微管相关蛋白轻链3和beclin-1在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的：研究自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3（LC-3）和beclin-1在子宫内膜异位症患者异位内膜组织中的表达情况,探讨其与临床分期的关系.方法：采用免疫组织化学及免疫印迹检测80例子宫内膜异位症患者（研究组）及20例正常子宫内膜（对照组）组织中LC-3和beclin-1蛋白的定位及定量情况.结果：研究组异位内膜组织中LC-3和beclin-1的表达较对照组显著下调,并且随着r-AFS期别程度的增加,LC-3和beclin-1蛋白表达呈逐渐下降趋势.结论：LC-3和beclin-1在子宫内膜异位症中处于低表达状态,且与子宫内膜异位症的发生发展及严重程度呈负相关.

腹腔镜结直肠癌根治术后患者组织中微管相关蛋白轻链3-Ⅱ表达水平与其临床病理特征及预后的关系

目的 探究腹腔镜结直肠癌根治术后患者组织中微管相关蛋白轻链3-Ⅱ表达水平与临床病理特征及预后的关系。方法 选取结直肠癌患者60例,收集患者临床资料,免疫组化法检测组织微管相关蛋白轻链3-Ⅱ水平,分析其与患者临床病理特征及预后的关系。结果 组织LC3表达与患者年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤分化程度等临床病理特征均无相关性(P>0.05),与肿瘤分期、淋巴结远处转移相关(P<0.05)。单因素分析发现:肿瘤分化程度、肿瘤分期、淋巴结远处转移、LC3表达是影响腹腔镜结直肠癌根治术后患者预后的因素(P<0.05)。多因素分析显示:肿瘤分化程度、淋巴结远处转移、肿瘤分期和LC3表达情况表达是影响腹腔镜结直肠癌根治术后患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 腹腔镜结直肠癌根治术后患者组织中微管相关蛋白轻链3-Ⅱ表达水平与临床病理特征有关,微管相关蛋白轻链3-Ⅱ表达可作为预测腹腔镜结直肠癌根治术后患者预后的生物标志物,具有重要的临床意义。

胃癌组织中维甲酸相关孤儿受体α、微管相关蛋白轻链3的表达与病人远期预后的关系

目的 分析胃癌组织中维甲酸相关孤儿受体α(RORα)、微管相关蛋白轻链3(MAPLC3)的表达与病人远期预后的关系。方法 2018年1月~2018年6月我院收治的胃癌病人82例,均经病理检查确诊,采用免疫组织化学染色法检测胃癌组织及癌旁组织中RORα、MAPLC3表达。随访3年病人生存情况,将病人分为死亡组(32例)和存活组(50例),比较两组胃癌组织中RORα、MAPLC3的表达及其与远期预后的关系。结果 癌组织中RORα阳性表达率为42.68%,MAPLC3阳性表达率为43.90%,癌旁组织分别为84.15%、91.46%,两种组织比较差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中RORα、MAPLC3表达与病人性别、年龄、肿瘤直径、癌细胞类型、病理分级无关,差异无统计学意义(P>0.05);RORα表达与T分期、淋巴结转移有关(P<0.05),MAPLC3表达与T分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。胃癌病人远期预后单因素分析结果显示,T分期、分化程度、淋巴结转移、RORα表达、MAPLC3表达等因素与胃癌病人远期预后密切相关(P<0.05);胃癌病人远期预后多因素COX回归分析,显示T分期(OR=1.779,95%CI:1.109~5.656)、分化程度(OR=1.621,95%CI:1.029~2.554)、淋巴结转移(OR=1.876,1.020~3.451)、RORα(OR=2.815,95%CI:1.401~5.656)、MAPLC3(OR=3.080,95%CI:1.305~7.268)是胃癌病人远期预后的独立危险因素(P<0.05);胃癌组织中RORα阳性表达评估胃癌病人预后生存的曲线下面积为0.67(95%CI:1.024~3.216),敏感性为72.34%,特异度为64.58%;胃癌组织中MAPLC3阳性表达评估胃癌病人预后生存的曲线下面积为0.65(95%CI:1.023~2.547),敏感性为74.52%,特异度为65.13%。结论 胃癌组织中RORα、MAPLC3呈较低表达,RORα、MAPLC3低表达是胃癌病人远期预后的独立危险因素。

