杜梨组培快繁及组培苗微扦插技术研究

以种子来源的4个杜梨株系组培苗为试材,采用植物组织培养和组培苗微扦插的方法,研究了不同浓度细胞分裂素6-BA和IBA处理对杜梨丛生芽增殖的影响以及不同浓度IBA和生长素(NAA)处理对杜梨组培苗离体生根和微扦插生根的影响,以期为稳定高效杜梨组培快繁体系的建立提供参考依据。结果表明:基因型和6-BA浓度对杜梨增殖系数具有极显著影响,IBA浓度对增殖系数具有显著影响;低浓度的生长素更适合用于杜梨组培苗的生根诱导。综合考虑组培苗增殖和生根情况,DL30株系表现最优,其适宜的增殖培养基为MS+1.0 mg·L^(-1)6-BA+0.2 mg·L^(-1)IBA,增殖系数为3.4±0.35,适宜的生根培养基为1/2MS+0.2 mg·L^(-1)IBA,生根率达60.0%±20.0%。IBA和NAA蘸根处理对杜梨组培苗微扦插生根有显著影响,杜梨株系DL30组培苗通过1000 mg·L^(-1)的IBA蘸根处理后微扦插生根率为46.7%±8.8%。

河南石斛的无菌播种与离体快繁技术研究

为建立河南石斛的无菌播种离体快繁技术体系,加快河南石斛资源保护和产业化利用,以河南石斛种子为外植体,采用不同的培养基配方开展了种子无菌萌发、分化、继代增殖及生根培养研究。结果表明,河南石斛种子播种后能快速萌发并分化成苗,最佳培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+香蕉100 g/L+AC 1.0 g/L,培养30 d时萌发率达到90%;将分化芽苗转接到继代增殖培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+香蕉100 g/L+AC 1.0 g/L上培养,以“芽繁芽”方式增殖,其增殖系数可达8.0;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.6 mg/L+香蕉100 g/L+AC 1.0 g/L上,培养50 d后可形成具发达根系的健壮植株;以松树皮和珍珠岩为基质,移栽成活率在90%以上。建立的上述快繁技术体系可直接应用于河南石斛的规模化种苗生产。

黄精根状茎无菌快繁体系建立

为进一步完善黄精无菌快繁技术体系提供技术基础。本试验以选育的七叶黄精根状茎作为外植体材料,测定不同消毒处理的根茎污染率、死亡率和不同浓度6-BA(6-Benzylminopurine)与NAA(1-Naphthalic acid)组合对其茎段腋芽的萌芽率影响,探索该植物根状茎无菌快繁体系的建立。结果表明,以超声波清洗机消毒15 min的处理效果最好,污染率和死亡率分别为20%和17%;恒温振荡器消毒15 min的污染率和死亡率分别为27%和37%,最佳消毒时间15 min;以MS为基本培养基,采用C12-Y组合(2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA)处理有芽茎段的效果最好,其平均萌芽率达76.67%,无芽茎段的平均萌芽率达56.67%。

油橄榄幼嫩茎段组培快繁技术研究

以阿贝基纳优良单株幼嫩茎段为试验材料,通过对油橄榄外植体灭菌、基本培养基、生长调节剂等因素对油橄榄组织培养技术影响的研究,试验结果表明:使用75%乙醇30 s、0.1%HgCl_(2) 10 min进行外植体消毒处理时获得率最高,达36.15%;改良MS培养基适宜外植体诱导芽萌发,最佳增殖培养基为改良MS+6-BA 4.0 mg·L^(-1)+NAA 0.5 mg·L^(-1)+TDZ 0.5 mg·L^(-1),诱导率为65.3%,最佳生根培养基为1/2MS+ABT 0.6 mg·L^(-1)+IBA 0.2 mg·L^(-1),生根率90%,活性炭浓度最佳添加浓度0.5 g·L^(-1),蔗糖最佳添加浓度30 g·L^(-1)。

