LINC00092靶向微小RNA-373-5p对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的影响

目的探究长基因间非蛋白编码RNA 92(LINC00092)在骨肉瘤细胞迁移和侵袭进展中的作用及潜在分子机制。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测人成骨细胞(hFOB1.19)和骨肉瘤细胞系(SOSP-9607、U2-OS、Saos-2和MG-63)中LINC00092的表达水平。选取MG-63细胞并分成LINC00092组(LINC00092过表达)、pcDNA组(阴性对照)和Control组(空白对照)。采用MTT、Transwell实验和划痕实验体外评估MG-63细胞的增殖、侵袭和迁移能力。通过双荧光素酶报告基因实验、qPCR和Western blot筛选并证实微小RNA-373-5p(miR-373-5p)与LINC00092的靶向作用关系。结果与hFOB1.19细胞相比,LINC00092在不同骨肉瘤细胞系中的表达均显著异常下调(P<0.05)。与pcDNA组相比,LINC00092组MG-63细胞活力、细胞划痕愈合率和细胞穿膜数量均下降。miR-373-5p是LINC00092的直接靶点且受其负调控(P<0.05)。此外,LINC00092组增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的mRNA和蛋白水平下调(P<0.05)。结论LINC00092可以靶向负调控miR-373-5p,并影响PCNA和MMP9表达,抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭过程。

血清微小RNA-373在胃癌中的表达水平及其诊断价值

目的 探讨微小RNA-373(miR-373)在胃癌中的表达水平及其诊断价值。方法 选取2021年2月至2023年2月广东医科大学东莞第三临床医学院胃癌诊疗中心收治的胃癌患者80例作为胃癌组,选取同期在广东医科大学东莞第三临床医学院接受胃镜检查,经病理学检查未见肿瘤的胃良性疾病患者80例作为胃良性疾病组,选取同期行健康体检的体检健康者80例作为对照组。采集受试者血清样本,利用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测miR-373的表达水平,并分析其与临床病理特征的相关性。采用全自动化学发光免疫分析法,检测血清糖类抗原199(CA199)和癌胚抗原(CEA)。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-373、CA199和CEA对胃癌的诊断效能。结果 胃癌组血清miR-373、CA199和CEA表达水平均高于胃良性疾病组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-373表达水平与胃癌患者的肿瘤最大径、淋巴结转移和TNM分期密切相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,miR-373、CA199和CEA诊断胃癌的曲线下面积分别为0.880(95%CI:0.819~0.926)、0.874(95%CI:0.813~0.921)、0.836(95%CI:0.769~0.889),miR-373的诊断效能优于传统肿瘤标志物CA199和CEA。结论 miR-373在胃癌组织中呈高表达,且miR-373的表达水平与胃癌的临床病理特征相关,在胃癌的早期诊断中有较高的应用价值。

微小RNA-373靶向调控LATS2的表达及其对肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响

目的探讨微小RNA-373(miR-373)靶向调控大肿瘤抑制因子2(LATS2)的表达及其对肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)法检测HepG2细胞及正常肝细胞LO2中miR-373的表达水平,采用Lipofectamine脂质体法将miR-373抑制剂及阴性对照转染至HepG2细胞并分为抑制剂组和对照组,采用QPCR法检测两组的miR-373水平以评价转染效果,MTT法和流式细胞术分别检测各组细胞的增殖及凋亡情况,Western blotting检测各组凋亡相关基因(Bax和caspase-3)及LATS2的表达情况,采用双荧光素酶报告实验验证miR-373与LATS2间的靶标关系。结果与LO2细胞相比,HepG2细胞中miR-373的表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);转染后抑制剂组的miR-373水平低于对照组(P<0.05),提示抑制HepG2细胞miR-373表达成功;与对照组比较,抑制组的细胞增殖率降低,凋亡率及Bax、caspase-3和LATS2蛋白水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验表明miR-373可显著抑制野生型LATS2-3’UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性,而对突变型LATS2-3’UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性并无影响。结论 miR-373可靶向调控LATS2的表达,且抑制miR-373表达可抑制HepG2细胞增殖并诱导凋亡,为肝癌的靶向治疗提供一定参考。

