恶性胸膜间皮瘤细胞培养条件及CDKN2B对癌细胞的作用

目的探讨不同培养条件(RPMI-1640、DMEM和DMEM/F12培养液)对人恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)组织中分离的MPM细胞传代的影响以及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B(cyclin dependent kinase inhibitor 2B,CDKN2B)对MPM细胞增殖、侵袭和凋亡的作用。方法从MPM组织中分离细胞分别用RPMI-1640、DMEM和DMEM/F12培养液培养。CCK-8检测细胞增殖,细胞核及染色体利用瑞氏-吉姆萨染色观察,免疫荧光实验检测MPM标志物Calretinin、CD141、CK5、EMA和WT-1荧光强度。RT-qPCR和Western blot分别检测CDKN2B的mRNA和蛋白表达能力。Transwell检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果建立的MPM细胞在RPMI-1640、DMEM和DMEM/F12培养液中传至第10代仍具有较好的活力,且MPM标志物Calretinin、CD141、CK5、EMA和WT-1在细胞中均表达,MPM细胞在RPMI-1640培养液中活力较为稳定。CDKN2B在MPM细胞中低表达(P<0.05),过表达CDKN2B显著抑制MPM细胞的增殖(P<0.05)、侵袭(P<0.05)和上皮间质转化(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01)。结论建立的MPM细胞可在RPMI-1640培养液中稳定传代,CDKN2B可作为MPM诊断和治疗的潜在靶标。

恶性胸膜间皮瘤靶向治疗的研究进展

恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma, MPM)是侵袭性极强的罕见胸膜表面恶性肿瘤,危险因素包括吸入石棉、遗传因素、基因突变等。现有的化疗、抗血管生成治疗、免疫治疗的效果均不佳,患者的生存期极短。亟需寻找治疗MPM的潜在靶点,目前发现有基因突变靶点如BRCA1相关蛋白1(BRCA associated protein1, BAP1)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(cyclin-dependent kinase 2A, CDKN2A)等;表观遗传靶点如组蛋白赖氨酸去甲基酶4A[lysine (K)-specific demethylase 4A, KDM4A]和赖氨酸特异性去甲基酶1(lysine-specific demethylase1, LSD1)等;信号蛋白靶点如葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78, GRP78)及信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)等。迄今为止,可查询的临床试验有组蛋白甲基转移酶抑制剂Tazemetostat、多聚ADP-核糖聚合酶[poly (ADP-ribose) polymerase, PARP]抑制剂Rucaparib和细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(cyclin-dependent kinases 4 and 6, CDK4/6)抑制剂Abemaciclib的II期临床试验,以及靶向间皮素的嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy, CAR-T)细胞胸腔注射、TEA结构域家族成员(TEA domain family member, TEAD)抑制剂VT3989和IK-930的I期临床试验,显示出一定的临床疗效。

从正虚邪实论治恶性胸膜间皮瘤伴急性呼吸困难思路探析

恶性胸膜间皮瘤是肿瘤内科恶性程度较高的癌种之一,近年国内外指南中的治疗方案有限且疗效欠佳,同时伴随药物毒副反应较大,致使该类患者较其他癌种的预后更差。恶性胸膜间皮瘤常常侵犯胸膜及纵隔,伴随呼吸困难、胸痛咳嗽等一系列不适症状,严重影响了患者的生活质量及后续的规范治疗。中医学认为恶性胸膜间皮瘤多因长期邪毒侵袭以及素体内虚所致,属于中医学“胸痹”范畴。本病病因病机以脾肾亏虚为主,气滞血瘀及痰瘀互结贯穿疾病全程。恶性胸膜间皮瘤伴急性呼吸困难的治疗应注意从正虚邪实论治,运用健脾化痰止咳、清热解毒平喘、活血散瘀利水三联疗法,在此基础上灵活运用对药和角药辨证辨病施治,获效显著。