霞妃睡莲的组织培养及快繁技术研究

文章以霞妃睡莲(Nymphaea cv.Sunshine Princess)的根状茎为外植体,通过全面系统研究其初代培养、增殖、生根及移栽等不同阶段的培养条件,首次成功建立了睡莲的组培快繁技术体系。研究结果显示:固体培养基更适合霞妃睡莲的组织培养,且有利于提高睡莲的增殖率和人工操作效率;噻二唑苯基脲(TDZ)对睡莲不定芽的增殖诱导效果优于苄基腺嘌呤(BA),且两者一起使用具有协同效应,增殖率达到3.44且保持较好的生长状态;吲哚丁酸(IBA)对睡莲的生根诱导效果优于相同浓度的萘乙酸(NAA),活性炭的添加也有利于睡莲的生根诱导;适量的多菌灵能够提高睡莲组培苗的移栽成活率。该研究为睡莲种质资源的无菌保存及新品种的快速推广提供了有力的技术支持,对于加速睡莲种苗的规模化生产和推动国内外睡莲产业发展具有重要的现实意义。

天冬组培快繁技术体系的研究

为确定最佳的外植体消毒方式和最适宜的诱导、分化和生根培养基,以内江天冬茎段为外植体,研究消毒时间、培养基及生长素对愈伤组织诱导、分化及组培苗生根的影响。试验结果表明,选取天冬茎段作为外植体时,0.1%氯化汞消毒处理的最佳时间为8 min,污染率为13.33%、死亡率为8.89%、存活率为77.78%。适宜愈伤组织诱导的培养基是1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂粉6 g/L,诱导率为72.2%,愈伤组织生长势强;适宜愈伤分化的培养基是MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂粉6 g/L,分化率达到82.2%,生长势较强;适宜组培苗生根的NAA质量浓度为2 mg/L,生根率可达86.7%,根系正常、生长迅速。通过研究,建立了天冬组培快繁技术体系,为保护天冬野生资源、解决优质种苗紧缺及实现规模化种植提供了科学依据和技术支撑。通过研究四川内江天冬组织培养的适宜条件,构建其组培快繁技术体系,以满足对优质种苗的需求,为天冬种质资源保护及可持续利用开辟新途径,为天冬产业化开发提供技术支持和科学依据。

‘红色龙沙宝石’欧月离体快繁关键技术研究

为建立‘红色龙沙宝石’月季组培快繁体系,选取其带腋芽茎段作为外植体进行试验。结果表明,以0.1%Hg Cl2灭菌处理8 min,成活率达88.68%;初代培养以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L为宜,诱导率为93.32%;以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.3 mg/L继代培养,增殖系数达5.72;1/2 MS+NAA 0.1mg/L加入300 mg/L活性炭生根率最佳,可达92.26%;移栽到培养基质为草炭︰珍珠岩︰蛭石=3︰1︰1中成活率高达92%。

平邑甜茶离体快繁体系的建立

平邑甜茶(Malus hupehensis)作为砧木,被广泛应用于苹果生产。为进一步提高平邑甜茶的离体快繁效率,以平邑甜茶春季幼嫩新梢带芽茎段为外植体,探究不同外植体消毒方式、不同植物生长调节剂配比对组培苗增殖和生根培养的影响,建立平邑甜茶离体快繁体系。结果表明,平邑甜茶新梢带芽茎段用75%酒精处理30 s+2%次氯酸钠溶液处理12 min的消毒效果较好,成活率达81.11%。最佳增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA,增殖系数为7.09;最适生根培养基为1/2MS+0.15 mg/L NAA,该处理下的生根率为75.55%,平均根系数量和长度分别为3.23条、3.57 cm;生根后的组培苗在蛭石∶珍珠岩∶营养土质量比为1∶1∶1基质中的移栽成活率为90%。该离体快繁体系,为周年培育平邑甜茶砧木苗提供了技术支持。

