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甘蔗脱落酸胁迫成熟诱导蛋白基因(SoASR)的克隆和表达分析 被引量:6
1
作者 黄杏 杨丽涛 +3 位作者 张保青 宋修鹏 李杨瑞 王盛 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期93-99,共7页
采用同源克隆和RT-PCR技术克隆了甘蔗SoASR基因全长cDNA,GenBank登录号为JX470187,长度为753 bp,包括一个429 bp的开放阅读框,编码142个氨基酸的蛋白。同源性分析表明,甘蔗SoASR与大蕉、玉米和高粱聚为一小组,同源性分别为79%、93%和88... 采用同源克隆和RT-PCR技术克隆了甘蔗SoASR基因全长cDNA,GenBank登录号为JX470187,长度为753 bp,包括一个429 bp的开放阅读框,编码142个氨基酸的蛋白。同源性分析表明,甘蔗SoASR与大蕉、玉米和高粱聚为一小组,同源性分别为79%、93%和88%。将SoASR在大肠杆菌中表达,获得一个约32.0 kD的外源蛋白。实时荧光定量PCR分析结果表明,低温胁迫下该基因在抗寒性强的甘蔗品种桂糖28号(GT28)中表达量先升后降,在抗寒性弱的甘蔗品种园林6号(YL6)中则呈下降趋势;该基因的表达在两个甘蔗品种中均受ABA的诱导。这说明SoASR基因在甘蔗抗寒机制中发挥一定作用。 展开更多
关键词 甘蔗 脱落酸胁迫成熟诱导蛋白 克隆 表达
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人外周血单核细胞来源树突状细胞的成熟诱导 被引量:2
2
作者 李东印 谷川 +2 位作者 闵军 褚忠华 区庆嘉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期531-534,共4页
目的:探讨诱导树突状细胞成熟的最优方法。方法:以细胞因子GM-CSF和IL-4体外诱导人单核细胞来源的树突状细胞,分别采用CD40L、LPS、TNF-α、细胞因子鸡尾酒法(TNF-α、IL-6、IL-1β、PGE2)诱导成熟,24小时后收获DCs以流式细胞仪检测其... 目的:探讨诱导树突状细胞成熟的最优方法。方法:以细胞因子GM-CSF和IL-4体外诱导人单核细胞来源的树突状细胞,分别采用CD40L、LPS、TNF-α、细胞因子鸡尾酒法(TNF-α、IL-6、IL-1β、PGE2)诱导成熟,24小时后收获DCs以流式细胞仪检测其成熟表型CD80、CD83、CD86、HLA-DR和FITC-Dextran的内吞能力,ELISA法检测其IL-12的分泌,MTT法检测其刺激淋巴细胞增殖活性。结果:CD40L、LPS、TNF-α、鸡尾酒法均可诱导DCs的成熟,其中以鸡尾酒法诱导成熟的效果最优,CD83的表达率为66.91%(P<0.05);成熟DCsFITC-Dextran的内吞能力明显下降;成熟DCsIL-12分泌量明显高于未成熟DCs,其中鸡尾酒法诱导成熟的DCs的IL-12分泌量最高,成熟的DCs有较强的刺激淋巴细胞增殖能力。结论:细胞因子鸡尾酒法是诱导DCs成熟的最佳方法。 展开更多
关键词 树突状细胞 细胞因子鸡尾酒 成熟诱导
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链球菌诱导外周血单个核细胞来源的树突状细胞的成熟
3
作者 曹华 薛峰 +3 位作者 陈小英 李霞 陈雪华 郑捷 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第12期1215-1217,共3页
目的探讨链球菌抗原(SA)对人外周血单个核细胞来源的树突状细胞(moDCs)成熟的影响。方法体外分离外周血单个核细胞(PBMC),通过重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白介素4(rhIL-4)诱导moDCs。用链球菌抗原诱导其成熟,EL... 目的探讨链球菌抗原(SA)对人外周血单个核细胞来源的树突状细胞(moDCs)成熟的影响。方法体外分离外周血单个核细胞(PBMC),通过重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白介素4(rhIL-4)诱导moDCs。用链球菌抗原诱导其成熟,ELISA法检测培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素6(IL-6)水平,流式细胞技术检测moDCs表面标志CD80和CD86。结果加入链球菌抗原18h后,moDCs培养上清液的TNF-α和IL-6水平分别为(3 433±363.6)pg/mL和(1 798±49.79)pg/mL,与空白对照比较差异有统计学意义(P<0.000 1)。同时moDCs表面CD80和CD86的表达显著升高。结论链球菌抗原可以诱导人外周血单个核细胞来源的树突状细胞成熟。 展开更多
