卡格列净对糖尿病合并慢性肾病患者炎性因子及代谢指标的影响

目的:探讨卡格列净对糖尿病合并慢性肾病患者炎性因子及代谢指标的影响。方法:收集2018年06月—2020年12月于我院就诊的患有慢性肾脏病(CKD)的2型糖尿病(T2D)患者160例,其中女76例,男84例,160例患者均分成为两组,每组80例患者,分为Ph组(常用降糖药物)、Kh组(卡格列净),观察Ph组、Kh组治疗前后相关代谢指标和炎症因子水平,观察Ph组、Kh组临床疗效,比较Ph组、Kh组患者对本次治疗的满意度。结果:与Ph组对比,Kh组治疗效果明显提升,Kh组患者无病情恶化患者,痊愈人数有27例,而Ph组出现2例病情恶化患者,痊愈患者仅有15例,Kh组无效5例,Ph组无效16例(P<0.05)。Kh组、Ph组治疗前代谢指标差异无统计学意义(P>0.05)、治疗后Kh组、Ph组LDL对比差异无统计学意义(P>0.05),与Ph组治疗后相比,Kh组TC、FBG水平显著降低,Kh组治疗后HDL-C减少,Ph组治疗后HDL-C增加(P>0.05),Kh组、Ph组TG水平比较(P<0.05)。Ph组、Kh组治疗前相关炎性因子水平对比(P>0.05)。与Kh组给药后相比,Ph组TNF-α、hs-CRP、IL-6水降低明显,TNF-α、hs-CRP、IL-6为(84.5±12.6、4.1±0.4、7.3±1.2)(P<0.05)。服药前,Kh组、Ph组UAER、24 h UPor和Scr指标对比(P>0.05),给药后Kh组患者的UAER、24 h UPor和Scr低于Ph组(P<0.05)。结论:卡格列净治疗糖尿病合并慢性肾病患者效果较好,能改善患者炎性因子和代谢指标,患者满意度也较高。

慢性肾病贫血及药学服务建议

慢性肾病(CKD)是我国重要的公共卫生问题,慢性肾病贫血作为CKD的重要并发症,对CKD患者的生活质量和生存率有严重影响。目前,我国慢性肾病贫血患者普遍存在达标率低和依从性差等问题,需要多学科团队协同解决。本文综述慢性肾病贫血的流行病学、疾病现状、作用机制、疾病危害、药物治疗,并提出初步的药学服务建议。药学工作者有必要融入到医疗团队中,用高质量的药学服务赢得患者的认可。

慢性肾病患者L3椎体水平肌肉质量评估

目的通过测量不同临床分期慢性肾病(CKD)患者的L3椎体水平腰大肌及棘旁肌的面积及密度,以评价L3椎体水平肌肉质量对CKD患者营养状态的评估价值。方法回顾性收集2023年2月至10月我院193例CKD患者的影像及临床资料,分别勾画并测量L3水平腰大肌及棘旁肌的面积(PMA、PSMA)及密度(PMD、PSMD),计算出腰大肌指数(PMI)及棘旁肌指数(PSMI)。根据估算肾小球滤过率(eGFR),划分CKD患者临床分期。分析不同临床分期CKD患者肌肉质量(即腰大肌及棘旁肌的面积)的差异。结果不同临床分期,男性患者的腰大肌及棘旁肌的面积均高于女性,差异有统计学意义,密度差异无统计学意义;且随着年龄的增高,腰大肌及棘旁肌的面积缩小,PMI及PSMI降低;CKD 4~5期患者的腰大肌及棘旁肌面积较CKD 1~3期患者明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05),CKD 1~3期之间及4~5期之间患者的肌肉质量差异不大。结论随着临床分期的增加,CKD患者L3椎体水平肌肉的面积呈下降趋势,且肌肉密度CT值逐渐减低,尤其4~5期的患者较1~3期明显减低。