帕博利珠单抗联合化疗治疗晚期恶性胸膜间皮瘤的成本-效用分析

目的从我国卫生医疗系统视角出发,评估帕博利珠单抗联合化疗一线治疗晚期恶性胸膜间皮瘤的经济性,为临床用药和卫生决议提供经济学参考。方法以IND227试验为基础,构建分区生存模型,周期为21 d,模拟至99%的患者死亡。模型产出指标为质量调整生命年(QALY),采用成本-效用分析法评价帕博利珠单抗联合化疗相对于单纯化疗治疗晚期恶性胸膜间皮瘤的经济性,并通过单因素敏感性分析和概率敏感性分析证明基础分析结果的稳健性。结果基础分析结果显示,与单纯化疗方案相比,帕博利珠单抗联合化疗方案的增量成本-效用比(ICUR)为1447296.58元/QALY,大于以3倍我国2023年人均国内生产总值(GDP)(268074元/QALY)作为的意愿支付(WTP)阈值,不具有经济性。患者在接受慈善赠药的情况下,ICUR为102236.18元/QALY,低于WTP阈值。单因素敏感性分析结果显示,帕博利珠单抗成本、效用贴现率和单纯化疗组支持治疗费用对结果的影响更显著。概率敏感性分析结果显示,基础分析结果稳健性较好。结论在WTP阈值为3倍我国2023年人均GDP时,与单纯化疗方案相比,帕博利珠单抗联合化疗治疗晚期恶性胸膜间皮瘤不具有经济性。但若患者接受慈善赠药,则帕博利珠单抗联合化疗方案更具有经济性。

恶性胸膜间皮瘤诊断及治疗最新进展

恶性胸膜间皮瘤(Malignant pleural mesothelioma, MPM)是一种少见的恶性肿瘤,主要是由于石棉暴露。恶性胸膜间皮瘤诊断和治疗具有挑战性。通过X线、CT、MRI、PET/CT、胸腔穿刺活检及血清学等检查,可正确诊断恶性胸膜间皮瘤。对于无法手术的患者培美曲塞联合铂类药物化疗是主要的治疗方法。本文主要阐释恶性胸膜间皮瘤的诊断及治疗最新进展。

基于TCGA数据库分析UHRF1基因在恶性胸膜间皮瘤中的表达及预后意义

利用生物信息学数据库分析泛素样含PHD和环指结构域蛋白1(UHRF1)在恶性胸膜间皮瘤(MPM)中的表达水平及临床意义。基于TCGA数据库和GTEx数据库差异表达分析UHRF1 m RNA在MPM组织和正常肺组织中的表达水平;使用R软件分析UHRF1 mRNA表达量与临床病理参数的相关性;构建Kaplan-Meier模型和单因素多因素COX回归模型分析UHRF1基因在MPM中的预后;利用TIMER2.0数据库分析UHRF1基因与免疫细胞浸润的关系;GSEA分析UHRF1基因发挥功能的主要富集通路。选取8例MPM组织及4例非MPM胸膜组织,通过RT-q PCR的方法验证UHRF1在MPM与非MPM胸膜组织的表达情况。数据库分析结果表明,与正常肺组织相比,UHRF1 m RNA在MPM组织中高表达;UHRF1高表达患者提示MPM患者预后不良;UHRF1基因表达量与CD4^(+)辅助型T细胞2、CD4^(+)效应记忆性T细胞、巨噬细胞等多种免疫细胞浸润水平具有显著的相关性(P<0.01),且显著影响MPM患者的预后。功能富集分析显示,UHRF1主要在DNA复制、蛋白酶体、同源重组等通路中起作用。在收集到的病例样本中,与非MPM胸膜组织相比,UHRF1 mRNA在MPM组织中的表达显著增高(P<0.001)。UHRF1在MPM组织中高表达,可能通过调节DNA甲基化和免疫细胞浸润来影响MPM患者预后,有望成为MPM治疗和预后评估的潜在靶点。