关键词 链球菌抗原 人外周血单个核细胞来源的树突状细胞 成熟诱导
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脂质体-鱼精蛋白-DNA复合物的制备及对树突状细胞的成熟诱导 被引量:1
4
作者 李攀 陈思穆 +2 位作者 龚涛 张志荣 孙逊 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期246-248,共3页
目的研究脂质体-鱼精蛋白-DNA复合物(LPD)的制备方法及对树突状细胞(DC2.4)的成熟诱导作用。方法薄膜-超声分散法制备空白的阳离子脂质体,再与鱼精蛋白-DNA复合物室温孵育形成LPD;测定其粒径和电位。流式细胞仪检测鼠源树突状细胞系DC2.... 目的研究脂质体-鱼精蛋白-DNA复合物(LPD)的制备方法及对树突状细胞(DC2.4)的成熟诱导作用。方法薄膜-超声分散法制备空白的阳离子脂质体,再与鱼精蛋白-DNA复合物室温孵育形成LPD;测定其粒径和电位。流式细胞仪检测鼠源树突状细胞系DC2.4的甘露糖受体表达水平;用DC2.4表面标记分子CD80、CD40、CD86和MHC-2的表达水平,考查LPD对树突状细胞的成熟诱导作用。结果 LPD的最佳比例为DDAB-鱼精蛋白-DNA(2∶1.5∶1);LPD粒径为84.28±0.56 nm,Zeta电位为27.33±1.23 mV。通过FITC-ManBSA的结合作用检测到DC2.4表面有83%的甘露糖受体表达。LPD明显上调DC2.4表面标记分子的表达水平(P<0.05)。结论 LPD制备工艺简单,是一个良好的疫苗佐剂。 展开更多
关键词 脂质体-鱼精蛋白-DNA复合物 树突状细胞 成熟诱导
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人γhG—CSF动员的外周血采集物来源的树突状细胞成熟诱导的研究 被引量:1
5
作者 魏静 蔡秋妍 +5 位作者 陈家萍 潘健 应美爱 完晓菊 周志风 王保龙 《国际免疫学杂志》 CAS 2013年第2期132-137,共6页
目的探讨优化人γhG-CSF动员的外周血采集物来源的树突状细胞(DC)成熟诱导条件。方法利用密度梯度离心法从重组人粒细胞集落刺激因子(吖hG-CSF)动员的外周血采集物分离出单个核细胞,以重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF... 目的探讨优化人γhG-CSF动员的外周血采集物来源的树突状细胞(DC)成熟诱导条件。方法利用密度梯度离心法从重组人粒细胞集落刺激因子(吖hG-CSF)动员的外周血采集物分离出单个核细胞,以重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)和重组人白细胞介素-4(IL4)体外诱导成不成熟树突状细胞(imDC),分别采用传统细胞因子鸡尾酒(IL-1β、IL-6、TNF—α、PGE2)和改良细胞因子鸡尾酒(IL-1β、IL-6、TNF-α、polyI:C、CpGODN)刺激成熟。3d后收获成熟DC,观察细胞形态、流式细胞仪检测DC的内吞能力通过异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC—Dextran)、检测DC表面CD83、CD1a、CD80、HLA—DR、CD86和CCR-7,酶联免疫吸附法(ELISA)检测其IL一12的分泌,M1Tr法检测其刺激淋巴细胞增殖活性。结果两种方法均能诱导DC成熟,以改良细胞因子鸡尾酒效果更佳,FITC—Dextran的内吞能力明显下降;CD83、CD1a的表达率分别是84.44%、87.94%(P〈0.05);IL-12分泌量明显增高,成熟DC能有效的刺激T淋巴细胞增殖。结论改良细胞因子鸡尾酒法可能是诱导DC成熟的最佳方法。 展开更多
关键词 树突状细胞 细胞因子鸡尾酒 改良 成熟诱导
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用LHRH-A_2埋植法诱导池养鲻鱼卵母细胞发育成熟的试验 被引量:5
6
作者 李加儿 区又君 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期83-86,共4页
将含LHRH A2 的药物颗粒埋植入池养人工繁殖鲻鱼MugilcephalusLinnaeus雌鱼体内 ,以诱导其性腺发育成熟 ,试验为期 81d。发现用LHRH A2 埋植的试验组鱼的卵母细胞直径超过 5 0 0 μm以上 ,达到成熟的个体比率为 3 0 %,而空白对照组鱼达... 将含LHRH A2 的药物颗粒埋植入池养人工繁殖鲻鱼MugilcephalusLinnaeus雌鱼体内 ,以诱导其性腺发育成熟 ,试验为期 81d。发现用LHRH A2 埋植的试验组鱼的卵母细胞直径超过 5 0 0 μm以上 ,达到成熟的个体比率为 3 0 %,而空白对照组鱼达到成熟的个体比率为0 %。试验结果表明 ,采用激素埋植的方法 ,可促进鲻鱼卵母细胞的发育。 展开更多
