贵州野生葛枣猕猴桃组培快繁体系的建立

【目的】探明贵州野生葛枣猕猴桃组培快繁体系,为优异猕猴桃野生资源繁殖推广和保存利用提供参考。【方法】以葛枣猕猴桃单芽茎段为外植体,对比分析不同激素浓度组合下葛枣猕猴桃单芽茎段离体后诱导培养、增殖培养、生根培养和植株移栽情况,建立组培快繁技术。【结果】葛枣猕猴桃单芽茎段诱导和增殖培养均以MS培养基为基本培养基,添加不同种类和浓度的植物激素组合后腋芽生长情况不同,诱导率、增殖率和增殖系数呈先升后降趋势或下降趋势;生根培养以1/2 MS培养基为基本培养基,随植物激素的种类和浓度不同其生根情况存在一定差异性,在相同浓度(0.25 mg/L)不同种类植物生长素的生根培养基上,猕猴桃单芽茎段在添加IBA的培养基上生根情况最好。野生葛枣猕猴桃最佳单芽诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA,诱导率达87.33%;最佳增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,增殖系数达4.37;最佳生根培养基为1/2 MS+0.25 mg/L IBA,生根率可达74.00%,主根数8.57条/株,根长3.93 cm;将生根≥3且带有3~5片叶的组培苗进行移栽,移栽成活率达88.60%。【结论】以贵州野生葛枣猕猴桃的带芽茎段为外植体,成功构建葛枣猕猴桃茎段组培快繁体系:诱导培养(MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2mg/L IBA)、增殖培养(MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L)、生根培养(1/2 MS+0.25 mg/L IBA)和移栽培养(生根≥3且带有3~5片叶的组培苗进行移栽),为葛枣猕猴桃组培苗工厂化快速繁育种苗、苗圃资源保存和利用奠定了基础。

黄精根状茎无菌快繁体系建立

为进一步完善黄精无菌快繁技术体系提供技术基础。本试验以选育的七叶黄精根状茎作为外植体材料,测定不同消毒处理的根茎污染率、死亡率和不同浓度6-BA(6-Benzylminopurine)与NAA(1-Naphthalic acid)组合对其茎段腋芽的萌芽率影响,探索该植物根状茎无菌快繁体系的建立。结果表明,以超声波清洗机消毒15 min的处理效果最好,污染率和死亡率分别为20%和17%;恒温振荡器消毒15 min的污染率和死亡率分别为27%和37%,最佳消毒时间15 min;以MS为基本培养基,采用C12-Y组合(2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA)处理有芽茎段的效果最好,其平均萌芽率达76.67%,无芽茎段的平均萌芽率达56.67%。

亚洲百合‘穿梭’组培快繁体系的建立

以亚洲百合‘穿梭’为试材,采用植物组织培养的方法,研究了不同浓度激素对百合鳞片诱导、不定芽增殖、小鳞茎生根培养的影响,并筛选出适宜百合组培苗生长的移栽基质,以期为亚洲百合‘穿梭’的组培快繁体系的建立提供参考依据。结果表明:百合鳞片最佳诱导培养基为MS+0.5 mg·L^(-1)NAA+0.5 mg·L^(-1)6-BA+30 g·L^(-1)蔗糖+6 g·L^(-1)琼脂,诱导率最高可达74.44%,显著高于其他处理;最佳增殖培养基为MS+0.1 mg·L^(-1)NAA+1.0 mg·L^(-1)6-BA+30 g·L^(-1)蔗糖+6 g·L^(-1)琼脂,不定芽增殖数量最多,增殖系数为3.27;适合小鳞茎生根培养基为1/2MS+0.1 mg·L^(-1)NAA+0.3 mg·L^(-1)IBA+40 g·L^(-1)蔗糖+6 g·L^(-1)琼脂,平均生根数量为14.33,是其他处理的1.15~2.02倍;移栽后组培苗在草炭与珍珠岩为1∶1的基质配比中成活率高达87.50%,且组培苗长势最好。