基于铁死亡基因的恶性胸膜间皮瘤风险预测模型构建及其肿瘤免疫微环境研究

目的:筛选恶性胸膜间皮瘤(MPM)预后相关的铁死亡基因,探索铁死亡与肿瘤免疫微环境的联系,为MPM患者的靶向及免疫治疗提供新的视角。方法:分析GEO数据集中MPM肿瘤组和正常组的差异表达基因(DEGs),与铁死亡基因取交集得到MPM中铁死亡相关的DEGs(DE-FRGs);进行GO、KEGG功能富集和蛋白-蛋白互作(PPI)等分析明确DE-FRGs主要参与的信号通路;通过单因素COX分析鉴定出预后相关的铁死亡基因,LASSO回归分析筛选建立风险预测模型的最佳DEFRGs,并通过多因素COX分析建立基于最佳DE-FRGs的风险预测模型,对模型的预测效果进行一系列验证。最后通过CIBERSORT等算法对模型进行肿瘤免疫细胞浸润分析及免疫微环境评价。结果:筛选出24个预后相关的DE-FRGs,主要富集于铁死亡、转录调控和对无机物的反应,建立并验证了1个基于5个铁死亡相关基因(ALDH3A2、CAV1、HRAS、CDCA3、RRM2)的MPM风险预测模型,模型中高风险组CD8+T细胞、巨噬细胞比例较高,而B淋巴细胞占比较低。此外,免疫检查点PD-1、CTLA-4及其配体在高风险组中有更高的表达状态。结论:建立了基于5个铁死亡相关基因的MPM风险预测模型,并明确了模型中的免疫状态。为MPM的靶向及免疫治疗提供了一定的研究基础,该模型在MPM中的预测能力需要临床上进一步验证,以更好地预测疾病分层和治疗管理。

自噬相关基因5在人恶性胸膜间皮瘤中的表达及其意义

目的探讨自噬相关基因5(ATG5)在人恶性胸膜间皮瘤(MPM)细胞和组织中的表达情况,分析ATG5与MPM患者临床病理参数和预后的相关性。方法实时定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting检测正常人胸膜间皮细胞和MPM细胞、非MPM胸膜间皮组织和MPM组织中ATG5的表达差异。应用TCGA数据库分析ATG5与MPM患者临床病理特征和预后的相关性。构建Cox回归模型,分析影响MPM患者预后的因素。GEPIA数据库评估ATG5与MPM肿瘤标志物和新型血清标志物的相关性。TIMER数据库分析ATG5与MPM免疫细胞浸润和关键免疫调节基因的相关性。结果ATG5在MPM细胞和组织中显著高表达,且与MPM患者的肿瘤分期呈正相关(P<0.05)。生存分析显示,ATG5高表达组MPM患者的预后更差,肿瘤病理类型可能是患者预后不良的危险因素(P<0.05)。ATG5与多种MPM肿瘤标志物(MTAP、SETD2、NF2、FIB3)和新型血清标志物(HMGB1、SMPR、THBS2、KRAS)显著相关(P<0.05)。ATG5表达与MPM中免疫细胞浸润(B细胞、CD4^(+)T细胞和巨噬细胞)和免疫相关基因(CD28、CUL48B、CD166、MMP14)呈显著正相关(P<0.05)。结论ATG5在MPM中表达上调,且与患者不良预后和免疫浸润水平相关,有望成为MPM早期筛查、诊断和预后评估的重要生物标志物。

恶性胸膜间皮瘤化疗抵抗机制研究进展

恶性胸膜间皮瘤(MPM)是一种发病率不高,但侵袭性强、预后差、致死率高的肿瘤,生存期为4个月~1年,5年生存率仅为10%左右。MPM具有很强的化疗抵抗性,顺铂联合培美曲塞或者雷替曲塞的常规治疗只在20%左右患者中有一定的效果。近年来,随着对MPM遗传特征研究的不断深入,对MPM化疗抵抗分子机制的研究也取得一定进展。本文总结了近年来MPM化疗抵抗分子机制的研究进展,包括BAP1基因突变、MicroRNA、MTA1介导的DNA损伤修复通路、GITR-GITRL通路、TGFa通路、肿瘤干细胞、EGFR、PTEN等,旨在为探索MPM新治疗靶点、新联合治疗方案提供参考。

