目的:探讨血浆微小RNA-9-5p(microRNA-9-5p,miR-9-5p)表达水平预测奥氮平治疗精神分裂症疗效的价值。方法:纳入杭州市第七人民医院2021年6月至2023年6月收治的78例奥氮平单药治疗的精神分裂症患者为研究对象,连续观察4周,采用阳性与阴...目的:探讨血浆微小RNA-9-5p(microRNA-9-5p,miR-9-5p)表达水平预测奥氮平治疗精神分裂症疗效的价值。方法:纳入杭州市第七人民医院2021年6月至2023年6月收治的78例奥氮平单药治疗的精神分裂症患者为研究对象,连续观察4周,采用阳性与阴性症状量表(positive and negative syndrome scale,PANSS)评定疗效。采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测血浆miR-9-5p表达水平。结果:基线血浆miR-9-5p表达水平与PANSS量表阴性症状减分率、一般精神病理症状减分率及总减分率呈负相关(r=-0.248、-0.320、-0.360,P均<0.05),治疗后血浆miR-9-5p表达水平增加量与PANSS量表阳性症状减分率、阴性症状减分率、一般精神病理症状减分率及总减分率呈正相关(r=0.236、0.317、0.436、0.462,P均<0.05)。miR-9-5p基线表达水平预测奥氮平治疗精神分裂症疗效的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.7792(95%CI:0.6692~0.8892),灵敏度为63.33%,特异度为83.33%,miR-9-5p表达水平增加量预测奥氮平治疗精神分裂症疗效的AUC为0.8278(95%CI:0.7248~0.9308),灵敏度为79.17%,特异度为83.33%。生物信息学分析表明,miR-9-5p预测靶基因参与多种与神经系统功能密切相关的生物学过程,富集于ErbB信号通路、神经营养素信号通路、MAPK信号通路等通路。结论:血浆miR-9-5p表达水平一定程度上可以预测奥氮平治疗精神分裂症的临床疗效。展开更多
目的:探讨微小RNA-9-5p(mi R-9-5p)调控肿瘤高甲基化基因1(hypermethylated in cancer 1,HIC1)对乳腺癌MDA-MB-231细胞对化疗药多柔比星敏感性的影响及其作用机制。方法:(1)使用慢病毒转染建立上调或下调mi R-9-5p细胞,加入不同浓度多...目的:探讨微小RNA-9-5p(mi R-9-5p)调控肿瘤高甲基化基因1(hypermethylated in cancer 1,HIC1)对乳腺癌MDA-MB-231细胞对化疗药多柔比星敏感性的影响及其作用机制。方法:(1)使用慢病毒转染建立上调或下调mi R-9-5p细胞,加入不同浓度多柔比星后,用CCK-8和流式细胞仪检测细胞活力和凋亡情况。(2)通过反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白质印迹试验检测上调或下调miR-9-5p时HIC1的表达情况。通过数据库资料、双荧光素酶报告基因系统验证miR-9-5p与HIC1的关系。(3)下调HIC1,观察加入多柔比星后细胞活力和凋亡情况。结果:(1)上调miR-9-5p可提高细胞活力、抑制凋亡。下调mi R-9-5p可降低细胞活力、促进凋亡。(2)miR-9-5p靶向HIC1,两者的表达呈负相关。(3)抑制HIC1的表达,可逆转miR-9-5p下调的作用。结论:miR-9-5p可通过下调HIC1降低乳腺癌细胞对多柔比星的敏感性。展开更多
[目的]探讨微小RNA(miR)-9-5p在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)中表达及影响其生物学行为的机制。[方法]实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)测定40例PDAC与正常人胰腺细胞系HPDE6-C7中miR-9-5p的表达。miR-9-5...[目的]探讨微小RNA(miR)-9-5p在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)中表达及影响其生物学行为的机制。[方法]实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)测定40例PDAC与正常人胰腺细胞系HPDE6-C7中miR-9-5p的表达。miR-9-5p模拟物转染PDAC细胞株PANC-1;甲基噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性;划痕实验、Transwell侵袭实验测定细胞侵袭、迁移能力。