CdS微球体的水热法制备及紫外-可见光谱分析

本文以水热法制得了CdS微球体,采用XRD、SEM、TEM等测试手段对产物进行了表征。实验结果表明,硫源、溶剂及其浓度对产物的形貌有显著影响。在180℃下,以硫脲为硫源,EDTA-二钠饱和水溶液为溶剂制得的CdS微球体具有良好的形貌,外形规则,直径大约2￣5μm。紫外-可见光谱分析表明CdS微球体的吸收峰与体相CdS相比出现了蓝移。

微球体光散射的研究

利用Mie散射理论对微球体光散射特性进行了研究,分析了散射光的偏振、分布规律及微球体对光的散射、吸收与半径的关系。结果表明,微球体的半径大小对光散射及吸收有较大的影响。分析结果可为实际应用中微透镜尺寸的选择以及微透镜阵列光学性能的进一步分析提供依据。

基于Mie散射理论的微球体颗粒半径分析

为高效、经济、准确地对微球体颗粒的半径进行测量,基于Mie散射理论设计了一种测量装置。本文应用Mie散射理论对微球体颗粒光散射的性质进行了理论分析与数值计算,得出了散射光分布与入射光波长、微球体颗粒半径以及微球体相对折射率之间的关系。结果表明:入射光波长越小,散射光能量越集中分布在散射角较小的范围内;相对折射率的变化对散射光分布的影响不大;不同半径颗粒的散射光强的分布差异较大,因此通过测量散射光的分布可以确定微球体颗粒的半径,从理论上证明了该设计方案的可行性。结合理论分析与计算结果设计了一种用于测量微球体颗粒半径的装置,该装置具有结构简单、成本低、效率高等优点,可以用于实际测量,具有一定的实用性。

人结直肠癌干细胞微球体培养及鉴定

目的探索结直肠癌细胞系干细胞微球体培养方法,并对Colo205细胞微球体是否具有肿瘤干细胞特性进行鉴定。方法结直肠癌Lovo、Colo205及SW480细胞在含生长因子无血清培养基(SFM)中悬浮培养。流式细胞术、裸鼠成瘤实验、Transwell小室实验分别检测Colo205细胞及其微球体表面标记分子CD133、CD44表达,体内成瘤能力和体外侵袭能力。微球体细胞在含血清培养基中贴壁培养后流式检测CD44分子表达变化。RT-PCR分析Colo205细胞及其微球体CD44、Musashi-1及Oct4 mRNA的表达。结果3种细胞系均能在特殊配制的SFM中形成可以稳定传代的微球体,SFM新鲜配制、用细胞分离剂Accutase替代胰酶传代以及保持细胞的悬浮状态均有利于微球体的形成和增殖。Colo205微球体中CD44+细胞比例显著增多,贴壁分化后逐渐减少至与Colo205细胞无明显差异。与Colo205细胞相比,微球体具有更强的侵袭能力和体内成瘤能力,并高表达干细胞标记分子Musashi-1及Oct4 mRNA。结论利用特制SFM悬浮培养可得到结直肠癌细胞系微球体,这种微球体富集了肿瘤干细胞。

