微小RNA-17在糖基化终末产物刺激下人牙周膜干细胞骨向分化过程中的调控作用

目的检测微小RNA-17(mir-17)在糖基化终末产物(AGEs)刺激下人牙周膜干细胞(HPDLSCs)骨向分化过程中的表达,并分析其对该过程的影响。方法体外组织块法和有限稀释法克隆化培养HPDLSCs。实时定量聚合酶链反应(real time PCR)检测实验组细胞在骨向分化过程中不同时间点mir-17的表达;采用细胞转染技术过表达和抑制mir-17的表达,real time PCR和Western blot分别检测转染前后其成骨基因mRNA水平和蛋白水平的表达情况。结果成骨诱导3、7、14 d后,对照组和实验组mir-17的表达均下调,差异有统计学意义(P<0.05)。上调mir-17后,与对照组相比,实验组骨涎蛋白(BSP)、碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子-2(Runx-2)mRNA表达水平以及Runx-2蛋白水平均明显降低;下调mir-17后,实验组BSP、ALP、Runx-2 mRNA表达水平以及Runx-2蛋白水平均高于对照组。结论 AGEs通过影响HPDLSCs骨向分化过程中mir-17的表达从而抑制了HPDLSCs的骨向分化。

微小RNA-17在幽门螺杆菌相关胃癌组织中的表达变化及意义

目的观察微小RNA-17(miR-17)在幽门螺杆菌(Hp)相关胃癌组织中的表达变化,并探讨其临床意义。方法收集75例份胃癌组织及其配对的癌旁组织标本,其中Hp阳性48例份、Hp阴性27例份。采用实时定量PCR法检测细胞毒素相关基因A(Cag A) mRNA、miR-17表达。结果 Hp阳性胃癌组织Cag A mRNA表达为6. 061±0. 712,Hp阴性胃癌组织为1. 024±0. 235,二者比较差异有统计学意义(t=35. 593,P <0. 05); Hp阳性胃癌组织及其癌旁组织miR-17表达均明显高于Hp阴性胃癌组织及其癌旁组织(12. 785±1. 324 vs 5. 654±0. 745,8. 124±1. 105 vs 3. 124±0. 564),二者比较差异均有统计学意义(t分别为23. 739、21. 911,P均<0. 01); Hp阳性、阴性胃癌组织miR-17表达均高于癌旁组织(12. 785±1. 324 vs 8. 124±1. 105,5. 654±0. 745 vs 3. 124±0. 564),二者比较差异均有统计学意义(t分别为18. 725、14. 069,P均<0. 01);胃癌组织miR-17表达与Cag A表达呈正相关关系(r=0. 564,P <0. 01);肿瘤直径> 5 cm,临床分期Ⅲ、Ⅳ期,Borrmann分型Ⅲ、Ⅳ型以及有淋巴结转移的Hp阳性胃癌组织miR-17表达高于肿瘤直径≤5 cm,临床分期Ⅰ、Ⅱ期,Borrmann分型Ⅰ、Ⅱ型以及无淋巴结转移的Hp阳性胃癌组织(15. 226±1. 325 vs 11. 041±1. 214,14. 485±1. 412 vs 11. 571±1. 116,14. 341±1. 325 vs 11. 468±1. 241,15. 124±1. 332 vs 9. 778±1. 123),二者比较差异均有统计学意义(t分别为11. 336、7. 983、7. 748、14. 753,P均<0. 05)。miR-17高表达Hp阳性胃癌患者平均生存时间明显短于miR-17低表达Hp阳性胃癌患者(t=5. 170,P <0. 05)。结论 miR-17在Hp相关胃癌组织中的表达异常升高,且与肿瘤直径、临床分期、Borrmann分型、淋巴结转移及患者预后有关,可作为胃癌早期诊断及预后判断的候选标志物。

微小RNA-17-5p在小儿肾病综合征发病中的作用及其机制研究

目的分析微小RNA-17-5p(miR-17-5p)在小儿肾病综合征(NS)发病中的意义及其通过激活素A(ActA)/Smads通路对肾足细胞凋亡的影响。方法选取2018年3月至2019年3月收治的55例NS患儿为NS组,另选取50例同期体检的健康儿童为正常对照组,比较两组外周血miR-17-5p表达情况。培养人肾足细胞株,分别转染含miR-17-5p反义寡核苷酸重组质粒(抑制组)、含无意义随机序列的对照载体(阴性对照组),未处理的人肾足细胞为空白组。比较各组细胞凋亡情况,以及转染后细胞miR-17-5p、ActA mRNA、Smads mRNA和相关蛋白表达情况。结果NS组外周血miR-17-5p水平高于正常对照组(P<0.001)。与空白组和阴性对照组比较,抑制组细胞凋亡率、miR-17-5p相对表达量更低,ActA、Smad2、Smad3三者的mRNA及蛋白相对表达量更高(P<0.001)。结论miR-17-5p在小儿NS外周血的含量升高,低表达miR-17-5p能抑制人肾足细胞的凋亡,其机制可能与上调ActA、Smad2、Smad3三者的mRNA及蛋白表达有关。