推拿对失神经骨骼肌萎缩大鼠自噬相关因子Beclin-1、液泡分选蛋白34和微管相关蛋白轻链3的mRNA表达的影响

目的探讨推拿延缓失神经骨骼肌萎缩的相关机制。方法 77只Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为假手术组(n=7)、模型组(n=35)和推拿组(n=35)。后两组通过暴露并切断胫神经的方法制备失神经骨骼肌萎缩大鼠模型。造模后第2天,推拿组术侧下肢进行推拿干预。分别在造模后0 d、7 d、14 d、21 d和28 d取材,测定术侧腓肠肌湿重比,HE染色测定腓肠肌肌纤维截面积和直径,逆转录实时定量聚合酶链反应检测术侧腓肠肌组织中自噬相关因子Beclin-1、液泡分选蛋白34 (Vps34)和微管相关蛋白轻链3 (LC3)的mRNA表达。结果三组0 d时,腓肠肌湿重比、肌纤维截面积和直径,以及Beclin-1、Vps34和LC3的mRNA表达均无显著性差异(F <1.321, P> 0.05)。与假手术组比较,模型组和推拿组腓肠肌湿重比、肌纤维截面积和直径在不同时间下降(P <0.05),推拿组肌湿重比(除21 d)均高于模型组(P <0.05),推拿组肌纤维截面积和直径(除21 d)均大于模型组(P <0.05)。与假手术组相比,模型组和推拿组术侧腓肠肌Beclin-1、 Vps34、 LC3mRNA表达在不同时间升高(P <0.05),推拿组各项mRNA表达(除14 d)均高于模型组(P <0.05)。组内比较,模型组和推拿组腓肠肌湿重比、肌纤维截面积和直径随时间呈进行性下降趋势(P <0.05);模型组Beclin-1、Vps34 mRNA表达在21 d后呈上升趋势(P <0.05),LC3 mRNA表达在21 d升高(P <0.05);推拿组Beclin-1 mRNA表达呈先上升后下降的趋势(P <0.05),Vps34和LC3 mRNA表达(除14 d)呈先上升后下降趋势(P <0.05)。结论推拿可能通过上调自噬相关因子Beclin-1、Vps34和LC3的mRNA表达,促进细胞自噬的激活,清除损伤细胞器和蛋白质,为肌纤维再生提供一定的合成底物和能量,从而减轻失神经骨骼肌萎缩的程度。

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中微管相关蛋白轻链3和溶酶体相关膜蛋白2基因表达及其临床意义

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中巨自噬标志性分子微管相关蛋白轻链3 (LC3)和分子伴侣介导的自噬(CMA)标志性分子溶酶体相关膜蛋白2(LAMP-2)基因表达,探讨其与SLE发病的关系。方法纳入2017年11月至2018年3月在川北医学院附属医院风湿免疫科诊治的88例SLE患者(SLE),采用密度梯度离心法分离外周血单个核白细胞(PBMCs);采用实时荧光定量PCR法测定患者PBMCs中LC3和LAMP-2在mRNA水平的表达量;采用SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分判断疾病活动度,分析LC3和LAMP-2表达与SLE患者临床特点及病情活动度的相关性。同期纳入年龄匹配的40例健康体检者作为正常对照组。结果正常对照组受检者PBMCs中LC3 mRNA和LAMP-2 mRNA相对表达量分别为1. 021±0. 551和1. 015±0. 667,SLE组患者分别为0. 783±0. 435和2. 402±2. 233,组间比较差异均有统计学意义(P=0. 020、0. 000)。SLE患者PBMCs中LAMP-2 mRNA表达水平与SLEDAI呈明显正相关(rs=0. 312,P=0. 003),LC3mRNA表达水平与SLEDAI无明显相关性(rs=-0. 175,P=0. 103)。LAMP-2 mRNA表达量升高患者肾脏损害发生率明显高于非升高患者(40. 7%vs. 16. 3%),LC3 mRNA表达量降低患者的血液系统受累率明显高于无LC3 mRNA表达降低患者(65. 2%vs. 32. 3%),差异均有统计学意义(P=0. 013、0. 006)。不同LC3 mRNA和LAMP-2 mRNA表达水平组实验室检查指标和治疗效果的患者分布差异均无统计学意义(均P>0. 05)。结论 SLE患者LC3 mRNA表达水平下调,LAMP-2 mRNA表达水平上调,提示SLE患者存在巨自噬功能不足。SLE患者CMA功能增强,并且与肾脏和血液系统受累有关。

