电针干预对慢性睡眠剥夺大鼠伏隔核ANXA1、IL-1β表达的影响

目的:观察电针对慢性睡眠剥夺(CSD)大鼠伏隔核(NAc)膜联蛋白A1(ANXA1)、白细胞介素1β(IL-1β)炎症因子的调节作用,分析电针改善睡眠及焦虑样行为的可能机制。方法:48只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组与假针刺组4组,每组12只。采用改良多平台水环境法(MMPM)建立CSD大鼠模型。电针组选用单日“百会”“神门”和双日双侧“内关”“太冲”电针干预21 d。实验过程中观察大鼠一般情况及体质量变化;旷场实验观察大鼠自主活动能力,评价焦虑程度;实时荧光定量PCR检测大鼠NAc脑区ANXA1、IL-1βmRNA表达水平,蛋白免疫印记(WB)检测NAc中ANXA1、IL-1β蛋白表达水平。结果:21 d造模后,与空白组比较,其余3组大鼠毛发干枯无光泽,体质量增长缓慢(P<0.01);大鼠在旷场中运动总距离及平均速度增加(P<0.05或P<0.01)、中央区停留时间减少(P<0.01)。21 d干预后,与同时段空白组比较,模型组大鼠体质量依旧增长缓慢(P<0.01),旷场实验中大鼠运动总距离及平均速度增加(P<0.01)、中央区停留时间减少(P<0.05),IL-1βmRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)、ANXA1升高(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠体质量开始逐渐上升(P<0.01),精神状态良好,大鼠运动总距离、平均速度降低(P<0.05或P<0.01),中央区停留时间增加(P<0.05),IL-1β在mRNA和蛋白表达水平上均显著升高、ANXA1明显降低(P<0.01);假针刺组与模型组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:电针可有效改善CSD大鼠睡眠及焦虑状态,其机制可能与升高CSD大鼠NAc脑区IL-1β、降低ANXA1炎症因子的表达有关。

罗汉果总黄酮对慢性睡眠剥夺小鼠抗氧化能力及炎症反应的影响

本试验旨在探究罗汉果总黄酮对慢性睡眠剥夺(CSD)小鼠抗氧化能力及炎症反应的影响。将42只4周龄无特定病原体(SPF)级雄性ICR小鼠按体质量随机分为7组,每组6只,组间体质量差异不显著(P>0.05)。空白对照组不进行慢性睡眠剥夺,其他6组使用改良多水平台睡眠剥夺法进行为期30 d的慢性睡眠剥夺,以构建CSD模型。造模成功后灌胃4周,其中低、中、高浓度罗汉果总黄酮组(分别简称低、中、高酮组)分别灌胃30、60、120 mg/(kg·d)的罗汉果总黄酮(溶于0.5 mL的1%DMSO溶液),空白对照组与模型对照组灌胃0.5 mL的生理盐水,阳性对照组灌胃30 mg/(kg·d)的褪黑素(溶于0.5 mL的1%DMSO溶液),二甲基亚砜(DMSO)对照组灌胃0.5 mL的1%DMSO溶液。利用相应试剂盒测定CSD小鼠血清和大脑中总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、血红素氧合酶-1(HO-1)活性、核因子-κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,利用实时荧光定量PCR测定血清和大脑中核因子E2相关因子2(Nrf2)、HO-1、NF-κB、TNF-αmRNA相对表达量。结果显示:1)低、中、高酮组CSD小鼠大脑中T-AOC显著高于模型对照组(P<0.05),中、高酮组CSD小鼠大脑中HO-1活性显著高于模型对照组和DMSO对照组(P<0.05)。低、中、高酮组CSD小鼠血清中T-AOC、HO-1活性显著高于模型对照组和DMSO对照组(P<0.05),大脑和血清中MDA、NF-κB、TNF-α含量显著低于模型对照组和DMSO对照组(P<0.05)。2)低、中、高酮组CSD小鼠大脑和血清中HO-1 mRNA相对表达量显著高于模型对照组及DMSO对照组(P<0.05);中、高酮组CSD小鼠大脑和血清中Nrf2 mRNA相对表达量显著高于模型对照组及DMSO对照组(P<0.05);低、中、高酮组CSD小鼠大脑和血清中NF-κB、TNF-αmRNA相对表达量显著低于模型对照组及DMSO对照组(P<0.05)。综上所述,罗汉果总黄酮可提高CSD小鼠大脑、血清中抗氧化酶活性及相关基因mRNA相对表达量,降低大脑、血清中MDA与炎症因子含量及相关基因mRNA相对表达量,改善CSD小鼠的氧化应激及炎症反应。