粉葛赣葛2号组培快繁体系建立与优化

为了加快横峰县本地粉葛品种赣葛2号优质种苗的繁育与推广,本研究以带芽茎段为材料,探讨无菌体系建立、不定芽诱导及增殖、试管苗生根、驯化移栽等过程,建立并优化了粉葛赣葛2号组培快繁体系。结果表明,初代芽诱导效果最优培养基为MS+6.5 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+1.5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA,平均诱导率为80.55%;继代培养效果最优培养基为MS+6.5 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,平均诱导率为91.66%;适合生根的培养基为MS+6.5 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+0.5 mg/L NAA,生根率达84.38%。移栽基质配方为V泥炭土∶V蛭石∶V珍珠岩=3∶2∶1,组培苗成活率达100%。

尤加利茎尖组培快繁体系的建立

尤加利是当前国内外鲜切花市场上重要的切叶材料,筛选其茎尖生长及生根的最佳培养基,建立其组培快繁体系,可为尤加利组培苗工厂化生产提供参考。以尤加利无菌茎尖为试验材料,分析不同基础培养基、6-BA、NAA组合及其浓度处理下尤加利组培生长和生根情况,并对组培苗进行移栽试验。结果表明:基本培养基是影响尤加利组培苗褐化和增殖的主要因子,NAA是影响尤加利组培苗生根的主要因子;1/4 WPM+6-BA1.3 mg/L+NAA0.1 mg/L组合处理下尤加利茎尖组培褐化率(2.63%)较低,增殖率(115.79%)和生根率(97.37%)均达到最大,移栽后幼苗健壮,叶色浓绿,移栽成活率可达73.71%。可见,1/4 WPM+6-BA1.3 mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖15 g/L+琼脂6.0 g/L作为最佳培养基,可建立高效的尤加利茎尖组培快繁体系。

红颜草莓组培脱毒快繁体系的建立

以红颜草莓匍匐茎为外植体,采取热处理脱毒和微茎尖脱毒相结合、直接微茎尖脱毒两种脱毒方法,以次氯酸钠为消毒剂,探索不同脱毒方法、消毒时间、消毒浓度对无菌脱毒苗获得的影响,得出在5% NaClO,12 min处理后,直接进行微茎尖脱毒,成活率能达到95%以上且长势最优,有明显生长情况。以MS为基本培养基,探索最佳增殖和生根培养基,增殖培养基为MS + 0.1 mg/L 6-BA + 0.05 mg/L NAA时,增值系数为3.4。生根培养基为1/2 MS + 0.1 mg/L IBA时,生根率能达到100%,无菌脱毒苗移栽到草炭:蛭石:珍珠岩(1:1:1)的栽培基质中成活率为100%。本试验建立红颜草莓组培快繁体系,以期为草莓优良品种规模化繁育和工厂化生产提供技术支撑。Using the creeping stems of red strawberry as explants, two detoxification methods were adopted, including heat treatment detoxification and micro stem tip detoxification, and direct micro stem tip detoxification. Sodium hypochlorite was used as the disinfectant to explore the effects of different detoxification methods, disinfection time, and disinfection concentration on obtaining sterile and detoxified seedlings. It was found that after 12 minutes of treatment with 5% NaClO, direct micro stem tip detoxification resulted in a survival rate of over 95% and optimal growth, with significant growth. Using MS as the basic culture medium, explore the optimal proliferation and rooting culture medium. When the proliferation medium is MS + 0.1 mg/L 6-BA + 0.05 mg/L NAA, the value-added coefficient is 3.4. When the rooting medium is 1/2 MS + 0.1 mg/L IBA, the rooting rate can reach 100%, and the survival rate of sterile and virus-free seedlings transplanted into a cultivation medium of peat:vermiculite:perlite (1:1:1) is 100%. This experiment aims to establish a fast propagation system for red strawberry tissue culture, in order to provide technical support for the large-scale breeding and industrial production of excellent strawberry varieties.