人鼻咽癌干细胞微球体培养并鉴定其生物特性

目的目前分离和鉴定鼻咽癌干细胞的方法仍不成熟。探索鼻咽癌细胞系干细胞微球体培养方法,并对CNE-2细胞微球体是否具有肿瘤干细胞生物特性(干性)进行鉴定。方法人鼻咽癌细胞CNE2、C666-1细胞在含生长因子的无血清培养基(serum-free medium,SFM)中悬浮培养。流式细胞术、Transwell小室实验、裸鼠成瘤实验、分别检测CNE2贴壁细胞(CNE2 monolayer,CNE2-MN)及CNE2微球体细胞(CNE2 sphere cells,CNE2-SC)CD133+标记细胞比例,体外侵袭能力、体内成瘤能力;CNE2-SC在含血清培养基中贴壁培养观察其分化能力;实时荧光定量PCR分析CNE2-MN及CNE2-SC相关干性基因Bmi-1、Oct4、Twist1RNA的表达。结果 2种细胞系均能在特殊配制的SFM中形成可以稳定传代的微球体,SFM新鲜配制、用细胞分离剂Accutase替代胰酶传代以及保持细胞的悬浮状态均有利于微球体的形成和增殖;在含血清培养基中培养能贴壁分化成CNE2-MN而无明显差异;CNE2-SC中CD133+细胞比例(98.79%)显著高于CNE2-MN(0.98%),差异有统计学意义(P<0.01);与CNE2-MN相比,CNE2-SC高表达干细胞相关基因Bmi-1、Oct4、Twist1及EMT标志物N-cadherin、Vimentin。Transwell小室实验示CNE2-SC与CNE2-MN的穿膜细胞数分别为(122±6)个/视野及(36±7)个/视野(P<0.05);裸鼠成瘤实验示1×104个CNE2-SC 3周内即能成瘤,成瘤率33.3%,而CNE2-MN不能成瘤,1×105个CNE2-SC与CNE2-MN成瘤体积比为(1.750±0.613)cm3vs(0.457±0.291)cm3(P<0.05),而1×106个以上2种细胞成瘤体积比为(2.332±0.549)cm3vs(0.669±0.278)cm3(P<0.01)。结论利用特制SFM悬浮培养法可得到鼻咽癌CNE2-SC,这种微球体富集了肿瘤干细胞,将为后续鼻咽癌干细胞研究打下基础。

沉默HIF-2α表达对低氧下乳腺癌干细胞微球体富集的影响

目的:探讨沉默低氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factor-2α,HIF-2α)表达对低氧下乳腺癌干细胞(breast cancerstem cells,BCSCs)微球体富集的影响。方法:构建HIF-2αRNA干扰慢病毒载体,并转染至MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot检测HIF-2αmRNA及蛋白表达;MTT检测MCF-7细胞在不同氧浓度下增殖活性;显微镜下观察低氧下BCSCs微球体形成情况;有限稀释法检测微球体细胞单克隆形成能力;RT-PCR检测微球体细胞干细胞相关标志物ABCG2、CD44及OCT-4 mRNA表达。结果:成功构建了HIF-2α基因siRNA慢病毒表达载体,RT-PCR和Western blot结果显示干扰组细胞HIF-2αmRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.05)。与未转染组及空载体组比较,低氧下RNA干扰组细胞增殖活性及BCSCs单克隆形成能力明显降低(P<0.05);RT-PCR结果亦显示RNA干扰组BCSCs相关标志物ABCG2、CD44及OCT-4 mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论:低氧能够诱导和强化MCF-7细胞乳腺癌癌干细胞样特性,而沉默HIF-2α表达可抑制低氧下BCSCs富集,提示HIF-2α有望成为乳腺癌治疗新的靶点。

沙利度胺对三阴乳腺癌干细胞微球体的干预研究

目的:以紫杉醇为对照,研究沙利度胺(thalidomide,TLD)对三阴乳腺癌干细胞(TNBCSCs)微球体的干预情况。方法:(1)采用微球体形成试验、CCK-8法、Transwell侵袭试验,研究TLD对TNBCSCs生物学行为的影响作用。(2)采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测TLD对TNBCSCs的血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。结果:与空白对照组相比,TLD处理后的微球体形成率明显减少,同时干细胞的增殖、侵袭能力均降低,VEGF的表达下降明显,差异有统计学意义。结论:TLD可以影响干细胞微球体的形成,抑制其体外增殖、侵袭及VEGF的表达。