罗汉果山柰苷对慢性睡眠剥夺小鼠抗氧化能力的影响

为探究罗汉果山柰苷对慢性睡眠剥夺小鼠抗氧化能力的影响,本试验将56只4周龄无特定病原体(SPF)级雄性ICR小鼠作为研究对象,适应性饲养1周后,按体质量随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、二甲基亚砜(DMSO)对照组以及低、中、高浓度罗汉果山柰苷组,每组8只,每组4个重复,每个重复2只,组间体质量差异不显著(P>0.05)。对除空白对照组外的其他试验组小鼠进行4周的慢性睡眠剥夺,造模成功后灌胃4周,其中空白对照组和模型对照组小鼠每日灌胃0.5 mL生理盐水,阳性对照组小鼠每日灌胃30 mg/kg BW的褪黑素,DMSO对照组小鼠每日灌胃0.5 mL的1%DMSO溶液,低、中、高浓度罗汉果山柰苷组小鼠每日分别灌胃15、30、60 mg/kg BW的罗汉果山柰苷。灌胃结束后测定小鼠体质量、胴体质量、心脏质量、肝脏质量和体脂含量,并测定小鼠心脏和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、血红素加氧酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)活性与总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量,以及抗氧化相关基因核转录因子E2相关因子2(Nrf2)、SOD-1、SOD-2、GPX-1、GPX-4、HO-1、NQO1的mRNA相对表达量。结果显示:与模型对照组相比,每日灌胃15、30、60 mg/kg BW罗汉果山柰苷均可显著降低慢性睡眠剥夺小鼠的体质量、体脂率(P<0.05),显著改善慢性睡眠剥夺小鼠的心脏指数和肝脏指数(P<0.05)。低、中、高浓度罗汉果山柰苷组慢性睡眠剥夺小鼠心脏中SOD、GPX、HO-1、NQO1活性均显著高于模型对照组和DMSO对照组(P<0.05),MDA含量显著低于模型对照组和DMSO对照组(P<0.05)。中、高浓度罗汉果山柰苷组慢性睡眠剥夺小鼠心脏中T-AOC均显著高于模型对照组和DMSO对照组(P<0.05)。中、高浓度罗汉果山柰苷组慢性睡眠剥夺小鼠肝脏中SOD、GPX、HO-1、NQO1活性和T-AOC均显著高于模型对照组和DMSO对照组(P<0.05),MDA含量显著低于模型对照组和DMSO对照组(P<0.05)。中、高浓度罗汉果山柰苷组慢性睡眠剥夺小鼠心脏和肝脏中SOD-1、SOD-2、GPX-1、GPX-4、Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA相对表达量均显著高于模型对照组和DMSO对照组(P<0.05)。综上所述,罗汉果山柰苷能显著提高慢性睡眠剥夺小鼠心脏和肝脏中抗氧化酶活性及抗氧化相关基因的表达,改善慢性睡眠剥夺小鼠的氧化应激损伤,提高其抗氧化能力。

丰富环境对慢性睡眠剥夺小鼠大脑皮层和海马Aβ1-42及相关代谢分子BACE1的影响

目的:探讨丰富环境(enriched environment, EE)对慢性睡眠剥夺小鼠前额叶皮层和海马Aβ1-42及相关代谢分子β位点淀粉样前体蛋白裂解酶1(β-site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1, BACE1)表达的影响。方法:3月龄SPF级健康雄性昆明小鼠40只,体重21~25 g,随机分为4组:标准环境对照(control, Ctrl)组、睡眠剥夺(sleep deprivation, SD)组、EE组和SD+EE组。采用改良的多平台睡眠剥夺模型建模,每天干预19 h,EE组及SD+EE组分别每天进行8 h EE干预。采用Y迷宫法及新物体识别对小鼠进行行为学分析;免疫荧光法检测小鼠前额叶皮层与海马Aβ1-42沉积情况;Western blot法检测前额叶皮层和海马组织中BACE1蛋白的表达水平。结果:与Ctrl组小鼠相比,SD组小鼠学习记忆功能和认知功能减退(P<0.01),前额叶皮层及海马Aβ1-42和BACE1蛋白的表达均有不同程度的升高(P<0.01);EE组小鼠学习记忆功能和认知功能提高(P<0.01),前额叶皮层及海马Aβ1-42表达均减少(P<0.05),前额叶皮层BACE1蛋白在两组间的差异无统计学意义(P>0.05),但海马BACE1蛋白的表达较Ctrl组减少(P<0.01)。与SD组相比,SD+EE组小鼠学习记忆功能和认知功能改善(P<0.01),前额叶皮层和海马Aβ1-42和BACE1蛋白表达均减少(P<0.01)。结论:丰富环境可以减少慢性睡眠剥夺小鼠前额叶皮层和海马Aβ1-42的沉积及BACE1蛋白的表达,同时改善慢性睡眠剥夺小鼠的学习记忆功能以及认知功能。