基于磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白信号通路小干扰RNA沉默微小RNA-373对喉癌细胞的影响

目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(Protein kinase B,Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)沉默微小RNA-373(Microrna-373,miR-373)对喉癌细胞生物学行为的影响。方法 喉癌TU212细胞株经常规培养后分为空白组、空白转染组、过表达组和沉默组,四组细胞分别培养。检测各组细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力及PI3K/AKT/mTOR通路蛋白表达。结果 与过表达组相比,沉默组miR-373、P13K、AKT、mTOR表达量较低(P<0.05);沉默组24、48、72 h细胞增殖率较低,72 h细胞凋亡率较高(P<0.05);沉默组细胞迁移率较少、侵袭数较少(P<0.05)。结论 沉默miR-373可能通过作用于PI3K/AKT/mTOR信号通路,下调P13K、AKT、mTOR表达,抑制喉癌细胞增殖、迁移、侵袭,促进凋亡。

高分辨率MRI联合微小RNA-135a-5p、微小RNA-373对宫颈癌的诊断价值研究

目的探讨高分辨率MRI联合微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)、微小RNA-373(miR-373)对宫颈癌的诊断价值。方法选取2018年9月至2020年9月浙江省台州医院进行宫颈病理检查的患者132例,根据病理诊断结果将其分为宫颈癌89例(恶性组)与宫颈癌前病变43例(良性组),所有患者均给予高分辨率MRI检查,记录检查参数并分析诊断价值,采用实时荧光定量(RT-PCR)检测两组患者血清miR-135a-5p、miR-373表达水平,分析高分辨率MRI、miR-135a-5p、miR-373表达水平与宫颈癌的关系,以及单项检测和3项联合检测的诊断价值。结果与良性组相比,恶性组miR-135a-5p、miR-373表达水平较高(均P<0.05)。阳性高危型HPV、鳞癌、低分化、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴血管间隙浸润及深浸润宫颈癌患者miR-135a-5p、miR-373表达水平均高于阴性高危型HPV、腺癌、高与中分化、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴血管间隙浸润及无浸润与浅浸润宫颈癌患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,与高分辨率MRI、miR-135a-5p、miR-373单项检测相比,3项联合检测对宫颈癌的诊断效能较高(P<0.05)。结论高分辨率MRI可准确显示宫颈癌的征象,miR-135a-5p、miR-373在宫颈癌患者血清中呈异常高表达且与患者临床特征有关,3项联合检测对宫颈癌的诊断价值较高。

微小RNA-373在肝门部胆管癌细胞中的达和靶向甲基CpG结合蛋白2的作用

目的 分析微小RNA（miR）-373在肝门部胆管癌的表达与临床病理因子之间的关系,探讨miR-373靶向甲基CpG结合蛋白2（MBD2）-3’端非翻译区（3＇ UTR）的机制.方法 TaqMan miRNA Assay检测miR-373的表达,采用QuantiTect_Primer Assays和Western blot法分析甲基CpG结合蛋白（MBPs） mRNA和蛋白水平；双荧光素酶报告基因检测miR-373对MBD2-3＇ UTR的靶向作用.结果 miR-373在肝门部胆管癌中上调2.94倍（P＜0.01）.与高表达组比较,miR-373低表达与肿瘤细胞低分化（P＜0.05）、高分期（P＜0.05）、短总生存和无病生存时间（P＜0.05）相关.miR-373低表达肿瘤组织中,MBD2的mRNA和蛋白表达分别上调3.75倍（P＜0.01）、2.34倍（P＜0.05）；miR-373前体抑制MBD2-3＇ UTR荧光素酶活性1.79倍；外源性miR-373和anti-miR-373分别下调QBC939细胞、上调人肝内胆管上皮细胞（HIBEpic）中MBD2表达2.56倍（P＜0.01）和2.13倍（P＜0.01）.结论 miR-373通过结合在MBD2-3＇ UTR,抑制MBD2表达.肝门部胆管癌中,miR-373下调导致MBD2表达增高,与肿瘤进展和预后密切相关.

