 )、OPF- 0 83 71(7号小种 )及 OPF- 12 70 ... 利用 RAPD技术 ,以随机引物对我国棉花枯萎菌的 3个生理小种 (3、7、8号小种 )共 2 6个菌株进行 PCR扩增 ,从产生的 140个 RAPD分子标记中寻找到了不同小种的特征性条带 ,OPF- 10 513 (3号小种 )、OPF- 0 83 71(7号小种 )及 OPF- 12 70 3 (8号小种 )。将其纯化后克隆到 p GEM- T Easy质粒载体上 ,并获得了 DNA特异性片段的核酸序列。 展开更多
关键词 棉花 枯萎菌 特异性DNA片段 序列测定 生理小种
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烟夜蛾滞育激素的cDNA克隆和序列测定 被引量:13
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作者 汤清波 杨效文 +3 位作者 安世恒 纠敏 郭线茹 马继盛 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2001年第4期303-307,共5页
运用RT -PCR法克隆了烟夜蛾 (HelicoverpaassultaGuen啨e)滞育激素的cDNA ,并对其进行了序列分析 .结果表明 ,烟夜蛾滞育激素由 2 4个氨基酸组成 ,属于FXPRL神经肽家族 ,与家蚕 (BombyxmoriLinnaeus)、棉铃虫 (HelicoverpaarmigeraH櫣... 运用RT -PCR法克隆了烟夜蛾 (HelicoverpaassultaGuen啨e)滞育激素的cDNA ,并对其进行了序列分析 .结果表明 ,烟夜蛾滞育激素由 2 4个氨基酸组成 ,属于FXPRL神经肽家族 ,与家蚕 (BombyxmoriLinnaeus)、棉铃虫 (HelicoverpaarmigeraH櫣bner)滞育激素氨基酸序列相比较 ,其同源性分别为 6 2 %和 99% . 展开更多
关键词 烟液蛾 滞育激素 CDNA 克隆 滞育 序列测定
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新疆乌鲁木齐HIV-1流行毒株膜蛋白基因C2-V3区序列测定和亚型分析 被引量:14
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作者 白旭华 管永军 +8 位作者 张远志 邵一鸣 王冬莉 苏玲 刘小良 赵全壁 杜大卫 JosefKostler HansWolf 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期339-344,共6页
应用PCR方法对7份1996年3-5月采集于新疆乌鲁木齐HIV-1阳性静脉吸毒者的外周血单核细胞(PBMCs)样品进行扩增,获得了HIV-1膜蛋白(env)基因的核酸片段,并对其C2-V3区及邻区350-450个核苷... 应用PCR方法对7份1996年3-5月采集于新疆乌鲁木齐HIV-1阳性静脉吸毒者的外周血单核细胞(PBMCs)样品进行扩增,获得了HIV-1膜蛋白(env)基因的核酸片段,并对其C2-V3区及邻区350-450个核苷酸序列进行了测定和分析。研究结果表明,7份样品都为C亚型的HIV-1毒株序列,其组内的基因离散率为1.0%;与A-E参考亚型及部分C亚型代表株序列相比较,这7个毒株与代表印度C亚型毒株及云南德宏州C亚型毒株的序列十分相似,其组间的基因离散率均为3.5%,与非洲C亚型毒株nof的基因离散率为14.0%。根据以上数据及其它资料提示,HIV-1在新疆乌鲁木齐的流行时间不长,且其毒株的传入与流行在云南德宏州的相同亚型HIV-1毒株密切相关。 展开更多
关键词 亚型分析 序列测定 艾滋病毒-1 毒株 膜蛋白基因
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西瓜花叶病毒中国分离株全基因组核苷酸序列测定 被引量:15
14
作者 张建新 吴云锋 +1 位作者 王睿 罗朝鹏 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期153-156,共4页
Watermelon and melon mosaic disease is the important disease in agricultural production,mostly caused by watermelon mosaic virus.In this paper,the complete nucleotide sequence of watermelon mosaic virus Chinese isolat... Watermelon and melon mosaic disease is the important disease in agricultural production,mostly caused by watermelon mosaic virus.In this paper,the complete nucleotide sequence of watermelon mosaic virus Chinese isolate(WMV-Ch)was firstly determined.Excluding the 3’-terminal poly(A)tail,the genome was 10037 nt long,containing 5’-and 3’-terminal untranslated regions and a large open reading frame.The genome encoded a polyprotein of 3217 amino acids with a predicted