基于人工智能的自动应变定量技术评价慢性肾病患者早期心肌损伤的临床价值

目的探讨基于人工智能的自动应变定量技术评价慢性肾病(CKD)患者早期心肌损伤的临床价值。方法选取2021年7月至2023年7月我院收治的CKD患者125例为研究对象,根据CKD分期分别纳入A组(2~3期,67例)、B组(4~5期,58例),另选取同期45例健康体检者为对照组。比较3组二维超声心动图参数[左室射血分数(LVEF)、舒张末期室间隔厚度(IVSd)、舒张末期左室后壁厚度(LVPWd)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、右心室内径(RVD)]、血清N末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)水平、自动及手动应变定量技术应变参数[左心室整体纵向收缩期峰值应变(LVGLS)、右心室整体纵向收缩期峰值应变(RVGLS)、左房储备期纵向应变(LASr)、左房管道期纵向应变(LAScd)、左房收缩期纵向应变(LASct)],采用Pearson分析自动应变参数与手动应变参数、二维超声心动图参数及血清NT-pro BNP水平的相关性,比较LVGLS、RVGLS、左房应变分析的手动、自动应变分析时间,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析自动应变参数联合检测对CKD患者早期心肌损伤的诊断价值。结果B组LVEF水平低于A组、对照组,B组IVSd、LVPWd、LVEDD、RVD及血清NT-pro BNP水平高于A组、对照组,且A组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);B组自动及手动LVGLS、RVGLS、LAScd、LASct均高于A组、对照组,B组LASr低于A组、对照组,且A组自动LVGLS、RVGLS、LAScd、LASct高于对照组,LASr低于对照组,A组手动LAScd、LASct高于对照组,LASr低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);自动分析各应变参数与手动分析各参数均呈正相关(r=0.852,0.721,0.605,0.630,0.627,P<0.05);自动LVGLS、RVGLS、LAScd、LASct与LVEF呈负相关(r=-0.659,-0.598,-0.612,-0.601,P<0.05),与NT-pro BNP呈正相关(r=0.643,0.638,0.622,0.647,P<0.05);自动LASr与LVEF呈正相关(r=0.629,P<0.05),与NT-pro BNP呈负相关(r=-0.658,P<0.05)。自动病变分析时间较手动分析时间明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。LVGLS诊断CKD患者早期心肌损伤的曲线下面积(AUC)为0.928(95%CI:0.889~0.957),约登指数为0.736,最佳诊断敏感度为87.20%,特异度为86.40%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论自动应变定量技术应变参数联合检测对CKD患者早期心肌损伤具有一定诊断价值,可作为临床评估早期心肌损伤的有效检查方式,并对后续治疗具有一定指导价值。

慢性肾病与认知功能障碍相关性研究进展

回顾近年来国内外有关慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)与认知功能障碍(cognitive impairment,CI)的相关研究,阐述CKD并发认知障碍的西医潜在机制及中医病因病机。中医认为CKD并发CI与“肾脑”联系密切,基于“肾脑相关”理论的中药复方治疗及针药并举治疗能明显改善CKD患者的认知功能,为寻找针对CKD相关CI的中西医结合治疗策略提供理论支持。

慢性肾病中医诊疗的传承与创新——西苑医院名老中医学术思想与临床经验

中国中医科学院西苑医院是我国最早开始现代中医肾病系统研究的单位之一。60多年来在多位著名老中医的引领与传承下,深入挖掘中医药治疗肾病的优势,不断吸取现代医学技术,形成了较为完善的中医优势突出的慢性肾病中西医结合防治体系。西苑医院肾病学科名医辈出,临床诊治经验丰富,学术积淀深厚,其中岳美中、方药中、时振声、聂莉芳等名老中医为现代中医肾病学的奠基者和开创者。本文聚焦名老中医对中医肾病学发展的学术贡献,从中医肾病临床诊疗的思路、肾病的辨病与中医病名、肾病证候与治法研究、临证选方用药等方面进行简要介绍。