关键词 鲻鱼 LHRH-A2埋植 诱导成熟 发育成熟 试验 卵母细胞 池塘养殖
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活动性结核患者单核细胞中B淋巴细胞诱导成熟蛋白1的mRNA水平降低 被引量:4
7
作者 刘艳华 王若 程小星 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期949-952,共4页
目的研究活动性结核患者单核细胞中B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp-1)的mRNA水平与结核分枝杆菌(MTB)潜伏感染者和健康者相比是否发生改变。方法收集活动性结核患者、结核菌潜伏感染者和和健康者的抗凝外周血,从外周血中分离并纯化单核细... 目的研究活动性结核患者单核细胞中B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp-1)的mRNA水平与结核分枝杆菌(MTB)潜伏感染者和健康者相比是否发生改变。方法收集活动性结核患者、结核菌潜伏感染者和和健康者的抗凝外周血,从外周血中分离并纯化单核细胞,荧光定量PCR检测单核细胞中Blimp-1 mRNA的水平。而后分别用MTB的H37Rv菌株全菌裂解液和ESAT-6/CFP-10的抗原多肽刺激健康者的单核细胞,荧光定量PCR检测刺激前后单核细胞中Blimp-1 mRNA的水平。结果与健康者相比,活动性结核患者、潜伏感染者单核细胞Blimp-1的mRNA水平显著降低;与未刺激的单核细胞相比,全菌裂解液刺激后的单核细胞Blimp-1的mRNA水平显著降低,而ESAT-6/CFP-10抗原多肽刺激后的单核细胞中Blimp-1的mRNA水平无显著变化。结论活动性结核患者和MTB潜伏感染者单核细胞Blimp-1的mRNA水平降低,MTB全菌裂解液刺激的人单核细胞中Blimp-1的mRNA水平降低。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 活动性结核 B淋巴细胞诱导成熟蛋白1 单核细胞
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宫腔内人工授精促排卵周期中使用GnRha诱导卵泡成熟疗效观察 被引量:3
8
作者 连蔚 李彩英 +2 位作者 罗一平 梁美燕 田小燕 《齐齐哈尔医学院学报》 2015年第25期3777-3778,共2页
目的观察宫腔内人工授精促排卵周期中使用促性腺激素释放激素激动剂(GnRha)诱导卵泡成熟的疗效,探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRha)促进卵泡成熟对腔内人工授精临床结局的影响。方法选择2013年4月至2015年4月我院进行宫腔内人工... 目的观察宫腔内人工授精促排卵周期中使用促性腺激素释放激素激动剂(GnRha)诱导卵泡成熟的疗效,探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRha)促进卵泡成熟对腔内人工授精临床结局的影响。方法选择2013年4月至2015年4月我院进行宫腔内人工授精促排卵的100例PCOS患者作为研究对象,将其随机分为应用促性腺激素释放激素激动剂(GnRha)诱导卵泡成熟为实验组(n=50)和应用绒毛膜促性腺激素(h CG)诱导卵泡成熟为对照组(n=50)。对照组患者在注射h CG后24~36小时内进行宫腔内人工授精,实验组患者在注射GnRHa后的24~36小时内进行宫腔内人工授精。比较对照组和观察组的排卵率、妊娠率及流产率。结果对照组和实验组患者的排卵率、妊娠率、流产率均未出现明显的差异,P〉0.05,差异不具有统计学意义。结论在宫腔内人工授精促排卵周期中使用GnRHA能够有效诱导卵泡成熟,其与h CG的促排卵效果接近,可替代h CG进行诱导排卵。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素激动剂 绒毛膜促性腺激素 PCOS 宫腔内人工授精 促排卵 诱导卵泡成熟 疗效
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B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1在变应性鼻炎中的作用研究进展 被引量:2
9
作者 张建 李同丽 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2022年第1期65-68,共4页