化疗后乳腺癌组织中干细胞微球体的分离、培养及鉴定

目的:对从接受新辅助化疗的乳腺癌患者的乳腺癌组织中分离出的化疗微球体(CMSs)进行培养和鉴定,为获取乳腺癌干细胞的新方法的建立提供理论依据。方法:①将获得的CMSs接种在添加生长因子的DMEM/F12培养基中,观察CMSs的生长情况;②通过单克隆形成实验检测化疗微球体细胞(CMSDCs)的克隆形成和自我更新能力;③CMSDCs贴壁培养在含5%胎牛血清的DMEM/F12培养基中,观察其分化能力;④免疫细胞化学检测CMSDCs及其分化细胞CK14、CK18和CK19的表达;⑤流式细胞术(FCM)检测CMSDCs及其分化细胞中ALDH1+细胞的含量;⑥构建NOD/SCID小鼠移植瘤模型,观察CMSDCs的致瘤能力。结果:CMSs在无血清培养基中继续呈球状生长,3d后球体表面出现坏死的细胞层;CMSDCs可以连续传代形成新的CMSs,新生球体折光性强,表面无坏死层;在添加血清的培养基中的CMSDCs可以分化产生梭形的单层细胞;CMSDCs表达乳腺干细胞标记物CK19,不表达分化标记物CK14和CK18;CMSDCs和分化细胞中ALDH1+细胞的比例分别为为17.41%～23.57%和0.50%～1.28%;103个CMSDCs即可在NOD/SCID小鼠体内形成与原发肿瘤性质相同的移植瘤。结论:CMSs富含乳腺癌干细胞,与悬浮培养所获得的乳腺癌干细胞微球体类似,提示从化疗后的乳腺癌组织中分离癌干细胞微球体可能成为乳腺癌干细胞获取的新途径。

纳米碳酸钙复合的微球体制备及其尺寸控制

利用两亲嵌段共聚物聚苯乙烯-丙烯酸(简称PAS)在水相中构成的空间立体三维框架 结构和亲水链聚丙烯酸在水相空间的伸展及其上羧酸基对钙离子的沉积作用，合成了球形纳 米碳酸钙复合物，并通过控制共聚物的浓度初步实现了复合物宏观尺寸的调控，制备出粒径 约２μm，４μm，８μm的球形纳米复合物。XRD分析结果表明复合物中碳酸钙粒子属方解石 型纳米微晶，有较大的晶格畸变率，微晶尺寸随球形复合物的增大反而减小。热分析研究显 示，复合物中有机物含量大于１２％，热分解稳定性的提高认为通过羧酸Ca-O键合使碳酸 钙与聚合物有效复合。

肿瘤微环境对乳腺癌干细胞样微球体培养鉴定的影响

目的:探讨肿瘤微环境在乳腺癌干细胞(breast cancer stem cells,BCSCs)培养鉴定及分化过程中的影响及意义。方法:采用无血清培养液PCM-2及成纤维细胞上清液对乳腺癌细胞及MCF-7细胞进行原代培养。观察乳腺癌细胞微球体形成状况,MTT比色法检测乳腺癌细胞的增殖能力,免疫细胞化学方法检测乳腺癌干细胞标记物及上皮间质标记物的表达,并通过RT-PCR进行验证。结果:无血清培养液PCM-2培养的原代细胞微球体的直径大于成纤维细胞上清液的培养(t=4.996,P=0.002),且原代细胞中ALDH1(aldehyde dehydrogenase 1)的表达率高于后者。成纤维细胞上清液培养的细胞生长速度较无血清培养液PCM-2快,差异具有统计学意义(P=0.004)。RT-PCR检测发现无血清培养液PCM-2培养的原代细胞中ALDH1表达上调,E-cadherin、Vimentin表达下调。结论:在乳腺癌原代细胞和MCF-7细胞中可以采用无血清悬浮培养方法富集BCSCs样微球体,成纤维细胞上清液能够促进BCSCs样微球体的增殖与分化。提示乳腺肿瘤微环境在乳腺癌细胞的生长增殖过程中发挥了至关重要的作用。

大型海藻无性系微球体构建和反应器培养研究

利用大型海藻细胞的全能性获得了蜈蚣藻(Grateloupia filicina)、多管藻(Polysiphonia urceolata)和孔石莼(Ulva pertusa Kjellm)的无性系材料,在此基础上分别构建了绒球状微球体、网状微球体和簇生状微球体3种微球体形式,这种微球体形式适合于大型海藻的生物反应器高密度培养。簇生状的孔石莼微球体在10 L藻类生物反应器中的培养密度达5.81 g/L鲜质量,最高生长速度达到0.36 g/L/d鲜质量,最大比生长速率为0.103/d。藻类生物反应器高密度培养海藻无性系可用于海藻育苗、水产养殖水处理以及天然活性物质生产等。

