利多卡因通过降低微小RNA-181a表达抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤

目的 探讨利多卡因通过调控微小RNA-181a(miR-181a)对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞H9C2损伤的影响。方法 培养H9C2细胞,建立H/R模型,作为H/R组;正常培养的细胞作为对照(Con)组。使用1.0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L利多卡因处理H/R诱导的H9C2细胞,并分别设为1.0μmol/L组、2.5μmol/L组、5.0μmol/L组、10.0μmol/L组和20.0μmol/L组。将anti-miR-NC、anti-miR-181a分别转染至H/R诱导的H9C2细胞,记为H/R+anti-miR-NC组、H/R+anti-miR-181a组。将miR-NC、miR-181a分别转染至H/R诱导的H9C2细胞,再用20.0μmol/L利多卡因处理,分别记为H/R+miR-NC+20.0μmol/L组、H/R+miR-181a+20.0μmol/L组。采用MTT实验检测细胞活性;采用流式细胞术检测细胞凋亡;采用蛋白质印迹(Western blot)检测细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-181a表达;检测丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)]的水平。结果 与Con组相比,H/R组细胞活性降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与H/R组相比,5.0μmol/L组、10.0μmol/L组和20.0μmol/L组的细胞活性提高,差异有统计学意义(P<0.05)。因此,后续以20.0μmol/L利多卡因进行实验。与Con组相比,H/R组细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与H/R组相比,20.0μmol/L组细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与Con组相比,H/R组MDA含量、LDH活性以及炎症因子水平提高,SOD活性降低,差异有统计学意义(P<0.05);与H/R组相比,20.0μmol/L组MDA含量、LDH活性以及炎性因子水平降低,SOD活性提高,差异有统计学意义(P<0.05)。与H/R+anti-miR-NC组相比,H/R+anti-miR-181a组细胞miR-181a表达、凋亡率和Caspase-3蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与H/R+anti-miR-NC组相比,H/R+anti-miR-181a组MDA含量、LDH活性以及炎性因子水平降低,SOD活性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与H/R+miR-NC+20.0μmol/L组相比,H/R+miR-181a+20.0μmol/L组细胞凋亡率、Caspase-3蛋白和MDA含量、LDH活性以及炎性因子水平升高,SOD活性降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 利多卡因通过干扰miR-181a表达,抑制H/R诱导的心肌细胞H9C2损伤。

免疫性血小板减少症患儿 T淋巴细胞亚群、甲状腺自身抗体、微小RNA-106b-5p 和微小RNA-181a-5p表达水平检测及临床意义

目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)患儿T淋巴细胞亚群、甲状腺自身抗体、微小RNA-106b-5p(miR-106b-5p)和微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)表达水平及临床意义。方法:以158例ITP患儿为ITP组,依据临床分型不同分为慢性ITP组(34例)、持续性ITP组(60例)和新诊断ITP组(64例)。另选取同期健康儿童102例为对照组。所有患儿均给予静脉滴注人免疫球蛋白及口服醋酸泼尼松片等常规治疗,均治疗5 d。比较ITP组与对照组全血T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+))细胞及血清甲状腺自身抗体[甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)]、miR-106b-5p、miR-181a-5p水平。比较慢性ITP组、持续性ITP组和新诊断ITP组患儿全血T淋巴细胞亚群及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p、miR-181a-5p水平。比较ITP患儿治疗前、治疗5 d后全血T淋巴细胞亚群及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p、miR-181a-5p水平。结果:与对照组比较,ITP组全血CD3^(+)、CD4^(+)细胞及血清miR-181a-5p水平更低,全血CD8^(+)细胞及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p水平更高(均P<0.05)。慢性ITP组全血CD3^(+)、CD4^(+)细胞及血清miR-181a-5p水平低于持续性ITP组和新诊断ITP组,全血CD8^(+)细胞及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p水平高于持续性ITP组和新诊断ITP组(均P<0.05)。与治疗前比较,治疗5 d后ITP患儿全血CD3^(+)、CD4^(+)细胞及血清miR-181a-5p水平升高,全血CD8^(+)细胞及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p水平降低(均P<0.05)。结论:ITP患儿存在T淋巴细胞亚群失衡、甲状腺自身抗体和miR-106b-5p高表达以及miR-181a-5p低表达情况。治疗期间积极检测患儿全血T淋巴细胞亚群及血清甲状腺自身抗体、miR-106b-5p、miR-181a-5p水平,有助于患儿的疗效评估。

