心肌营养素-1诱导心肌细胞肥大及辛伐他汀的干预作用

目的观察细胞因子心肌营养素1(CT-1)诱导大鼠心肌细胞的肥大效应,探讨辛伐他汀(Sim)对这一过程的干预作用及其信号转导机制。方法以培养的新生Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌细胞为实验模型,分为对照组,CT-1诱导组,CT-1+Sim组,CT-1+Sim+甲羟戊酸(MVA)组,CT-1+AG490(JAK2拮抗剂)组。应用图像分析系统测定心肌细胞表面积,3H-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心钠素(ANP)mRNA表达,RT-PCR检测细胞因子信号通路JAK/STAT的mRNA表达水平。结果(1)与对照组相比,CT-1组心肌细胞表面积,3H-亮氨酸掺入率,ANPmRNA表达水平均明显增高(P<0.01),JAK2拮抗剂AG490可显著的抑制CT-1的作用(P<0.01)。(2)与CT-1组相比,辛伐他汀共培养后心肌细胞表面积,3H-亮氨酸掺入率,ANPmRNA表达水平明显减小(P<0.01),外源性甲羟戊酸可显著的抑制辛伐他汀的作用(P<0.01);(3)CT-1可使心肌细胞JAK-STAT的mRNA表达水平显著增强,辛伐他汀显著抑制CT-1诱导心肌细胞JAK-STATmR-NA表达水平增高(P<0.01),而MVA和AG490可部分阻断辛伐他汀的效应(P<0.01)。结论心肌营养素1能够诱导心肌细胞肥大,辛伐他汀可抑制其这一过程并可能与细胞因子信号通路JAK-STAT活化有关。

老年急性冠脉综合征合并心衰患者心肌营养素-1的变化

目的探讨老年急性冠脉综合征(ACS)合并心衰患者血浆心肌营养素-1(CT-1)的变化和意义。方法选取老年ACS患者160例,均经冠状动脉造影判定血管狭窄程度,分为无狭窄组、轻度狭窄组、中度狭窄组及重度狭窄组;依据临床指标进行心功能分级,彩超测定左心室射血分数(LVEF),双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆CT-1水平,N末端B型利钠肽原(NT-pro BNP)水平采用锐普荧光干式定量分析仪检测。结果冠状动脉狭窄程度越重,血浆CT-1、NT-pro BNP水平越高(P<0.01);随心衰程度加重,CT-1、NT-pro BNP水平升高(P<0.01)。Pearson相关分析血浆CT-1与NT-pro BNP水平呈正相关,与LVEF呈负相关(P<0.01)。结论老年ACS合并心衰患者血浆CT-1水平明显升高,与NT-pro BNP、LVEF有较好相关性。检测CT-1水平可能有助于老年ACS患者的风险评估。

芪苈强心胶囊联合辅酶Q10对老年高血压并心衰患者心肌营养素-1、丙二醛水平的影响

目的观察芪苈强心胶囊联和辅酶Q10长程服用对老年高血压并心衰患者心肌营养素(CT-1)、丙二醛(MDA)和心功能的影响。方法选择年龄≥65岁的高血压心衰患者94例,随机分为治疗组和对照组,对照组常规抗心衰治疗,治疗组常规抗心衰治疗加用芪苈强心胶囊和辅酶Q10服用12 w,测定CT-1、MDA、N末端B型利钠肽原(NT-pro BNP)、左心室射血分数(LVEF)和6 min步行试验(6MWT)。结果治疗12 w两组CT-1、MDA、NT-pro BNP水平均较治疗前显著下降(P<0.05,P<0.01),6MWT、LVEF均较治疗前显著增高(P<0.05,P<0.01)。12 w治疗组CT-1、MDA和NT-pro BNP水平较对照组继续显著降低(P<0.05),6MWT、LVEF较对照组显著增高(P<0.05,P<0.01)。12 w治疗组地高辛、呋塞米用量较对照组明显减少(P<0.01)。结论芪苈强心胶囊联合辅酶Q10长程应用通过降低老年高血压并心衰患者CT-1、MDA和NT-pro BNP水平,进一步改善心功能。