人肺动脉平滑肌细胞中精氨酸酶Ⅱ与微小RNA-17的相互作用

背景:已有研究证实microRNA-17-92簇在肺动脉高压中发挥着重要作用,精氨酸酶Ⅱ又参与低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞的增殖,而人肺动脉平滑肌细胞中微小RNA-17与精氨酸酶Ⅱ之间的相互作用尚未见研究报道。目的:分析人肺动脉平滑肌细胞中,微小RNA-17与精氨酸酶Ⅱ的关系及其相互作用机制。方法:选用4-8代的人肺动脉平滑肌细胞,分别给予转染微小RNA-17的抑制剂、增强剂、精氨酸酶Ⅱ小干扰RNA等处理,分别在常氧(体积分数21%O2)及低氧(体积分数1%O2)条件下培养。提取RNA和微小RNA,采用实时定量PCR法检测各组平滑肌细胞中微小RNA-17和精氨酸酶ⅡmRNA的表达,提取蛋白,采用Western blot法比较各组细胞中精氨酸酶Ⅱ等蛋白水平的表达。结果与结论:低氧下人肺动脉平滑肌细胞中微小RNA-17及精氨酸酶Ⅱ的表达均明显增加,抑制微小RNA-17的表达可阻止低氧诱导的精氨酸酶Ⅱ的表达增加,微小RNA-17的过表达可使精氨酸酶Ⅱ表达上调,精氨酸酶Ⅱ基因敲除后,低氧诱导的微小RNA-17的表达受到抑制。提示人肺动脉平滑肌细胞中,精氨酸酶Ⅱ是微小RNA-17的一个新的靶基因,而且精氨酸酶Ⅱ可以反馈调节微小RNA-17的表达。

微小RNA-17-5p及RNA-21在卵巢癌患者血清中的表达及与术后复发的关系

目的探讨微小RNA(microRNA,miR)-17-5p及miR-21在卵巢癌患者血清中的表达及与术后复发的关系。方法选取2014年1月至2016年6月河北省沧州市中西医结合医院102例卵巢癌患者为研究对象,检测患者血清miR-17-5p及miR-21表达情况,分析不同临床特征患者血清miR-17-5p及miR-21水平差异;根据患者术后是否复发,将患者分为复发组(45例)和未复发组(57例),探讨血清miR-17-5p及miR-21表达情况与卵巢癌术后复发的关系;根据血清miR-17-5p和miR-21的表达情况,将患者分为高表达组(60例)和低表达组(42例),探讨不同miR-17-5p及miR-21表达患者复发情况。结果不同临床分期、病理类型、分化程度和是否存在淋巴结转移的卵巢癌患者血清miR-17-5p及miR-21表达,差异有显著性(P<0.05)。术后复发组患者血清miR-17-5p及miR-21表达水平显著高于未复发组(P<0.05)。血清miR-17-5p及miR-21检测预测卵巢癌患者术后复发的曲线下面积分别为0.819、0.807,预测灵敏度为66.7%、64.4%,特异度为84.2%、80.7%。血清miR-17-5p和miR-21低表达组患者术后3年内复发率明显低于高表达组(P<0.05)。结论血清miR-17-5p和miR-21表达与卵巢癌临床分期和分化程度有关,检测血清miR-17-5p和miR-21水平可以辅助评估术后复发。

