白花败酱草中异牡荆苷和异荭草苷的高速逆流色谱分离和制备

应用高速逆流色谱分离制备白花败酱草中的异荭草苷和异牡荆苷,以乙酸乙酯∶乙醇∶水(4∶1∶5)为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速2.0 mL/m in,主机800 r/m in,检测波长254 nm。以此分离条件经一步洗脱,从300 mg白花败酱草粗提物中制备得到异荭草苷24.1 mg和异牡荆苷49.8 mg,产物纯度经HPLC检测高达98.0%,结构经UV、IR、MS1、H NMR和13C NMR鉴定,二者均为首次从败酱属植物中分离得到。

HPLC测定不同来源竹叶中荭草苷、异荭草苷和异牡荆苷的含量

目的 :测定不同来源竹叶中荭草苷、异荭草苷和异牡荆苷的含量。方法 :用HPLC法测定 ,以MeOH H2 O HAc(35∶6 5∶1)为流动相 ,340nm为检测波长。结果 :不同来源最高含量为 0 .89% ,最低含量为 0 .0 7%。结论 :该法简单、快速、准确。

菥蓂药材中异牡荆苷的分离鉴定及指纹图谱研究

采用高效半制备液相色谱法分离,并以13C谱法(13C-NMR)、1H谱法(1H-NMR)、质谱法(Ms)、紫外光谱法(UV)确定结构;采用HPLC梯度洗脱进行色谱分离,对不同产地的11批菥蓂药材指纹图谱的相似度进行比较分析。结果表明,分离得到异牡荆苷纯度>98%(面积归一化法);各批药材共建立了17个共有峰,不同产地的菥蓂药材指纹图谱相似度良好。说明高效半制备液相色谱法制备异牡荆素方法简单、高效,指纹图谱分析方法稳定性、精密度、重现性较好,用于菥蓂的质量评价切实可行。

HPLC法测定木豆中牡荆苷和异牡荆苷含量

建立了测定木豆叶、茎、根中牡荆苷和异牡荆苷含量的高效液相色谱分析方法。色谱柱为HIQ Sil C18V(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水-甲酸(体积比35∶64.74∶0.26);检测波长330nm;流速1mL/min;进样量10μL;柱温30℃。在2～200mg/L牡荆苷、异牡荆苷质量浓度与色谱峰面积线性关系良好;牡荆苷峰面积精密度的相对标准偏差(RSD)最大为2.93%,重复性RSD为2.91%,加样回收率为97.38%;异牡荆苷峰面积精密度的RSD最大为2.69%,重复性RSD为3.37%,加样回收率为98.63%。木豆叶、茎、根中牡荆苷、异牡荆苷的质量分数分别为0.768、0.066、0.183mg/g和0.799、0.139、0.013mg/g。叶中牡荆苷和异牡荆苷含量明显高于茎、根中的含量,可以作为大规模获得牡荆苷、异牡荆苷的资源。

HPLC法测定不同采收期小叶榕叶中异牡荆苷的含量

目的建立小叶榕叶中异牡荆苷的含量测定方法，并比较不同采收期小叶榕叶的异牡荆苷的含量差异。方法用HPLC法进行测定，流动相为甲醇-水（38：62），检测波长为270nm。结果不同采收期药材异牡荆苷最高含量达0．69％，最低为0．18％，7～12月份含量明显高于其他月份。结论该方法简便，准确，重复性好，适于小叶榕叶中异牡荆苷的含量测定。

脂肪酶催化竹叶抗氧化物中异荭草苷和异牡荆苷酰化

研究南极假丝酵母脂肪酶在叔戊醇中催化竹叶抗氧化物中异荭草苷和异牡荆苷的酰化。反应条件为脂肪酶用量50g/L、分子筛4用量100g/L、竹叶抗氧化物中黄酮苷与月桂酸的物质的量比1:4、反应温度60℃、搅拌转速150r/min、反应时间48h。经过高效液相色谱分析,制备液相分离,得到2种被酰化的黄酮苷。对产物的结构采用电喷雾电离质谱分析,1H-NMR及13C-NMR表征,确定产物分别为异荭草苷-6″-月桂酸酯和异牡荆苷-6″-月桂酸酯。