许家松辨治慢性肾病舌诊经验

介绍许家松教授运用温病学舌诊理论,结合“辨证论治五步法”辨治慢性肾病的经验。许师从“整体恒动观”的中医学指导思想出发,以温病学辨舌法中三焦脏腑定位、正邪关系等内容为理论基础,以方药中先生“辨证论治五步法”为临床诊疗思路,认为舌象的观察要以整体到局部为顺序,重视舌象在治疗前后的对比,总结舌象动态变化,将舌象作为慢性肾病中医临床上辨证辨病、诊疗效果、判断预后的重要客观证据之一,并重视其在治则治法选择上起到的关键作用。

慢性肾病患者并发压疮的临床护理干预探析

本研究旨在探究慢性肾病患者并发压疮的临床护理干预的效果。方法 选择77名慢性肾病患者并发压疮的患者为研究对象,分为观察组(39例)和对照组(38例)。观察组实施临床护理干预,对照组执行常规护理。结果 观察组压疮发生率(2.56%)显著低于对照组(13.16%)(P<0.05)。在护理依从性方面,观察组在身体清洁(86.24±1.60)和定期翻身(88.43±1.24)两方面的评分均显著高于对照组(分别为68.32±1.3和65.82±1.68);护理前后,SAS和SDS评分比较,观察组的护理后评分(SAS 20.41±1.04,SDS 21.54±1.06)显著低于对照组(SAS 30.06±1.37,SDS 31.94±1.78),差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 对于慢性肾病患者并发压疮的临床护理,实施临床护理干预优于常规护理,可以降低压疮发生率,提高护理依从性,有助于改善慢性肾病患者的情绪。

慢性肾病患者应用Clark安适护理模式的价值评估分析

探讨将Clark安适护理模式应用在慢性肾病患者护理中的效用价值。方法 此次研究共选取96例慢性肾病患者进行实验对比,采取盲抽方式做好组别划分工作,每组人数均为48例,对照组与观察组分别采取常规护理与Clark安适护理模式,对两组实际临床应用效果进行评价分析。结果 经实验中各项数据表明,干预前两组患者自护能力及生存质量水平评分经对比明显差异(P>0.05),但护理干预后,观察组自护能力评分显著提升,生存质量水平大幅度提高(P>0.05);与此同时,相比对照组,观察组护理满意度较高(P<0.05)。结论 对于慢性肾病患者而言,实施Clark安适护理可有效提高其自护能力,改善生活质量水平,对患者整体护理满意度的提升也起到积极促进作用。

不同血液净化方式在阿法骨化醇联合治疗下对慢性肾病患者的影响

探究在阿法骨化醇治疗下,不同血液净化方式对慢性肾病患者的影响。方法 2021.12-2023.12的100例慢性肾病患者,随机分为对照组(50例,阿法骨化醇下血液灌流)和观察组(50例,阿法骨化醇下血液透析滤过),观察两组的骨代谢指标、肾功能指标、Ca、P、PTH水平。结果 治疗后,观察组骨代谢指标低于对照组(P<0.05);治疗后,观察组肾功能指标低于对照组(P<0.05);治疗后,观察组Ca高于对照组,P、PTH水平低于对照组(P<0.05)。结论 通过比较研究,血液透析联合阿法骨化醇的治疗方式效果相对更为显著,不仅减轻不良反应,更改善了患者的肾功能情况,维持正常骨代谢。

基于移动护理的沟通系统在行血液净化慢性肾病患者中的应用效果

深入研究移动护理沟通系统在血液净化慢性肾病患者治疗过程中的实际应用效果。方法 选取于慢性肾病患者30例随机分为对照组(常规护理)和实验组(基于移动护理的沟通系统护理)各15例,对比两组患者护理效果。结果 实验组患者在护理过程中的沟通效果、护理满意度、应对评分、肾功能指标、不良反应发生率、自我管理能力评分等均优于对照组(P<0.05)。结论 基于移动护理的沟通系统在血液净化慢性肾病患者的治疗过程中展现出了显著的应用成效。该系统不仅极大提升了患者与医护人员之间的沟通效率,还确保了信息的准确传递,对于优化治疗流程、提升服务质量具有积极意义,提升患者的护理满意度和自我管理能力,值得临床推广应用。