急性缺血性卒中患者静脉溶栓后血清微小RNA-874-3p、微小RNA-181a-5p及Wnt/β-catenin信号通路与神经功能预后的关系

目的探讨急性缺血性卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者静脉溶栓后血清微小RNA(microRNA,miRNA)-874-3p(miR-874-3p)、miRNA-181a-5p(miR-181a-5p)与Wnt/β-catenin信号通路和神经功能预后的关系。方法前瞻性连续纳入2021年3月—2022年12月深圳市龙华区中心医院接受静脉溶栓治疗的AIS患者进入AIS组,选取同期体检健康者进入对照组。检测并比较两组血清miR-874-3p、miR-181a-5p及外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中Wnt/β-catenin相对表达水平,采用Pearson相关性分析AIS患者血清miR-874-3p、miR-181a-5p表达与Wnt/β-catenin信号通路的相关性。所有AIS患者出院后均随访3个月,根据mRS评分将完成随访的患者分为神经功能预后良好组和神经功能预后不良组,比较两组患者血清miR-874-3p、miR-181a-5p相对表达水平。采用多因素logistic回归方程分析AIS患者神经功能预后的影响因素。结果本研究中,AI S组纳入185例患者,平均(62.8±7.3)岁;对照组纳入65例体检健康者,平均(63.4±6.9)岁。与对照组相比,AIS组血清miR-874-3p(1.02±0.21 vs.1.46±0.23,P<0.001)相对表达水平及PBMC中Wnt mRNA(2.41±0.64 vs.4.59±1.13,P<0.001)、β-catenin mRNA(1.19±0.18 vs.2.34±0.73,P<0.001)相对表达水平均低于对照组,血清miR-181a-5p(1.95±0.32 vs.1.27±0.27,P<0.001)相对表达水平高于对照组;Pearson相关性分析显示,AIS患者血清miR-874-3p表达与PBMC中Wnt mRNA(r=0.562,P<0.001)、β-catenin mRNA(r=0.611,P<0.001)表达呈正相关,miR-181a-5p表达与PBMC中Wnt mRNA(r=-0.586,P<0.001)、β-catenin mRNA(r=-0.595,P<0.001)表达呈负相关。AIS组中,神经功能预后良好104例,预后不良81例,预后不良率为43.78%;神经功能预后不良组血清miR-874-3p相对表达水平显著低于神经功能预后良好组(0.79±0.20 vs.1.20±0.22,P<0.001),miR-181a-5p相对表达水平显著高于神经功能预后良好组(2.26±0.31 vs.1.71±0.24,P<0.001);神经功能预后不良组年龄([65.48±7.45)岁vs.(62.29±7.21)岁,P=0.004]、发病至入院时间([4.36±1.03)h vs.(3.79±1.15)h,P=0.001]、入院时NIHSS评分([6.81±2.45)分vs.(4.67±1.76)分,P<0.001]及Hcy水平([13.34±4.12)μmol/L vs.(11.75±3.46)μmol/L,P=0.005]均高于神经功能预后良好组;多因素logistic回归结果显示,年龄偏高(OR 1.056,95%CI 1.005~1.108,P=0.029)、发病至入院时间延长(OR 1.125,95%CI 1.008~1.256,P=0.035)、入院时NIHSS评分高(OR 1.220,95%CI 1.093~1.362,P<0.001)、miR-874-3p低表达(OR 0.632,95%CI 0.498~0.803,P<0.001)及miR-181a-5p高表达(OR 1.506,95%CI 1.209~1.875,P<0.001)是导致AIS神经功能预后不良的危险因素。结论AIS组患者血清miR-874-3p表达下降,miR-181a-5p表达升高,均与Wnt/β-catenin信号通路相关,血清miR-874-3p、miR-181a-5p水平是患者神经功能预后的影响因素。

微小RNA-181a与视网膜节细胞在视网膜缺血-再灌注中的关系及其作用机制探讨

背景视网膜缺血-再灌注（RIR）损伤是眼科常见病理改变之一，但其发病机制尚未明确。目的探讨大鼠RIR模型中微小RNA-181a（miR-181a）与视网膜神经节细胞（RGCs）凋亡之间的关系及可能的靶向机制。方法构建68只SD大鼠RIR模型，按随机数字表法随机分为对照组和造模后即刻组、造模后24h组及造模后72h组，每组17只，根据MiRanda、Targetscan和miRBase3个靶基因数据库的共同预测结果，选取肿瘤坏死因子-α（TNF-α）作为miR-181a的下游靶基因研究对象，通过免疫荧光标记法Westernblot及实时荧光定量PCR法观察miR-181a、TNF·仅在各组的表达情况及其与RGCs凋亡的关系。结果RGCs计数在造模后24h和72h显著减少，与对照组比较差异有统计学意义（P〈O．001）。各造模组miR-181a表达量随造模时间明显下降，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。此外，随RIR时间的延长，miR-181a的表达量及RGCs的数量均逐渐减少，两者呈正相关（r=0．995，P=0．005）。TNF-α主要在内层视网膜表达，与miR-181a分布重叠；RIR即刻至24h之间TNF-α表达明显升高，与RGCs计数及miR-181a表达的变化趋势相反，但总体相关性分析无统计学意义。结论在RIR模型中，miR-181a可能参与RGCs凋亡的调控，TNF-α是其可能的下游靶基因之一，RIR24h前是重要的干预时机。深入研究miR-181a及其靶向基因有助于探寻新的神经保护治疗靶点。