老年高血压左室肥厚患者血浆心肌营养素-1和N端脑钠肽的变化

目的探讨血浆心肌营养素-1(CT-1)联合N端脑钠肽(NT-pro BNP)在老年高血压左室肥厚(LVH)患者中的作用和意义。方法选择年龄≥65岁的高血压患者62例,分为单纯高血压组(n=30)和LVH组(n=32),另选健康体检老人(n=26)为对照组。应用GE Vivid 7进行超声心动图检查,按Devereux公式计算左室质量指数(LVMI)。血浆CT-1水平采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定,NT-pro BNP含量应用锐普荧光干式定量分析仪检测。结果 LVH组血浆CT-1、NT-pro BNP水平明显高于单纯高血压组和对照组(P<0.01)。Pearson相关分析显示,LVH组血浆CT-l水平与LVMI值、NT-pro BNP含量呈正相关(r=0.630,P<0.01;r=0.718,P<0.01)。结论老年高血压LVH患者血浆CT-1水平明显升高,并与LVMI和NT-pro BNP有较好的相关性。联合检测血浆CT-1和NT-pro BNP将有助于提高老年高血压LVH的诊断。

腺病毒介导的心肌营养素-1基因转染对神经干细胞作用的实验研究

目的:观察腺病毒介导的心肌营养素-1(Adv-CT-1)基因转染对大鼠神经干细胞(NSCs)的作用。方法:分离、培养胚胎大鼠NSCs,以Adv-CT-1基因转染NSCs,应用细胞集落与细胞突起计数、流式细胞仪凋亡检测等技术,检测NSCs的生长与凋亡情况。结果:Adv-CT-1基因转染培养大鼠NSCs可增加NSCs集落数量和诱导分化细胞突起的数量(P<0.05)。在H2O2诱导的NSCs凋亡模型中,转染Adv-CT-1基因的NSCs凋亡细胞数量较对照组减少(P<0.05),存活细胞数增加(P<0.01)。结论:CT-1基因转染可促进NSCs分裂增殖以及细胞突起的生长,减少超氧化损伤诱导的NSCs凋亡发生,促进损伤NSCs的存活。

老年冠心病患者血浆心肌营养素-1与心功能的关系

目的探讨老年冠心病患者血浆心肌营养素-1(CT-1)与心功能的关系及其临床意义。方法应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定老年冠心病患者54例(NYHAⅠ级11例,NYHAⅡ级16例,Ⅲ级16例,Ⅳ级11例)血浆CT-1、脑钠素(BNP)水平,通过超声心动图检查测定左室射血分数(LVEF)。结果老年冠心病患者血浆CT-1水平随心功能下降而升高。其中NYHAⅣ级患者为(249.95±53.529)pg/ml,Ⅲ级患者为(159.67±50.159)pg/ml,Ⅱ级患者为(108.70±39.241)pg/ml,NYHAⅠ级为(70.66±29.021)pg/ml,各组CT-1水平差异具有统计学意义(F=35.144,P<0.01),组间比较亦有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。Spearman直线相关分析显示老年冠心病患者血浆CT-1水平与心功能分级相关(r=0.805,P<0.01);Pearson直线相关分析显示冠心病组血浆CT-1水平与血浆BNP水平相关(r=0.819,P<0.01),与LVEF值负相关(r=-0.678,P<0.01)。通过绘制CT-1的ROC曲线,CT-1在ROC曲线下的面积为0.882,95%的可信区间为0.789～0.974,曲线下面积差异有统计学意义(P<0.01)。结论老年冠心病患者血浆CT-1水平随心功能下降而升高,且与BNP、NYHA分级、LVEF具有较好的相关性。联合检测老年冠心病患者血浆CT-1、BNP浓度有助于判断冠心病预后。