冠心病合并慢性肾病经皮冠状动脉介入术后替格瑞洛应用的系统性评价

目的系统评价冠心病合并慢性肾病经皮冠状动脉介入术(PCI)后患者使用替格瑞洛的有效性和安全性。方法计算机检索中国知网、万方、维普、PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane Library数据库。根据Cochrane系统评价手册和纽卡斯尔-渥太华量表(NOS)对纳入研究的质量进行评价。采用Stata 15.0软件进行Meta分析。结果共纳入了10项研究,涉及4项随机对照试验和6项队列研究,合计8110例冠心病合并慢性肾病PCI术后患者,试验组3356例,对照组4754例。Meta分析结果显示:在有效性方面,两组患者不良心脑血管事件(MACCE)(OR=0.78,95%CI:0.68~0.89,P<0.001)、心肌梗死发生率(OR=0.76,95%CI:0.62~0.93,P<0.001)比较,差异均有统计学意义;两组患者全因死亡(OR=0.81,95%CI:0.59~1.10,P=0.179)、心源性死亡(OR=0.76,95%CI:0.54~1.05,P=0.542)、卒中(OR=0.87,95%CI:0.65~1.17,P=0.354)、重复血运重建发生率(OR=0.73,95%CI:0.51~1.04,P=0.077)比较,差异无统计学意义。在安全性方面,两组患者出血发生率(OR=1.12,95%CI:0.85~1.46,P=0.432)比较,差异无统计学意义。结论应用替格瑞洛治疗冠心病合并慢性肾病PCI术后患者,全因死亡、心源性死亡、卒中、重复血运重建发生率与对照组相比疗效相当,但是替格瑞洛可有效降低MACCE、心肌梗死的发生率,且不增加出血风险。

火把花根片治疗慢性肾病的效果

目的研究火把花根片治疗慢性肾病的效果及对患者尿蛋白、肝肾功能及血脂等的影响。方法采用回顾性队列研究对2022年6月—2023年4月于我院门诊诊治的100例慢性肾病患者的资料进行分析,根据患者是否使用火把花根片治疗分为对照组、观察组,每组50例,对照组仅行常规治疗,观察组加用火把花根片治疗。比较2组患者治疗前后24 h尿蛋白总量(urine protein quantitation,UTP)、肝肾功能指标[血清白蛋白(serum albumin,ALB)、谷丙转氨酶(glutamicpyruvic transaminase,GPT)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、内生肌酐清除率(creatinine clearance,CCr)]、血脂指标[三酰甘油(triacylglycerol,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL-C)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL-C)]、免疫功能指标[T淋巴细胞亚群(CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)值)],并比较2组疗效、不良反应发生率。结果治疗后,观察组UTP水平[(1.22±0.21)g·24 h^(−1) vs.(2.36±0.31)g·24 h^(−1)]、Scr水平[(107.98±10.14)μmol·L^(−1)vs.(123.42±12.31)μmol·L^(−1)]降低,ALB水平[(46.98±5.64)g·L^(−1)vs.(43.62±3.41)g·L^(−1)]、CCr水平[(49.98±6.57)mL·min^(−1)vs.(42.13±4.35)mL·min^(−1)]升高,差异具有统计学意义(t=21.530、6.846、8.125、3.605、7.045,均P<0.05)。治疗后观察组GPT略低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,观察组TG[(1.43±0.21)mmol·L^(−1)vs.(2.00±0.25)mmol·L^(−1)]、TC[(4.72±0.35)mmol·L^(−1)vs.(5.08±0.40)mmol·L^(−1)]、LDL-C[(3.01±0.14)mmol·L^(−1)vs.(3.26±0.17)mmol·L^(−1)]低于对照组,HDL-C[(1.69±0.35)mmol·L^(−1)vs.(1.40±0.22)mmol·L^(−1)]高于对照组,差异具有统计学意义(t=12.340、4.789、8.027、4.960,均P<0.05)。观察组CD4^(+)比例[(44.53%±5.16%)vs.(40.21%±4.35%)]、CD4^(+)/CD8^(+)值[(1.78±0.31)vs.(1.36±0.24)]升高,CD8^(+)比例[(24.36%±2.15%)vs.(28.98%±2.21%)]降低,差异具有统计学意义(t=4.526、7.575、10.600,P<0.05)。与对照组比较,观察组的治疗总有效率[96.00%vs.82.00%]升高,差异具有统计学意义(χ^(2)=5.005,P<0.05)。2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论火把花根片可降低慢性肾病患者的尿蛋白水平,提高免疫功能,改善血脂,促进患者肾功能恢复,且不会引起肝功能损伤,应用有效且安全。