微小RNA-373表达下调对皮肤鳞状细胞癌A431细胞周期和凋亡的影响

目的探讨微小RNA-373(miR-373)表达下调对皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)A431细胞周期和凋亡的影响。方法将对数生长期A431细胞分为3组,miR-373抑制剂组和阴性对照组分别转染miR-373抑制剂和阴性对照miRNA,未处理组不做任何处理。转染后48 h,采用实时PCR检测各组miR-373的表达水平;采用CCK-8试剂分析miR-373表达下调对A431细胞增殖的影响,流式细胞仪检测不同处理组A431细胞周期分布和凋亡的变化,最后采用比色法检测各组胱天蛋白酶3(caspase-3)活性的变化。两组之间数据比较采用t检验,3组及以上采用单因素方差分析,两两组间比较采用LSD-t检验。结果 miR-373抑制剂组miR-373表达水平为0.120 ± 0.036,显著低于未处理组(1.002 ± 0.022)和阴性对照组(1.037 ± 0.028),t值分别为36.21、34.83,均P < 0.001。miR-373抑制剂组在48、72和96 h细胞增殖活性均显著低于未处理组和阴性对照组,F值分别为10.805、13.720和30.907,P值分别为0.038、0.010和0.001)。miR-373抑制剂组G0/G1期比例为64.69%± 1.18%,显著高于未处理组(52.74%± 0.66%)和阴性对照组(53.80%± 0.80%),t值分别为15.51和13.24,均P < 0.001;总凋亡细胞比例为22.69%± 1.24%,显著高于未处理组(9.62%± 1.14%)和阴性对照组(9.66%± 0.97%),均P < 0.001;caspase-3活性为1.238 ± 0.057,显著高于未处理组(0.413 ± 0.028)和阴性对照组(0.437 ± 0.036)(均P < 0.001)。结论 miR-373可能在皮肤鳞癌细胞周期调控和凋亡诱导中发挥重要作用。

微小RNA-373靶定E2F转录因子5降低胶质瘤细胞恶性表型

目的观察微小RNA（miRNA，miR）-373对胶质瘤细胞恶性表型的影响，探讨miR-373调控胶质瘤发生发展的分子机制。方法利用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测胶质瘤组织及正常脑组织中miR-373的表达水平；利用噻唑蓝（MTT）比色法及Transwell侵袭实验检测miR-373对胶质瘤细胞U251活性及侵袭能力的影响；通过生物信息学方法，筛选miR-373的靶基因，利用荧光报告载体实验结合Real-time PCR和Western blot验证miR-373对靶基因的直接调控作用。结果将正常脑组织和人正常星形细胞株中miR-373的表达水平标化为1，胶质瘤组织和U251、U87、A172、U118细胞中miR-373的相对表达水平分别为0.36±0.14、0.21±0.04、0.32±0.05、0.35±0.04、0.56±0.12，差异有统计学意义（t＝－7.862，P＝0.006；t＝－9.211，P＝0.004；t＝－8.090，P＝0.005；t＝－7.953，P＝0.006；t＝－6.254，P＝0.007）。miR-373转染U251细胞48 h后，细胞活性和侵袭能力与对照组比较显著降低[活性：0.25±0.03比0.63±0.08；穿膜细胞数：（41.5±5.7）个比（118.5±9.8）个；t＝－12.561，P＝0.002；t＝－10.792，P＝0.003]。过表达miR-373后，含有E2F转录因子5的3’端非编码区域（E2F5 3’UTR）的荧光报告载体的细胞组荧光值为1.49±0.21，对照组的荧光值为2.23±0.32，差异有统计学意义（t＝－9.804，P＝0.004）。结论miR-373通过靶向抑制E2F5表达降低胶质瘤细胞的恶性生物学活性。