电针预处理内关穴对心肌缺血再灌注大鼠自噬调控基因和自噬微管相关蛋白轻链3表达的影响

目的:基于不同时间点对比电针预处理内关穴对心肌缺血再灌注(MIRI)模型大鼠自噬基因的不同表达影响,探讨电针预处理的最优时间点。方法:48只SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、内关组,每组12只。根据不同时间点按3、7 d分时间点观察,每组6只。采用大鼠冠状动脉左前降支穿线结扎的手段创建心肌缺血再灌注损伤模型。HE染色法检测心肌细胞病理形态学变化,RT-PCR法、Western blotting法检测自噬相关基因在心肌细胞中的表达。结果:第3天模型组心肌损伤程度高于空白组、假手术组,模型组自噬调控基因(Beclin-1)、自噬微管相关蛋白轻链3(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)蛋白表达高于空白组、假手术组,差异有统计学意义(均P<0.01)。第3天内关组心肌细胞损伤程度低于模型组,内关组自噬相关基因表达量低于模型组,差异有统计学意义(均P<0.05)。第7天空白组、模型组均存在心肌组织细胞紊乱、结构模糊、自噬泡存在等表现;模型组自噬相关蛋白表达量明显升高。第7天内关组自噬相关蛋白表达量低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),且心肌损伤情况较第3天改善。第7天模型组、内关组的心肌损害程度均较第3天减轻,细胞器损坏程度也有所改善。第7天模型组、内关组的蛋白表达低于第3天,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:电针预处理内关穴对MIRI模型大鼠的保护机制可能与自噬的相关调节有关,对比不同时间效应差异,第7天效果更佳。

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C对脑缺血再灌注大鼠脑皮质中热休克蛋白70、微管相关蛋白轻链3蛋白表达和神经元超微结构的影响

目的应用不同浓度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)干预脑缺血再灌注大鼠,检测热休克蛋白70(HSP70)和微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白的表达,观察其对神经元超微结构的影响。方法成年雄性SD大鼠60只,随机分成5组:假手术组(sham)、缺血再灌注组(IR),Cys C低浓度组(Cys C1)、Cys C中浓度组(Cys C2)、Cys C高浓度组(Cys C3),每组12只。采用线栓法制备脑缺血再灌注损伤模型,缺血2 h再灌注24 h后进行改良神经功能损伤严重程度评分(m NSS)。Western blotting半定量检测损伤中心脑皮质组织中HSP70、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达;免疫组织化学法检测HSP70、LC3的阳性细胞个数;免疫荧光双标记法检测皮质神经元自噬相关蛋白LC3和神经元核抗原(Neu N)共染的阳性细胞平均吸光度值;透射电子显微镜下观察神经元超微结构的变化。结果与IR组相比,Cys C1、Cys C2组m NSS评分明显减少(P<0. 05),HSP70的表达较IR组明显升高(P<0. 01);而Cys C3组m NSS评分升高,与IR组差别无显著性(P>0. 05); Cys C3组HSP70的表达明显降低(P<0. 01); Cys C各浓度组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达有不同程度的升高(P<0. 01); LC3和Neu N共染阳性细胞平均吸光度逐渐增强(P<0. 05);透射电子显微镜结果显示,Cys C1、Cys C2组神经细胞的超微结构有所改善,而Cys C3组脑皮质神经细胞损伤较重。结论 Cys C可能在一定浓度范围内对缺血再灌注损伤神经细胞有保护作用。浓度过高则导致神经细胞自噬性死亡。