治疗1例ⅢB期恶性胸膜间皮瘤患者实现长期生存的报告

恶性胸膜间皮瘤(Malignant pleural mesothelioma,MPM)是一种原发于胸膜间皮细胞且具有极强侵袭性和致死性的恶性肿瘤。MPM较为罕见,不仅起病隐匿、早期诊断率低,而且恶性程度高、预后极差。患者平均中位生存期不足1年,5年生存率不足1%。虽然MPM在临床中较为罕见,但此病的发病人数和病死人数呈逐年上升趋势。目前,临床上MPM的治疗方法主要包含外科手术、化学治疗、放射治疗以及靶向治疗等,但效果均不太理想。文章报道运用中西医结合方法治疗1例ⅢB期MPM患者,此患者最初诊断后总生存期达5年零7个月,以期为MPM的治疗提供新思路。

基于TCGA数据分析NEK2基因在恶性胸膜间皮瘤中的表达及预后意义

目的 分析永不有丝分裂基因A相关激酶2(NEK2)基因在恶性胸膜间皮瘤(MPM)中的表达及预后意义。方法 下载癌症基因组图谱(TCGA)数据库MPM基因表达数据、临床病理数据和生存状态数据;使用perl软件和R语言的limma、timeROC等程序包作NEK2基因在MPM中的差异分析、临床病理相关性分析、COX单因素和多因素分析以及基因富集分析,并绘制ROC曲线;利用TIMER2.0数据库分析MPM中NEK2表达与常见的免疫细胞浸润的相关性。选取12例MPM组织和6例非MPM胸膜组织,通过RT-qPCR的方法验证NEK2基因在MPM与非瘤组织中的表达情况。结果 与正常肺组织相比,NEK2在MPM组织中高表达(P<0.001)。NEK2基因mRNA表达量与MPM淋巴结分期具有显著相关性(P<0.05);NEK2高表达与MPM患者预后不良相关(P<0.001);NEK2基因表达与MPM中B淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞浸润水平呈正相关(P<0.05),并在细胞周期、DNA复制、剪接体、mRNA监测等通路显著富集。在收集到的病例样本中,与非MPM胸膜组织相比,NEK2基因在MPM组织中的表达量显著增高(P<0.01)。结论 NEK2在MPM组织中高表达,且NEK2在MPM中高表达提示预后不良,可能成为治疗MPM的潜在靶点。

恶性胸膜间皮瘤的诊疗进展

恶性胸膜间皮瘤（malignant pleural mesothelioma,MPM）是一种源于胸膜间皮细胞、以局部侵袭为主、恶性度极高的罕见疾病。近年,由于MPM的发病率和病死率逐年增多，针对其诊断和治疗的研究也更多的被报道，本文就此进行相应阐述。

恶性胸膜间皮瘤的外科治疗

目的 恶性胸膜间皮瘤的治疗尚无统一方案 ,手术切除仍是主要的治疗手段。本文探讨了恶性胸膜间皮瘤的手术方式、手术指征 ,以及影响术后生存的因素。方法 收集本院自 1985年以来手术治疗的恶性胸膜间皮瘤患者的资料 ,对临床表现、TNM分期、细胞类型、手术方式、生存期等分析 ,研究胸膜外全肺切除和胸膜切除两种不同手术方式以及不同分期、不同细胞类型对预后的影响。结果 33例手术治疗者中胸膜外全肺切除术 16例 ,胸膜切除术 17例 ,总中位生存期为 2 1个月 ,2年生存率和 5年生存率分别为 36 .6 %和 13.3% ,不同手术方式之间术后生存期差异无显著性 ;不同TNM分期之间生存期差异有显著性 (P =0 .0 4 2 8)。结论 无论胸膜外全肺切除还是胸膜切除 ,都只能达到肉眼下的完全切除 ,可缓解症状 ,并为综合治疗创造条件。两种手术方式对预后的影响差异无显著性。早期诊断和尽早手术治疗是取得良好效果的关键。