紫云英苷对慢性睡眠剥夺小鼠肝脏氧化损伤的修复作用

本试验旨在研究紫云英苷对慢性睡眠剥夺小鼠肝脏氧化损伤的修复作用。将36只4周龄无特定病原体(SPF)级C57BL/6J雄性小鼠随机分成3组,分别为正常睡眠组(DMSO组)、睡眠剥夺组(SD组)、睡眠剥夺+紫云英苷组(SD+AG组),每组3个重复,每个重复4只。DMSO组不进行慢性睡眠剥夺,其余2组利用改良多平台睡眠剥夺法对其连续睡眠剥夺21 d。每日进行睡眠剥夺前,DMSO组和SD组灌胃0.04 mL生理盐水配制的0.1%DMSO溶液,SD+AG组灌胃等量由0.1%DMSO溶液溶解的20 mg/kg BW紫云英苷。每日13:00测量各组小鼠的摄食量,观察小鼠状态。末次灌胃后禁水禁食,断颈法处死小鼠,取其心脏、肝脏、肾脏和脑,称其重量,并检测小鼠肝脏中总抗氧化能力(T-AOC)与谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)含量,同时检测核转录相关因子2(Nrf2)基因及其下游基因NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)和谷氨酸-半胱氨酸连接酶调节亚基(GCLM)表达的变化。结果显示:与DMSO组相比,SD组小鼠的肝脏AKP和ALT活性分别升高了112.03%(P<0.05)和32.96%(P<0.05),T-AOC、GSH含量和GSH-Px活性分别降低了8.33%(P<0.05)、39.79%(P<0.001)和9.00%(P<0.01),Nrf2、NQO1、GCLC和GCLM mRNA相对表达量分别降低了19.00%(P>0.05)、8.91%(P>0.05)、13.00%(P>0.05)和13.00%(P>0.05);SD+AG组小鼠肝脏AKP活性降低了45.11%(P<0.01),ALT活性升高了14.88%(P<0.001),T-AOC、GSH含量和GSH-Px活性分别升高了47.22%(P<0.05)、70.38%(P<0.01)和36.07%(P<0.001),Nrf2、NQO1和GCLC mRNA相对表达量分别升高了23.00%(P<0.001)、61.39%(P<0.01)和85.00%(P<0.01),GCLM mRNA相对表达量降低了19.00%(P<0.05)。与SD组相比,灌胃20 mg/kg BW紫云英苷的SD+AG组小鼠的脑系数显著升高(P<0.05),肝脏系数显著下降(P<0.05),同时肝脏AKP和ALT活性分别降低了74.11%(P<0.001)和13.60%(P<0.05),T-AOC、GSH含量和GSH-Px活性分别升高了60.61%(P<0.05)、182.99%(P<0.001)和49.53%(P<0.001),Nrf2、NQO1和GCLC mRNA相对表达量分别提高了51.85%(P<0.01)、77.17%(P<0.001)和112.64%(P<0.001),而GCLM mRNA相对表达量下降了7.03%(P>0.05)。综上可知,紫云英苷可上调肝脏中Nrf2基因及其下游基因NQO1、GCLC和GCLM的表达,修复慢性睡眠剥夺对小鼠肝脏造成的氧化损伤。