台湾榕组培快繁技术研究

【目的】建立台湾榕(Ficus formosana)组培高效繁育技术体系。【方法】以台湾榕茎段为试验材料,研究不同基础培养基对台湾榕茎段诱导率和萌芽数的影响;利用正交试验研究不同植物生长调节剂、活性炭及其质量浓度配比对丛生芽增殖系数、生根率和生长发育的影响;最后通过设置不同移栽基质对生根的组培苗开展移栽驯化研究,筛选能提高组培苗移栽成活率和质量的基质。【结果】同样添加1.0 mg/L 6-苄基腺嘌呤(6-BA)、0.5 mg/L激动素(KT)、0.2 mg/L萘乙酸(NAA),以WPM为基础培养基对台湾榕茎段的诱导效果优于MS培养基,培养30 d后其诱导率达97.13%,萌芽数为3.38。正交试验的极差结果显示,NAA是影响丛生芽增殖的主要植物生长调节剂,其次是6-BA,丛生芽增殖的最佳培养基为WPM+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA,接种60 d后,增殖系数达到5.77,丛生芽健壮;同时NAA也是影响丛生芽生根的主要因素,吲哚丁酸(IBA)、活性炭对生根率的影响差异不显著,丛生芽生根的最佳培养基为WPM+0.1 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA+1 g/L活性炭,接种60 d后,生根率达到100%,组培苗健壮、根系发达、不易折断;组培苗最适移栽基质是河沙∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1的组合基质,移栽30 d后,苗株成活率97.78%,长势很好。【结论】台湾榕茎段经过WPM+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L NAA诱导,再利用WPM+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA和WPM+0.1 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA+1 g/L活性炭进行丛生芽的增殖和生根,最后由河沙∶蛭石∶珍珠岩=1∶1∶1的组合基质进行移栽驯化,是最适合台湾榕组培高效繁育的技术体系。

亚洲百合‘穿梭’组培快繁体系的建立

以亚洲百合‘穿梭’为试材,采用植物组织培养的方法,研究了不同浓度激素对百合鳞片诱导、不定芽增殖、小鳞茎生根培养的影响,并筛选出适宜百合组培苗生长的移栽基质,以期为亚洲百合‘穿梭’的组培快繁体系的建立提供参考依据。结果表明:百合鳞片最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L^(-1)NAA+0.5 mg·L^(-1)6-BA+30 g·L^(-1)蔗糖+6 g·L^(-1)琼脂,诱导率最高可达74.44%,显著高于其他处理;最佳增殖培养基为MS+0.1 mg·L^(-1)NAA+1.0 mg·L^(-1)6-BA+30 g·L^(-1)蔗糖+6 g·L^(-1)琼脂,不定芽增殖数量最多,增殖系数为3.27;适合小鳞茎生根培养基为1/2MS+0.1 mg·L^(-1)NAA+0.3 mg·L^(-1)IBA+40 g·L^(-1)蔗糖+6 g·L^(-1)琼脂,平均生根数量为14.33,是其他处理的1.15~2.02倍;移栽后组培苗在草炭与珍珠岩为1∶1的基质配比中成活率高达87.50%,且组培苗长势最好。

湖北海棠离体快繁体系的建立

【目的】建立苹果砧木湖北海棠离体快繁体系,为苹果砧木苗的周年供应提供技术支撑。【方法】以湖北海棠幼嫩春梢带芽茎段为外植体,研究植物生长调节剂(6-BA,IBA)浓度对组培苗增殖和生根的影响,筛选最适合其增殖和生根的培养基配方,建立湖北海棠离体快繁体系。【结果】湖北海棠幼嫩春梢带芽茎段经消毒处理后接种至MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA30.3 mg/L培养基上,其萌芽率为77.78%;最佳增殖培养基配方为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,增殖系数为8.13;最佳生根培养基配方为1/2 MS+0.45 mg/L IBA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,生根率为97.78%,平均根系数量和长度分别为3.28条和3.35 cm;生根培养30 d后,组培苗的移栽成活率为85.27%。【结论】湖北海棠的最佳增殖培养基配方为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,最佳生根培养基配方为1/2 MS+0.45 mg/L IBA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖。该组培快繁体系可有效控制湖北海棠的玻璃化现象,提高其增殖率和生根率。