Mr of 365.8 kD.Based on comparison with the proposed location of cleavage sites of other potyvirus polyproteins,10 mature proteins were predicted.There were 92.5% nucleotide and 96.4% amino acid identities over entire genome between WMV-Ch and France isolate(WMV-Fr),respectively.The nucleotide identity of the coat protein genes among WMV-Ch and WMV from different countries was all less than 95%,and phylogenetic tree revealed that WMV-Ch was most close to Japanese isolate. 展开更多
关键词 西瓜花叶病毒 全基因组 序列测定 结构分析
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猪生殖-呼吸道综合征病毒CH-1a株ORF2~7序列测定 被引量:10
15
作者 仇华吉 童光志 +5 位作者 周彦君 郭宝清 张绍杰 王柳 蔡雪晖 刘宝全 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第2期156-158,共3页
新近发现的猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)是单股RNA病毒,属于不久前成立的动脉炎病毒科。为了比较从国内分离的PRRSV与欧美PRRSV毒株的分子遗传学关系,本文扩增并克隆了PRRSVCH-1a株ORF2~7,... 新近发现的猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)是单股RNA病毒,属于不久前成立的动脉炎病毒科。为了比较从国内分离的PRRSV与欧美PRRSV毒株的分子遗传学关系,本文扩增并克隆了PRRSVCH-1a株ORF2~7,测定了其核苷酸序列。用序列分析软件进行核苷酸和氨基酸序列比较分析,结果表明CH-1a株与欧洲型代表株LV的遗传关系较远,与北美洲型代表株VR-2332遗传距离最近,可能来自同一祖先。 展开更多
关键词 ORF2~7 序列测定 PRRSV
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中国历年H_3N_2亚型人流行性感冒病毒血凝素基因的序列测定及分析 被引量:13
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作者 王勇 陈淑霞 +3 位作者 薛颖 董杰 金奇 侯云德 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期118-125,共8页
测定了 2 7株中国 196 8~ 2 0 0 0年的人H3 N2 亚型流行性感冒 (流感 )病毒分离株HA1基因的核苷酸全序列 ,其中包括 7株流行代表株 :A3/Beijing/ 1/ 6 8、A3/Guangdong/ 2 4 3/ 72、A3/Beijing/ 39/ 75、A3/Guangdong/ 38/ 77、A3/Beij... 测定了 2 7株中国 196 8~ 2 0 0 0年的人H3 N2 亚型流行性感冒 (流感 )病毒分离株HA1基因的核苷酸全序列 ,其中包括 7株流行代表株 :A3/Beijing/ 1/ 6 8、A3/Guangdong/ 2 4 3/ 72、A3/Beijing/ 39/ 75、A3/Guangdong/ 38/ 77、A3/Beijing/ 2 6 6 / 85、A3/Beijing/ 30 / 95、A3/Shanghai/ 1/ 98。阐明了这些流感病毒分离株的基因结构、变异本质、进化发展过程以及这些毒株与其它分离株之间的遗传进化亲缘关系 ,为应用生物信息学研究流感病毒基因组变异规律等打下了基础。初步的进化分析表明 ,历年来的人流感病毒H3 N2 亚型的起源和进化分为两个分支谱系 ,并在 1984 /1985年进行了交替转换 ;且有一部分人的H3 N2 展开更多
关键词 中国 H3N2亚型 人流行性感冒病毒 血凝素基因 序列测定 基因序列 HA1基因
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椰毒假单胞菌酵米面亚种16S rDNA序列测定与分析 被引量:15
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作者 焦振泉 刘秀梅 +1 位作者 杨瑞馥 孟昭赫 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期232-235,共4页
本文对3种不同来源样品的4株椰酵假单胞菌的16SrDNA的序列进行了测定,以确定其系统发育位置及与其它菌种的遗传进化关系。实验中设计了7条引物,利用聚合酶链式反应(PolymaseChainRe-action,PCR... 本文对3种不同来源样品的4株椰酵假单胞菌的16SrDNA的序列进行了测定,以确定其系统发育位置及与其它菌种的遗传进化关系。实验中设计了7条引物,利用聚合酶链式反应(PolymaseChainRe-action,PCR)扩增4株细菌的16SrDNA,通过扩增产物的克隆测序或直接测序,获得了它们的16SrDNA序列,将测得的序列与伯克霍尔德氏菌属中其它菌种的16SrDNA序列进行了聚类分析,得到了系统发育进化树状图。树状图及不同菌种之间的同源性比值:椰酵假单胞菌(P.cocovenenanssubsp.farinofermentans)与唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderiagladioli)、椰毒伯克霍尔德氏菌(Burkholderiacocovenenans)的亲缘关系非常近,与其它菌种的亲缘关系相对较远,椰酵假单胞菌、唐菖蒲伯克霍尔德氏菌和椰毒伯克霍尔德氏菌可归属于一个独立的系统发育系。 展开更多