子宫内膜癌组织微小RNA-373表达情况及其对子宫内膜癌细胞增殖、迁移的影响研究

背景微小RNA-373 (miRNA-373)在多种恶性肿瘤(如肝癌、肺癌)的发生发展过程中具有重要作用,但其在子宫内膜癌(EC)发生发展中的作用尚不完全清楚。目的探讨EC组织miRNA-373表达情况及其对EC细胞增殖、迁移的影响。方法选取2012年6月-2013年6月在邯郸市妇幼保健院行手术治疗的64例EC患者的EC组织作为试验组,另选取同期在邯郸市妇幼保健院行子宫切除术的30例良性子宫肌瘤患者的正常组织作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测两组miRNA-373表达情况,绘制Kaplan-Meier生存曲线以分析不同miRNA-373表达情况EC患者术后5年预后;分别比较转染miRNA-373模拟物(miRNA-373 mimic)及其阴性对照物(mimic-NC)、miRNA-373抑制剂(miRNA-373 inhibitor)及其阴性对照物(inhibitor-NC)的HEC-1B细胞大型肿瘤抑制基因2 (LATS2)表达情况、转染96 h后吸光度值、迁移细胞数量;采用双荧光素酶报告基因系统验证miRNA-373与LATS2间的靶标关系。结果 (1)试验组miRNA-373相对表达量高于对照组(P<0.05)。根据miRNA-373相对表达量平均值将试验组患者分为低表达组(n=26)和高表达组(n=38),Kaplan-Meier生存曲线显示,高表达组患者术后5年累积生存率为52.6%,低于低表达组的84.6%(P<0.05)。(2)转染miRNA-373 mimic的HEC-1B细胞LATS2相对表达量低于转染mimic-NC的HEC-1B细胞(P<0.05);转染miRNA-373 inhibitor的HEC-1B细胞LATS2相对表达量高于转染inhibitor-NC的HEC-1B细胞(P<0.05)。转染96 h后,转染miRNA-373 mimic的HEC-1B细胞吸光度值高于转染mimic-NC的HEC-1B细胞(P<0.05);转染miRNA-373 inhibitor的HEC-1B细胞吸光度值低于转染inhibitor-NC的HEC-1B细胞(P<0.05)。转染miRNA-373 mimic的HEC-1B细胞中迁移细胞数量多于转染mimic-NC的HEC-1B细胞(P<0.05);转染miRNA-373 inhibitor的HEC-1B细胞中迁移细胞数量少于转染inhibitor-NC的HEC-1B细胞(P<0.05)。(3)双荧光素酶报告基因系统检测结果显示,LATS2含有miRNA-373的潜在结合位点。野生型LATS2中miRNA-373相对荧光强度低于空载对照(P<0.05);突变型LATS2中miRNA-373相对荧光强度与空载对照比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EC组织miRNA-373呈高表达,其可通过直接靶向调节LATS2的表达而促进EC细胞增殖、迁移,进而影响EC患者预后。

多发性骨髓瘤患者骨髓组织中miRNA-181a、miRNA-373的表达及相关性分析

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓组织中微小RNA-181a(miRNA-181a)与miRNA-373的表达,探讨其临床意义。方法选取2015年3月～2017年3月浙江省台州市第一人民医院收治的67例MM患者作为病例组,选取同期患其他血液疾病的40例患者作为病例对照组、40例健康体检人员作为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组骨髓组织中miRNA-181a及miRNA-373的表达,分析各组间两者的表达差异及其与MM临床病理特征的关系。Pearson线性相关分析分析miRNA-181a与miRNA-373表达的相关性。结果分别与病例对照组及健康对照组比较,病例组miRNA-181a表达明显较高,miRNA-373表达明显较低(P <0.05),而病例对照组与健康对照组miRNA-181a、miRNA-373表达差异无统计学意义(P> 0.05)。病例组患者骨髓组织中miRNA-181a、miRNA-373表达与肿瘤分期、肿瘤分化有关(均P <0.05),其与年龄、性别、细胞学分型及淋巴结转移无关(均P> 0.05)。病例组骨髓组织中miRNA-181a与miRNA-373表达呈明显负相关(r=-0.696,P <0.05)。病例对照组和健康对照组的miRNA-181a与miRNA-373表达无相关性(r=0.151、0.179,均P> 0.05)。结论 MM骨髓组织中miRNA-181a表达升高,而miRNA-373表达降低,两者共同参与肿瘤的发生、发展过程,可能成为新的MM诊断、治疗及预后评估的标志物。