自噬基因Beclin1和微管相关蛋白轻链3与胃癌的关系研究

目的研究胃部非癌组织、胃部癌旁组织与胃部癌组织中自噬基因Beclin1和微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,MAPLC3)基因的表达含量,确定Beclin1和MAPLC3表达含量与胃癌之间的联系。方法使用实时逆转录-聚合酶链反应(Real-Time reverse transcription polymerase chain reaction,Real-Time RTPCR)检测胃部非癌组织、胃部癌旁组织与胃部癌组织中Beclin1以及MAPLC3基因的mRNA表达含量。使用蛋白质印迹法(Western blot)方法检测胃部非癌组织、胃部癌旁组织与胃部癌组织中Beclin1以及MAPLC3基因的蛋白表达含量。结果与胃部非癌组织相比,胃部癌旁组织Beclin1以及MAPLC3的mRNA含量显著降低(P<0.01),胃部癌组织中Beclin1以及MAPLC3的mRNA含量也显著降低(P<0.01);与胃部癌旁组织相比,胃部癌组织中Beclin1以及MAPLC3的mRNA含量也显著降低(P<0.05)。与胃部非癌组织相比,胃部癌旁组织Beclin1以及MAPLC3的蛋白含量显著降低(P<0.05),胃部癌组织中Beclin1以及MAPLC3的蛋白含量也显著降低(P<0.01);与胃部癌旁组织相比,胃部癌组织中Beclin1以及MAPLC3的蛋白含量也显著降低(P<0.05)。结论自噬相关基因Beclin1以及MAPLC3的mRNA和蛋白水平在胃癌组织中表达降低,这提示自噬相关基因与胃癌的发生、发展密切相关。

自噬相关基因微管相关蛋白1A/1B轻链3B在结肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨自噬相关基因微管相关蛋白1A/1B轻链3B(MAP1LC3B)在结肠癌中的表达及临床意义。方法:采用癌症基因组图谱(TCGA)数据库中提供的临床和RNA-seq数据,以预测MAP1LC3B水平与结肠癌的关系。再利用免疫组织化学染色(IHC)、Western印迹等技术对人群样本(结肠癌组织40例,癌旁组织20例)中MAP1LC3B表达情况进行检测,验证其表达情况与临床病理参数包括肝转移与否、淋巴结转移与否及组织分化等的关系。结果:MAP1LC3B在结肠癌组织中的表达阳性率为72.5%,明显高于癌旁组织组,差异具有统计学意义(P=0.001);在MAP1LC3B阳性组中,21例(72.41%)合并肝转移(P=0.001),且患者的TNM分期多为Ⅴ期患者,占79.31%,与MAP1LC3B阴性组比较差异具有统计学意义(P=0.001),但MAP1LC3B的表达与结肠癌组织的分化程度(P=0.056)和淋巴结转移情况比较,差异无统计学意义(P=0.265)。与TCGA数据库等分析结果有所差异,但Kaplan-Meier生存分析表明,MAP1LC3B高表达与预后不良显著相关,差异有统计学意义(P<0.01),且MAP1LC3B表达水平与CD8+T细胞的功能最为密切。结论:自噬相关基因MAP1LC3B在结肠癌组织中异常表达,并参与介导了肿瘤的恶性生物学行为,影响患者预后。