5-氟尿嘧啶羧甲基壳聚糖微球体的制备及体外释放

目的 探讨羧甲基壳聚糖包药微球体的制备及体外释药特性。 方法 采用乳化交联法制备 5 氟尿嘧啶羧甲基壳聚糖 (FU CMCS)微球体 ;用红外光谱 (IR)对其结构进行表征 ,扫描电子显微镜 (SEM )观察微球体形貌及表面结构 ,利用激光粒度分布仪考察微球体的粒径分布 ;考察包药微球体在人工胃液、人工肠液、人工结肠液中的释放。 结果 电镜扫描显示微球体表面结构规整、致密 ,FU CMCS微球体粒径 6 0 %在 2～ 15 μm ,药物含量为 8 39%。体外释放实验表明 ,包药微球体在 pH 1 2 2、pH 7 0 1、pH 7 4 5缓冲溶液中均具有缓释作用。 结论 FU CMCS微球体在体外具有缓释作用。

微球体与微椭球体光散射特性的研究

采用M ie散射理论研究了微球体光散射的性质并用E ikonal近似方法把微椭球体用与其等效的微球体来近似,进而应用M ie散射理论对微椭球体光散射进行数值模拟,并对计算结果进行了分析。结果表明微球体与微椭球体光散射具有相似的性质,且微椭球体散射光振幅分布与其位置有关。分析结果可为实际应用中微球体与微椭球体透镜的设计、应用及微透镜阵列光学性能的进一步分析提供依据。

顺铂明胶微球体内释药特性的实验研究

目的 对比顺铂不同给药方法的效果 ,以了解顺铂明胶微球在体内的释药特点。方法 在X线监视下 ,将顺铂明胶微球超选择栓塞在犬颈外动脉及其分支 ,以顺铂溶液灌注颈外动脉或在股静脉点滴作为对照 ,不同时间点取血样测试血药浓度。取栓塞组织石蜡切片 ,常规苏木精 伊红染色 ,光镜观察。结果 动脉灌注法可以产生局部较高的血药浓度 ,但维持时间较短 ;静脉滴注法血药浓度维持时间较长 ,但局部与全身血药浓度无显著差异 ;使用顺铂明胶微球进行栓塞可以在较小的用药剂量上在局部维持相对较长时间较高的血药浓度。结论 顺铂明胶微球进行动脉栓塞可以显著降低全身血药浓度及用药剂量 。

盐酸氟西汀胃漂浮海藻酸钙缓释微球体内外研究

目的制备盐酸氟西汀海藻酸钙胃漂浮微球,考察胃漂浮制剂的体内滞留及生物利用度。方法采用离子凝胶-烘干法制备海藻酸钙胃漂浮微球,以百忧解为参比制剂,测定微球体外释放情况,并采用残余药量法考察微球胃肠转运行为,建立柱前衍生-HPLC荧光检测法测定胃漂浮微球大鼠体内血药浓度,计算药代动力学参数和生物利用度。结果胃漂浮微球体外释放较慢,释放曲线符合Higuchi方程,在胃中的滞留时间>8h,血药浓度更平稳,生物利用度明显提高。结论所制胃漂浮微球具有缓释的效果,可以延长胃中滞留时间,提高药物的生物利用度。

氟尿嘧啶微球体外释药的影响因素

目的 探讨对以羧甲基壳聚糖为载体的氟尿嘧啶微球体外释药特性的影响因素。方法 超声作用下采用乳化交联法制备氟尿嘧啶羧甲基壳聚糖微球（Fu—CMCS-MS）；光镜观察微球的形态和粒径分布；恒温振荡透析法和紫外分光光度法测定Fu—CMCS-MS的药物释放，考察5种因素对微球体外释药的影响。结果 超声作用下制得Fu—CMCS-MS成球性良好，粒径分布均匀，微球76．4％在1～3μm，平均粒径1．6μm。微球体外释药受投药方式、投药量、交联剂、释放介质和超声作用的影响显著，前期释药速率快，遵守溶胀控制机制，缓释后期释药缓慢，遵守扩散控制机制。结论 超声作用下以戊二醛乳化交联所制Fu—CMCS-MS在体外具有缓释作用。