微小RNA-146a和微小RNA-34a及微小RNA-17-5p与老年患者颈动脉粥样硬化的相关性分析

目的探究微小RNA(miR)-146a、miR-34a及miR-17-5p与老年患者颈动脉粥样硬化发生的相关性。方法选取2019年1月至2020年1月广东省深圳市人民医院收治的132例老年颈动脉粥样硬化患者作为粥样硬化组,另外选取同期于本院体检的80例无颈动脉粥样硬化的老年人作为无粥样硬化组。采集研究对象清晨空腹外周静脉血,分离出单个核细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测外周血单个核细胞miR-146a、miR-34a、miR-17-5p表达量,分析三者与颈动脉粥样硬化的关系及对斑块性质的预测价值。结果粥样硬化组miR-146a、miR-34a、miR-17-5p表达量均显著高于无粥样硬化组[(1.68±0.38)比(1.02±0.23)、(1.85±0.46)比(1.13±0.24)、(1.59±0.28)比(1.00±0.13)],差异均有统计学意义(均P<0.001)。miR-146a、miR-34a、miR-17-5p表达与颈动脉粥样硬化患者斑块性质相关(均P<0.05)。不稳定性斑块颈动脉粥样硬化患者miR-146a、miR-34a、miR-17-5p表达量高于稳定斑块患者,差异均有统计学意义(均P<0.001)。miR-146a、miR-34a、miR-17-5p三者表达互呈正相关(均P<0.05)。miR-146a、miR-34a、miR-17-5p三项指标联合对颈动脉粥样硬化患者斑块性质的预测价值高于单项指标,差异有统计学意义(P<0.05),受试者工作特征曲线下面积为0.892,敏感度为86.39%,特异度为70.12%。结论老年颈动脉粥样硬化患者外周静脉血单个核细胞miR-146a、miR-34a、miR-17-5p表达异常升高,与患者斑块性质相关,三者呈正相关,可用于此病的诊断和斑块性质的预测。

微小RNA-17-5p通过靶向调控TP53INP1的表达对急性心肌梗死后心室重构的影响

目的:探讨微小RNA(miRNA)miR-17-5p通过靶向调控肿瘤蛋白53诱导性核蛋白1(TP53INP1)的表达对急性心肌梗死(AMI)后心室重构的影响。方法:选取成年miR-17-5p^(-/-)、miR-17-5p^(+/+)和正常型SPF级昆明种小鼠各20只,采用随机数字表法分为假手术组、AMI组、miR-17-5p^(-/-)假手术组、miR-17-5p^(-/-)AMI组,miR-17-5p^(+/+)假手术组和miR-17-5p^(+/+)AMI组,每组10只,雌雄各半。构建小鼠AMI模型,采用超声心动图检测舒张末期容积指数(EDVI)、收缩末期容积指数(ESVI)和左室射血分数(LVEF),红四氮唑(TTC)染色法检测小鼠心肌梗死面积,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测小鼠心脏组织miR-17-5p和TP53INP1 mRNA表达水平,Western blot法检测小鼠心脏组织TP53INP1蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,AMI组建模后7 d和14 d的EDVI、ESVI和LVEF,建模后14 d的miR-17-5p表达水平均显著降低,建模后7 d和14 d的心肌梗死面积、建模后14 d TP53INP1 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P均<0.05);与AMI组比较,miR-17-5p^(-/-)AMI组建模后7 d和14 d的EDVI、ESVI和LVEF,建模后14 d的miR-17-5p表达水平均显著降低,建模后7 d和14 d的LVEF和心肌梗死面积、建模后14 d TP53INP1 mRNA和蛋白表达水平均显著升高,miR-17-5p^(+/+)AMI组建模后7 d和14 d的EDVI、ESVI和LVEF,建模后14 d的miR-17-5p表达水平均显著升高,建模后7 d和14 d的心肌梗死面积、建模后14 d TP53INP1 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P均<0.05);与miR-17-5p^(-/-)AMI组比较,miR-17-5p^(+/+)AMI组建模后7 d和14 d的EDVI、ESVI和LVEF,建模后14 d的miR-17-5p表达水平均显著升高,建模后7 d和14 d的心肌梗死面积、建模后14 d TP53INP1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P均<0.05);各假手术组超声心动图指标及心机梗死面积比较差异无统计学意义。结论:miR-17-5p和TP53INP1与小鼠AMI后心室重构密切相关,其机制可能与miR-17-5p靶向抑制TP53INP1表达有关。

ParT1靶向调控微小RNA-17-5p对胃癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA前列腺雄激素调控转录物1(ParT1)对微小RNA-17-5p(miR-17-5p)的靶向调控作用及在胃癌细胞增殖、迁移和侵袭中的生物学作用。方法采用实时定量PCR(qPCR)检测胃癌组织和癌旁组织的ParT1水平。培养胃癌BGC-823细胞,根据转染情况分为对照组(未转染作空白对照)、pcDNA3.1组(转染空载体作阴性对照)、pcDNA3.1-ParT1组(转染pcDNA3.1-ParT1作过表达处理)和pcDNA3.1-ParT1+miR-17-5p组(转染pcDNA3.1-ParT1+miR-17-5p模拟物mimics)。通过MTT、划痕实验和Transwell小室实验检测BGC-823细胞的增殖、迁移和侵袭情况,qPCR和Western blotting检测蜗牛家族转录抑制因子1(SNAIL1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)及其磷酸化形式p-Akt水平;荧光素酶报告实验验证ParT1与miR-17-5p的靶向关系。结果胃癌组织的ParT1水平低于癌旁组织中的表达(P<0.05)。miR-17-5p mimics降低了野生型ParT1的荧光素酶活性(P<0.05),而不影响突变型ParT1的荧光素酶活性(P>0.05)。与对照组和pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-ParT1组BGC-823细胞活力、划痕愈合率、穿膜细胞数及SNAIL1、MMP-9和p-Akt水平降低,而pcDNA3.1-ParT1+miR-17-5p组上述指标水平较pcDNA3.1-ParT1组升高,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。结论异常低表达的ParT1在胃癌中发挥抑癌作用,ParT1可能通过靶向miR-17-5p来抑制胃癌细胞的增殖侵袭与迁移能力,ParT1/miR-17-5p轴有望成为胃癌治疗的新靶点。