沉默miR-373对喉癌细胞增殖、凋亡能力的影响及作用机制研究

目的探究沉默RNA-373(miR-373)对喉癌细胞增殖、凋亡能力的影响及作用机制研究。方法将喉癌细胞分为对照组、过表达组、沉默组3组,并通过细胞转染建立稳定转染的过表达组和沉默组。采用MTT法检测细胞增殖能力,TUNEL法检测细胞凋亡能力,Transwell小室检测细胞侵袭,细胞划痕实验检测细胞迁移,蛋白质印迹法检测各组细胞Wnt/β-catenin信号通路β-连锁蛋白(β-catenin)、c-myc、细胞周期素D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、Bc1-2、Bax蛋白表达量。结果与过表达组相比,沉默组miR-373表达量明显下降(t=15.062,P<0.05)。与过表达组相比,沉默组细胞凋亡率较高,细胞不同时间点增殖率较低(t=31.025、16.453、22.475、29.672,P<0.05);与过表达组相比,沉默组细胞侵袭能力、迁移数均较低(t=35.254、37.205,P<0.05)。与过表达组相比,沉默组β-catenin、c-myc、CyclinD1、MMP-9、Bc1-2蛋白表达量较低,Bax蛋白较高(t=4.218、5.307、4.609、5.005、4.328、3.984,P<0.05)。结论沉默miR-373可能通过促进Bax表达,抑制β-catenin、c-myc、CyclinD1、MMP-9、Bc1-2表达,阻滞Wnt/β-catenin信号通路,从而促进喉癌细胞凋亡,抑制喉癌细胞侵袭、增殖、迁移。

多发性骨髓瘤患者骨髓组织中miR-181a和miR-373的表达及临床意义

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓组织中微小RNA-181a(miR-181a)和微小RNA-373(miR-373)的表达及临床意义。方法收集2013年1月至2018年3月收治的MM患者64例(MM组),并选取同时期进行骨髓穿刺并最后明确骨髓功能无异常的健康者64例(正常对照组)。采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测两组骨髓组织中miR-181a、miR-373的表达水平,并分析两者与MM临床病理特征的关系;采用Pearson法分析miR-181a和miR-373表达的相关性。结果 MM组骨髓组织中miR-181a的表达水平为112. 68±16. 53,高于正常对照组的75. 94±10. 02,差异有统计学意义(P<0. 01); miR-373的表达水平为0. 36±0. 06,低于正常对照组的1. 12±0. 10,差异有统计学意义(P<0. 01)。MM患者骨髓组织中miR-181a和miR-373的表达呈负相关(r=-0. 928,P<0. 001)。miR-181a和miR-373表达水平与MM患者的年龄、临床分期、分化程度及淋巴结转移有关(P<0. 001),与性别及一般分型无关(P>0. 05)。结论 miR-181a、miR-373在MM骨髓组织中分别为高表达和低表达,两者表达存在负相关,并与临床分期、淋巴结转移和分化程度有关,可作为MM潜在的分子筛查标志物。