尿酸盐在慢性肾病并发肾间质纤维化中的作用及机制

目的探讨尿酸盐在慢性肾病并发肾间质纤维化过程中的作用及机制。方法利用0.2%腺嘌呤的饲料喂养小鼠9周,构建慢性肾病小鼠模型。造模结束后,小鼠眼眶后静脉丛采血,检测肾功能和血尿酸含量;HE染色和PAS染色分析肾脏组织病理变化;Masson染色观察肾脏纤维化程度;尿酸盐染色观察肾组织中尿酸盐沉积;Western blot和免疫组化检测目标分子的表达变化。利用不同浓度尿酸刺激原代培养小鼠肾小管上皮细胞(mRTECs)及人肾小管上皮细胞系(HKC);划痕实验观察尿酸对细胞迁移的影响。结果动物水平上,生化分析检测结果显示,模型组小鼠血清尿素氮(P=0.0064)、肌酐(P=0.0080)、血尿酸(P=0.0007)水平较对照组明显增加;HE和PAS染色结果显示,模型组小鼠出现严重肾小管损伤及炎症细胞浸润;Masson染色结果显示,模型组胶原沉积明显增加;尿酸盐染色结果显示,与对照组比较,模型组小鼠肾组织出现大量尿酸盐结晶;Western blot和免疫组化结果显示,模型组小鼠波形蛋白、平滑肌肌动蛋白和转化生长因子β1(TGF-β1)水平较对照组升高,E钙黏蛋白水平较对照组降低。细胞水平上,划痕结果显示,尿酸刺激促进肾小管上皮细胞迁移;Western blot检测结果与免疫组化一致。结论尿酸可通过促进肾小管上皮细胞分泌TGF-β1,进而促进上皮-间质细胞转分化,加速肾间质纤维化的发生。

长期利尿剂与限钠法在治疗慢性肾病高血压患者中的应用

目的 探讨长期利尿剂与限钠法在治疗慢性肾病(CKD)高血压患者的应用效果。方法 选取2019年9月至2021年3月我院肾内科收治的26例CKD高血压患者,所有患者均接受阿米洛利/氢氯噻嗪(每天5 mg/50 mg)和膳食钠(60 mmol/d)限制治疗。分析两种干预措施对血压、肾功能和体液平衡的影响,将其与利尿剂的肾脏清除率相关联。结果 饮食钠限制将钠排泄从每天160 mmol/L减少到64 mmol/L;与钠限制(SBP从134 mmHg到129 mmHg)相比,利尿剂使24 h平均收缩压(SBP从138到124 mmHg)产生更大的降低作用,并且对细胞外水、肾小球滤过率(eGFR)、血浆肾素和醛固酮有显著影响;两种干预措施都导致体质量和氨基末端脑钠肽前体下降,没有显著降低白蛋白尿,而利尿剂却显著降低了尿血管紧张素原和β2-微球蛋白的排泄;尽管较低的eGFR和较高的血浆硫酸吲哚酚与较低的利尿剂清除率相关,但在较低的eGFR下仍维持了对体质量和血压的利尿作用。在利尿剂治疗期间,较高的前列腺素E2排泄与较低的游离水清除率相关,4例患者出现轻度低钠血症。结论 长期利尿剂在降低CKD的血压和细胞外容量方面不劣于饮食钠盐限制。尽管利尿剂清除率较低,但CKD患者仍能维持对利尿剂的敏感性。