甘薯脱毒苗快繁体系的研究进展

中国是世界上最大的甘薯生产国(Ipomoea batatas(L.)Lam.)。考虑到中国甘薯产区众多,甘薯是一种无性繁殖作物,甘薯病毒的遗传多样性在全国可能很高^([1])。甘薯原产于南美洲,传于中国已经有400多年的历史,它产量高、用途广、适应性强,是中国重要的粮食作物,种植面积居于世界首位。世界卫生组织经过3年的研究和评选,评出最健康的六大食品,甘薯被列为13种最佳蔬菜之首。据专家介绍,红薯不但营养均衡,而且具有防止亚健康、减肥、健美和抗癌等作用。甘薯属于无性繁殖作物,主要通过茎蔓,、薯块和秧苗进行繁殖,一旦感染上病毒病,病毒病就会在体内不断繁殖,造成甘薯产量降低、品质变差和种性退化,据统计,中国每年因甘薯病毒病的损失高达40亿元,因此,利用茎尖分生组织培养培育甘薯脱毒苗是目前防治甘薯病毒病提高甘薯产量和品质唯一有效的方法。

芸苔素内酯对石榴快繁体系及愈伤组织生长的影响

为建立‘突尼斯’软籽石榴(Punica granatum‘Tunisia’)的快繁体系,探究芸苔素内酯(Brassinolide,BR)对石榴愈伤组织诱导的效果,该研究分别以软籽石榴茎段和嫩芽作外植体,设置4个芸苔素内酯浓度水平(0、0.2、0.4、0.6mg·L^(-1)),通过测定茎秆高度、愈伤组织直径变化、叶绿素含量、过氧化物酶活性和丙二醛含量等指标,探究芸苔素内酯对石榴快繁苗生长发育的影响。结果显示:以茎段为外植体的组培苗污染率高,但发芽率和存活率同样较高,且长势良好,是更合适的外植体材料;0.4mg·L^(-1)的芸苔素内酯较其他浓度对‘突尼斯’软籽石榴快繁苗生长发育的效果更佳,加快了组培苗茎秆和愈伤组织生长速度,使叶片叶绿素含量、过氧化物酶活性较对照组分别提高了17.4%、20.0%,丙二醛含量较对照组降低了47.5%,可提高快繁苗的抗逆性。因此,一定浓度的外源芸苔素内酯可促进石榴愈伤组织诱导,有助于石榴离体培养体系的建立,为培育高质量的无菌苗提供理论基础和科学依据。

大苞鞘石斛种子快繁体系培养基的筛选

以大苞鞘石斛(Dendrobium wardianum Warner)种子为材料,利用MS培养基为基础培养基,选取2种生长素(NAA、IAA)和2种细胞分裂素(6-BA、KT)进行不同浓度的两两随机组合(NAA+6-BA、NAA+KT、IAA+6-BA和IAA+KT),筛选大苞鞘石斛的最适种子萌发培养基、生根培养基和继代培养基。结果表明,在MS+蔗糖(30 g/L)+马铃薯匀浆(80 g/L)+琼脂粉(7 g/L)+活性炭粉末(0.5 g/L)的基础培养基上,添加NAA(0.9 mg/L)+KT(0.3 mg/L)是大苞鞘石斛种子萌发的最适培养基,添加NAA(0.3 mg/L)+6-BA(0.6 mg/L)是最适生根培养基,添加IAA(0.3 mg/L)+6-BA(0.6 mg/L)是最适继代培养基。可见,大苞鞘石斛在不同生长阶段对植物生长调节剂的种类及浓度的需求存在差异,结果可为大苞鞘石斛的快速繁殖提供科学依据。

巨桉芽器官离体培养与快繁体系建立的研究

研究了以巨桉 (Eucalyptusgrandis)优树的带芽茎段为外植体诱导丛生芽发生以及植株再生的过程 ,对培养过程中新芽及丛生芽的发生类型进行了探讨。通过正交实验及单因素试验 ,确定了巨桉快繁体系的最适培养条件 :(1 )初代培养基 :S +BA0 5mg·L- 1 +NAA0 0 5mg·L- 1 +蔗糖 3 % ;(2 )丛生苗诱导培养基 :S +BA1 0mg·L- 1 +NAA0 0 5mg·L- 1 +蔗糖 3 % ;(3 )有效苗诱导培养基 :S+BA0 5mg·L- 1 +NAA0 1mg·L- 1 +生物素 2 0 +蔗糖 4% ;(4 )壮苗培养基 :MS(铁盐、有机物 1 5倍 ) +蔗糖 4% ;(5 )生根培养基 :1 2MS +ABT生根粉 (1号 ) 1 0mg·L- 1 +蔗糖 2 %。