松郁安神方通过海马NLRP3炎性小体通路改善慢性睡眠剥夺大鼠学习记忆能力的研究

目的探讨松郁安神方(甘松、郁金、丹参、酸枣仁等)通过海马NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体通路改善慢性睡眠剥夺大鼠学习记忆能力的作用及机制。方法将SD大鼠随机分成正常组(8只)、大平台组(8只)、睡眠剥夺组(32只),采用改良多平台水环境法复制慢性睡眠剥夺大鼠模型,连续剥夺21 d。模型复制成功后,将睡眠剥夺组大鼠随机分为模型组及松郁安神方高、中、低剂量组(34、17、8.5 g·kg^(-1)),每组8只;灌胃给药,每天1次,连续7 d。造模及给药期间观察记录大鼠一般状态及体质量变化;造模第21天和给药后第7天均采用Morris水迷宫法(进行定位航行和空间搜索试验)测定大鼠学习记忆能力;末次水迷宫测试结束后,采用ELISA法检测海马组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18含量;Western Blot法检测海马组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达水平。结果(1)正常组和大平台组比较,所有检测指标均无明显变化(P>0.05)。(2)与大平台组比较,造模期间睡眠剥夺组大鼠体质量增加缓慢(P<0.01);21 d睡眠剥夺后,睡眠剥夺组大鼠的逃避潜伏期显著延长(P<0.01),到达平台的总距离显著增加(P<0.01),穿越平台的次数及目标象限停留时间显著减少(P<0.05,P<0.01);模型组大鼠海马组织中IL-1β、IL-18含量明显升高(P<0.05),NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达均明显上调(P<0.05)。(3)与模型组比较,松郁安神方高、中剂量组大鼠的体质量增加量均显著升高(P<0.01);逃避潜伏期及到达平台的总距离明显缩短(P<0.05),穿越平台的次数及目标象限停留时间显著增加(P<0.05,P<0.01);海马组织中IL-1β、IL-18含量均显著下降(P<0.05,P<0.01),NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达均显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论松郁安神方可能通过抑制NLRP3炎性小体通路调控促炎性细胞因子IL-1β、IL-18的分泌,从而改善睡眠剥夺大鼠的学习记忆能力。

酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠视交叉上核c-fos及nNos表达的影响

目的:研究酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠视交叉上核c-fos及nNos表达的影响。方法:利用"多平台水环境法"建立老年大鼠慢性睡眠剥夺模型,将实验大鼠随机分为4组,环境对照组、慢性睡眠剥夺模型组、舒乐安定组以及酸枣仁汤组。用透射电镜方法观察大脑下丘脑视交叉上核部位形态学改变,免疫组织化学方法观察睡眠剥夺21 d后各组大鼠视交叉上核c-fos、nNos表达的变化,采用RT-PCR法检测大鼠视交叉上核c-fos、nNos的表达。结果:与环境对照组相比较,慢性睡眠剥夺模型组c-fos活性明显升高(P<0.05),nNos明显升高(P<0.05),脂褐素(Lipo)增多增大,扩张肿胀的高尔基体(Golgi)囊泡明显增多;与慢性睡眠剥夺模型组比较,酸枣仁汤组c-fos的表达显著下降(P<0.05),nNos明显下降(P<0.05),脂褐素显著减少减小。结论:酸枣仁汤能够调控大脑视交叉上核c-fos、nNos的表达,有效调节老年睡眠剥夺大鼠的昼夜节律。

酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠下丘脑GABA及其受体表达的影响

目的：研究酸枣仁汤对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠下丘脑GABA及其受体表达的影响。方法：利用＂多平台水环境法＂建立老年大鼠慢性睡眠剥夺模型,将实验大鼠随机分为4组,环境对照组,慢性睡眠剥夺模型组,舒乐安定组以及酸枣仁汤组。应用免疫组织化学方法观察睡眠剥夺21 d后各组大鼠下丘脑GABA含量的变化,Realtime-PCR法检测大鼠下丘脑GABAARα1和γ2亚单位mRNA表达水平。结果：免疫组化法检测结果表明,与环境对照组比较,慢性睡眠剥夺模型组较环境对照组GABA含量降低（P〈0.05）;与慢性睡眠剥夺模型组比较,舒乐安定组和酸枣仁汤组GABA相对表达量相对升高（P〈0.05）。Realtime-PCR法检测结果表明,与环境对照组比较,慢性睡眠剥夺模型组GABAARα1、GABAARγ2表达下调（P〈0.05）;与慢性睡眠剥夺模型组比较,酸枣仁汤组和舒乐安定组GABAARα1、GABAARγ2表达明显上调（P〈0.05）。结论：酸枣仁汤改善睡眠机制与调控大鼠下丘脑GABA的含量及其受体表达有关。