诺和锐特充联合门冬胰岛素对妊娠期糖尿病患者微小RNA-17-5p 促代谢因子及妊娠结局的影响

目的 分析瑞格列奈片联合门冬胰岛素对妊娠期糖尿病患者微小RNA-17-5p(miR-17-5p)、促代谢因子(Betatrophin)及妊娠结局的影响。方法 选取2020年1月-2021年1月于天津市第五中心医院接受治疗的妊娠期糖尿病患者105例,按随机数字表法分为联合组和对照组。对比两组不良反应发生情况及母婴妊娠结局,观察两组患者血糖、miR-17-5p、Betatrophin、胱抑素C(CysC)、胰岛功能[胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、空腹胰岛素(FINS)]、胰岛素用量及血糖达标时间。结果 治疗后,两组患者HbA1c、FPG、2h FPG、HOMA-IR、FINS、miR-17-5p、Betatrophin及CysC水平降低,HOMA-β水平升高,且相比对照组,联合组HbA1c、FPG、2h FPG、HOMA-IR、FINS、miR-17-5p、Betatrophin及CysC水平较低,HOMA-β水平较高,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组患者比较,联合组血糖达标时间和胰岛素用量水平均有所降低,差异均有统计学意义(t=5.744,7.301,均P<0.05);联合组不良母婴妊娠结局总发生率(9.09%)明显低于对照组(24.00%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.290,P<0.05);联合组临床疗效总有效率(96.36%)高于对照组(82.00%),差异有统计学意义(χ^(2)=5.761,P<0.05)。结论 瑞格列奈片联合门冬胰岛素可有效调节妊娠期糖尿病患者胰岛功能,控制血糖,降低miR-17-5p、Betatrophin水平,改善母婴结局,不良结局的发生情况。

微小RNA-17-5p在脑恶性胶质瘤患者血清和肿瘤组织的表达及其对U87MG和U251体外作用

目的观察恶性胶质瘤患者肿瘤组织与血清微小RNA（miRNA，miR）-17-5p的表达，以及miR-17-5p对恶性胶质瘤细胞株U87MG和U251的体外作用。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测恶性胶质瘤患者肿瘤组织与血清miR-17-5p的表达水平；将U87MG和U251细胞用化疗药物20 μmol/L顺铂（DDP），50 μmol/L替莫唑胺或30 Gy伽马射线处理后检测miR-17-5p表达变化；将U87MG和U251细胞转染miR-17-5p mimic，并用无血清培养，检测miR-17-5p在无血清条件对细胞存活的作用；将U87MG和U251细胞转染miR-17-5p mimic，测定其细胞增殖、细胞迁移、集落形成以及肿瘤蛋白p53可诱导核蛋白1（TP53INP1）、Tripartite基序蛋白8（TRIM8）和含BTB结构域的锌指蛋白（ZBTB4）蛋白表达量的变化。结果通过RT-qPCR检测可见恶性胶质瘤患者肿瘤组织（7.40±1.55）和血清（2.70±0.55） miR-17-5p的表达较癌旁组织和健康人血清明显升高（P=0.019和P=0.028），同时采用化疗药物20 μmol/L DDP、50 μmol/L替莫唑胺或30 Gy伽马射线处理U87MG和U251细胞后，其miR-17-5p的表达量也明显上升（P=0.001）。将U87MG和U251细胞转染miR-17-5p mimic，并用无血清培养结果表明，miR-17-5p能够促进U87MG和U251在无血清条件下的细胞存活，同时检测显示miR-17-5P在低浓度（2.5%）血清下可以促进U87MG和U251细胞迁移[（20.50±2.33） mm和（14.50±1.35） mm]，促进U87MG和U251集落形成[（225±45）个和（312±58）个]，而在高浓度血清（10%）条件下，miR-17-5p并不能促进U87MG和U251细胞迁移，反而会抑制细胞增殖，表明miR-17-5p能够降低抑癌基因TP53INP1、TRIM8和ZBTB4蛋白表达。结论恶性胶质瘤患者血清和组织miR-17-5p表达增加，同时miR-17-5p对于恶性胶质瘤细胞株U87MG和U251在不良环境中的细胞生存具有促进作用。