qPCR及蛋白印迹实验检测RhoA、ROCK1、PCNA、CyclinD1、MMP-2、MMP-9及p21表达。双荧光素酶报告基因分析实验检测miR-9-5p对RhoA的调控功能。[结果](1)临床样本中miR-9-5p在PDAC组织中的表达显著性低于癌旁组织(0.34±0.08 vs 1.01±0.24,t=13.222,P<0.001)。miR-9-5p表达降低与胰腺癌淋巴结转移、肿瘤分期存在相关性。(2)miR-9-5p在胰腺癌细胞系PANC-1中表达明显低于正常人胰腺细胞系HPDE6-C7(0.28±0.04 vs 0.53±0.05,t=7.204,P=0.019)。(3)双荧光素酶报告基因分析结果表明,野生型RhoA的荧光素酶活性在转染miR-9-5p模拟物后较对照组降低(0.99±0.08 vs0.22±0.02,P<0.001)。(4)转染后,转染组细胞增殖活性降低(0.53±0.07 vs 1.09±0.11、1.13±0.08,P均<0.001),侵袭距离减少(0.28±0.07μm vs 0.66±0.05μm、0.64±0.07μm,P均<0.001),迁移细胞数减少(32.83±2.99 vs 70.00±4.29、65.67±5.79,P均<0.001)。(5)与阴性对照组及Scramble组比较,miR-9-5p模拟物转染组RhoA、ROCK1、PCNA、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9表达显著性降低,p21表达升高(P均<0.05)。[结论]胰腺导管腺癌细胞中miR-9-5p表达降低;过表达miR-9-5p后能明显抑制PANC-1细胞的体外增殖、侵袭及迁移,其调控机制可能与RhoA信号通路相关。展开更多
目的:研究微小RNA-9(microRNA-9,miR-9)对胃癌SGC-7901细胞上皮-间充质转化(EMT)功能的影响及其相关机制。方法:SGC-7901胃癌细胞株分别转染miR-9 mimics和阴性对照序列(negative control mimic,NCM),作为miR-9组和NCM组,并设立未转染对...目的:研究微小RNA-9(microRNA-9,miR-9)对胃癌SGC-7901细胞上皮-间充质转化(EMT)功能的影响及其相关机制。方法:SGC-7901胃癌细胞株分别转染miR-9 mimics和阴性对照序列(negative control mimic,NCM),作为miR-9组和NCM组,并设立未转染对照(control)组,采用RT-qPCR法检测各组细胞miR-9的含量,Transwell实验检测3组细胞迁移能力和侵袭能力,Western blot法检测3组细胞的N-cadherin、E-cadherin、α-catenin和神经纤毛蛋白1(NRP1)表达水平。采用Western blot法检测NRP1过表达对miR-9抑制EMT的拮抗作用。双萤光素酶实验检测miR-9与NRP1的关系。结果:miR-9组的miR-9表达水平明显上调,为control组的538倍(P<0.05)。miR-9组的迁移细胞数量明显低于control组(P<0.05)。miR-9组的侵袭细胞数量明显低于control组(P<0.05)。miR-9组细胞的N-cadherin和NRP1蛋白表达量明显降低,E-cadherin及α-catenin蛋白表达量明显升高。而NRP1及miR-9均过表达组胃癌细胞中N-cadherin蛋白表达量明显升高,E-cadherin及α-catenin蛋白表达量明显降低。双萤光素酶检验结果显示NRP1为miR-9的下游靶基因(P<0.05)。结论:miR-9可能通过降低下游靶基因NRP1水平影响EMT相关蛋白表达,抑制胃癌SGC-7901细胞的EMT功能。展开更多
文摘目的:探讨血浆微小RNA-9-5p(microRNA-9-5p,miR-9-5p)表达水平预测奥氮平治疗精神分裂症疗效的价值。方法:纳入杭州市第七人民医院2021年6月至2023年6月收治的78例奥氮平单药治疗的精神分裂症患者为研究对象,连续观察4周,采用阳性与阴性症状量表(positive and negative syndrome scale,PANSS)评定疗效。采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测血浆miR-9-5p表达水平。