微小RNA-181a及其在恶性肿瘤中的作用

微小RNA(miRNA)是一类非蛋白质编码的小分子RNA,参与调控不同基因的表达,对癌细胞的侵袭和转移有着十分重要的影响。miRNA-181a(miR-181a)参与调控细胞的分化和免疫以及肿瘤的发生发展及预后等。本文就miR-181a的结构和功能,miR-181a在其他恶性肿瘤发病中的作用,miR-181a在口腔鳞状细胞癌发病中的作用等研究进展作一综述,以期为进一步研究miR-181a提供帮助。

稳定期慢性阻塞性肺疾病患者微小RNA-181a表达水平及其与预后的关系

目的探讨稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者微小RNA(miRNA)-181a表达水平及其与预后的关系。方法选取300例稳定期COPD患者作为COPD组,150例健康志愿者作为对照组。检测并比较两组研究对象外周血miRNA-181a的表达水平及血清促炎细胞因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、IL-18]的水平。采用Kaplan-Meier曲线分析稳定期COPD患者miRNA-181a及促炎细胞因子水平与预后的关系,并采用Cox回归模型分析稳定期COPD患者预后的影响因素。结果与对照组比较,COPD组患者外周血miRNA-181a的表达水平降低,血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18的水平升高(均P<0.05)。COPD组miRNA-181a表达水平与TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18水平呈负相关(均P<0.05)。Kaplan-Meier曲线分析结果显示,miRNA-181a低表达的COPD患者,以及TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-18低水平的COPD患者发生急性加重累积发生率和累积病死率更高(均P<0.05)。Cox回归分析结果显示,miRNA-181a、TNF-α、IL-6是COPD组患者发生急性加重的影响因素,miRNA-181a、IL-6、IL-18是COPD组患者死亡的影响因素(均P<0.05)。结论稳定期COPD患者外周血miRNA-181a表达水平降低,其可负调控促炎细胞因子水平,且是稳定期COPD患者发生急性加重和死亡的影响因素。

糖尿病视网膜病变患者外周血微小RNA-181a与血管内皮生长因子水平及临床意义

目的探讨糖尿病视网膜病变(DR)患者外周血微小RNA-181a与血管内皮生长因子(VEGF)水平及临床意义。方法选取85例2型糖尿病患者,根据眼底检查和眼底荧光血管造影结果,分为无视网膜病变(NDR)组49例、DR组36例,另选取62例健康成人为对照组。比较3组外周血微小RNA-181a相对表达水平、血管内皮生长因子(VEGF)及常规生化指标水平。采用多因素Logistic回归模型分析2型糖尿病患者发生DR的危险因素。分析血清微小RNA-181a相对表达水平与年龄、血清VEGF、LDL-C、糖化血红蛋白A1c(HbA1c)水平的相关性。结果对照组、NDR组、DR组的空腹血糖、LDL-C、HbA1c、VEGF水平均依次升高,微小RNA-181a相对表达水平依次降低(均P<0.05)。年龄>53岁、LDL-C水平>3.26 mmol/L、HbA1c水平>9.76 mg/dL、微小RNA-181a相对表达水平<2.48、VEGF水平>198.74μg/L均为2型糖尿病患者发生DR的危险因素(均P<0.05)。对照组的微小RNA-181a相对表达水平与年龄、VEGF、LDL-C、HbA1c水平均无相关性(均P>0.05),NDR组与DR组的微小RNA-181a相对表达水平与年龄无相关性(均P>0.05),与LDL-C、HbA1c水平呈正相关,与VEGF水平呈负相关(均P<0.05)。结论 DR患者血清微小RNA-181a水平下调,而VEGF水平升高,两者密切相关,在DR的发生发展中具有重要作用,两者可为DR的预防和靶向治疗提供思路。