血清人G蛋白偶联胆汁酸受体1 微管相关蛋白轻链3及肝素结合性表皮生长因子诊断卵巢癌的价值分析

目的 探讨血清人G蛋白偶联胆汁酸受体1(GPBAR1)、微管相关蛋白轻链3(LC3)及血清肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)水平对于卵巢癌发生的预测评价。方法 选取2019年10月—2022年10月期间在宁夏银川市第一人民医院经确诊接受治疗的卵巢癌患者及同期于医院体检的96例健康志愿者作为研究对象,将卵巢癌患者作为观察组(96例),健康受试者作为对照组(96例)。统计两组研究对象的一般资料,并比较两组GPBAR1、LC3及HB-EGF的表达水平差异。采用多因素logistic回归模型分析卵巢癌发生与GPBAR1、LC3及HB-EGF的关系。结果 干预后,观察组GPBAR1水平为(707.69±2.56)pg/ml明显高于对照组(246.15±11.98)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05);观察组LC3水平(0.53±0.11)μg/mL显著高于对照组的(0.15±0.03)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05);观察组HB-EGF水平(597.45±110.37)ng/ml明显高于对照组(302.36±93.25)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.05),logistic多因素回归分析显示,GPBAR1(OR=2.051、P<0.05)、LC3(OR=0.595、P<0.05)、HB-EGF(OR=1.974、P<0.05)是影响卵巢癌发生的独立危险因素(P<0.05)。ROC结果显示,血清GPBAR1、LC3及HB-EGF对卵巢癌的诊断效果曲线下面积(AUC)分别为0.758、0.768及0.817,对应灵敏度分别为82.43%、65.13%及73.26%,特异性分别为68.59%、94.11%及88.24%。三者联合诊断的AUC为0.893,灵敏度和特异度分别为83.72%和94.13%。结论 卵巢癌患者血清GPBAR1、LC3、HB-EGF水平升高,三者分别对卵巢癌发生的预测有一定的诊断价值,但三者联合的预测诊断效能更好,可在临床推广应用。

重症胰腺炎患者血清载脂蛋白B/载脂蛋白A1、微管相关蛋白1-轻链3和细胞间黏附分子-1水平在预测并发感染性胰腺坏死中的价值

目的观察重症胰腺炎(SAP)患者血清载脂蛋白B与载脂蛋白A1比值(ApoB/ApoA1)、微管相关蛋白1-轻链3(MAP1-LC3)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平,并分析其与患者并发感染性胰腺坏死(IPN)的关系和预测价值。方法选取2019年1月至2022年1月于该院收治的172例SAP患者作为SAP组。收集临床资料及外周静脉血标本,检测患者血清ApoB/ApoA1、MAP1-LC3和ICAM-1水平,同期选取该院70例体检健康者作为对照组。比较SAP患者与体检健康者的血清ApoB/ApoA1、MAP1-LC3和ICAM-1水平差异;根据SAP患者后续有无并发IPN分为IPN组和非IPN组。采用单因素及多因素分析比较两组患者临床资料,分析血清ApoB/ApoA1、MAP1-LC3、ICAM-1水平及其他相关因素与SAP患者并发IPN的关系;并通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清ApoB/ApoA1、LC3和ICAM-1水平用于预测SAP患者并发IPN的价值。结果SAP组血清ApoB/ApoA1、MAP1-LC3、ICAM-1水平均高于对照组(均P<0.05);单因素分析显示,IPN组ApoB/ApoA1、MAP1-LC3及ICAM-1水平均高于非IPN组(均P<0.05),多因素分析显示,ApoB/ApoA1(β=2.309,P=0.027)、MAP1-LC3(β=5.447,P=0.037)及ICAM-1(β=0.039,P=0.045)水平均是SAP患者并发IPN的影响因素。血清ApoB/ApoA1、MAP1-LC3及ICAM-1水平预测SAP患者并发IPN的曲线下面积(AUC)分别为0.761(95%CI:0.683~0.840)、0.765(95%CI:0.681~0.848)、0.882(95%CI:0.829~0.935);灵敏度分别为76.1%、68.7%、71.6%,特异度分别为61.0%、89.5%、91.4%。联合预测的AUC为0.957,灵敏度为85.1%,特异度为96.2%。结论血清ApoB/ApoA1、MAP1-LC3、ICAM-1水平是SAP患者并发IPN的影响因素,并发IPN的患者ApoB/ApoA1、MAP1-LC3和ICAM-1水平更高,这些指标对于预测SAP患者并发IPN具有一定的价值。