三阴性乳腺癌干细胞微球体的治疗

三阴性乳腺癌(TNBC)是指雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及人类表皮生长因子受体2(HER-2)均为阴性的乳腺癌。TNBC恶性程度高,侵袭性强,易远处转移,预后差,对内分泌治疗及靶向治疗的效果均欠佳,是临床治疗的难点。近几年研究发现,三阴性乳腺癌的发生、发展很可能与其中的乳腺癌干细胞有关,乳腺癌干细胞微球体培养是一种收集干细胞的方法,被广泛用于三阴性乳腺癌的干细胞研究。

地质微球体的初步研究

利用扫描电子显微技术（SEM）和高级透射电子显微十能散X射线分析技术（ATEM＋EDX），研究了地质体中微球体的形态、微结构和元素微区分布的特征。简要讨论了这些微球体的成因。

自制左氧氟沙星羧甲基壳聚糖缓释微球体内结肠靶向释放的实验

目的:制备左氧氟沙星羧甲基壳聚糖(LVFX/CMC)微球并检测其在大鼠体内结肠靶向释药的性能。方法:色谱柱:KromasilRKR100-5C18(250 mm×4.6 mm),流动相:乙腈-0.1%三氟醋酸溶液(20:80),柱温:50℃,激发波长:295 nm,发射波长:495 nm,流速:1.0 ml/min。SD大鼠60只,随机分为2组,分别以LVFX/CMC微球(含40 mg左氧氟沙星)及等量左氧氟沙星溶剂灌胃,以高效液相色谱法对LVFX/CMC微球和左氧氟沙星(LVFX)灌胃后大鼠胃、小肠、盲肠、结肠及血液中药物浓度进行定量检测。结果:灌胃后LVFX/CMC微球组5 h盲肠、结肠药量分别达(3.394±0.197)和(1.873±0.216)mg,远高于LVFX组的(0.489±0.123)和(0.078±0.002)mg(P<0.01)。在9 h时LVFX/CMC微球组盲肠和结肠药量仍分别达到(1.580±0.234)和(0.713±0.073)mg,明显高于LVFX组的(0.105±0.023)和(0.054±0.016)mg(P<0.01)。LVFX/CMC微球组血药浓度于5 h后达到最高,而LVFX组1 h后即达最高血药浓度峰。微球组盲肠和结肠内容物的药量在7、9 h时段均明显大于胃和小肠内的药量。结论:左氧氟沙星羧甲基壳聚糖微球在体内实验中的释放符合结肠靶向释药的特点。

乳清分离蛋白与大豆分离蛋白混合溶液制备外源式钙交联冷凝胶型微球体

将分别经过热变性处理的乳清分离蛋白和大豆分离蛋白溶液按照2∶1,1∶1和1∶2比例(质量比)混合后,通过外源式添加钙离子的方法,获得钙交联冷凝胶型微球体。检测微球体的蛋白质包埋率、溶解度和溶胀率。结果显示,微球体的蛋白质包埋率较高,均大于99.36%,不同蛋白质比率对蛋白质包埋率没有显著影响。微球体具有一定的水溶性,在缓冲液中的溶解度顺序为pH7.0>pH2.5>pH4.5,且乳清蛋白质量分数越高,微球体的溶解度越小。微球体在缓冲液中发生不同程度的膨胀,溶胀率顺序为pH2.5>pH7.0,而在pH值为4.5缓冲液中发生皱缩,溶胀率为负值,微球体中的乳清蛋白质量分数越高,溶胀率越小。缓冲液中的钙离子会影响微球体的溶解度和溶胀率。基本性质说明外源式钙交联冷凝胶型微球体可以作为热敏性或活性物质的传递载体,应用于相关的食品及医药行业。