心肌营养素-1在窒息新生大鼠心肌和外周血血浆中的表达及神经调节蛋白-1的干预作用

目的探讨心肌营养素-1(CT-1)在窒息新生大鼠心肌和外周血血浆中的表达,以及神经调节蛋白-1(NRG-1)的干预作用。方法新生7日龄大鼠90只,随机分成窒息组(n=40)、正常对照组(n=10)和NRG-1预处理组(n=40)。采用颈动脉结扎联合缺氧法制备新生大鼠窒息模型。NRG-1预处理组在缺氧缺血前30min腹腔注射1mg/kgNRG-1。分别在造模后6、12、24、48h各时间点取其外周血和左心室前壁心肌,酶联免疫吸附法检测其外周血血浆CT-1蛋白的表达。采用Western blot检测其心肌CT-1蛋白表达。结果窒息组新生大鼠外周血血浆CT-1的表达在各时间点均显著高于正常对照组,24h达到高峰(Pa<0.05);窒息后24h,新生大鼠外周血血浆CT-1的表达与CK-MB水平呈显著正相关(r=0.733P<0.01)。窒息后新生大鼠心肌中CT-1的表达逐渐增加,在各时间点均显著高于正常对照组(Pa<0.05)。其心肌中CT-1蛋白表达量在24h达高峰(4176.5±341.6),显著高于正常对照组(1211.9±237.7)(P<0.05);窒息后24h,NRG-1预处理组外周血血浆CT-1蛋白表达[(1287.7±18.9)ng/L]显著高于窒息组[(712.5±24.6)ng/L](P<0.05)。结论窒息可导致新生大鼠心肌和外周血血浆CT-1的表达增加。CT-1可能为心肌细胞损害的诊断提供一个新的检测指标。NRG-1可通过诱导CT-1表达上调,产生保护心肌的作用。

心肌营养素-1 ELISA测定法的建立及初步应用

目的应用生物素链霉亲和素酶联免疫吸附法(BSA ELISA)建立血浆心肌营养素1(CT1)测定法,并初步应用于冠心病患者血浆CT1水平的检测。方法用鼠抗重组人CT1单抗包被酶标板,加入待测抗原,并依次加入生物素化羊抗重组人CT1多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记链霉亲合素,用H2O2邻苯二胺显色。检测35名冠心病患者及对照组血浆CT1含量的变化。结果方法的线性范围为10～2000pg/ml,检测下限为10pg/ml,批内变异系数为1.76%～7.64%,批间变异系数为5.96%～9.04%。结论该方法简便、快速,特异性、敏感性、重复性均在临床检测可接受范围内,标准曲线线性良好,适用于基础研究与临床检验。

氟伐他汀对高血压大鼠心肌纤维化中心肌营养素-1的作用

目的:探讨氟伐他汀逆转一氧化氮(NO)缺乏性高血压大鼠心肌纤维化及其对心肌组织中心肌营养素-1(CT-1)的影响。方法:以硝基精氨酸甲酯(L-NAME,50 mg.kg-1.d-1,ig,qd,连续12周)诱导的NO缺乏性高血压大鼠为模型。第5周开始用氟伐他汀(5 mg.kg-1.d-1)和卡托普利(50 mg.kg-1.d-1)进行干预,ig,qd,连续8周。12周后处死动物,取材观察心肌组织病理变化,检测心肌中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及羟脯氨酸的浓度,用Western blotting检测心肌中CT-1的表达。结果:给予L-NAME后第2周大鼠血压开始明显升高,经卡托普利干预,血压明显下降,心肌组织中羟脯氨酸浓度降低,AngⅡ分泌减少,CT-1表达下调。而氟伐他汀干预后,虽然血压没有降低,但心肌组织羟脯氨酸和AngⅡ浓度均显著降低,心肌CT-1的表达明显下调。结论:氟伐他汀能逆转NO缺乏性高血压大鼠心肌纤维化,而下调CT-1的表达可能是其作用机制之一。