檀香叶中牡荆苷与异牡荆苷的含量测定

目的建立同时测定檀香叶中牡荆苷与异牡荆苷含量测定方法，为其资源利用等提供依据。方法采用Agilent TC—C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相为甲醇-0．5％冰醋酸溶液（40：60），检测波长为338nm，柱温为30℃，流速为1mL·min^-1。结果牡荆苷的线性范围为7．625～488．0μg·mL^-1；高、中、低剂量回收率分别为96．38％、97.23％、97．96％，RSD为1．29％～1．83％。异牡荆苷的线性范围为8．047～515．01μg·mL^-1，高、中、低剂量回收率分别为97．81％、96．13％、97．98％，RSD为1．31％～1．81％。三批样品中牡荆苷与异牡荆苷的含量为1．13％～1．25％和1．20％～1．46％。结论檀香叶中牡荆苷与异牡荆苷含量较高，所建立的含量测定方法简便、准确，可用于檀香叶的质量控制。

HPLC法测定导赤冲剂中异牡荆苷和异荭草苷的含量

目的建立导赤冲剂中异牡荆苷和异荭草苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为迪马C18柱,流动相为四氢呋喃-乙腈-0.2%磷酸水溶液(66∶22∶12),流速为1.0mL.min-1,柱温为35℃,检测波长为330nm。结果异荭草苷在0.82～4.08μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9990),平均加样回收率为98.4%,RSD为2.7%;异牡荆苷在0.79～3.96μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为98.8%,RSD为2.6%。结论建立的含量测定方法简便、准确、灵敏,可用于导赤冲剂中异牡荆苷和异荭草苷的含量测定。

UPLC法测定绿豆中牡荆苷与异牡荆苷含量

建立了同时测定绿豆中牡荆苷与异牡荆苷含量方法:采用美国Waters ACQUITY UPLC系统,ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱;流动相:甲醇-0.5%冰醋酸溶液(20∶80);检测波长:338 nm;柱温:30℃;流速:1 mL/min;进样量:1μL。结果表明:该含量测定方法的精密度、稳定性、重复性、准确度良好,牡荆苷在0.685～6.85μg/mL,异牡荆苷在0.645～6.45μg/mL线性关系良好。三批样品中牡荆苷与异牡荆苷的平均含量为0.0467%和0.0555%。赤豆及黑豆中未检测到牡荆苷与异牡荆苷。所建立的含量测定方法快速、简便、准确,为绿豆解毒功效的物质基础研究提供质量控制方法。

HPLC测定撑篙竹竹叶中异牡荆苷的含量

建立HPLC测定撑篙竹竹叶中异牡荆苷的含量。采用反相高效液相色谱法,色谱柱:Z0RBAX SB-C18(2.1 mm×100 mm,3.6μm),甲醇(A)-0.1%冰醋酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0 min^3 min,85%~70%B;3 min^6 min,70%~55%B;6 min^9 min,55%~35%B;9 min^12 min,35%~35%B;12 min^15 min,35%~70%B;15 min^18 min,70%~85%B),流速0.6 mL/min,检测波长340 nm,柱温30℃。异牡荆苷在1.733 1μg/mL^10.832 0μg/mL呈良好的线性关系(r=0.999 6),平均回收率为98.01%,RSD1.02%,试验测得异牡荆苷的含量为2.928 5 mg/g。

UPLC测定中药材中牡荆苷和异牡荆苷的含量

目的:建立同时测定几种药材中牡荆苷和异牡荆苷含量的方法。方法:采用超高效液相色谱(ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)法,以ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm×50mm,1.7μm),甲醇-乙腈-0.2%乙酸水为流动相,流速0.3mL·min-1,梯度洗脱,检测波长340nm,柱温35℃,检测时间7min。检测含羞草、小叶榕、布渣叶、蒲葵、软叶刺葵、淡竹叶、木豆叶和白花败酱草等8种中药材中牡荆苷和异牡荆苷的含量。结果:所建立的测定方法符合液相色谱法要求;牡荆苷、异牡荆苷均在5～250ng(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.40%、98.35%(n=9),RSD分别为0.43%、0.45%。结论:该法快速简便、准确、分离效果好,能同时快速测定这8种药材中牡荆苷和异牡荆苷含量。