LncRNA ZFAS1靶向miR-373导致肝癌细胞顺铂耐药的机制研究

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)锌指结构反义转录本1(ZFAS1)靶向微小RNA(miR)-373导致肝癌细胞顺铂(DDP)耐药的机制。方法HepG2细胞设正常培养组、si-NC组、si-ZFAS1组,实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中ZFAS1、miR-373表达水平。在si-NC组、si-ZFAS1组基础上分别添加0、50、100、200、300μmol/L DDP处理细胞12 h,CCK-8检测细胞增殖情况,Transwell检测细胞侵袭情况,蛋白免疫印迹检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9蛋白表达水平。双荧光素酶验证ZFAS1与miR-373的靶向关系。在si-ZFAS1组基础上添加inhibitor miR-373,检测细胞中MMP2、MMP9蛋白表达水平。结果si-ZFAS1组细胞中ZFAS1表达水平均低于正常培养组和si-NC组,miR-373表达水平均高于正常培养组和si-NC组(P<0.05)。si-NC组和si-ZFAS1组经不同浓度顺铂处理后细胞增殖率、侵袭数量、侵袭蛋白MMP2、MMP9表达水平基本呈降低趋势;si-ZFAS1组上述指标分别低于其对应浓度的si-NC组(P<0.05)。Starbase分析发现,miR-373与ZFAS1存在互补的结合位点并经双荧光素酶验证。si-ZFAS1+inhibitor miR-373组细胞MMP2、MMP9蛋白表达水平高于si-ZFAS1组和si-ZFAS1+inhibitor NC组(P<0.05)。结论ZFAS1可能降低肝癌细胞DDP耐药,其机制可能与调控miR-373有关。

尿液外泌体miR-106a联合miR-373诊断前列腺癌的价值

目的探讨尿液外泌体微小RNA-106a(miR-106a)联合微小RNA-373(miR-373)诊断前列腺癌的应用价值。方法选取2016年11月至2018年4月在本院就诊的前列腺癌患者69例作为观察组,另选取同期在本院进行常规体检的健康男性69例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测尿液外泌体中miR-106a、miR-373的表达情况。分析miR-106a、miR-373表达与前列腺癌临床病理特征的关系。分别以miR-106a、miR-373水平为检验变量绘制受试者工作特性曲线(ROC),采用四表格分析血清前列腺特异性抗原(PSA)以及miR-106a联合miR-373检测诊断前列腺癌的应用价值,结果观察组miR-106a、miR-373的表达均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。前列腺癌患者尿液外泌体中miR-106a、miR-373的表达水平与临床分期、淋巴结转移和远处转移有关(P<0.05)。血清PSA诊断前列腺癌的灵敏度为94.2%,特异度为26.1%。前列腺癌患者尿液外泌体中miR-106a、miR-373水平ROC曲线的AUC分别为0.852、0.821,灵敏度分别为82.6%、72.5%,特异度分别为72.5%、78.3%。miR-106a联合miR-373诊断前列腺癌的灵敏度为92.8%,特异度为72.5%。结论miR-106a联合miR-373检测诊断前列腺癌的灵敏度、特异度均较好,具有一定的临床应用价值。

胃癌患者血清中miR-373和miR-592的表达变化及意义

目的观察胃癌患者血清miR-373和miR-592表达变化,并探讨其意义。方法选取胃癌患者75例(胃癌组),同时选择体检健康者40例作为对照组。采用RT-PCR检测两组血清中的miR-373和miR-592,分析miR-373和miR-592表达与胃癌患者临床病理特征的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清中miR-373和miR-592表达对胃癌的诊断价值;采用Kaplan-Meier生存曲线分析血清中miR-373和miR-592表达对胃癌患者生存预后的影响。结果胃癌组血清中miR-373、miR-592的相对表达量高于对照组(P均<0.01)。胃癌患者血清中miR-373和miR-592的表达与淋巴结转移和TNM分期有关(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清中miR-373表达诊断胃癌的曲线下面积为0.904(95%CI:0.845~0.963,P<0.01),最佳诊断界值为4.93,此时其特异性为0.950,敏感性为0.787;血清中miR-592表达诊断胃癌的曲线下面积为0.941(95%CI:0.900~0.982,P<0.01),最佳诊断界值为1.24,此时其特异性为0.850,敏感性为0.893。分别以胃癌患者血清中miR-373、miR-592相对表达量中位数值为截断值,将患者分别分为miR-373高表达(43例)、miR-373低表达(32例)和miR-592高表达(47例)、miR-592低表达(28例)。Kaplan-Meier生存曲线结果显示,miR-373低表达者预后生存率高于miR-373高表达者(P<0.05)。结论miR-373和miR-592在胃癌患者血清中表达升高,可能与胃癌的转移有关,对胃癌的诊断有一定价值。miR-373高表达可能作为患者预后生存不良的标志物。