代谢综合征患者发生慢性肾病的影响机制研究进展

代谢综合征不仅与慢性肾病的发生、发展密切相关,而且会使患者发生全因死亡和心血管事件的风险大大增加。积极进行代谢综合征人群筛查和管理可使慢性肾病早发现、早治疗,使病情得到良好控制。本研究简述了代谢综合征患者发生慢性肾病的研究现状和流行病学特征,进一步探究了两者之间的影响因素和作用机制;并从早期高危人员筛查、社区重点人群管理以及日常生活干预等方面提出了预防代谢综合征患者发生慢性肾病的健康管理要点和护理措施,以期降低代谢综合征患者中慢性肾病的患病率。

参芪延肾方改善慢性肾病患者肾功能、炎症反应和钙磷代谢的研究

目的分析参芪延肾方对慢性肾病患者炎症反应、肾功能、钙磷代谢影响。方法选择2019年6月—2022年1月间该院收治的慢性肾病60例患者,分为观察组和对照组,对照组采用醋酸泼尼松片治疗,观察组采用醋酸泼尼松片联合参芪延肾方治疗;比较两组患者临床疗效、钙磷代谢指标、肾功能指标、血液流变学指标、炎症水平。结果观察组治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05);治疗后观察组患者血中钙(Ca)均明显高于对照组,磷(P)、全段甲状旁腺激素(iPTH)、全血低切(LS)、全血高切(HS)、血浆黏度(PV)、尿微量白蛋白(UmAlb)、尿微量白蛋白(UAER)、血肌酐(Scr)、C反应蛋白(CRP)、AGEs、Gd-IgA1、IL-8及IL-6水平均明显低于对照组,且差异存在统计学意义(P<0.05)。结论利用参芪延肾方对慢性肾病患者进行干预后,可有效改善患者肾功能,降低炎症反应并改善钙磷代谢。

基于机器学习的超声影像及SWE预测模型在早期慢性肾病中的应用

目的:开发并验证一种基于机器学习算法的预测模型,该模型结合超声影像学和剪切波弹性成像(SWE)技术,旨在提高早期慢性肾病(CKD)的诊断准确性。方法:采用前瞻性研究设计,纳入2022年3月至2023年11月期间在广州医科大学附属番禺中心医院就诊的308名研究对象,其中185名为慢性肾病患者(观察组),123名为对照组。对所有研究对象进行双肾彩色多普勒超声检查和SWE定量测量,收集临床资料及实验室指标。根据肾小球滤过率和血清肌酐水平,将患者分为早期CKD组、中晚期CKD组和对照组。利用随机森林机器学习算法分析不同分组的参数,建立早期CKD的预测模型。结果:单因素分析表明,双肾皮质杨氏模量(YM)平均值、双肾实质厚度、右肾主动脉峰值流速及阻力指数(RI)等参数在不同分组间差异具有统计学意义(P<0.05)。随机森林模型确定了右肾皮质YM、左肾皮质YM和右肾主动脉RI为评估CKD严重程度的3个关键指标。该模型在CKD分类预测中显示出78.86%的总体准确率,早期CKD组的预测AUC为0.91,灵敏度为75.00%,特异度为85.54%。结论:结合彩色多普勒超声和SWE技术的机器学习模型在评估慢性肾病严重程度方面表现出良好的性能。该模型在早期CKD的预测中具有较高的准确性,提供了一种无创、高效的早期诊断方法。

261例慢性肾病患犬临床病理学特征和超声征象回顾性分析

慢性肾病(CKD)是犬最常见的肾脏疾病,为了探究国内犬CKD的流行特征,本文回顾性分析了261例在中国农业大学教学动物医院确诊为CKD的患犬资料。结果显示CKD的患病率约为0.9%,发病中位年龄为12岁,雌雄患病比为1∶1.5,小型犬患病率高于中、大型犬,常见的患病品种包括杂交犬、贵宾犬、博美犬和雪纳瑞犬等;常见的临床症状是胃肠道不适(食欲减退、呕吐、腹泻等)和多饮多尿;常见的临床病理学变化是非再生性贫血、氮质血症、高磷血症和低白蛋白血症,且随着CKD分期增加,血液学指标异常逐渐加重;常见的超声异常征象是皮质回声增强、轮廓不平滑/不规则和皮质内囊肿。CKD1期~CKD4期的患犬均可能出现蛋白尿和高血压。因此,建议大于7岁的犬进行CKD的筛查,在条件允许的情况下,检查计划应包括血常规、生化分析、对称性二甲基精氨酸(SDMA)、尿常规、尿蛋白肌酐比(UPC)、超声和血压检查。