柿砧木优系L938离体快繁技术建立

【目的】L938是从君迁子中选育出的适宜中国北方地区应用的甜柿优良砧木,但因缺乏再生体系,使其规模化生产受到影响。高效稳定再生体系的建立有利于资源保存,同时也是开展组培快繁和遗传转化研究的基础,因此建立柿砧木优系L938的高效离体快繁体系,可为品种推广及组培苗规模化繁育提供技术支持和参考依据。【方法】以柿砧木L938为试材,重点探讨了不同外植体材料、消毒时间、植物生长调节剂浓度配比组合对其再生过程的影响。【结果】(1)新梢(4月份)相较于休眠芽、新梢(5月份)为最适宜君迁子优系L938启动培养的外植体,消毒入瓶后成活率最高,可达71.33%。(2)启动培养阶段随着HgCl_(2)消毒时间的延长,新梢外植体污染率整体呈下降趋势,采用0.1 g·L^(-1)HgCl_(2)处理40 min灭菌效果最好,成活率可达35.30%。(3)1/2MS培养基较适宜进行君迁子L938组培苗的继代培养,新梢增殖系数达到4.4。(4)以1/2MS+1.0 mg·L^(-1)NAA+1.0 mg·L^(-1)IBA为生根培养基,暗处理7 d后转至光下,生根率可达93.33%,根长为29.08 cm,根系表面积为19.53 cm^(2)、根系体积为1.05 cm3。【结论】建立的柿砧木优系L938高效离体快繁体系,可为组培苗规模化繁育提供科学依据和参考。

树莓组织培养及快繁体系的建立

以红树莓、黑树莓、掌叶覆盆子为试验材料,选取茎段、茎尖和叶片作为外植体,建立树莓组织培养快繁体系。结果表明,适宜获得树莓无菌苗的外植体是茎段和茎尖,三种树莓丛生芽诱导最佳培养基为MS+6-BA(1.0~2.0)mg/L+NAA(0.1~0.2)mg/L;最佳愈伤出芽培养基为MS+6-BA(5.0 mg/L)+NAA(0.2 mg/L);红树莓增殖培养的培养基为MS+6-BA(0.5~1.0)mg/L+NAA(0.2 mg/L);黑树莓增殖的培养基为MS+6-BA(1.0 mg/L)+NAA(0.05~0.1)mg/L;掌叶覆盆子增殖的培养基:MS+6-BA(1.0 mg/L)+NAA(0.2 mg/L)。以1/2 MS+IBA(1.0 mg/L)为培养基诱导生根。炼苗在0.05%KMnO4杀菌条件下,在V粘土∶V泥炭土=1∶1的基质中进行。

蜜薯茎尖脱毒快繁体系优化与脱毒效果的研究

针对蜜薯病毒病严重的问题,对蜜薯进行茎尖脱毒,研究不同消毒剂与消毒时间对蜜薯外植体消毒效果和脱毒率的影响。通过RT-PCR技术检测蜜薯苗所带病毒种类;针对检测出的病毒进行茎尖脱毒处理,研究不同消毒剂与消毒时间对蜜薯外植体消毒效果的影响;通过正交试验研究6-BA、NAA、GA_(3)和IAA激素浓度配比对茎尖诱导及根诱导的影响,以此优化蜜薯快繁体系;最后,用RT-PCR检测茎尖脱毒效果。结果表明:蜜薯病毒初检发现,蜜薯中主要携带SPVG、SPFMV和SPCSV 3种病毒,其中SPVG带毒率最高;茎尖诱导适宜的外植体消毒方式为:70%酒精清洗45 s,再用0.1%升汞溶液浸泡7~8 min;茎尖诱导适宜的培养基选择为:MS+1.0 mg·L^(–1)6-BA+0.1 mg·L^(–1)NAA+1.0 mg·L^(–1)GA_(3),生根诱导最适宜培养基为1/2 MS+0.1 mg·L^(–1)NAA+0.1 mg·L^(–1)IAA。经茎尖脱毒后SPFMV脱除效果最好,脱毒率为100%,SPVG次之,SPCSV脱除效果最差,仅降低了约3.33%。