恶性胸膜间皮瘤20例临床分析

目的 总结20例恶性胸膜间皮瘤的诊断方法。方法 分析20例恶性胸膜间皮瘤的临床资料,包括年龄、石棉接触史、临床表现、影像学检查及实验室检查。结果 1例病人有石棉接触史。13例病人(65％)有明显胸痛,14例病人(70％)发现胸腔积液,X线检查18例病人(90％)纵隔未向健侧移位,11例病人(55％)CT发现胸膜肥厚或肿块。4例病人胸水中查到恶性间皮细胞,B超引导下经皮胸膜穿刺活检确诊10例。结论 石棉接触史并非恶性胸膜间皮瘤的唯一病因,恶性胸膜间皮瘤病人多数伴有与呼吸运动无关的持续性胸痛。X线、CT、B超对发现恶性胸膜间皮瘤有一定价值,B超引导下经皮胸膜穿刺活检对恶性胸膜间皮瘤的诊断有重要价值。

恶性胸膜间皮瘤19例临床分析

目的 经病理证实的 19例恶性胸膜间皮瘤的诊断经验。方法 分析 19例恶性胸膜间皮瘤的临床资料 ,包括石棉接触史、临床表现、影像学检查、特殊检查、胸水检测和转移情况 ,并对比 15例手术结果。结果 7例工种与石棉有关 ,占恶性胸膜间皮瘤 36 8% (7/ 19) ,18例 (94 7% )有胸痛 ,其中 16例 (84 2 % )伴胸腔积液 ,1例出现Horner’s综合症并影响臂丛神经。 3例 (15 8% )CT下穿刺找到间皮瘤细胞 ,2例 (10 8% )胸水中找到间皮瘤细胞 ,1例锁骨上淋巴结穿刺找到间皮瘤细胞。 15例CT发现胸膜增厚或胸膜上结节样病灶 ,占恶性弥漫性胸膜间皮瘤 78 9%。 15例手术病例中 11例胸膜广泛增厚或胸壁上广泛不规则大小不等结节融合成片 ,侵犯肺组织或纵隔胸膜、横膈胸膜。结论 石棉接触史是恶性胸间皮瘤主要病因 ,胸痛、胸腔积液是胸膜间瘤的主要临床表现。CT对诊断胸膜间皮瘤有重要参考价值。CT下活检能提高诊断率。

胸腔镜滑石粉胸膜固定术延长恶性胸膜间皮瘤患者生存时间的临床分析

目的探讨胸膜间皮瘤患者行胸腔镜胸膜固定术后生存期延长的可能原因。方法 1998年12月~2008年7月,笔者对于伴有胸腔积液的间皮瘤患者使用胸腔镜滑石粉胸膜固定作为主要的治疗手段。对连续的,有症状的,并接受胸腔镜胸膜活检的528例胸腔积液患者的临床资料进行分析,其中52例最终被诊断为恶性胸膜间皮瘤。对这些患者进行随访直至死亡。结果胸腔镜下滑石粉胸膜固定术后患者的平均生存时间（18.5±4.8）个月（中位生存时间18.0个月,范围9.8~36.9个月）。log-rank和Cox风险模型分析结果显示：胸腔镜胸膜固定术后生存时间的长度与性别、细胞类型、胸膜结节的数量、胸水的颜色、胸痛表现、石棉暴露史、吸烟史、疾病分期及放化疗无关。患者的呼吸困难症状在胸膜固定后均得到缓解。没有1例发生围手术期死亡,1例手术后并发肺炎。平均住院时间（5.9±2.7）d。结论滑石粉胸膜固定可能通过消除积液中肿瘤细胞生长的液态微环境而间接发挥治疗作用。

恶性胸膜间皮瘤的临床研究进展

恶性胸膜间皮瘤是发生于胸膜间皮细胞的恶性度较高的一种罕见肿瘤，近年来发病率逐步上升。目前对其治疗多为经验性，疗效差，尚缺乏大规模的随机对照临床试验验证各种治疗手段的疗效优劣。近年来，多位学者从不同途径寻求延长生存，改善生存质量的手段，并取得了一定进展，不同报道综合治疗的中位生存期可以达到17～24个月。根据现有的证据，建议以手术＋术后放疗化疗的综合治疗为主。今后尚需开展进一步的前瞻性临床研究，以期寻求最佳的治疗方案。