红掌气生根根段再生快繁体系的建立

以红掌气生根根段为材料,诱导再生团块产生,进而分化出苗,形成快速繁殖系统。培养基1/2MS+6-BA1.0mg·L-1+2,4-D0.6mg·L-1适于气生根的保持和繁殖,1/2MS+6-BA1.0mg·L-1+2,4-D0.2mg·L-1适于诱导气生根再生团块的产生,MS+6-BA1.0mg·L-1+2,4-D0.2mg·L-1可使再生团块分化成苗。不论是愈伤组织,还是再生团块,出现绿色组织是分化所必需的。添加2,4-D、6-BA和2,4-D的适当比例、MS培养基的无机盐浓度在再生团块的诱导与分化成苗中起重要作用。

大花萱草新品种“红运”快繁体系的建立

以大花萱草“红运”幼嫩花柄为试材建立了其快繁体系。愈伤组织诱导和增殖培养基为MS＋6-BA4．0mg／L＋NAA0．4mg／L；愈伤组织分化培养基MS＋6-BA 2．0mg／L＋NAA 0．2mg／L，丛生芽增殖倍数达5～10倍。针对丛生芽黄绿色、长势弱的问题，进行了调整植物生长调节剂、无机盐、蔗糖和铁盐浓度以及添加植物汁液的一系列试验，结果显示：培养基添加植物汁液对丛生芽变绿和长高有一定作用，但效果不稳定。只有在不合植物生长调节剂的MS培养基上才能使黄绿色丛生芽获得绿色、整齐而健壮的无根苗。最适的生根培养基为MS＋NAA2．0mg／L＋蔗糖15g／L，低浓度蔗糖可获得高的生根率。

大岩桐快繁体系优化研究

以大岩桐种子无菌萌发获得无菌苗为试材,进行大岩桐快繁体系建立的研究.结果表明:MS+BA 2.0 mg/L是诱导愈伤组织和丛芽形成的合适培养基;MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L是继代增殖的最佳培养基,增殖系数达4.7;诱导生根培养基1/2MS+IBA 0.4 mg/L,生根率达100%,且根系健壮;在腐质土∶椰糠∶珍珠岩=1∶1∶2的混合基质上,生根苗有98%的成活率,移栽苗的生长状况最好,是大岩桐试管苗移栽的合适基质.

越橘离体快繁体系的优化

以越橘(Vaccinium ssp.)茎段为外植体,改良WPM为基本培养基,对影响越橘离体快繁的因素进行分析。结果表明:3月份采集越橘作为外植体、暗处理22h、pH为4.2,改良WPM添加ZT(1mg/L)和TDZ(0.2mg/L)时,能够迅速建立起初代培养体系。促进越橘丛生芽萌发的最佳培养基为改良WPM+ZT(1.5mg/L)。

上饶早梨主栽品种离体快繁体系的建立

【目的】建立上饶早梨主栽品种六月雪和黄皮消的离体快繁技术体系,为上饶早梨试管苗的快速繁殖提供参考依据。【方法】对六月雪和黄皮消进行组织培养,筛选适宜的外植体、灭菌方式、培养基和移栽基质。【结果】六月雪和黄皮消理想的外植体为长7.0-8.0 cm的新生幼嫩带芽茎段,理想的灭菌方式为75%酒精消毒1.0 min＋0.1%氯化汞消毒10-12 min,理想的腋芽诱导培养基为MS＋2.0mg/L 6-BA＋0.2 mg/L IBA,理想的不定芽增殖培养基为MS＋1.0 mg/L KT＋0.2 mg/L NAA,繁殖系数为3.6-3.8,理想的不定芽生根培养基为1/2MS＋0.3 mg/L NAA＋0.3 mg/L PP333＋0.5 g/LAC（活性炭）,理想的试管苗移栽基质为泥炭：珍珠岩：蛭石=4：1：1或腐殖土：珍珠岩=5：1,移栽后浇灌含0.5 mg/LPP333的MS基本培养液可显著提高试管苗成活率（P〈0.05）,驯化移栽成活率在90.0%以上。【结论】建立的六月雪和黄皮消离体快繁体系,可供上饶早梨组培苗工厂化生产参考利用。