高效液相色谱法同时测定护肝片中牡荆苷和异牡荆苷的含量

目的建立同时测定护肝片中牡荆苷和异牡荆苷含量的方法,并比较不同厂家护肝片中这两种成分含量的差异。方法以牡荆素和异牡荆素为指标,采用Prevail C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水(20∶80)为流动相,柱温30℃,检测波长337 nm,流速1 mL·min^-1,进样量15μL。结果牡荆苷和异牡荆苷分别在1.55~99.2μg·m L^-1和1.73~110.4μg·mL^-1内与峰面积线性关系良好,回归方程分别为Y=44.980X-26.175(r=0.9995)和Y=54.267X-48.826(r=0.9994),方法平均回收率分别为98.5%(RSD=0.93%)和99.0%(RSD=1.8%);所收集的30批来自16个不同厂家的护肝片每片牡荆苷和异牡荆苷的含量分别为0.011~0.222 mg和0.014~0.185 mg。结论该方法简便可行,准确可靠,重复性较好,可用于护肝片中牡荆苷及异牡荆苷的含量测定,为护肝片质量标准的完善提供参考。结果显示,不同厂家护肝片中牡荆苷和异牡荆苷含量差异较大。

不同产地白花败酱草中异荭草苷和异牡荆苷的含量测定

目的建立白花败酱草中异荭草苷和异牡荆苷含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法药材经甲醇超声提取后进行色谱分析,色谱柱为YWGC18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水-乙酸(22∶78∶1),流速1.0mL/min,检测波长270nm。结果异荭草苷和异牡荆苷分离良好,含量分别在0.012～0.037mg/mL和0.026～0.082mg/mL范围内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率分别为96.1%(RSD=0.89%)和98.1%(RSD=1.43%)。结论HPLC法简便、快速,可用于白花败酱草的质量控制。

HPLC法测定低温烘焙绿豆中牡荆苷与异牡荆苷的含量及变化

采用远红外低温烘焙的方法对原料绿豆进行熟化处理,经感官评价后得出其适宜的处理条件为烘焙温度130℃,时间180 min。通过建立的高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定方法测得原料绿豆和低温烘焙绿豆中牡荆苷与异牡荆苷的含量分别为(0.044±0.002)%、(0.033±0.000 5)%和(0.047±0.002)%、(0.036±0.001)%。试验表明:低温烘焙加工熟化后的绿豆具有良好的感官特性,牡荆苷和异牡荆苷的含量未发生明显的变化,是适宜的绿豆干燥熟化加工方法。可见,在该条件下开发的绿豆冲调食品避免了高温条件对绿豆中活性成分的破坏,对开发全营养绿豆食品具有重要的意义。

咳特灵中牡荆苷、异牡荆苷二者之和的含量不同对止咳疗效的观察

目的探讨咳特灵中牡荆苷、异牡荆苷二者之和的含量不同对止咳疗效的影响。方法选择2015年1月至2016年11月本院收治的80例以咳、痰、喘症状为主的呼吸道疾病患者,随机分为对照组和观察组,各40例。观察组采用牡荆苷+异牡荆苷含量为0.95毫克/粒的咳特灵胶囊治疗,对照组增加常规符合国家最新版药典标准咳特灵胶囊(牡荆苷+异牡荆苷含量约为0.28毫克/粒)治疗,观察两组临床疗效、不良反应情况。结果观察组总有效率(97.50%)显著高于对照组(82.50%),组间差异(P<0.05)。观察组不良反应发生率(17.50%)略低于对照组(22.50%),但无显著组间差异(P>0.05)。结论咳特灵中牡荆苷、异牡荆苷二者之和含量不同对止咳疗效影响较大,高含量有助于提高临床疗效,临床应用安全可靠。

一测双评法测定咳特灵胶囊中牡荆苷与异牡荆苷的含量

目的:建立咳特灵胶囊一测双评法,并进行方法学考察。方法:以牡荆苷为研究对象,建立牡荆苷与异牡荆苷的相对校正因子(RCF),并利用校正因子对异牡荆苷进行含量测定,实现一测双评;采用外标法测定牡荆苷与异牡荆苷的含量,比较计算值与实测值间的差异。结果:在一定线性范围内,牡荆苷与异牡荆苷的RCF为0.9,不同厂家的咳特灵胶囊中两个成分的计算值与实测值无明显差异。结论:本研究建立的一测双评法准确、可行,可为中药制剂多指标质量评价提供新思路。