自噬及铁死亡相关靶点与慢性肾病肾功能损伤的进展:生物信息学分析及实验验证

背景:自噬及铁死亡在慢性肾病的病程发展过程中发挥着重要作用,但目前对于慢性肾病肾组织自噬及铁死亡相关分子机制及基因靶点尚不清楚。目的:基于生物信息学筛选慢性肾病相关数据集中差异表达基因,并探讨其中适合作为筛查慢性肾病患者肾功能进展的潜在关键生物标志物。方法:①从GEO数据库获取GSE137570数据集,通过Networkanalyst数据库分析筛选差异表达基因,OMIM,GENECARD,FerrDb及HAMdb数据库分别获取铁死亡及自噬相关靶点,各数据取交集以获取慢性肾病自噬和铁死亡相关差异表达基因,并行富集分析。利用STRING网站构建差异表达基因蛋白互作网络,导入Cytoscape软件后利用MCODE及CytoHubba插件对蛋白互作网络进行功能模块分析,筛选潜在核心靶点,经富集分析以获取潜在核心靶点功能。②体外实验:将小鼠源肾小管上皮细胞分为2组,空白组不予任何干预,模型组加入5 ng/mL转化生长因子β1刺激24 h以诱导肾小管上皮细胞间充质转化,流式细胞术检测细胞中活性氧含量及线粒体膜电位变化,RT-PCR法检测细胞中铁死亡、自噬相关指标及潜在核心靶点mRNA表达。结果与结论:①GSE137570数据集筛选后共计获取480个差异基因,其中表达上调基因104个,表达下调基因376个(log2|(FC)|>1,P<0.05);OMIM、GENECARD、FerrDb及HAMdb数据库获取铁死亡相关靶点562个,自噬相关靶点1266个,将差异基因与铁死亡、自噬相关靶点取交集,分别获得铁死亡相关靶点15个,自噬相关靶点18个。②富集分析结果表明,铁死亡相关差异基因主要涉及硫氨基酸代谢、中性粒细胞脱粒等生物学过程及铁死亡信号通路,自噬相关差异基因主要富集于血小板脱颗粒、细胞外基质降解等生物学过程及受体酪氨酸激酶的信号传导。③经MCODE及CytoHubba筛选蛋白互作网络中关键基因,分别为CD44,ALB,TIMP1,PLG,CCL2,DPP4。④免疫浸润分析结果显示B细胞、CD4^(+)T细胞、NK细胞及单核细胞等免疫细胞在慢性肾病肾组织中表达具有显著差异,而核心靶点与此类免疫细胞同样存在显著相关性(P<0.05)。⑤ROC曲线分析结果进一步表明可通过CD44,ALB,TIMP1,PLG,CCL2,DPP4有效诊断慢性肾病病理进展。⑥经单细胞测序结果显示,除PLG外,各模型组小鼠肾组织靶点基因表达与该实验结果基本一致。⑦RT-PCR结果显示,对于自噬及铁死亡表型的验证,与空白组比较,模型组中LC3B,Nrf2,SLC7A11 mRNA表达显著降低(P<0.05),P62 mRNA表达显著增高(P<0.05);潜在核心靶点验证方面,与空白组比较,模型组中ALB、PLG mRNA表达显著降低(P<0.05),TIMP1,CCL2 mRNA表达显著升高(P<0.05)。⑧上述结果显示,经生物信息学分析与实验验证,CD44,ALB,TIMP1,PLG,CCL2在慢性肾病患者肾组织中异常表达,与肾小球滤过率及肾间质纤维化密切相关,对慢性肾病进展或具有预测作用。