子痫前期患者胎盘组织miR-373、PDCD4表达与胎盘螺旋动脉重铸的关系

目的检测微小RNA-373(miR-373)、程序性细胞死亡因子4(PDCD4)在子痫前期患者胎盘组织中的表达水平,探讨miR-373、PDCD4表达与胎盘螺旋动脉重铸的关系。方法选择2019年4月至2020年11月在恩施州中心医院产科建卡并首次诊断为子痫前期的43例孕妇为研究对象(子痫前期组),另选正常妊娠孕妇45例作为对照组,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测胎盘组织miR-373、PDCD4mRNA表达水平,免疫印迹法检测胎盘组织中PDCD4蛋白表达;Pearson法分析胎盘组织miR-373、PDCD4表达水平与螺旋动脉管壁厚度及管腔面积的相关性。结果子痫前期组入院收缩压与舒张压显著高于对照组(P<0.001);两组年龄、体重指数及分娩孕周比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,子痫前期组胎盘组织中miR-373表达水平、平均管腔面积显著降低,PDCD4mRNA及蛋白表达水平、平均管壁厚度显著升高,差异具有统计学意义(P<0.001)。子痫前期患者胎盘组织中miR-373与管壁厚度呈负相关(r=-0.411,P=0.006),与管腔面积呈正相关(r=0.547,P<0.001);PDCD4与管壁厚度呈正相关(r=0.439,P=0.003),与管腔面积呈负相关(r=-0.663,P<0.001)。结论子痫前期患者胎盘组织中miR-373低表达,PDCD4高表达,两者均与子痫前期胎盘螺旋动脉重铸障碍过程有关。

miR-373-3p调控小窝蛋白1逆转膀胱癌细胞顺铂耐药的机制研究

目的探讨微小RNA-373-3p(miR-373-3p)靶向小窝蛋白1(Cav1)对膀胱癌细胞顺铂(DDP)耐药性的影响。方法建立膀胱癌DDP耐药细胞株T24/DDP,RT-qPCR检测T24细胞与T24/DDP细胞中miR-373-3p表达,在T24/DDP细胞中过表达miR-373-3p或抑制Cav1表达,每组实验设置6个复孔,MTT法检测DDP对T24/DDP细胞的半数抑制浓度(IC50)及细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;免疫印迹法检测细胞中Cav1、多药耐药相关蛋白(MRP)、P-糖蛋白(P-gp)蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-373-3p与Cav1的靶向关系。结果与T24细胞比较,T24/DDP细胞中miR-373-3p表达水平降低(0.34±0.06 vs.1.00±0.18,t=8.521,P<0.001),Cav1蛋白表达水平升高(0.95±0.10 vs.0.41±0.06,t=11.342,P<0.001);双荧光素酶报告基因实验证明miR-373-3p可靶向负调控Cav1表达;T24/DDP细胞中过表达miR-373-3p或抑制Cav1表达,细胞凋亡率显著升高(均P<0.05),细胞增殖活性、DDP对细胞的IC50值及MRP、P-gp蛋白表达水平显著降低(均P<0.05);过表达Cav1可逆转过表达miR-373-3p对T24/DDP细胞耐药性的抑制作用。结论miR-373-3p可靶向下调Cav1表达逆转T24/DDP细胞对DDP的耐药性。