微小RNA-17-5p在食管鳞癌中的表达及其对食管鳞癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨微小RNA-17-5p(miR-17-5p)在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其对ESCC细胞增殖和侵袭的影响。方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测ESCC组织和细胞中miR-17-5p的表达。将miR-17-5p抑制剂和阴性对照转染食管鳞癌细胞EC9706和TE1,RT-qPCR检测转染后细胞中miR-17-5p的表达水平,细胞计数试剂盒8和EdU检测转染后细胞的增殖情况,Transwell小室检测细胞的侵袭能力。采用双荧光素酶报告实验分析miR-17-5p与成视网膜细胞瘤样蛋白2(RBL2)直接的相互作用,Western blot检测转染后RBL2蛋白的表达,RT-qPCR检测RBL2在ESCC组织中的表达,并分析其与miR-17-5p表达的相关性。结果ESCC组织中miR-17-5p的相对表达水平为4.222±0.39,高于正常食管上皮组织(1.081±0.046,P<0.001)。ESCC细胞EC9706、Eca109、TE1、KYSE450、KYSE70和KYSE520中miR-17-5p的相对表达水平分别为13.84±1.266、6.453±0.293、11.41±0.520、2.613±0.548、5.251±0.239和4.251±0.195,均高于正常食管上皮细胞Het-1A(1.007±0.079,均P<0.05)。Ⅲ+Ⅳ期ESCC组织中miR-17-5p的表达水平(5.094±0.562)高于Ⅰ+Ⅱ期患者(2.934±0.364),差异有统计学意义(P<0.01);有淋巴结转移患者中miR-17-5p的表达水平(5.523±0.634)高于无淋巴结转移患者(3.533±0.461),差异有统计学意义(P<0.05)。miR-17-5p高表达患者的生存率低于miR-17-5p低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-17-5p抑制剂能下调EC9706和TE1细胞中miR-17-5p的表达,其表达下调抑制细胞的增殖和侵袭能力。双荧光素酶报告实验显示,无论是EC9706细胞还是TE1细胞,在RBL23′UTR-WT载体和miR-17-5p mimic共转染后,荧光素酶的活性显著降低(P<0.01),RBL2是miR-17-5p的直接作用靶点。Western blot检测显示,miR-17-5p抑制剂组EC9706和TE1细胞中RBL2蛋白的表达量分别为0.936±0.055和0.923±0.048,明显高于对照组(分别为0.087±0.019和0.102±0.010),差异均有统计学意义(均P<0.001)。ESCC组织中RBL2的表达水平为0.219±0.510,低于正常食管上皮组织(0.983±0.324,P<0.001)。ESCC组织中miR-17-5p的表达水平与RBL2的表达水平呈负相关(r=-0.462,P<0.001)。RBL2表达下调能逆转miR-17-5p抑制剂引发的细胞增殖和侵袭能力降低。结论miR-17-5p参与ESCC的发生、发展过程,有望成为ESCC潜在的分子治疗靶点。

微小RNA-17-5p在特发性少精症患者睾丸组织中的表达及其意义

目的 探讨微小RNA （miR）-17-5p在特发性少精症患者睾丸组织中的表达及其意义.方法 对25例特发性少精症患者和10例正常男性为对照组,分别采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot检测miR-17-5p基因和E2F1蛋白在其睾丸组织中的表达,应用原位缺口末端标记法（TUNEL）检测睾丸组织切片中生精细胞凋亡率.结果 Real-time PCR显示miR-17-5p基因表达在特发性少精症患者睾丸组织中较正常生育能力的睾丸组织显著减少（0.38）,明显低于对照组（1.00,P＜0.05）,Western blot结果显示特发性少精症患者组睾丸组织中凋亡蛋白E2F1条带灰度值显著高于正常对照组（P＜0.05）,凋亡率检测结果示特发性少精症组凋亡指数（AI）为（50.8±0.9）％,显著低于正常对照组的（1.3±1.2）％（P＜0.05）.结论 miR-17-5p表达减少可能通过上调凋亡蛋白E2F1表达,而促进睾丸生精细胞过度凋亡,导致特发性少精.