微小RNA-181a-3p表达下调对甲状腺癌细胞放射敏感性的影响及其作用机制

目的探讨下调微小RNA(miRNA)-181a-3p表达对甲状腺癌细胞放射敏感性的影响,并分析其可能的分子生物学机制。方法(1)体外培养甲状腺癌细胞TPC-1、BCPAP和正常甲状腺上皮细胞Nthyori3-1,并以不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)X射线照射TPC-1细胞,采用定量PCR法检测各细胞中miRNA-181a-3p的表达量。(2)将inhibitor control、miRNA-181a-3p inhibitors分别转染TPC-1细胞(anti-miRNA-NC组、anti-miRNA-181a-3p组),另设对照组(细胞中只加入转染试剂),检测不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)X射线照射后的细胞活性和经4 Gy X射线照射后的细胞克隆数。(3)应用TargetScan在线工具预测miRNA-181a-3p和丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶5(MAP3K5)的靶向关系并采用双荧光素酶报告基因实验验证。(4)将空载质粒、shRNA-MAP3K5、shRNA-MAP3K5对照质粒Vector和miRNA-181a-3p inhibitors、shRNA-MAP3K5和miRNA-181a-3p inhibitors分别转染至TPC-1细胞,设为Scrambled组、shMAP3K5组、Vector+anti-miRNA-181a-3p组和shMAP3K5+anti-miRNA-181a-3p组。检测不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)X射线照射后的细胞活性和经4 Gy X射线照射后的细胞克隆数。结果(1)TPC-1、BCPAP细胞中miRNA-181a-3p的表达量高于Nthyori3-1细胞(均P<0.05);不同剂量X射线照射能上调TPC-1细胞中miRNA-181a-3p的表达量,且表达量与照射剂量呈剂量依赖性(均P<0.05)。(2)与对照组和anti-miRNA-NC组比较,经4、6、8 Gy X射线照射的anti-miRNA-181a-3p组细胞活力降低,经4 Gy X射线照射后anti-miRNA-181a-3p组细胞克隆数减少(均P<0.05)。(3)TargetScan在线预测和双荧光素酶报告基因实验结果表明,MAP3K5是miRNA-181a-3p的靶基因。(4)与Vector+anti-miRNA-181a-3p组比较,MAP3K5+anti-miRNA-181a-3p组经4、6、8 Gy X射线照射后的细胞活力和经4 Gy X射线照射后的细胞克隆数均增加(P<0.05)。结论miRNA-181a-3p在甲状腺癌细胞中表达上调,抑制miRNA-181a-3p表达或通过靶向调控MAP3K5或可增强甲状腺癌TPC-1细胞的放射敏感性。

微小RNA-181c-5p和Kruppel样因子6在子宫内膜样腺癌组织中的表达及其与患者临床病理特征关系研究

目的:检测子宫内膜样腺癌组织中微小RNA-181c-5p(miR-181c-5p)和Kruppel样因子6(KLF6)的表达,探讨其相关性及临床意义。方法:选择49例子宫内膜样腺癌行手术治疗的患者作为观察组,选择49例增生期子宫内膜组织作为对照组。应用实时荧光定量PCR法检测术后组织中miR-181c-5p的表达,应用免疫组化方法检测KLF6的表达。应用线性相关分析观察miR-181c-5p和KLF6的关系,应用K-M生存分析观察miR-181c-5p和KLF6与术后生存时间的关系。结果:观察组miR-181c-5p表达量明显低于对照组(P<0.05),KLF6的阳性率明显低于对照组(P<0.05)。观察组miR-181c-5p与KLF6表达与肿瘤肌层浸润深度、宫颈管累犯及病理分级密切相关(均P<0.05),且两者具有正相关性,两者的表达与术后生存时间相关(均P<0.05)。结论:子宫内膜样腺癌中miR-181c-5p和KLF6均异常表达且具有正相关性,联合检测miR-181c-5p和KLF6的表达对判断肿瘤预后可能有一定价值。