变应性鼻炎(AR)是特异性免疫球蛋白E介导的鼻黏膜非感染性慢性炎症性疾病,以Th2及其分泌的IL-4、IL-5参与主要炎症过程。B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(Blimp-1)是一种含锌指基序的转录抑制因子,调控T细胞发育、分化和功能,对活化T淋巴细胞... 变应性鼻炎(AR)是特异性免疫球蛋白E介导的鼻黏膜非感染性慢性炎症性疾病,以Th2及其分泌的IL-4、IL-5参与主要炎症过程。B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(Blimp-1)是一种含锌指基序的转录抑制因子,调控T细胞发育、分化和功能,对活化T淋巴细胞增殖分化和免疫自稳有重要的调节作用。鉴于Blimp-1对于下呼吸道及其他变应性炎症反应疾病有抗炎作用,深入探寻Blimp-1在AR发生发展中可能的作用,对研究AR的发病机制、新的治疗方法、改善症状、降低并发症具有重大意义。本文对Blimp-1在AR发病机制中的作用及其研究进展进行综述。 展开更多
关键词 变应性鼻炎 B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1 TH2细胞 TH9细胞 哮喘
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多囊卵巢综合征不孕患者应用GnRH-a与hCG诱导卵泡成熟促排卵效果比较 被引量:10
10
作者 黄欣慰 徐璞 《中国计划生育学杂志》 2021年第5期899-902,共4页
目的:探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)与绒毛膜促性腺激素(hCG)诱导卵泡成熟在多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者促排卵效果。方法:选取本院收治的PCOS不孕患者116例,随机数字表法分为两组各58例,两组均采用来曲唑促排卵方案,在主导... 目的:探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)与绒毛膜促性腺激素(hCG)诱导卵泡成熟在多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者促排卵效果。方法:选取本院收治的PCOS不孕患者116例,随机数字表法分为两组各58例,两组均采用来曲唑促排卵方案,在主导卵泡平均直径18~22mm时,一组应用GnRH-a(G组),另一组应用hCG(H组)诱导卵泡成熟。对比两组诱发排卵日的各项参数、排卵效果及妊娠结局。结果:两组诱发排卵日优势卵泡数、成熟卵泡数、子宫内膜厚度、血清促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)水平均无差异(P>0.05)。与注射前相比,两组注射药物后尿LH水平均升高,且G组在注射后4h、8h均高于H组并在24h开始下降(P<0.05),而H组持续升高在24h、36h均高于G组(P<0.05)。两组排卵率、妊娠率、多胎率、黄体功能不足发生率比较无差异(P>0.05)。G组的黄素化发生率(1.7%)、卵巢过度刺激综合征发生率(0)、卵巢囊肿发生率(6.9%)均低于H组(18.0%、10.3%、22.4%)(P<0.05)。结论:GnRH-a与hCG用于PCOS不孕患者均获得较好的诱导卵泡成熟促排卵,但前者能有效预防卵巢过度刺激综合征与卵巢囊肿的发生、安全性更好,后者费用更低、经济性更好,二者各有优缺点。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征不孕 促排卵 诱导卵泡成熟 绒毛膜促性腺激素 促性腺激素释放激素激动剂
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骨髓单个核细胞中B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1表达对多发性骨髓瘤患者预后的影响 被引量:3
11
作者 刘国生 王姣平 +2 位作者 褚志华 余莹莹 周维 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1449-1453,共5页