血清BGP、miR-17-92、sST2与CHD患者PCI术后预后的关系

目的探讨骨钙素(BGP)、微小RNA-17-92a(miR-17-92)可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)与冠心病(CHD)患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后预后的关系。方法选取2020年6月至2022年6月南阳市第一人民医院收治并行PCI术的168例CHD患者作为研究组,另选取同期53例未行PCI的CHD患者作为对照组。比较两组患者的血清BGP、miR-17-92、sST2水平,研究组患者随访12个月,失访6例,依据预后情况分为预后不良组126例和预后良好组36例,采用多因素Logistic回归分析影响CHD患者PCI术后预后的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清BGP、miR-17-92、s ST2对预后不良的预测效能。结果两组患者的血清BGP比较差异无统计学意义(P>0.05),但研究组患者的血清miR-17-92、sST2分别为1.55±0.29、(53.48±10.84)ng/mL,明显高于对照组的1.41±0.30、(20.64±5.97)ng/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);预后不良组患者的miR-17-92、s ST2分别为1.59±0.29、(58.33±8.43)ng/mL,明显高于预后良好组的1.45±0.28、(52.15±6.86)ng/mL,而血清BGP水平为(23.06±3.84)ng/mL,明显低于预后良好组的(27.19±4.31)ng/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,miR-17-92、sST2是CHD患者PCI术后预后的独立危险因素,而血清BGP是保护因素(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清BGP、miR-17-92、s ST2单独及联合检测预测CHD患者PCI术后预后的曲线下面积(AUC)分别为0.783、0.628、0.723、0.856,联合预测的AUC明显高于单独预测(Z=2.897、4.627、1.984,P<0.05)。结论血清miR-17-92、sST2均是CHD患者PCI术后预后的危险因素,BGP是保护因素,监测其变化对CHD患者PCI术后预后有一定预测价值。

miR-17-5p、IL-6及MCP-1联合检测对卵巢子宫内膜异位症患者术后复发的预测价值

目的 分析研究血清微小RNA-17-5p(miR-17-5p)、白细胞介素-6(IL-6)及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)联合检测对卵巢子宫内膜异位症(OEM)患者术后复发的预测价值。方法 选取郑州大学第三附属医院2019年1月至2022年12月收治的OEM患者作为研究对象,将其命名为OEM组(n=100),另选同期在本院进行体检的健康女性为对照组(n=60)。比较两组血清miR-17-5p、IL-6及MCP-1水平;OEM组患者在入院后均进行手术与药物对症治疗,在治疗结束后对患者随访12个月。以多因素Logistic回归分析OEM患者术后复发的影响因素,并绘制ROC曲线分析血清miR-17-5p、IL-6、MCP-1水平对OEM患者术后复发的预测价值。结果 OEM组的血清miR-17-5p水平低于对照组,IL-6、MCP-1水平均高于对照组,差异有统计学意义(t=11.015、59.651、38.199,均P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,囊肿直径>5 cm(OR=1.828)、ASRM分期为Ⅲ~Ⅳ期(OR=1.815)、血清miR-17-5p水平降低(OR=2.042)、IL-6水平升高(OR=2.136)及MCP-1水平升高(OR=1.966)均是OEM患者术后复发的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,血清miR-17-5p、IL-6、MCP-1水平及联合检测的曲线下面积(AUC)分别为0.816、0.781、0.745、0.933,联合检测优于单一检测(P<0.05)。结论 miR-17-5p、IL-6及MCP-1联合检测对OEM患者术后复发具有一定预测价值。

微小RNA-17-92基因簇与心血管疾病发病关系的研究进展

近年来,微小RNA这类转录后调控非编码小RNA在心脑血管疾病发病中的作用引起越来越多学者的关注。微小RNA-17-92基因簇是目前研究得较为深入的微小RNA之一,可通过多种机制参与动脉粥样硬化发病,与冠心病、缺血性卒中以及心脏疾病等多种心脑血管疾病发病有着紧密的联系。

SOX4通过靶向调节miR-17表达水平对结直肠癌细胞免疫逃逸及细胞迁移的影响

目的探究性别决定区Y框蛋白4(SOX4)通过靶向调节微小RNA(miR)-17表达水平对结直肠癌细胞免疫逃逸及细胞迁移的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测正常结直肠黏膜上皮细胞及4种结直肠癌细胞中SOX4、miR-17表达水平。取结直肠癌细胞将其分为结直肠癌细胞(CC)组、结直肠癌细胞+SOX4-NC(SN)组、结直肠癌细胞+SOX4激动剂(SM)组、结直肠癌细胞+SOX4抑制剂(SI)组、结直肠癌细胞+miR-17-NC(MN)组、结直肠癌细胞+miR-17激动剂(MM)组、结直肠癌细胞+miR-17抑制剂(MI)组、结直肠癌细胞+SOX4抑制剂+miR-17抑制剂(II)组。采用免疫印迹法检测程序性死亡受体-1(PD-1)及PD-1配体(PD-L1)表达水平,小室法检测细胞迁移数量,双荧光素酶报告基因检测各组细胞荧光素酶活性。结果4种结直肠癌细胞中SOX4、miR-17 mRNA表达水平明显高于FHC正常结直肠黏膜上皮细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。CC组与SN组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。SM组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量均明显高于SN组,SI组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量均明显低于SM组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CC组与MN组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。MM组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量均明显高于MN组,MI组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量均明显低于MM组,差异均有统计学意义(P<0.05)。SI组与MI组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。II组PD-1、PD-L1蛋白表达水平及细胞迁移数量均明显低于MI组,差异均有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测结果显示,转染SOX4后miR-17-3′-UTR-WT的荧光素酶活性明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),miR-17-3′-UTR-MUT的荧光酶活性无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论抑制SOX4表达水平可有效抑制结直肠癌细胞免疫逃逸,并抑制细胞迁移,其作用机制可能与抑制miR-17表达水平有关。