关键词 椰酵假单胞菌 16SRDNA序列 食物中毒 序列测定
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我国蚊虫体内感染的Wolbachia的wsp基因序列测定与分析 被引量:11
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作者 宋社吾 赵彤言 +2 位作者 董言德 蒋书楠 陆宝麟 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期571-577,共7页
测定了我国尖音库蚊复合组和白纹伊蚊蚊虫体内感染的Wolbachia株的wsp基因序列。核苷酸和氨基酸的同源性及系统关系分析表明 ,我国尖音库蚊复合组和白纹伊蚊中Wolbachia株的wsp基因序列与Pip组其它株的核苷酸及氨基酸同源性分别为 98%~... 测定了我国尖音库蚊复合组和白纹伊蚊蚊虫体内感染的Wolbachia株的wsp基因序列。核苷酸和氨基酸的同源性及系统关系分析表明 ,我国尖音库蚊复合组和白纹伊蚊中Wolbachia株的wsp基因序列与Pip组其它株的核苷酸及氨基酸同源性分别为 98%~ 10 0 %和 97%~ 10 0 % ,属B大组Wolbachia中的Pip组。 展开更多
关键词 蚊虫 体内感染 WOLBACHIA 基因序列测定 尖音库蚊复合组 白纹伊蚊 昆虫共生微物
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PRVLA株gD基因的序列测定及其重复高变区的发现 被引量:10
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作者 范伟兴 魏荣 +2 位作者 张雪莲 陈溥言 赵宏坤 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期350-352,共3页
对猪伪狂犬病病毒鲁 A株 (PRV L A株 ) g D基因进行了克隆和序列测定 ,结果表明 :在测序的 14 5 3bp的 DNA序列中包括着 1个 12 0 3bp的 ORF(即 g D基因 ) ,它编码 4 0 0个氨基酸组成的多肽 ;在整个 g D基因的 ORF内 PRVL A株与 PRV Ea... 对猪伪狂犬病病毒鲁 A株 (PRV L A株 ) g D基因进行了克隆和序列测定 ,结果表明 :在测序的 14 5 3bp的 DNA序列中包括着 1个 12 0 3bp的 ORF(即 g D基因 ) ,它编码 4 0 0个氨基酸组成的多肽 ;在整个 g D基因的 ORF内 PRVL A株与 PRV Ea株、Hubei株、Rice株、NIA- 3株、Kaplan株的 g D基因比较 ,核苷酸的同源性分别为 98.3%、98.3%、98.0 %、98.1%、98.6 % ,氨基酸的同源性分别为 97.8%、97.8%、97.5 %、98.1%、98.6 % ;发现 PRV L A株 g D基因与Ea株、Hubei株、Rice株、NIA- 3株、Kaplan株的 g D基因均在 80 2~ 837nt处有 1个 C(A) GGCCC的重复高变区 ,其对应的是 g D2 6 7~ 2 79位氨基酸残基 Arg- Pro的重复高变区。正是该重复高变区的碱基缺失或插入使得 PRV g D的ORF在 1194~ 12 15 nt间变化 ,g D前体的氨基酸残基为 398~ 4 0 4个。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 PRV LA株 GD基因 序列测定 重复高变区 伪狂犬病 同源性
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鸡白细胞介素18成熟蛋白全长基因的克隆与序列测定 被引量:8
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作者 胡敬东 崔治中 +2 位作者 范伟兴 刘文强 赵宏坤 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期119-121,共3页
根据已发表的鸡白细胞介素 18(IL- 18)成熟蛋白的 c DNA序列 ,设计 1对特异性引物 ,应用 RT- PCR从脂多糖(L PS)刺激 10 h活化的 MDCC- MSB1细胞中克隆到编码鸡 IL - 18成熟活性蛋白的完整基因片段 ,其大小为 5 10 bp。经序列测定证实 ... 根据已发表的鸡白细胞介素 18(IL- 18)成熟蛋白的 c DNA序列 ,设计 1对特异性引物 ,应用 RT- PCR从脂多糖(L PS)刺激 10 h活化的 MDCC- MSB1细胞中克隆到编码鸡 IL - 18成熟活性蛋白的完整基因片段 ,其大小为 5 10 bp。经序列测定证实 ,所获得的 c DNA基因序列与文献报道的结果完全一致 ,从而为进一步研究鸡 IL- 18的基因表达、生物学活性以及应用奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡白细胞介素18 基因 克隆 序列测定
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