胃癌组织微小RNA-181d-5p和三基序蛋白22表达与患者术后5年内生存相关性研究

目的:探讨胃癌组织微小RNA-181d-5p(miR-181d-5p)和三基序蛋白22(TRIM22)表达与患者术后5年内生存的关系。方法:收集110例胃癌患者(均是胃腺癌)术中切除的胃癌组织标本及癌旁组织标本。荧光定量PCR和免疫组织化学法分别检测miR-181d-5p和TRIM22蛋白表达。患者术后随访5年,记录生存情况。Starbase数据库预测miR-181d-5p与TRIM22结合位点,并验证miR-181d-5p与TRIM22的靶向关系。比较癌旁和胃癌组织miR-181d-5p、TRIM22表达,不同临床病理特征患者胃癌组织miR-181d-5p、TRIM22表达差异。分析胃癌组织miR-181d-5p、TRIM22表达与患者预后的关系,胃癌患者预后的影响因素,以及胃癌组织miR-181d-5p与TRIM22及它们与不同临床病理特征的相关性。结果:与癌旁组织比较,胃癌组织miR-181d-5p表达升高,TRIM22阳性率降低(均P<0.05)。肿瘤低分化、肌层或外膜浸润、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期在miR-181d-5p高表达和TRIM22阴性表达患者中的比例分别高于肿瘤高分化、黏膜或膜下层浸润、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ-Ⅱ期(均P<0.05)。miR-181d-5p与TRIM22具有靶向结合位点,miR-181d-5p可负向调控TRIM22表达。miR-181d-5p高表达和TRIM22阴性表达患者5年总生存率分别低于miR-181d-5p低表达和TRIM22阳性表达患者(均P<0.05)。影响胃癌患者术后5年内生存的独立危险因素有miR-181d-5p高表达、TRIM22阴性表达、肿瘤低分化、肌层或外膜浸润、有淋巴结转移和TNM分期Ⅲ期(均P<0.05)。胃癌组织miR-181d-5p与TRIM22、肿瘤分化程度呈负相关,与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期呈正相关(均P<0.05);TRIM22与肿瘤分化程度呈正相关,与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期呈负相关(均P<0.05)。结论:胃癌组织miR-181d-5p表达升高,TRIM22阳性率降低,两者与患者临床病理特征和术后5年内生存有密切关系。

精神分裂症患者血清微小RNA-181c、微小RNA-30e的表达及其临床意义

目的:探讨精神分裂症患者血清微小RNA-181c(miR-181c)、微小RNA-30e(miR-30e)的表达,并分析其与患者认知功能、预后的关系。方法:选取本院2018年5月至2020年5月收治的138例精神分裂症患者为研究组,另选取同期健康体检者123例为对照组。受试者均采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测血清miR-181c、miR-30e表达,使用认知功能成套测验共识版(MCCB)进行认知功能评估并进行对比分析;随访1年,根据患者预后情况将其分为预后良好组与预后不良组,采用多因素Logistic回归性分析法分析血清miR-181c、miR-30e表达与精神分裂症患者预后不良的关系。结果:研究组血清miR-181c、miR-30e表达均高于对照组(P均<0.05),MCCB测评中各分测验评分及总评分均低于对照组(P均<0.05);血清miR-181c、miR-30e表达与MCCB总评分呈负相关(P均<0.05);研究组随访1年,预后不良80例(57.97%);预后良好组的有攻击行为占比、MCCB总评分<50分占比及血清miR-181c、miR-30e表达均高于预后良好组(P均<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,有攻击行为、MCCB总评分<50分及血清miR-181c、miR-30e表达升高均是精神分裂症患者预后不良的独立危险因素(P均<0.05)。结论:精神分裂症患者血清miR-181c、miR-30e表达均明显升高,且与认知功能障碍具有相关性,可能是精神分裂症患者预后不良的危险因素。

环状RNA hsa_circ_0085576调控微小RNA-498/B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1轴对口腔鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭的影响

目的探究环状RNA hsa_circ_0085576对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法检测OSCC细胞中hsa_circ_0085576、微小RNA-498(miR-498)以及B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(BMI-1)的表达水平。使用CCK-8、划痕实验、Transwell实验以及qRT-PCR、蛋白印迹法分别检测SCC-15细胞增殖活力、迁移及侵袭能力以及相关基因和蛋白的相对表达量。结果OSCC细胞中hsa_circ_0085576与BMI-1表达上调,miR-498表达下调(P<0.05)。下调hsa_circ_0085576表达或过表达miR-498后SCC-15细胞的增殖活性、划痕愈合率、侵袭细胞数目以及细胞周期蛋白D1、波形蛋白表达水平下调,miR-498和E-钙黏蛋白表达水平上调(P<0.05);抑制miR-498表达可减弱下调hsa_circ_0085576表达对OSCC细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用;上调BMI-1表达可减弱过表达miR-498对OSCC细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论下调hsa_circ_0085576表达可通过激活miR-498/BMI-1轴抑制OSCC细胞增殖、迁移及侵袭。

血清微小RNA-107、白细胞介素-18与慢性肾功能衰竭患者肾移植术后急性肾损伤的关系

目的探究血清微小RNA-107(miR-107)、白细胞介素-18(IL-18)水平对慢性肾功能衰竭患者肾移植术后急性肾损伤(AKI)的关系及其评估价值。方法收集2022年10月至2023年10月在西安交通大学第一附属医院接受肾移植手术的120例慢性肾功能衰竭患者为研究对象。根据术后1周内是否并发AKI分为AKI组(46例)与非AKI组(74例)。比较两组患者血清miR-107、IL-18及基线资料,采用logistic回归性分析检验血清miR-107、IL-18与并发AKI的关系;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,以曲线下面积(AUC)分析血清miR-107、IL-18对肾移植患者后并发AKI的评估价值。结果AKI组患者血清miR-107、IL-18、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平明显高于非AKI组患者,肾小球滤过率低于非AKI组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,血清miR-107、IL-18、Scr是影响肾移植患者术后并发AKI的危险因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清miR-107、IL-18均具有评估并发AKI的效能,并且当二者串联时其效能明显提升。结论血清miR-107、IL-18水平升高与肾移植术后并发AKI有关系,且二者对并发AKI均具有评估价值,串联联合应用时可提升评估效能。