血清α-突触核蛋白、微管相关蛋白1轻链3、载脂蛋白A1与帕金森病认知功能、疾病进展的关系

目的检测α-突触核蛋白(α-synuclein)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、载脂蛋白A1(Apo A1)水平在帕金森病(PD)患者血清中的表达情况,以及三者与PD患者发生认知功能障碍(CI)、疾病进展的相关性。方法选取96例PD患者作为研究组,另外选取同期体检健康者90例为对照组。根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分将患者分为CI组(42例)和认知功能正常组(54例)。根据Hoehn-Yahr(H-Y)分期量表将PD患者分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ期,其中Ⅰ~Ⅱ期PD患者纳入早期PD组(57例),Ⅲ~Ⅴ期PD患者纳入中晚期PD组(39例)。测定PD患者血清中α-synuclein、LC3、Apo A1水平。分析α-synuclein、LC3、Apo A1与H-Y分期的相关性。采用多因素Logistic回归分析筛选PD患者发生CI的影响因素。结果研究组α-synuclein水平高于对照组,LC3、Apo A1水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);早期PD组α-synuclein水平低于中晚期PD组,LC3与Apo A1水平高于中晚期PD组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清α-synuclein水平与H-Y分期呈正相关(P<0.05)。三者联合预测PD患者发生CI的曲线下面积(AUC)为0.925,大于α-synuclein、LC3、Apo A1单独预测的AUC(P<0.05)。α-synuclein、LC3、Apo A1、高血压史是PD患者发生CI的影响因素(P<0.05)。结论α-synuclein在PD合并CI患者血清中呈高表达,LC3、Apo A1呈低表达,三者与PD认知功能、疾病进展的关系密切。

自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白轻链3在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 检测自噬相关基因Beelin 1和微管相关蛋白轻链3（LC3）在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌临床病理参数及患者预后的关系.方法 应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法分别检测96例胃癌石蜡组织和癌旁组织中Beclin 1和LC3的蛋白表达水平.应用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot检测27例新鲜胃癌组织和相应癌旁组织中mRNA和蛋白的表达.结果 新鲜胃癌组织中Beclin l mRNA（ΔCt：5.90±1.52）及蛋白（1.060±0.112）的表达水平较癌旁组织（ΔCt：7.50±1.22;0.964±0.130）高,两者之间差异有统计学意义（=4.87,t=4.643,P＜0.05）.新鲜胃癌组织中LC3 mRNA（ΔCt：5.00±1.34）及蛋白（1.115±0.111）的表达水平较癌旁组织（ΔCt：6.62±1.51;1.002±0.134）高,两者之间差异有统计学意义（t=5.90,t=5.653,P＜ 0.05）.在胃癌石蜡组织中,Beclin l蛋白和LC3表达阳性率（67.7％、64.6％）均高于癌旁组织（45.8％、40.6％）,差异有统计学意义（P＜0.01）.Beclin 1蛋白和LC3均与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移以及临床分期有关（P＜0.05）.Beclin 1和LC3蛋白阳性表达患者的5年生存率明显低于阴性表达者（P＜0.01）.结论 Beclin 1和LC3蛋白表达增高与胃癌的发生、发展相关,提示其发挥着癌基因的作用.

心脏病合并糖尿病患者围术期自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ水平变化及其与炎性因子水平、心肌缺血再灌注损伤的相关性研究

背景细胞自噬在心肌缺血再灌注损伤及2型糖尿病发生发展过程中发挥着重要作用,因此明确心脏病合并糖尿病患者围术期细胞自噬作用具有重要意义。目的分析心脏病合并糖尿病患者围术期自噬微管相关蛋白轻链3抗体Ⅱ(LC3Ⅱ)水平变化及其与炎性因子水平、心肌缺血再灌注损伤的相关性。方法选取2016—2017年武汉大学人民医院心胸外科收治的心脏病合并糖尿病患者64例作为观察组,同期未合并糖尿病的心脏病患者64例作为对照组。两组患者均根据冠状动脉、瓣膜及血管病变情况选择相应手术方法,比较两组患者手术前后LC3Ⅱ及炎性因子〔包括白介素6(IL-6)及白介素8(IL-8)〕水平,术后24 h乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平;LC3Ⅱ水平与围术期心脏病合并糖尿病患者IL-6、IL-8、LDH、cTnT、CK-MB水平的相关性分析采用Pearson相关分析。结果 (1)两组患者术前LC3Ⅱ、IL-6、IL-8水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后观察组患者LC3Ⅱ、IL-6、IL-8水平高于对照组(P<0.05)。(2)术后24 h观察组患者LDH、cTnT、CK-MB水平高于对照组(P<0.05)。(3)Pearson相关分析结果显示,LC3Ⅱ水平与围术期心脏病合并糖尿病患者IL-6(r=0.955)、IL-8(r=0.962)、LDH(r=0.981)、cTnT(r=0.964)、CK-MB(r=0.969)水平呈正相关(P<0.01)。结论心脏病合并糖尿病患者围术期LC3Ⅱ水平较高,且LC3Ⅱ水平与炎性因子水平及心肌缺血再灌注损伤有关。