跑台运动对慢性睡眠剥夺大鼠行为学改变、海马炎症因子及海马齿状回BDNF/Trk B信号通路的影响

目的:研究认为,体育运动可以改善慢性睡眠缺失引起的认知功能下降和情绪障碍,海马DG区在学习、记忆和空间编码中起着关键作用,并且对睡眠缺失高度敏感。因此本研究主要通过测量8周跑台运动对慢性睡眠剥夺(chronicsleepdeprivation,CSD)大鼠海马炎症因子(IL-6及TNF-a)水平和海马DG区BDNF及TrkB表达的影响,探讨跑台运动改善CSD大鼠认知功能及焦虑样行为的可能机制。方法:将44只大鼠随机分为对照组(SG)、运动组(EX)、慢性睡眠剥夺组(CSD)和睡眠剥夺运动组(CSD+E)。随后,CSD和CSD+E组大鼠采用多平台水环境法制作CSD模型,同时,EX和CSD+E组大鼠进行8周中等强度跑台运动(1h/day/6d/week)。跑台运动及CSD结束后,采用高架迷宫实验(EPM)评估大鼠焦虑样行为,八臂迷宫实验(ERM)评估大鼠空间学习记忆能力;除外,海马炎症因子(IL-6、TNF-a)水平及海马DG区BDNF及其受体TrkB表达被测量。结果:1)与SG组比较,ERM实验中,CSD组大鼠错误潜伏期缩短,训练达到标准次数及TM显著增多(P均<0.01)、CN减少(P<0.05);EPM实验中,CSD组大鼠ORT、ORE均显著减少,焦虑指数显著增加(P均<0.01);海马促炎因子IL-6及TNF-a水平显著增加(P均<0.01);海马DG区BDNF及TrkB表达显著降低(P均<0.01);2)8周跑台运动显著削弱了大鼠焦虑样行为,阻止了大鼠空间学习记忆能力的下降,海马促炎因子IL-6及TNF-a水平明显下降(P<0.05,P<0.01),海马DG区BDNF及TrkB表达均显著增强(P<0.05,P<0.01)。结论:中等强度跑台运动可以增强CSD大鼠学习记忆能力,削弱大鼠焦虑样行为,可能与此运动减弱海马炎症反应、增加海马DG区BDNF及其受体TrkB表达,从而增强BDNF/TrkB信号通路对CSD大鼠海马的神经保护作用有关。

电项针对慢性睡眠剥夺轻度认知障碍大鼠海马突触可塑性相关蛋白的影响

目的观察电项针对慢性睡眠剥夺(CSD)轻度认知障碍大鼠海马组织中突触素(SYN)、脑源性神经营养因子(BDNF)和酪氨酸激酶受体B(TrkB)蛋白表达的影响,探讨电项针改善CSD记忆损伤的作用机制。方法将24只雄性Wistar大鼠随机分为大平台对照组、模型组和电项针组,每组8只。模型组和电项针组采用改良的多平台水环境法制备模型,大平台对照组除平台表面有细密铁丝网外,其他条件与造模环境一致。电项针组选取两侧的风池和供血穴电针治疗,模型组和大平台对照组给予相同时间的捆绑固定,共14 d。Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,免疫组化技术检测各组海马CA1区SYN、BDNF和TrkB蛋白的定性表达,Western blot技术检测各组海马区SYN、BDNF和TrkB蛋白的定量表达。结果造模后,模型组和电项针组大鼠逃避潜伏期较大平台对照组明显延长(P<0.05),经针刺治疗后,电项针组逃避潜伏期较模型组显著缩短(P<0.05)。免疫组化和Western blot结果显示,与大平台对照组相比,模型组大鼠海马SYN、BDNF和TrkB蛋白表达均明显减少(P<0.05);与模型组相比,电项针组大鼠海马SYN、BDNF和TrkB蛋白表达升高(P<0.05)。与大平台对照组大鼠相比,电项针组TrkB表达升高(P<0.05),SYN和BDNF表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论电项针能显著上调CSD轻度认知障碍大鼠海马区SYN、BDNF和TrkB蛋白的表达,增强海马突触可塑性。