培美曲塞与卡铂静脉化疗联合榄香烯乳胸腔灌注治疗恶性胸膜间皮瘤的临床观察

目的评价培美曲塞与卡铂化疗同时联合榄香烯乳胸腔灌注治疗恶性胸膜间皮瘤（MPM）合并胸腔积液的疗效与安全性。方法回顾性分析15例MPM合并胸腔积液患者的临床资料,具体用药：培美曲塞500mg/m2,d1;卡铂（AUC=5）d2,每21天重复;同时引流尽胸腔积液,榄香烯乳200mg/m2胸腔注入,d1或d8。结果 15例患者中,13例（86.7%）胸腔积液得到控制,10例（66.7%）胸腔积液癌细胞检查由阳性转为阴性;获CR 4例,PR 6例,SD 3例,PD 2例;总有效率为66.7%,疾病控制率为86.7%,中位无进展时间为5.0个月,中位总生存时间为11.1个月,1年生存率为36.0%。主要毒副反应为骨髓抑制、发热、胸痛、皮疹,多为1~2级,支持对症处理后均可恢复。结论培美曲塞联合卡铂化疗同时榄香烯乳胸腔灌注治疗MPM合并胸腔积液有较好的疗效,毒副反应轻,值得临床推广应用。

恶性胸膜间皮瘤32例诊疗分析

恶性胸膜间皮瘤（MPM）是起源于胸膜间皮细胞的一种少见肿瘤,其发病率占全部肿瘤的0.02%～0.04%,却占胸膜原发肿瘤的80%,临床表现不典型,诊断困难。文献报道误诊率40%～50%,我国约为49%,恶性程度高,自然生存期只有4～12个月,经过积极治疗后中位生存期可达到17～24个月〔1〕。因此MPM的临床诊断和治疗仍然是一个难题。

胸腔积液脱落细胞免疫组织化学染色检测相关抗体对胸膜转移性肺腺癌和恶性胸膜间皮瘤的鉴别诊断价值

目的评估胸腔积液脱落细胞的波形蛋白(vimentin,VIM)、神经特异度钙结合蛋白(calretinin,CR)、细胞角蛋白7(CK7)、甲状腺转录因子-1(thyroid transcription factor-1,TTF-1)免疫组织化学染色在胸膜转移性肺腺癌和恶性胸膜间皮瘤鉴别诊断中的价值。方法收集我科2009年9月—2011年10月经胸腔积液细胞学诊断或胸膜活检病理学证实的42例恶性胸膜间皮瘤(11例)和胸膜转移性肺腺癌(31例)患者纳入分析。计算胸腔积液脱落细胞免疫组织化学染色中VIM、CR、CKT和TTF-1 4项指标诊断胸膜转移性肺腺癌和恶性胸膜间皮瘤的灵敏度和特异度,评估4项指标在鉴别诊断中的应用价值。结果恶性胸膜间皮瘤患者的VIM、CR、CK7、TTF-1的阳性表达率与胸膜转移性肺腺癌患者比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。VIM在恶性胸膜间皮瘤诊断中的灵敏度为91%(10/11),特异度为52%(16/31),阳性预测值为40.0%,阴性预测值为94.1%。CR在恶性胸膜间皮瘤诊断中的灵敏度为82%(9/11),特异度为84%(26/31),阳性预测值为62.9%,阴性预测值为92.9%。CK7在胸膜转移性肺腺癌诊断中的灵敏度为94%(29/31),特异度为82%(9/11),阳性预测值为81.8%,阴性预测值为76.3%。TTF-1在胸膜转移性肺腺癌诊断中的灵敏度为77%(24/31),特异度为91%(10/11),阳性预测值为96.0%,阴性预测值为58.8%。结论胸腔积液脱落细胞的VIM、CR、CKT和TTF-1免疫组织化学染色对恶性胸膜间皮瘤和胸膜转移性肺腺癌的鉴别诊断具有较高应用价值。