心肌营养素-1在心肌成纤维细胞增殖中的作用

目的:探讨心肌营养素-1(CT-1)在高血压心室重塑中的作用。方法:3-4代心肌成纤维细胞用于实验,分为对照组、助溶剂(二甲亚砜,DMSO)组、CT-1反义寡核苷酸组(ASODN)、正义寡核苷酸对照组(SODN)、PD98059组、AG490组、LY294002组。利用自制压力培养装置,将各组细胞置于160mmHg压力下培养8h。STAT3、ERK1/2和PI3-K的活性通过Western blotting分析测定;MTT测定心肌成纤维细胞增殖。结果:高静水压明显促进心肌成纤维增殖,CT-1表达上调,CT-1ASODN干预后,CT-1ASODN能抑制高静水压所致的细胞增殖(0.132±0.013vs0.154±0.011,P<0.05),STAT3、ERK1/2和PI3-K蛋白表达水平明显低于对照组(2.09±0.25vs2.47±0.28,P<0.05)、(1.13±0.19vs1.61±0.22,P<0.05)、(1.25±0.23vs1.71±0.25,P<0.05)。AG490组明显减弱高静水压的促增殖作用(0.118±0.018vs0.155±0.010,P<0.05)并且增加ERK1蛋白磷酸化(1.85±0.18vs1.45±0.23,P<0.05);PD98059增强高静水压的促增殖(0.185±0.011vs0.155±0.010,P<0.05)并且增加STAT3蛋白磷酸化(1.83±0.23vs1.58±0.22,P<0.05),PI3/K阻断剂LY294002干预后对高静水压的促增殖作用无影响(0.157±0.015vs0.155±0.010,P>0.05);SOND(0.151±0.010vs0.154±0.011,P>0.05)和DMSO组(0.141±0.017vs0.155±0.010,P>0.05)与对照组相比对心肌成纤维细胞增殖无明显差别。结论:高静水压下,心肌成纤维细胞增殖主要通过STAT3通路;ERK1/2通路通过抑制STAT3的活性起负向调节作用,可能在防止心肌成纤维细胞过度增殖起重要的作用;PI3-K没有参与这一作用。上述STAT3通路与ERK1/2通路之间的相互作用可能有助于防止诱导成纤维细胞过度增殖。

心肌营养素-1在血管紧张素Ⅱ致心肌细胞肥大中的表达

目的利用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激心肌细胞造成肥大,观察心肌细胞肥大过程中心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)的表达情况。方法培养原代心肌细胞,给予AngⅡ刺激心肌细胞造成肥大,在不同时间取细胞进行反转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察CT-1 mRNA表达,免疫组化法检测CT-1蛋白表达,相差显微镜下观察细胞形态变化。结果经AngⅡ刺激后在相差显微镜下可见心肌细胞面积变大。CT-1 mRNA水平随着AngⅡ刺激时间延长而有增高的趋势,CT-1蛋白表达亦增加。结论AngⅡ致心肌细胞肥大过程中伴有CT-1表达增加,CT-1有可能参与心肌细胞的肥大机制。

辛伐他汀干预急性心肌梗死后心肌营养素-1的表达与左室重塑的关系

目的研究辛伐他汀干预急性心肌梗死(AMI)后左室非梗死区(LVNIZ)心肌营养素-1(CT-1)表达及左室重塑(LVRM)的进程。方法♂SD大鼠分为4组,AMI组、AMI+辛伐他汀组、假手术组和正常组,每组8只。前2组大鼠结扎左冠状动脉前降支(LAD)制备成AMI模型。AMI+辛伐他汀组在手术后d2予辛伐他汀40mg.kg-1.d-1灌胃。余3组给予生理盐水灌胃。4wk后测定左室重量指数,LVNIZ心肌细胞横截面积,LVNIZ心肌胶原容积分数变化,用RT-PCR和Western blot法测定LVNIZ CT-1mRNA表达和蛋白合成水平。结果与正常和假手术组比较,AMI组LVRM参数:左室重量指数(LVWI),心肌细胞横截面积(CA),Ⅰ、Ⅲ胶原容积分数(CVFⅠ、CVFⅢ),均明显增加(P<0.05),LVNIZ CT-1mRNA表达和蛋白合成水平于4wk后明显增加(P<0.05)。与AMI组相比,AMI+辛伐他汀组LVRM明显减轻,LVNIZ CT-1mRNA表达和蛋白合成水平明显下调(P<0.05)。结论大鼠AMI后LVNIZ CT-1mR-NA和蛋白的过度表达与AMI后LVRM的发生有联系,辛伐他汀可改善LVRM,其机制可能与抑制CT-1基因过度表达与蛋白合成有关。