2个枣品种茎段的组织培养快繁技术

【目的】探索植物激素对枣茎段不定芽诱导、增殖与生根的影响,确立各培养阶段最佳的培养基激素配比,建立枣组织培养高效再生植株的体系。【方法】以‘赛蜜酥’‘伏脆蜜’当年生枣头枝茎段作为外植体材料,利用组织培养技术,研究接种前不同浓度NaClO消毒处理不同时间对污染率、褐化率和成活率的影响,以及不同浓度、不同种类植物激素对外植体不定芽诱导、增殖继代和生根的影响,筛选最佳的外植体消毒方式以及最适合不定芽诱导、增殖与生根的激素种类与浓度配比。【结果】当以‘赛蜜酥’‘伏脆蜜’当年生枣头枝茎段为外植体时,最佳外植体消毒方式为75%乙醇处理30 s+2%NaClO溶液处理5~10 min,最佳不定芽诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+0.010 mg/L TDZ+30 g/L蔗糖+5.6 g/L琼脂,最佳增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+0.006 mg/L TDZ+30 g/L蔗糖+5.6 g/L琼脂,最佳生根培养基为1/2 MS+0.1 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA+0.3 g/L活性炭+15 g/L蔗糖+5.6 g/L琼脂。【结论】构建了‘赛蜜酥’‘伏脆蜜’2个枣品种的茎段组织培养快速繁殖技术体系。

粉葛赣葛2号组培快繁体系建立与优化

为了加快横峰县本地粉葛品种赣葛2号优质种苗的繁育与推广,本研究以带芽茎段为材料,探讨无菌体系建立、不定芽诱导及增殖、试管苗生根、驯化移栽等过程,建立并优化了粉葛赣葛2号组培快繁体系。结果表明,初代芽诱导效果最优培养基为MS+6.5 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+1.5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA,平均诱导率为80.55%;继代培养效果最优培养基为MS+6.5 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,平均诱导率为91.66%;适合生根的培养基为MS+6.5 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+0.5 mg/L NAA,生根率达84.38%。移栽基质配方为V泥炭土∶V蛭石∶V珍珠岩=3∶2∶1,组培苗成活率达100%。

基于瓶内-瓶外结合的濒危药用植物茅苍术组培快繁研究

目的:优化茅苍术离体培养方法及条件,建立一种茅苍术高效组培快繁技术体系。方法:以茅苍术无菌苗为外植体,优化培养条件,筛选最佳增殖培养基,并采用组培瓶内-瓶外结合对茅苍术继代芽苗进行生根诱导,获得组培苗。结果:茅苍术胚轴切割以横切、仅保留下胚轴最佳,平均增殖系数为3.80;光照强度6000 lx更适于茅苍术不定芽诱导,平均增殖系数达4.36。茅苍术最适不定芽增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖50 g/L,增殖系数为12.96±1.55,单芽最高增殖系数可达15,农艺性状整齐度最高。瓶外生根过程中,育苗周期较瓶内生根方式可缩短14 d左右,最适生根基质为草炭∶珍珠岩∶蛭石=3∶1∶1;瓶外生根平均成活率达95.00%,显著高于瓶内生根。结论:通过结合瓶内培养与瓶外生根技术,建立了一种创新性的茅苍术组培快繁技术体系,在缩短育苗周期的同时,提高茅苍术成活率,为濒危药用植物茅苍术工厂化育苗提供科学可行的技术支持。