孕早期孕妇促甲状腺激素、甲状腺过氧化物酶抗体及微小RNA-873-5p水平与妊娠期糖尿病相关性研究

目的:分析研究孕早期促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)及微小RNA-873-5p(miR-873-5p)水平与妊娠期糖尿病(GDM)的相关性。方法:选取定期产检的GDM孕妇命名为GDM组(n=109),另选同期在本院产检的糖耐量正常孕妇为对照组(n=60)。收集两组孕妇的一般资料及孕早期实验室检测指标(TSH、TPOAb、miR-873-5p),采用单因素、多因素分析TSH、TPOAb、miR-873-5p水平与GDM的关系;并绘制ROC曲线分析血清TSH、TPOAb、miR-873-5p水平对GDM的预测价值。结果:GDM组的血清TSH、TPOAb、miR-873-5p水平均高于对照组,差异具有统计学意义(均P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,年龄>30岁(OR=1.982)、孕前BMI≥24 kg/m^(2)(OR=2.020)、TSH升高(OR=2.113)、TPOAb升高(OR=2.307)及miR-873-5p水平升高(OR=2.059)是发生GDM的独立危险因素(均P<0.05);ROC曲线分析显示,血清TSH、TPOAb、miR-873-5p及联合检测的曲线下面积(AUC)分别为0.830、0.829、0.762、0.936,联合检测优于单一检测(P<0.05)。结论:TSH、TPOAb及miR-873-5p在GDM孕妇体内呈高表达,可能成为GDM发生的辅助预测指标。

微小RNA-150及靶基因SRC激酶信号抑制剂1在下肢深静脉血栓中的表达及作用机制

目的探讨微小RNA(miRNA)-150及靶基因SRC激酶信号抑制剂1(SRCIN1)在下肢深静脉血栓(LEDVT)中的表达及作用机制。方法收集2022年1月至2023年1月柳州市人民医院收治的60例LEDVT患者的临床资料作为LEDVT组,另纳入同期进行体检的60例健康者作为对照组。采集两组受试者的外周静脉血,并分离内皮祖细胞。通过荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNA-150的表达水平,利用生物信息学分析和双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-150的靶基因,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测SRCIN1蛋白的表达,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测内皮祖细胞增殖情况。结果与对照组相比,LEDVT组内皮祖细胞中miRNA-150的相对表达量明显降低(P﹤0.01)。生物信息学分析和双荧光素酶报告基因实验证实SRCIN1是miRNA-150的靶基因;在野生型SRCIN1中,与转染miRNA-NC的细胞相比,转染miRNA-150 agomir细胞的荧光素酶活性明显降低(P﹤0.01)。在突变型SRCIN1中,miRNA-150对SRCIN1的负向调控作用消失。Western blot检测结果显示,与miRNA-150antagomir组内皮祖细胞相比,miRNA-150 agomir组内皮祖细胞中SRCIN1蛋白的表达水平降低(P﹤0.05);与对照组相比,LDVT组内皮祖细胞中SRCIN1蛋白的表达水平升高(P﹤0.05)。MTT实验检测结果显示,与miRNA-150antagomir组相比,miRNA-150 agomir组的吸光度(OD)值在48、72 h时均明显升高(P﹤0.01)。结论miRNA-150在内皮祖细胞中的表达水平降低可能与LEDVT的发生、发展有关。高表达的miRNA-150可能通过靶向SRCIN1促进内皮祖细胞的增殖,从而达到治疗LEDVT的目的。

血清中微小RNA-506、微小RNA-934水平对胰腺癌患者术后生存结局的预测价值

目的探讨血清中微小RNA-506(miR-506)、微小RNA-934(miR-934)表达水平对胰腺癌患者术后生存结局的预测价值。方法选取接受手术治疗的115例胰腺癌患者为研究组,并根据随访结果分为生存组(n=18)和死亡组(n=97)。选取同期就诊的50例胰腺良性病变患者为对照组;选取同期体检健康的50例志愿者作为健康组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组血清中miR-506和miR-934的相对表达水平。采用多因素Logistic回归分析法分析胰腺癌患者术后生存结局的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-506、miR-934对胰腺癌患者术后生存结局的预测价值。结果研究组患者的血清miR-506表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者的血清miR-934表达水平高于对照组和健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。生存组的血清miR-506表达水平高于死亡组,血清miR-934表达水平低于死亡组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-506、miR-934、TNM分期、淋巴结转移是胰腺癌患者术后是否生存的独立影响因素(P<0.05)。结论miR-506在胰腺癌术后死亡患者血清中低表达,miR-934在胰腺癌术后死亡患者血清中高表达。miR-506、miR-934预测胰腺癌患者术后生存结局的价值较高。