血清miR-15b-5p、miR-17-5p水平与子宫内膜癌临床病理特征和预后的关系

目的研究血清微小RNA(miR)-15b-5p、miR-17-5p水平与子宫内膜癌(EC)临床病理特征及预后的关系。方法选取2016年1月至2020年6月三二○一医院收治的82例EC患者作为研究对象,设为EC组。另选取同期进行体检的40例健康女性设为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-15b-5p、miR-17-5p水平。比较不同临床病理特征EC患者血清miR-15b-5p、miR-17-5p水平。采用Pearson分析相关性。绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用Log-Rank检验比较不同血清miR-15b-5p、miR-17-5p水平患者的预后。采用Cox回归模型分析EC患者预后的影响因素。结果EC组血清miR-15b-5p、miR-17-5p相对表达量及血清糖类抗原125(CA125)水平高于对照组(P<0.05)。EC患者血清miR-15b-5p、miR-17-5p水平与国际妇产科联盟(FIGO)分期、肿瘤分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05)。EC患者血清miR-15b-5p、miR-17-5p水平与CA125呈正相关(r=0.661、0.702,P<0.05)。miR-15b-5p高表达组、miR-15b-5p低表达组3年总体生存率分别为47.50%(19/40)、90.48%(38/42)。miR-17-5p高表达组、miR-17-5p低表达组3年总体生存率分别为46.15%(18/39)、90.70%(39/43)。miR-15b-5p高表达组累积生存率低于miR-15b-5p低表达组(P<0.05)。miR-17-5p高表达组EC累积生存率低于miR-17-5p低表达组(P<0.05)。血清miR-15b-5p、miR-17-5p、CA125、FIGO分期、淋巴结转移是影响EC患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论EC患者血清miR-15b-5p、miR-17-5p水平升高,与患者不良临床病理特征有关,是评估EC患者生存预后的血清标志物。

微小RNA-17-5p靶向调控S100钙结合蛋白A4对子宫内膜异位症在位子宫内膜间质细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究微小RNA?17?5p(miR?17?5p)对子宫内膜异位症(EMs)在位子宫内膜间质细胞(ESC)增殖和凋亡的影响.方法 选择2016年2月~2017年6月本院收治的EMs患者30例(EMs组),同期因卵巢囊肿或浆膜下肌瘤等行手术治疗的患者30例作为对照组,分离、原代培养两组ESC,应用噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪分别检测细胞的增殖和凋亡,双萤光素酶报告系统验证miR?17?5p和S100钙结合蛋白A4(S100A4)的关系,实时荧光定量PCR(qRT?PCR)检测miR?17?5p和S100A4 RNA的表达,免疫印迹法检测S100A4蛋白表达水平.结果 与对照组相比,EMs组中miR?17?5p表达水平下降(0.53±0.05比1.01±0.08,P<0.05),S100A4 mRNA和蛋白的表达水平上升(5.27±0.25比1.03±0.09、0.59±0.05比0.23±0.03,均P<0.05);双萤光素酶报告系统结果显示,miR?17?5p靶向负调控S100A4的表达;过表达miR?17?5p和抑制S100A4均可抑制EMs ESC细胞的增殖活性,诱导细胞凋亡;过表达S100A4可逆转上调miR?17?5p对EMs ESC细胞增殖和凋亡的影响.结论 miR?17?5p通过靶向S100A4调控EMs在位内膜细胞的增殖和凋亡.