慢性睡眠剥夺对CAS大鼠冠状动脉狭窄程度的影响

目的探讨慢性睡眠剥夺(chronic sleep deprivation,CSD)对冠状动脉粥样硬化(coronary atherosclerosis,CAS)模型大鼠冠状动脉狭窄进展程度的影响及其可能机制。方法选取健康SD大鼠96只,随机分为4组:正常对照组、CSD组、CAS模型组及CAS合并CSD组,每组24只;通过12w喂饲高胆固醇饲料、建立CAS动物模型;采用CSD对CAS模型大鼠实施12w干预,观察、分析4组大鼠焦虑行为、血清致炎因子和CAS斑块以及管腔狭窄程度的变化。结果 1)与CAS模型组比较,CAS合并CSD组跨格次数、直立次数及粪便粒数明显增多(P<0.05);2)CAS合并CSD组IL-1β、IL-6水平明显高于CAS模型组(P<0.05);3)CAS合并CSD组CAS斑块出现率(95.83±2.87)、冠状动脉狭窄程度(87.95±5.46)明显高于CAS模型组(83.33±2.64)、(75.42±5.11)(P<0.05)。结论 CSD可以通过提高大鼠焦虑状态、升高致炎因子水平,促进CAS斑块形成,从而加快冠状动脉狭窄进展程度。

电针对慢性睡眠剥夺大鼠行为学及海马神经元形态学的影响

目的:观察电项针对慢性睡眠剥夺(CSD)大鼠自主活动能力及海马CA1区和齿状回神经元形态结构的影响。方法:将筛选出的24只Wistar大鼠随机分为大平台对照(TC)组、模型(M)组和电项针(ENA)组,每组8只。采用多平台水环境法建立CSD模型,电项针组在造模21 d后电针项部两侧的风池和供血穴,20 min/次,共14 d。每周称量大鼠体质量并计算变化差值。治疗14 d后,用旷场实验评估大鼠的自主探究行为,用HE染色观察海马CA1区和齿状回神经元形态结构改变。结果:睡眠剥夺后,M组和ENA组大鼠体质量较TC组明显减轻,干预后体质量逐渐增加,且ENA组体质量增加差值明显多于M组(P<0.01)。干预14 d后,M组大鼠中央区滞留时间较TC组明显延长,行走总路程和中央区运动速度则显著下降(P<0.05);与M组相比,ENA组中央区滞留时间缩短,行走总路程和运动速度均显著上升(P<0.05)。HE染色结果显示,TC组海马CA1区和齿状回神经元排列有序,包膜完整,染色均一;M组锥体细胞和颗粒细胞数量减少,部分出现肿胀和坏死;ENA组神经元数量增多,水肿减轻或消失。结论:电项针可以明显改善CSD模型大鼠的自主探究能力,并有保护海马CA1区和齿状回受损神经元的作用。

慢性睡眠剥夺对大鼠颞下颌关节的影响

目的:研究慢性睡眠剥夺后大鼠颞下颌关节(TMJ)的组织学变化。方法:将60只大鼠随机分为对照组和实验组。采用改良多平台睡眠剥夺模型法对实验组大鼠进行4、6和8周的慢性睡眠剥夺,通过苏木精-伊红(HE)染色观察TMJ髁突组织病理学变化,CD105荧光染色观察血管新生情况,免疫组化染色检测TMJ髁突组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:通过改良多平台法成功建立大鼠慢性睡眠剥夺模型;HE染色观察到实验组TMJ髁突组织出现纤维断裂,软骨细胞减少、排列紊乱,毛细血管数量增多等类骨关节炎(OA)样病理改变,而对照组无明显变化。实验组大鼠骨软骨交界处毛细血管密度(MVD)显著高于对照组(P<0.05),且表现出随睡眠剥夺时间延长而增加的趋势。免疫组化染色显示,VEGF在实验组的髁突软骨中层甚至浅层高度表达,而在对照组的髁突软骨各层中表达较低。结论:慢性睡眠剥夺后的大鼠可出现髁突软骨血管化、TMJ-OA样等病理改变,且随睡眠剥夺时间延长而逐渐加重。

慢性睡眠剥夺对初诊2型糖尿病患者糖化血红蛋白的影响

目的观察慢性睡眠剥夺对糖尿病患者血糖控制的影响。方法对172例初诊糖尿病患者进行睡眠问卷调查,符合入选试验条件者75例,分为慢性睡眠剥夺组(A组36例)、正常睡眠时间组(B组25例)和超长时间睡眠组(C组14例),均进行强化治疗达标,之后除继续糖尿病饮食、运动外,据个体情况采用口服药或胰岛素治疗,分别检测强化治疗结束后3,6,9个月的糖化血红蛋白(HbA1c),观察各组的变化。结果A组HbA1c逐渐增高,C组亦呈上升趋势,而B组则平稳下降。结论慢性睡眠剥夺使HbA1c增高,睡眠时间超长,对HbA1c也有不利影响,在临床工作中应予以重视。