培哚普利和贝尼地平对高血压病患者血浆心肌营养素-1和可溶性细胞间黏附分子-1表达的影响

目的探讨高血压病患者血浆心肌营养素-1(CT-1)和血浆细胞间黏附分子-1(sICAM-1)活性的变化及培哚普利和贝尼地平对其的影响。方法应用生物素-链霉亲和素酶联免疫吸附法(BSA-ELISA)对56例高血压患者应用培哚普利和贝尼地平治疗前后及30名正常健康人,测定血浆CT-1水平和血浆sICAM-1水平。结果高血压组的血浆CT-1和血浆sICAM-1的表达明显高于正常对照组,差异有显著性(P<0.01);高血压组经培哚普利和贝尼地平治疗8周后其浓度明显下降(P<0.01)。结论高血压患者血浆CT-1水平和sICAM-1活性较正常人明显升高。培哚普利和贝尼地平在有效降压的同时能降低高血压患者血浆CT-1水平和sICAM-1浓度,以减少高血压并发症发生。

心肌营养素-1在大鼠缺血再灌注心肌中的表达及神经调节蛋白-1对其表达的促进作用

目的研究大鼠缺血再灌注心肌中心肌营养素-1(CT-1)的表达及神经调节蛋白-1(NRG-1)对其表达的影响。方法制备大鼠缺血再灌注心肌模型,分为模型组(n=8),NRG-1预处理组(n=9),假手术组(n=8)和正常对照组(n=10)。利用RT-PCR技术检测各组CT-1 mRNA表达,计算CT-1 mRNA相对量,并作统计学处理。结果模型组CT-1 mRNA结果(63.96±9.34)高于假手术组(36.16±5.43)和正常对照组(36.84±4.64),三者比较差异有显著性(F=47.37 P<0.01);NRG-1预处理组(89.49±6.99)高于模型组,差异有显著性(t=6.43 P<0.01)。结论大鼠心肌缺血再灌注后CT-1 mRNA表达升高,其原因可能是缺血再灌注激活机体内源性保护机制,NRG-1预处理对心肌的保护作用可能与提高心肌细胞中CT-1的表达有关。实用儿科临床杂志,2006,21(1)

缺氧后适应与心肌营养素-1对心肌细胞缺氧复氧的保护作用及机制探讨

目的探讨缺血后适应与心肌营养素-1(CT-1)对心肌细胞缺氧复氧的保护作用及其机制。方法将体外培养的H9C2细胞株分为正常对照组(a组)、缺氧复氧组(b组)、缺氧复氧+缺氧后适应组(c组)、缺氧复氧+缺氧后适应+CT-1组(d组)、缺氧复氧+缺氧后适应+CT-1+ERK抑制剂组(e组)、缺氧复氧+缺氧后适应+CT-1+二甲基亚砜组(f组),MTS法检测各组细胞存活率、流式细胞仪检测细胞凋亡率、Western blot检测细胞外调节激酶(ERK1/2)和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的表达、Q-PCR检测Bad mRNA的表达。结果与a组比较,其他各组细胞存活率下降,细胞凋亡率、Bad mRNA和p-ERK1/2(除外e组)表达量增加,P均<0.05;与b组比较,c组细胞存活率、p-ERK1/2表达量均增加,Bad mRNA表达、凋亡率下降,P均<0.05;与c组比较,d组细胞存活率、pERK1/2表达量均增加,细胞Bad mRNA表达、凋亡率下降(P均<0.05);与d组比较,e组细胞存活率下降,细胞凋亡率、Bad mRNA表达量增加,p-ERK1/2表达量下降;d、e组各项指标指标比较差异无统计学意义。结论缺氧后适应可减少心肌细胞缺氧复氧损伤,联合CT-1后保护作用明显加强,而ERK1/2抑制剂可阻断这种保护作用;该保护机制可能与CT-1激活ERK1/2信号通路,下调Bad mRNA的表达有关。