结果:基线血浆miR-9-5p表达水平与PANSS量表阴性症状减分率、一般精神病理症状减分率及总减分率呈负相关(r=-0.248、-0.320、-0.360,P均<0.05),治疗后血浆miR-9-5p表达水平增加量与PANSS量表阳性症状减分率、阴性症状减分率、一般精神病理症状减分率及总减分率呈正相关(r=0.236、0.317、0.436、0.462,P均<0.05)。miR-9-5p基线表达水平预测奥氮平治疗精神分裂症疗效的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.7792(95%CI:0.6692~0.8892),灵敏度为63.33%,特异度为83.33%,miR-9-5p表达水平增加量预测奥氮平治疗精神分裂症疗效的AUC为0.8278(95%CI:0.7248~0.9308),灵敏度为79.17%,特异度为83.33%。生物信息学分析表明,miR-9-5p预测靶基因参与多种与神经系统功能密切相关的生物学过程,富集于ErbB信号通路、神经营养素信号通路、MAPK信号通路等通路。结论:血浆miR-9-5p表达水平一定程度上可以预测奥氮平治疗精神分裂症的临床疗效。
文摘目的:探讨微小RNA-9-5p(mi R-9-5p)调控肿瘤高甲基化基因1(hypermethylated in cancer 1,HIC1)对乳腺癌MDA-MB-231细胞对化疗药多柔比星敏感性的影响及其作用机制。方法:(1)使用慢病毒转染建立上调或下调mi R-9-5p细胞,加入不同浓度多柔比星后,用CCK-8和流式细胞仪检测细胞活力和凋亡情况。(2)通过反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白质印迹试验检测上调或下调miR-9-5p时HIC1的表达情况。通过数据库资料、双荧光素酶报告基因系统验证miR-9-5p与HIC1的关系。(3)下调HIC1,观察加入多柔比星后细胞活力和凋亡情况。结果:(1)上调miR-9-5p可提高细胞活力、抑制凋亡。下调mi R-9-5p可降低细胞活力、促进凋亡。(2)miR-9-5p靶向HIC1,两者的表达呈负相关。(3)抑制HIC1的表达,可逆转miR-9-5p下调的作用。结论:miR-9-5p可通过下调HIC1降低乳腺癌细胞对多柔比星的敏感性。
文摘[目的]探讨微小RNA(miR)-9-5p在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)中表达及影响其生物学行为的机制。[方法]实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)测定40例PDAC与正常人胰腺细胞系HPDE6-C7中miR-9-5p的表达。miR-9-5p模拟物转染PDAC细胞株PANC-1;甲基噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性;划痕实验、Transwell侵袭实验测定细胞侵袭、迁移能力。qPCR及蛋白印迹实验检测RhoA、ROCK1、PCNA、CyclinD1、MMP-2、MMP-9及p21表达。双荧光素酶报告基因分析实验检测miR-9-5p对RhoA的调控功能。[结果](1)临床样本中miR-9-5p在PDAC组织中的表达显著性低于癌旁组织(0.34±0.08 vs 1.01±0.24,t=13.222,P<0.001)。miR-9-5p表达降低与胰腺癌淋巴结转移、肿瘤分期存在相关性。(2)miR-9-5p在胰腺癌细胞系PANC-1中表达明显低于正常人胰腺细胞系HPDE6-C7(0.28±0.04 vs 0.53±0.05,t=7.204,P=0.019)。(3)双荧光素酶报告基因分析结果表明,野生型RhoA的荧光素酶活性在转染miR-9-5p模拟物后较对照组降低(0.99±0.08 vs0.22±0.02,P<0.001)。(4)转染后,转染组细胞增殖活性降低(0.53±0.07 vs 1.09±0.11、1.13±0.08,P均<0.001),侵袭距离减少(0.28±0.07μm vs 0.66±0.05μm、0.64±0.07μm,P均<0.001),迁移细胞数减少(32.83±2.99 vs 70.00±4.29、65.67±5.79,P均<0.001)。(5)与阴性对照组及Scramble组比较,miR-9-5p模拟物转染组RhoA、ROCK1、PCNA、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9表达显著性降低,p21表达升高(P均<0.05)。[结论]胰腺导管腺癌细胞中miR-9-5p表达降低;过表达miR-9-5p后能明显抑制PANC-1细胞的体外增殖、侵袭及迁移,其调控机制可能与RhoA信号通路相关。