慢性睡眠剥夺对大鼠葡萄糖稳态的影响

目的评估慢性睡眠剥夺和大鼠血糖稳态之间的关系。方法将24只大鼠随机分为慢性睡眠剥夺(CSD)组和对照组,CSD组采用改良水平台法(MMPM)建立慢性睡眠障碍模型,干预3个月后接受糖耐量试验(IPGTT)和胰岛素耐量试验(ITT),并检测体重、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酐、血脂和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果干预后3个月,两组增重衰减,CSD组血糖水平显著高于对照组(P<0.01)。CSD组较对照组胰岛素抵抗指数和胰岛素耐受显著增加(P<0.01)。两组AST、ALT、肌酐和大部分血脂参数没有显著性差异(P>0.05)。结论慢性睡眠剥夺对大鼠葡萄糖稳态如葡萄糖耐受不良和胰岛素抵抗有显著影响。

慢性睡眠剥夺对小鼠海马胶质细胞α7-nAChR影响的研究

目的探讨慢性睡眠剥夺对小鼠海马组织α7-nAChR表达及星形胶质细胞和小胶质细胞表面α7-nAChR的表达的影响。方法成年C57BL/6J小鼠随机分为3组:正常对照(control,CC)组、慢性睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)组、慢性睡眠剥夺后腹腔注射α7-nAChR激动剂PHA-543613(SD+PHA-543613)组。采用Western印迹、实时荧光定量PCR分别检测各组小鼠海马组织α7-nAChR蛋白及基因的表达;使用免疫荧光染色法观察各组小鼠海马组织星形胶质细胞、小胶质细胞表面α7-nAChR的表达变化。结果 SD组与CC组比较,SD组海马组织的α7-nAChR蛋白表达、mRNA表达和星形胶质细胞表面α7-nAChR的表达均明显低于CC组(P=0.001,P=0.038,P=0.003);SD组与SD+PHA-543613组比较,SD+PHA-543613组海马组织的α7-nAChR蛋白表达、mRNA表达和星形胶质细胞表面α7-nAChR的表达较SD组升高(P=0.037,P=0.002,P=0.027)。结论慢性睡眠剥夺不仅抑制海马组织α7-nAChR基因及蛋白的表达,同时降低α7-nAChR在星形胶质细胞表面的表达,海马组织胶质细胞α7-nAChR的减少可能是慢性睡眠剥夺后认知功能下降的危险因素。

α7-nAChR/PI3K/AKT/GSK-3β通路在慢性睡眠剥夺后的保护作用及其机制研究

目的观察α7-nAChR/PI3K/AKT/GSK-3β通路在慢性睡眠剥夺后的保护作用,并探讨其作用机制。方法成年C57BL/6J小鼠随机分为3组:对照(CC)组、慢性睡眠剥夺(SD)组、慢性睡眠剥夺后腹腔注射α7-nAChR激动剂-PHA-543613(SD+PHA-543613)组。采用Western-blot印迹检测各组小鼠海马组织α7-nAChR及p-AKT、p-GSK-3β、Nrf-2、HO-1蛋白表达变化;使用实时荧光定量PCR检测各组小鼠海马组织α7-nAChR mRNA水平及炎性因子与抑炎因子TNF-α、IL-1β、IFN-γ、MCP-1、Arg-1、CD206、TGF-β、YM-1mRNA表达水平;采用免疫荧光染色法观察各组小鼠海马组织星形胶质细胞、小胶质细胞表面α7-nAChR的表达变化;通过水迷宫评估小鼠的行为学。结果慢性睡眠剥夺7 d后,SD组海马组织的α7-nAChR蛋白、mRNA的表达明显低于CC组(P=0.001,P=0.038),SD组海马组织p-AKT蛋白表达显著低于CC组(P=0.019),p-GSK-3β蛋白表达量高于CC组(P=0.011);慢性睡眠剥夺后腹腔注射α7-nAChR激动剂-PHA-543613后海马组织星形胶质细胞表面α7-nAChR的表达高于SD组(P=0.027),p-AKT、p-GSK-3β的蛋白表达也明显高于SD组(P=0.047,P=0.017);腹腔注射α7-nAChR激动剂-PHA-543613后,SD+PHA-543613组海马组织Nrf-2、HO-1蛋白表达量和抑炎因子CD206、TGF-β的mRNA表达量与SD组相比明显增多(P=0.020,P=0.016,P<0.01,P<0.01),而促炎因子TNF-α、MCP-1的mRNA表达量与SD组相比显著下降(均P<0.01)。腹腔注射α7-nAChR激动剂-PHA-543613后小鼠的逃避潜伏期与SD组相比缩短,处于目标象限时间延长、穿越平台次数增多(P=0.000,P=0.000,P=0.001)。结论慢性睡眠剥夺后刺激α7-nAChR通过激活PI3K/AKT/GSK-3β减轻神经炎症和氧化应激。