心肌营养素-1在新生儿缺氧缺血性脑病中的变化及与心肌损伤的相关性研究

目的探讨血浆心肌营养素-1(CT-1)在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中的变化,并分析其与心肌损伤的相关性。方法该院儿科收治的足月HIE患儿45例(轻度15例、中度24例、重度6例),分为心肌损伤组19例和非心肌损伤组26例。20例健康新生儿作为健康对照组。使用双抗体夹心酶标免疫分析法检测血浆CT-1水平。应用多普勒超声心动仪测定心输出量(CO)、左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)。结果轻、中、重度HIE血浆CT-1水平较健康对照组均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),中、重度与轻度HIE比较,CT-1水平也明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。心肌损伤组血浆CT-1水平较非心肌损伤组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。心肌损伤组急性期血浆CT-1水平明显高于恢复期,差异有统计学意义(P<0.01)。HIE患儿急性期CO、EF、FS明显降低,且CT-1水平与CO、EF、FS均呈显著负相关。结论 HIE患儿急性期血浆CT-1水平升高,且检测血浆CT-1水平有助于早期诊断心肌损伤,判断病情,并能反映其心功能变化。

冠心病患者血浆心肌营养素-1、胃饥饿素、脂蛋白相关磷脂酶A2水平与心功能的关系

目的探讨冠心病患者血浆心肌营养素-1（CT-1）、胃饥饿素（Ghrelin）、脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp—PLA2）水平与心功能的关系。方法选取2016年4月至2017年4月期间我院心内科收治的81例冠心病患者作为研究对象，依据纽约心功能分级（NYHA）进行分组，冠心病组中心功能Ⅰ级16例，Ⅱ级24例，Ⅲ级25例，Ⅳ级16例，并选取45名健康体检者作为正常对照组。采用ELISA检测入组患者CT-1、Ghrelin、Lp—PLA2水平，分析其与冠心病严重程度、心功能的关系。结果冠心病组患者CT-1、Lp-PLA2水平明显高于正常组，Ghrelin水平低于LE常组（P〈0．05）。双支病变组CT-1、Lp-PLA2水平高于单支病变组，Ghrelin水平低于单支病变组（P〈0．05）；多支病变组CT-1、Lp—PLA2水平高于双支病变组，Ghrelin水平低于双支病变组（P〈0．05）。NYHAⅣ级冠心病患者CT-1、Lp-PLA2水平高于NYHAⅠ、Ⅱ、Ⅲ级冠心病患者（P〈0．05），Ghrelin水平低于NYHAⅠ、Ⅱ、Ⅲ级冠心病患者（P〈0．05）。CT-1、Ghrelin、Lp—PLA2检测对冠心病发生心力衰竭的预测价值处于60％-80％之间，阴性预测价值处于40％-50％之间，但联合检测CT-1、Ghrelin、Lp—PLA2水平，可提高对冠心病发生心力衰竭的预测价值，为88．79％。血浆CT-1、Lp—PLA2水平与冠心病患者心功能严重程度呈正相关（rCT-1=0．598，P〈0，05；rLp-PLA2=0．524，P〈0．05）；血浆Ghrelin水平与冠心病患者心功能严重程度呈负相关（r=-0．629，P〈0．05）。结论冠心病患者血浆CT-1、Lp—PLA2水平随着心功能下降而升高，Ghrelin水平随着心功能下降而降低，联合检测有助于判断冠心病患者预后。