微管相关蛋白轻链3-Ⅱ与白细胞分化抗原44在结直肠癌中的表达及临床意义

目的探讨微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3Ⅱ)与白细胞分化抗原44(CD44)在结直肠癌及其浸润性成分中的表达,分析两者在结直肠癌发生发展及转移中的作用。方法从天津医科大学第二医院病理科2011年至2014年结直肠癌手术切除标本中选取64例结直肠癌、20例结直肠腺瘤和20例癌旁正常组织(距癌组织边缘>10 cm)作为研究对象,利用免疫组织化学染色检测20例癌旁组织、20例腺瘤及64例结直肠癌组织中CD44蛋白及LC3Ⅱ蛋白的表达,分析两者与结直肠癌临床病理学特征的关系、在结直肠浸润性成分中表达的差异及两者的相关性。通过Fishier确切概率法分析LC3Ⅱ与CD44蛋白的表达与癌旁组织、腺瘤及结直肠癌不同病理参数之间的关系。结果 (1)LC3Ⅱ在结直肠癌中的表达高于癌旁组织及腺瘤中(χ^(2)=66.495,P<0.01),但其在癌旁组织及腺瘤中的表达差异无统计学意义(χ^(2)=3.198,P>0.05);CD44在癌旁组织、腺瘤及结直肠癌的表达逐渐增高(χ^(2)=47.782,P<0.01)。(2)LC3Ⅱ和CD44在结直肠癌中的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、伴癌结节及临床分期有关(依次为LC3Ⅱ:χ^(2)=8.313、8.459、9.356、10.011,P<0.05;CD44:χ^(2)=9.182、9.430、9.560、13.513,P<0.05),LC3Ⅱ的表达与肿瘤浸润深度无关(χ^(2)=4.523,P>0.05),CD44的表达与浸润深度有关(χ^(2)=8.322,P<0.05)。(3)肿瘤浸润性成分中LC3Ⅱ和CD44的表达水平高于癌灶中心(LC3Ⅱ:χ^(2)=26.004,P<0.01;CD44:χ^(2)=26.145,P<0.01),在结直肠癌中两者的表达呈正相关(r=0.492,P<0.05)。结论 LC3Ⅱ和CD44在结直肠癌发生发展中均发挥重要作用,两者协同作用共同导致结直肠癌的不良预后。

微管相关蛋白轻链3及自噬基因Beclin-1在低氧性肺动脉高压大鼠模型肺组织中的表达

目的探讨微管相关蛋白轻链3(LC3)及自噬基因Beclin-1在低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的表达及其意义。方法成年雄性SD大鼠30只,随机均分为低氧组和常氧组。建立低氧性肺动脉高压模型,采用蛋白质免疫印记法分别检测两组大鼠肺组织中LC3含量及Beclin-1蛋白的表达。结果低氧组肺组织中LC3及Beclin-1蛋白含量较对照组显著增高(P<0.05)。结论低氧性肺动脉高压大鼠的自噬途径被激活,可能参与了低氧性肺动脉高压的发病过程。

多发性骨髓瘤中相关自噬蛋白LC3的表达及意义

目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达,进一步探讨其与MM疾病的关系。方法:通过前瞻性分析福建医科大学附属南平第一医院初诊的MM患者自噬蛋白LC3含量,通过与正常人群LC3蛋白表达量相比较进而分析MM患者蛋白表达量水平差异。结果:在MM瘤患者中LC3 I、LC3Ⅱ蛋白的表达量显著低于对正常人群,差异有统计学意义(P<0.05),且LC3 I、LC3Ⅱ表达呈正相关(r=0.777,P=0.000)。结论:自噬蛋白LC3可能与MM的发生及发展有一定相关性。