RP-HPLC法同时测定布渣叶中牡荆苷和异牡荆苷的含量

目的:建立同时测定布渣叶中牡荆苷和异牡荆苷含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为SHISEIDO Capcell pak MG C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%甲酸溶液(30:70,V/V),流速为1.0ml/min,检测波长为339nm,柱温为30℃。结果:牡荆苷和异牡荆苷的进样量分别在53.40～1334.00、73.90～1847.00ng范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r均为0.9999);平均加样回收率分别为99.00%和99.37%,RSD分别为1.87%和1.77%(n均为9)。结论:本方法重复性好、操作简便、结果准确可靠,可为布渣叶的质量评价和资源利用提供试验依据。

布渣叶总黄酮中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷在家兔体内的药动学

目的:建立了家兔灌胃布渣叶总黄酮提取物后血浆中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的HPLC/MS方法,并研究其药动学。方法:家兔灌胃给于布渣叶总黄酮提取物后于不同时间点取血,采用HPLC/MS测定兔血浆中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的血药浓度,并计算药动学参数。色谱柱:Hypersil Gold C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-1%乙酸水溶液(V/V),梯度洗脱,柱温20℃,质谱检测采用ESI离子源,同时测定血浆样品中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的浓度,采用非房室模型估算药动学参数。结果:牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷均在0.2~20 mg·L^(-1)内线性关系良好(r>0.999),提取回收率、精密度和稳定性均良好。家兔口服布渣叶总黄酮提取物后牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的主要药动学参数如下:AUC0-t分别是10.13,8.92,15.12 mg·L^(-1)·h,Cmax分别是3.04,2.62,3.51 mg·L^(-1),tmax分别是0.75,0.75,1.00h,t1/2分别是2.96,3.20,3.93 h,MRT0-∞分别是5.01,5.58,6.33 h。结论:该方法可特异、准确、灵敏地同时测定家兔血浆中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的血药浓度,家兔口服布渣叶总黄酮提取物后牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷可迅速吸收入体内,其药时曲线存在双峰现象。

檀香叶中牡荆苷与异牡荆苷的提取纯化工艺优选

目的优选檀香叶中牡荆苷与异牡荆苷的提取和纯化工艺。方法以牡荆苷与异牡荆苷的提取率为指标,通过正交试验考察料液比、提取时间、乙醇体积分数、提取次数等因素的影响,优选提取工艺。通过单因素试验考察影响大孔吸附树脂的吸附率、解析率的多种因素,优选檀香叶中牡荆苷与异牡荆苷的纯化工艺。结果优选所得提取工艺为50℃恒温超声提取,料液比1∶8,提取时间为40 min,提取溶剂为60%（V∶V）乙醇,提取次数为3次。纯化工艺为AB-8大孔吸附树脂,上样液浓度为0.25 g/ml（生药量/溶剂）;洗脱顺序为：10%乙醇除杂,洗脱体积约10～12 BV（至流出液无色）,再换用30%乙醇,洗脱6 BV,洗脱速度为2 BV/h。结论提取与纯化工艺操作简便、稳定可行。

异牡荆苷作为sortase A抑制剂对小鼠金黄色葡萄球菌肺炎的保护作用

sortase A(SrtA)是一种重要的毒力决定因子,负责将多种毒力相关蛋白锚定在金黄色葡萄球菌(S.aureus)的细胞表面,在其致病过程中发挥重要作用,是开发抗金黄色葡萄球菌毒力药物的理想靶点。本研究首先通过荧光共振能量转移试验发现异牡荆苷是SrtA的可逆抑制剂;又利用细胞侵袭试验证明异牡荆苷能够显著抑制金黄色葡萄球菌对A549细胞的内化作用;最后考察了异牡荆苷对小鼠肺炎的保护作用,发现异牡荆苷能明显减轻金黄色葡萄球菌感染性肺炎小鼠肺组织的病理损伤和炎症反应,减少肺部载菌量,显著提高小鼠存活率。以上结果表明,异牡荆苷能够通过抑制毒力因子SrtA对金黄色葡萄球菌引起的小鼠肺炎起到保护作用,是一种很有前景的抗金黄色葡萄球菌毒力活性化合物,可作为开发治疗金黄色葡萄球菌感染药物的先导化合物。