心肌营养素-1对谷氨酸诱导神经元凋亡的抑制作用及机制

目的:探索重组腺病毒心肌营养素-1(Adv-CT-1)对谷氨酸(Glu)诱导神经元凋亡的保护作用及相关机制,为脑损伤提供新的治疗措施.方法:海马神经元分为3组:单纯Glu组、CT-1干预组(Adv-CT-1转染)及对照组;利用相差显微镜检查、DNA片段检测、乳酸脱氢酶(LDH)活性及流式细胞技术,对各组神经元进行凋亡检测;WesternBlot检测Caspase-3活性变化及线粒体内和胞浆内细胞色素C(CytC)水平变化.结果:Glu组神经元呈现明显形态改变,并见DNA梯状条带形成,CT-1组未见类似改变;Glu组神经元在Glu暴露后6,9及18h,LDH释放量(14.3%,24.6%及28.4%)及凋亡率(6.2%,18.8%及26.4%)均高于CT-1组(分别为9.2%,16.1%,19.7%及3.6%,11.3%,16.1%);Glu组Caspase-3活性3h即增加(25.6%),6及9h达到62.4%及46.1%,CT-1组3h时的Caspase-3表达分别为13.6%,45.2%及17.1%,均低于Glu组(P<0.05);Glu暴露30min,神经元胞质内CytC水平增加,之后进行性增高,线粒体内CytC进行性减少;Glu暴露后6h,CT-1组神经元胞质内CytC较Glu组减少了55.7%(P<0.05).结论:Glu诱导海马神经元凋亡的机制涉及线粒体CytC释放,激活Caspase级联反应;CT-1对损伤神经元的保护作用可能是经由线粒体信号转导途径、通过减少线粒体CytC释放而实现的.

NADPH氧化酶亚单位nox-1在心肌细胞急性缺氧复氧损伤时的变化及心肌营养素-1的作用

目的:探讨心肌细胞急性缺氧复氧损伤时NADPH氧化酶亚单位nox-1的变化及心肌营养素-1的作用。方法:用改良的方法培养出生1-3d的乳鼠心肌细胞,分为6组:(1)对照组;(2)缺氧复氧组;(3)缺氧复氧+CT-1组;(4)缺氧复氧+CT-1+LY294002组(PIK3/Akt阻断剂);(5)缺氧复氧+CT-1+PD98059组(ERK阻断剂);(6)缺氧复氧+CT-1+助溶剂DMSO组。CT-1的浓度为10μg/L。MTS法测定心肌细胞的存活率,四氯四乙基苯丙咪唑基羰化青碘化物(JC1)检测心肌细胞线粒体膜电位(Δψm),二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-CA)检测细胞活性氧(ROS),流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率。Nox-1蛋白采用Westernblotting检测。结果:缺氧复氧培养后心肌细胞凋亡率及细胞内ROS较对照组明显增加,分别是(19.7%±1.4%vs2.1%±0.5%,14.07%±1.25%vs3.54%±0.86%,P<0.05),而心肌细胞存活率显著降低,线粒体膜电位(Δψm)下降;nox-1表达明显升高。CT-1处理的心肌细胞,较缺氧复氧组心肌细胞存活率明显上升(87.0%±7.3%),而心肌细胞凋亡率及细胞内ROS显著减少,Δψm水平增加,nox-1蛋白表达下调。而CT-1的这些作用能被PIK3/Akt和ERK阻断剂抑制。结论:心肌细胞急性缺氧复氧损伤时NADPH氧化酶亚单位nox-1表达上调,而心肌营养素-1能通过下调nox-1表达,发挥对心肌细胞保护作用。

替米沙坦对压力超负荷性大鼠心室重构及心肌营养素-1表达的影响

目的研究血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂替米沙坦对压力超负荷性大鼠心室重构及心肌营养素-1(CT-1)表达的影响。方法20只雄性SD大鼠行腹主动脉缩窄术后2周造成后负荷增高型大鼠模型,存活大鼠随机分为肥厚组和替米沙坦组,另设8只作为假手术组。替米沙坦组灌胃给药(3mg·kg-1·d-1),连续4周。测定血流动力学指标和心室质量指数,放免法测定心肌和血浆的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,原位杂交法检测心肌的CT-1mRNA表达水平。结果与假手术组比较,肥厚组SBP、DBP和MABP显著升高(P<0.05),LVMI和RVMI亦明显升高(P<0.05);心肌组织AngⅡ含量和CT-1mRNA表达水平明显增加(P<0.05)。替米沙坦改善血流动力学指标(P<0.05),降低LVMI和RVM(IP<0.05),AngⅡ含量显著降低(P<0.01),CT-1mRNA的表达明显下调(P<0.05)。结论压力超负荷性大鼠表达上调的CT-1参与心室重构;替米沙坦下调CT-1的过度表达可能是其防治心室重构的机制之一。