血管性痴呆大鼠海马CA1区自噬及微管相关蛋白1轻链3的表达

目的观察血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠海马CA1区自噬及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1light chain 3,MAP1LC3,LC3)的表达,探讨自噬在血管性痴呆发病中的可能作用。方法大鼠随机分为假手术组(sham组)、血管性痴呆模型组(VD组)和Wortmannin自噬抑制剂组(WM组),每组又随机分为模型制备后1、2、4、8、12周5个亚组。采用四血管阻断法制作血管性痴呆模型,Morris水迷宫法检测学习记忆能力,透射电镜观察自噬体的形成,蛋白质印迹法检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值作为自噬活性的指标。结果与假手术组相比,VD组大鼠平均逃避潜伏期延长(P<0.05或0.01),穿越平台次数减少(P<0.05或0.01);与VD组比较,WM组大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05或0.01),穿越平台次数增加(P<0.05或0.01)。VD组大鼠海马CA1区1周时神经细胞核膜凹陷,胞核浓缩,线粒体肿胀,可见自噬体、溶酶体;4周时自噬体、溶酶体数量显著增多;12周时仍可见自噬体。WM组神经元损伤较VD组减轻,自噬体数量减少。VD组大鼠海马CA1区LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值在1周时升高,4周时达到高峰,8周时开始下降,12周时仍较高。WM组各时间点LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值较VD组低,差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。结论血管性痴呆大鼠海马CA1区自噬活性被激活,可能参与了血管性痴呆的发生发展。

微管相关蛋白1轻链3及Beclin-1在硅沉着病大鼠肺泡巨噬细胞中的表达

目的观察自噬相关蛋白——微管相关蛋白1轻链3(LC-3)、Beclin-1在硅沉着病大鼠肺泡巨噬细胞中的表达,从细胞自噬角度探讨硅沉着病形成的分子机制。方法 50只成年雄性SD大鼠随机分为2组(n=25):对照组和硅沉着病模型组,每组再分5个时相组。采用非暴露气管灌注二氧化硅(SiO2)粉尘混悬液法(50g/L)建立大鼠硅沉着病模型。分别于造模后1、3、7、14及28 d分批处死5只大鼠,进行原位支气管肺泡灌洗,获取肺泡巨噬细胞,进行培养纯化和富集后用于后续研究。HE染色及透射电子显微镜观察肺泡巨噬细胞形态学改变;免疫细胞化学法检测LC-3、Beclin-1的表达及分布;免疫印迹法检测LC-3、Beclin-1的蛋白表达量。结果与对照组相比模型组肺泡巨噬细胞体积较大,胞质丰富,部分细胞内可见硅沉着吞噬颗粒,电镜下可见自噬体形成;模型组LC-3、Beclin-1在各时间点的表达较对照组均增多(P<0.05),1 d即开始增多,随着时间的延长表达逐渐增多,至14 d时达高峰(P<0.05),28d时回落,但仍高于对照组的表达。结论在硅沉着病大鼠肺泡巨噬细胞中有自噬的激活,肺泡巨噬细胞自噬参与了大鼠硅沉着病的病理进程。

急性胰腺炎患者血清微管相关蛋白1轻链3水平变化及意义

目的观察急性胰腺炎(AP)患者血清微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)水平变化,探讨其临床意义。方法选择轻型AP患者(MAP组)31例和重症AP患者(SAP组)31例,于发病24 h内抽取血清样本,另选择31例健康者作为对照组。检测血清淀粉酶(Ams)、MAP1-LC3水平,对AP患者的腹部CT进行评分。结果与对照组比较,MAP组、SAP组血清Ams、MAP1-LC3水平及腹部CT评分均升高(P均<0.05),其中SAP组较MAP组上述指标升高(P均<0.05);血清MAP1-LC3水平与腹部CT评分呈正相关(r=0.977,P<0.01),与Ams呈正相关。结论 AP患者发病早期血清MAP1-LC3水平明显升高,并与AP的病情严重程度呈正相关关系;血清MAP1-LC3可能是早期预测AP严重程度的有效标记物。