微小RNA-155和白细胞介素-6在子痫前期极早产新生儿中表达水平的差异及临床意义

目的观察微小RNA-155(miR-155)mRNA和白细胞介素-6(IL-6)在子痫前期极早产新生儿中表达水平的差异及临床意义。方法选择2021年1月至12月聊城市人民医院产科收治的28例子痫前期孕母分娩极早产新生儿〔胎龄<32周和(或)体质量<1500 g〕作为观察组,以同期本院住院治疗其他原因导致的极早产儿26例作为对照组。收集患儿相关电子病历临床资料,包括极早产儿和孕母一般情况(性别、胎龄、出生体质量、有无子痫前期等)、有创通气比例、支气管肺发育不良(BPD)比例、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和早发脓毒症发生率、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NEUT),以及出生后脐动脉血清中miR-155 mRNA表达、IL-6水平,并比较两组上述指标的差异。采用Pearson相关性分析法分析miR-155、IL-6水平的相关性。结果观察组出生体质量明显低于对照组(kg:1.21±0.22比1.32±0.33,P<0.05),有创通气、BPD、ARDS比例和脓毒症发生率均明显高于对照组〔有创通气比例:75.0%(21/28)比57.7%(15/26),BPD比例:35.7%(10/28)比11.5%(3/26),ARDS发生率:100.0%(28/28)比84.6%(22/26),脓毒症发生率:71.4%(20/28)比53.8%(14/26),均P<0.05〕,miR-155 mRNA表达和IL-6水平均明显高于对照组〔miR-155 mRNA(2-ΔΔCt):0.93±0.18比0.17±0.03,IL-6(ng/L):73.84(33.44,429.00)比19.05(9.30,47.20),均P<0.05〕。Pearson相关性分析显示:miR-155和IL-6水平呈明显正相关(r=0.782,P<0.01)。两组随出生时间延长,WBC和NEUT均逐渐降低,观察组出生后各时间点WBC和NEUT比较差异均有统计学意义,出生后48 h和72 h均明显低于出生后24 h(均P<0.05)。观察组出生后24、48和72 h WBC均明显低于对照组(×109/L:出生后24 h为7.85±2.44比12.28±6.81,出生后48 h为7.31±3.53比10.98±7.91,出生后72 h为4.97±2.05比7.82±4.65,均P<0.05),NEUT仅出生后24 h和48 h两个时间点观察组明显低于对照组(×109/L:出生后24 h为4.13±1.93比7.45±5.67,出生后48 h为3.96±2.64比6.89±6.24,均P<0.05)。结论子痫前期极早产新生儿出生时机体内miR-155 mRNA表达、IL-6水平明显上调,机体炎症反应紊乱,对早期评估病情有一定价值。

微小RNA-15a表达与妊娠期糖尿病患者胎儿心脏畸形的关系分析

目的探讨微小RNA-15a(miR-15a)表达与妊娠期糖尿病(GDM)患者胎儿心脏畸形的关系。方法选取891例GDM患者作为疾病组,同时选取健康孕妇891例作为健康组,检测并比较2组母体血清miR-15a表达。根据疾病组是否发生胎儿心脏畸形将其分为畸形组和非畸形组,比较2组血清miR-15a表达及一般资料。另根据确诊孕周将疾病组患者分为A组和B组,根据空腹血糖升高程度将血糖控制不良患者分为C组和D组。采用多因素Logistic回归分析法分析GDM患者胎儿心脏畸形影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-15a表达对GDM患者胎儿心脏畸形的预测价值。结果疾病组血清miR-15a表达高于健康组,差异有统计学意义(P<0.001)。GDM患者中胎儿心脏畸形发生率为2.87%(24/835)。畸形组血清miR-15a表达、年龄、孕前体质量指数和不良孕产史、血糖控制不良占比高于非畸形组,妊娠早期规律服用叶酸占比低于非畸形组,差异有统计学意义(P<0.05)。A组、B组的血清miR-15a表达、胎儿心脏畸形发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。D组血清miR-15a表达、胎儿心脏畸形发生率高于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-15a表达(OR=16.651,95%CI:6.252~44.344)、年龄(OR=1.078,95%CI:1.006~1.156)、血糖控制不佳(OR=3.404,95%CI:1.852~5.137)是GDM患者胎儿心脏畸形的影响因素(P<0.05)。血清miR-15a表达预测GDM患者胎儿心脏畸形的最佳临界值、灵敏度、特异度、曲线下面积分别为2.34、87.50%、73.24%、0.827(95%CI:0.799~0.852)。结论在GDM患者中,血清miR-15a表达异常升高,其是预测GDM患者胎儿心脏畸形的有效指标。