多发性骨髓瘤患者血浆微小RNA-17-5p的表达及其对肿瘤发生发展的作用

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者血浆微小RNA(miR)-17-5p的表达及其对肿瘤发生发展的作用。方法纳入2013年4月至2018年4月在河南省肿瘤医院血液科就诊的意义未明单克隆丙种球蛋白血症(MGUS)患者、MM患者及20名健康志愿者,采用逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测血浆循环miR-17-5p和骨髓单个核细胞中miR-17-5p的表达量。其中MM组患者分为初诊未治MM(NDMM)组、完全缓解MM(CRMM)组以及复发难治MM(RRMM)组。分析各组miR-17-5p的表达差异;用相关性分析评估NDMM患者的血浆miR-17-5p与血清M蛋白和骨髓浆细胞比例之间的关系;用受试者工作特征(ROC)曲线评估血浆miR-17-5p作为MM诊断相关的分子标志物的可能性;过表达或敲低miR-17-5p的表达后,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测miR-17-5P对MM细胞系增殖的影响,裸鼠皮下成瘤实验体内检测miR-17-5p对MM细胞增殖的影响。结果纳入MGUS患者10例,其中男6例、女4例。MM患者92例,其中男54例、女38例;MM患者中,NDMM组22例、CRMM组11例、RRMM组59例。NDMM组和RRMM组骨髓单个核细胞中miR-17-5p的表达量高于健康对照组[1.37(0.47,4.87)、2.68(1.02,5.02)比1.00(1.00,1.00),均P<0.05],且血浆miR-17-5p的表达水平也高于健康对照组[1.85(0.92,3.51)、2.79(1.22,5.04)比1.00(1.00,1.00),均P<0.05];miR-17-5p在KMS-11、RPMI-8226、H929、MM-1R、U266B1等MM细胞系中的表达量均高于健康对照组的骨髓单个核细胞(3.96±0.68、1.58±0.32、3.51±0.55、5.08±0.76、3.22±0.75比1.00±0,均P<0.05);血浆miR-17-5p表达与血清M蛋白和骨髓浆细胞比例均呈正相关(r=0.50,P<0.05;r=0.60,P<0.01);ROC曲线显示血浆miR-17-5p作为诊断MM的相关分子标志物的特异度为0.591,灵敏度为0.900(ROC曲线下面积=0.74,cut-off值为0.491);CCK-8结果提示miR-17-5p过表达使RPMI-8226和NCI-H929等MM细胞系72 h的增殖较对照组增高(1.37±0.11比1.07±0.09,2.14±0.09比1.82±0.11,均P<0.05),miR-17-5p低表达使NCI-H929和MM-1R等MM细胞系72 h的增殖较对照组降低(1.38±0.09比1.83±0.11,1.45±0.10比1.73±0.09,均P<0.05)。裸鼠皮下成瘤实验提示,miR-17-5p过表达组肿瘤体积大于对照组[(1865±181)比(1389±227)mm^(3),P<0.05],miR-17-5p低表达组肿瘤体积小于对照组[(1006±171)比(1389±227)mm^(3),P<0.05]。结论miR-17-5p可能作为MM疾病发展状态相关的血浆分子标志物,在MM细胞系中起癌基因作用。

血清微小RNA与血管内皮生长因子在老年血管性痴呆患者中的表达与相关性

目的探讨血清微小RNA-17(miR-17)、miR-34a与血管内皮生长因子(VEGF)在老年血管性痴呆(VD)中的表达水平与相关性。方法选择2022年6月—2023年5月于金华市第二医院就诊的老年35例VD患者和35例轻度认知功能障碍(MCI)患者作为研究对象,分别纳入VD组和MCI组,另外选择同期30例健康体检者纳入对照组。采用简易智力状态检查量表(MMSE)对受试者进行评分;采用定量反转录酶-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测三组受检者血清miR-17、miR-34a水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测VEGF水平;采用Pearson相关系数以及受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析上述指标在VD中的相关性和对VD的诊断价值。结果VD组和MCI组患者的MMSE评分和血清miR-17、VEGF表达水平均明显低于对照组[MMSE评分(分):8.85±3.68、23.03±2.95比29.87±0.35;miR-17(拷贝/μg RNA):76355.85±34594.59、80764.66±46480.37比168183.17±126325.72;VEGF(mmol/L):115.55±20.99、143.09±23.52比173.32±24.13;均P<0.05],且VD组的MMSE评分和血清miR-17、VEGF表达水平均明显低于MCI组(均P<0.05)。对照组、MCI组和VD组的miR-34a表达水平呈上升趋势,但差异无统计学意义。Pearson相关性分析表明,MMSE评分与miR-34a水平呈负相关,与miR-17、VEGF水平呈正相关(r值分别为-0.028、0.232、0.684,P值分别为0.786、0.020、0.000)。miR-17、miR-34a、VEGF诊断VD的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.712、0.506和0.898,95%可信区间(95%CI)分别为0.589~0.836、0.385~0.626、0.839~0.956。三项指标联合检测诊断VD的AUC为0.930(95%CI为0.882~0.977),明显高于各指标单独检测(均P<0.05)。结论老年VD患者血清miR-17、VEGF表达下调,而miR-34a表达上调,且与VD严重程度密切相关,三者联合检测对VD的临床诊断与病情评估具有重要意义。