苹果砧木‘K9’无糖组培快繁体系的优化

试验以苹果砧木‘K9’组培苗为材料,研究在继代阶段,生根阶段,缓苗阶段中不同影响因素对其生长发育的影响,进而对无糖组培高效快繁体系进行优化。结果表明,在继代阶段,植物生长调节剂、NH4NO3与KNO3均会对组培苗‘K9’增殖与生长产生影响,MS(1.65g·L-1 NH4NO3与1.60g·L-1 KNO3)+6BA(0.40 mg·L-1)+IBA(0.10 mg·L-1)是苹果砧木‘K9’组培苗增殖生长的最佳培养基,增殖系数为3.67,苗高为2.55 cm。在生根阶段,合理的IBA浓度与基质含水量是无糖组培苗能否成功生根的关键,当IBA浓度为0.75 mg·L-1,基质含水量为75 %时,组培苗生根率达到99 %,且根系各指标显著优于其他处理。而无糖组培盒的接种密度对组培苗生根的影响不大,不同处理间根系指标无显著差异。在缓苗阶段,无糖组培苗大小与穴盘规格是无糖组培苗能否移栽到大田的重要影响因素,当无糖组培苗为大苗(高度≥2 cm)且移栽在32深孔的穴盘时,株高与茎粗分别达到12.66 cm与2.93 mm,经过缓苗能够最快达到移栽到大田所需的质量标准。此外,4-5月份是移栽的最好时期,成苗率较高且苹果砧木‘K9’生长发育状况良好。

7种微型月季组培快繁及叶片直接再生技术探究

为筛选出不定芽诱导率最高的品种和最优培养条件,为微型月季规模化生产提供科学依据和理论基础。以7个微型月季品种茎段为外植体,建立组培快繁体系,对叶片直接再生的影响因子进行研究,结果表明,不同微型月季品种表现出增殖、生根和再生能力上的差异。微型月季茎段最佳消毒方式为75%酒精冲洗30s+5%NaClO冲洗6min;最适腋芽萌发培养基为MS+3.0mg/L6-BA+0.05mg/L NAA,萌芽率81.8%,平均每个外植体萌芽1.4个;不定芽增殖最佳培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA,增殖系数为1.97;最适生根培养基为1/2MS+0.25mg/L IBA+0.25mg/L NAA,生根率达到81.9%;7个微型月季品种中能够通过叶片直接发生不定芽的是‘灌木小伊甸园’,最适合的诱导培养基为MS+1.0mg/L TDZ+0.05mg/L NAA+10 mg/L Ag NO_(3)+100mg/L CH,暗培养12d,不定芽诱导率为23.58%。

尤加利茎尖组培快繁体系的建立

尤加利是当前国内外鲜切花市场上重要的切叶材料,筛选其茎尖生长及生根的最佳培养基,建立其组培快繁体系,可为尤加利组培苗工厂化生产提供参考。以尤加利无菌茎尖为试验材料,分析不同基础培养基、6-BA、NAA组合及其浓度处理下尤加利组培生长和生根情况,并对组培苗进行移栽试验。结果表明:基本培养基是影响尤加利组培苗褐化和增殖的主要因子,NAA是影响尤加利组培苗生根的主要因子;1/4 WPM+6-BA1.3 mg/L+NAA0.1 mg/L组合处理下尤加利茎尖组培褐化率(2.63%)较低,增殖率(115.79%)和生根率(97.37%)均达到最大,移栽后幼苗健壮,叶色浓绿,移栽成活率可达73.71%。可见,1/4 WPM+6-BA1.3 mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖15 g/L+琼脂6.0 g/L作为最佳培养基,可建立高效的尤加利茎尖组培快繁体系。