溃疡性结肠炎患者结肠黏膜组织微小RNA-155和细胞因子信号转导抑制因子1表达与疾病严重程度的相关性

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者结肠黏膜组织微小RNA-155(miR-155)、细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)表达水平与疾病严重程度的关系。方法选取2021年9月至2023年6月河北北方学院附属第二医院收治的UC患者130例。按照改良Mayo评分系统将患者分为活动期组(n=85)和缓解期组(n=45);根据改良Truelove和Witts分型标准将UC活动期患者分为轻度组(n=35)、中度组(n=30)和重度组(n=20)。同时选取健康体检行结肠镜检查或结肠单发息肉切除术后复查结肠镜结果正常并排除其他疾病者共90例作为对照组。收集UC患者病变显著的结肠段黏膜组织和对照组距肛门20 cm处正常结肠黏膜组织。采用荧光定量PCR法测定组织中miR-155、SOCS1 mRNA表达水平,免疫组织化学法测定组织中SOCS1蛋白表达情况,分析UC患者结肠黏膜组织miR-155、SOCS1 mRNA和改良Mayo评分的相关性,评价miR-155、SOCS1 mRNA表达水平对UC活动期患者发生重度病情的预测价值。结果与对照组和缓解期组比较,活动期组结肠黏膜组织miR-155表达水平显著升高,SOCS1 mRNA表达水平、SOCS1蛋白阳性表达率显著降低(P均<0.001)。轻、中、重度组UC活动期患者结肠黏膜组织miR-155表达水平和改良Mayo评分依次升高,SOCS1 mRNA表达水平依次降低(P均<0.001)。UC患者结肠黏膜组织miR-155与改良Mayo评分呈正相关,SOCS1 mRNA与改良Mayo评分呈负相关(P均<0.001)。miR-155高表达(OR=2.762,95%CI=1.284~5.944,P=0.009)、SOCS1 mRNA低表达(OR=2.617,95%CI=1.302~5.258,P=0.007)、改良Mayo评分≥12分(OR=3.232,95%CI=1.450~7.204,P=0.004)是影响UC活动期患者发生重度病情的危险因素。miR-155和SOCS1 mRNA联合预测UC活动期患者发生重度病情的曲线下面积为0.920。结论miR-155、SOCS1 mRNA的表达水平与UC活动期患者的病情严重程度存在相关性,两者联合对UC活动期患者发生重度病情的预测效能较高。

多发性骨髓瘤患者血清微小RNA-625和微小RNA-203的水平及临床意义

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者血清微小RNA-625(miR-625)、血清微小RNA-203(miR-203)水平及临床意义。方法选取2021年6月—2023年8月本院治疗的103例确诊MM患者为观察组,根据多发性骨髓瘤国际分期体系(ISS)分为Ⅰ期(n=23)、Ⅱ期(n=31)和Ⅲ期(n=49)。按照诊疗情况将患者分为初诊组(n=75)和复发组(n=28);另选取103例同期本院体检健康者为对照组。采用逆转录-实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法测定血清miR-625、miR-203水平;采用多因素Logistic回归模型分析MM的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-625、miR-203对MM患者的诊断价值。结果观察组M蛋白、血红蛋白、白蛋白、miR-625和miR-203水平均低于对照组,血肌酐、24 h尿蛋白、尿素氮、血清β_(2)微球蛋白和血清钙水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。初诊组MM患者血清miR-625、miR-203水平均高于复发组,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅱ期、Ⅲ期患者血清miR-625、miR-203水平均低于Ⅰ期患者,Ⅲ期患者血清miR-625、miR-203水平均低于Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。溶骨性病变<2个的MM患者血清miR-203水平低于溶骨性病变≥2个的患者,差异有统计学意义(P<0.05);骨病分级为1~2级的MM患者血清miR-625水平高于骨病分级为3~4级的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-625、miR-203是MM发生的保护因素(P<0.05)。血清miR-625、miR-203诊断MM的曲线下面积(AUC)分别为0.808、0.866,二者联合诊断的AUC为0.919,二者联合诊断优于血清miR-625、miR-203各自单独诊断(Z_(二者联合-miR-625)=3.816、Z_(二者联合-miR-203)=2.157,P=0.001、0.031)。结论MM患者血清miR-625、miR-203水平下降,二者联合对MM具有较高的诊断价值。