慢性睡眠剥夺对小鼠糖、脂代谢的影响及网络药理机制研究

目的 本研究慢性睡眠剥夺(CSD)对小鼠糖脂代谢的影响及网络药理学机制。方法 实验中运用改良多平台水环境法建立CSD小鼠模型,通过监测小鼠空腹血糖(FBC),酶联免疫吸附试剂盒测定血清胰岛素、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)水水平反映慢性睡眠剥夺对小鼠糖、脂代谢的影响。同时,利用网络药理学技术预测CSD影响小鼠糖脂代谢的作用机制。结果 与正常小鼠相比,睡眠剥夺CSD小鼠的FBG降低,胰岛素含量升高,胰岛素抵抗指数显著增加,血清LDL和HDL含量明显下降,睡眠剥夺小鼠出现糖脂代谢障碍和胰岛素抵抗。网络药理学分析结果显示,CSD可能通过影响PI3K-Akt信号通路,Rap1信号通路,Toll样受体信号通路等途径导致糖脂代谢紊乱。结论 CSD可降低小鼠血糖,诱导胰岛素抵抗,通过多种途径参与、诱发小鼠糖、脂代谢紊乱。

慢性睡眠剥夺对大鼠髁突MMP-2和MMP-9表达的影响

目的:探讨慢性睡眠剥夺及睡眠恢复对大鼠颞下颌关节髁突基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达的影响。方法:利用改良多平台法(MMPM)法对大鼠施加为期1、2、3、4周时间的慢性睡眠剥夺,并利用旷场实验进行检验,通过HE染色观察实验组、对照组和恢复组大鼠髁突软骨组织的结构变化,通过免疫组织化学方法检测各组大鼠髁突MMP-2、MMP-9的表达变化。结果:旷场实验中各实验组及恢复组在结束慢性睡眠剥夺时水平得分与垂直得分均高于对照组大鼠,差异具有统计学意义(P<0.05)。恢复组经过1周时间睡眠恢复后水平得分与垂直得分与对照组无明显差异(P>0.05)。HE染色观察发现,慢性睡眠剥夺后实验组大鼠髁突软骨出现了退行性表现。恢复组与实验组相比,软骨组织出现修复性增生改变。免疫组织化学结果显示:MMP-2、MMP-9在各时间点实验组中的阳性表达强度高于对照组(P<0.05),各时间点恢复组阳性表达强度低于实验组(P<0.05)。结论:慢性睡眠剥夺可引起大鼠髁突软骨退行性改变,软骨细胞分泌的MMP-2、MMP-9参与了其病理改变的进程。

慢性睡眠剥夺影响大鼠峰值骨量的实验性研究

目的:探讨慢性睡眠剥夺(CSD)对Sprague-Dawley(SD)大鼠峰值骨量及骨微结构的影响。方法:24只8周龄SD雄性大鼠随机分为两组:慢性睡眠剥夺组(n=12)采用睡眠剥夺仪干预5周建立慢性睡眠剥夺模型,对照组(n=12)进行正常自然饲养。观察慢性睡眠剥夺后的骨转换指标:PINP与CTX-1;采用左侧股骨作为目标骨,使用Micro-CT扫描,采集骨皮质和骨小梁的骨密度,分析表达骨微结构的相关定量指标。结果:慢性睡眠剥夺SD大鼠股骨近端骨小梁参数显示:骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数(Tb.N)、及骨小梁分离度(Tb.Sp)均低于对照组。其股骨中段骨皮质参数:骨组织总面积(Tt.Ar)、皮质骨厚度(Ct.Th)及皮质骨面积(Ct.Ar)明显低于对照组(P<0.01)。CSD干预后,股骨无论是骨小梁还是骨皮质的骨矿物质密度(BMD)均低于对照组,而相应的PINP与CTX-1明显升高。结论:睡眠在峰值骨量的形成中具有重要作用。慢性睡眠剥夺加速了骨转化,会显著降低SD大鼠的峰值骨量。