白花曼陀罗植株再生及快繁体系的建立

目的:探索白花曼陀罗植株再生与快繁体系的最佳培养条件。方法:以白花曼陀罗的茎段、叶片为外植体,建立以叶片为材料的植株再生体系和以茎段为材料的快繁体系。结果:白花曼陀罗不同外植体的最优消毒方法为:叶片采用75%酒精浸泡6 s,0.1%HgCl2浸泡6 min;茎段采用75%酒精浸泡8 s,0.1%HgCl2浸泡7 min。叶片的愈伤组织最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,丛生芽的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;茎段的快繁体系最佳培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA。组培苗生根的最佳培养基为MS+0.5 mg/L IBA;组培苗经驯化及移栽,成活率达90%以上。结论:建立了白花曼陀罗植株再生及快繁体系。

紫薇优良品种‘晓明1号’组培快繁体系的建立

建立紫薇优良品种‘晓明1号’组培快繁体系,为大规模繁殖提供技术。以带腋芽茎段为外植体,对组培快繁体系中的基本培养基、生长调节剂浓度、组培苗移栽进行了研究,建立组培快繁体系。结果表明:带腋芽茎段接种在DKW+BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+PVP 300 mg/L的初代培养基上,腋芽萌发率95.56%,植株生长健壮;‘晓明1号’紫薇增殖培养及生根培养最佳配方为DKW+BA 1.0 mg/L+IBA 0.05 mg/L和1/2DKW+NAA 0.1 mg/L+AC 300 mg/L,增殖系数达到5.08,生根率达到100%,平均根条数6.2条,平均根长4.12 cm;用泥炭土:珍珠岩为2?1或3?1作为基质,以营养钵作为容器,组培苗移栽成活率达到95.33%以上,组培苗叶色鲜艳,长势良好。该研究获得了适合‘晓明1号’紫薇的组培方法,为品种的大规模繁殖和大面积推广提供了参考。

路易斯安娜鸢尾快繁体系的建立

路易斯安娜鸢尾(Louisiana Iris),为四季常绿水生鸢尾。其花色丰富,株型挺拔美观;同时又耐湿抗旱,冬季又能保持叶色翠绿,并可净化水质,是长江中下游地区河道及湿地绿化的一种极好的花卉品种。本文主要取路易斯安娜鸢尾的茎尖组织为外植体,诱导生成丛生芽,接种于附加不同激素配比的基本培养基上,并对生根及移栽进行了实验。结果表明,培养基为Ms+1.5mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30g/蔗糖+7g/L琼脂的不定芽诱导倍数为最高(12.96);培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA+0.3g/L AC+30g/L蔗糖+7g/L琼脂时根有利于不定根的发生(90%以上);试管苗不经炼苗直接出瓶,移栽最佳基质为泥炭,成活率达95%以上,且生长健壮,栽种一年后即可开花。

紫萼玉簪快繁体系建立和移栽初步研究

以安徽黄山产野生紫萼玉簪叶片作为外植体,对其快繁体系的建立和幼苗移栽技术进行初步研究。结果表明,利于愈伤组织诱导的最佳取材季节为春季,诱导愈伤组织形成和不定芽分化的最佳培养基为MS+6-BA2.0+NAA0.3;适宜的不定芽增殖培养基为MS+6-BA3.0+NAA0.1;利于生根的培养基为1/2MS+NAA0.3。最佳的移栽基质为珍珠岩+腐殖土(1:3),移栽成活率最高,幼苗长势好,明显优于其他3个处理。

藿香蓟组培快繁体系的建立

对藿香蓟组培快繁技术进行了研究,结果表明:叶片为组织培养的最佳外植体,各培养阶段适宜培养基为:诱导愈伤组织培养基:MS+6-BA1mg/L+NAA0.5mg/L;诱导丛生芽培养基:MS+6-BA2mg/L;生根培养基:1/2MS+NAA0.5mg/L。