目的:研究分析骨髓单个核细胞中B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(B lymphocyte induced maturation protein 1,Blimp1)的表达对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,M M)预后的影响。方法:选取本院2014年1月-2015年1月期间收治的48例MM患者,检测所... 目的:研究分析骨髓单个核细胞中B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(B lymphocyte induced maturation protein 1,Blimp1)的表达对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,M M)预后的影响。方法:选取本院2014年1月-2015年1月期间收治的48例MM患者,检测所有入组患者骨髓中Blimp1表达水平,依据Blimp1转录表达水平的中位值将入组患者分为低表达组(L组,22例)和高表达组(H组,26例),比较分析Blimp1不同表达水平的相关影响因素,比较Blimp1不同表达水平患者的临床疗效、免疫表型变化及无进展生存期差异。结果:2组患者在性别、年龄、分型、分期及治疗阶段等方面均无统计学差异(P>0.05)。低表达组总缓解率明显高于高表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者CD19、CD38、CD56、CD138及微小病灶残留阳性率均无统计学差异(P>0.05);治疗后低表达组患者CD38、CD56、CD138及微小病灶残留阳性表达率均明显低于高表达组,CD19+表达率明显高于高表达组(P<0.05)。低表达组1、2、3年无进展生存期(PFS)均明显高于高表达组(P<0.05)。结论:分期越高,治疗难度越大的M M,其患者Blimp1表达水平越高,低B limp1表达水平的患者,其临床疗效及预后均明显优于高表达患者。 展开更多
关键词 B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1 多发性骨髓瘤 骨髓单个核细胞
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GnRHa与HCG在微刺激方案中诱导卵泡成熟效果的比较
12
作者 胡艳芳 樊桂玲 李大雷 《中外女性健康研究》 2015年第19期1-3,共3页
目的:比较GnRHa与HCG在加强黄体支持的微刺激方案中诱导卵泡成熟的效果。方法:回顾性分析2013年1月至2015年4月在唐山市妇幼保健院因卵巢低反应因素行微刺激方案治疗的119周期,根据最终诱导卵泡成熟药物的不同分为三组:A组皮下注射G... 目的:比较GnRHa与HCG在加强黄体支持的微刺激方案中诱导卵泡成熟的效果。方法:回顾性分析2013年1月至2015年4月在唐山市妇幼保健院因卵巢低反应因素行微刺激方案治疗的119周期,根据最终诱导卵泡成熟药物的不同分为三组:A组皮下注射GnRHa0.1mg,共个41周期(其中36个周期进行新鲜胚胎移植),B组皮下注射GnRHa0.2mg,共57个周期(其中46个周期进行新鲜胚胎移植),C组肌注HCGl0000U,共21个周期(其中16周期进行新鲜胚胎移植).三组常规用药后34~36小时取卵,当日行IVF受精,取卵后3日进行胚胎移植,所有患者自取卵日每日给予黄体酮60mg,地屈孕酮20mg,补佳乐2mg的常规黄体支持,A组与B组从移植日开始每日肌注HCG2000U。比较三组的获卵率、受精卵、优胚率、临床妊娠率、种植率流产率及周期取消率,同时比较诱导日(d0)、取卵日(d1)、移植日(d5)的血清FSH、E2、P、LH水平。结果:三组组间比较Gn天数、获卵率、受精卵、优胚率、流产率及周期取消率无明显差异,GnRHa组临床妊娠率、种植率高于HCG组(P〈0.05),Gn使用总量低于HCG组(P〈0.05)。GnRHa组dlLH、d5LH水平高于HCG组(P〈0.05),而d5E2d5P水平低于HCG组(P〈0.05)。结论:在加强黄体支持的基础上,微刺激方案中使用GnRHa能够诱导卵泡成熟,并且获得较高妊娠率,所以使用GnRHa诱导卵泡成熟是相对有效的治疗方案。 展开更多
关键词 诱导卵泡成熟 GNRHA HCG 微刺激方案
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Toll样受体信号通路在调控树突状细胞成熟中的作用研究 被引量:2
13
作者 周志风 王保龙 +8 位作者 魏静 蔡秋妍 潘健 陈家萍 应美爱 沈佐君 李庆 黄琼 罗朋 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期473-479,共7页
目的探讨TLR信号通路在调控树突状细胞(DC)熟过程中的作用。方法用密度梯度离心法从人外周富集血中分离单个核细胞(PBMC),以GM-CSF和IL-4体外诱导成未成熟DC(imDC),用电穿孔法把A549的总RNA转染入imDC,分别用传统细胞因子鸡尾酒(IL-1β... 目的探讨TLR信号通路在调控树突状细胞(DC)熟过程中的作用。方法用密度梯度离心法从人外周富集血中分离单个核细胞(PBMC),以GM-CSF和IL-4体外诱导成未成熟DC(imDC),用电穿孔法把A549的总RNA转染入imDC,分别用传统细胞因子鸡尾酒(IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2)和改良细胞因子鸡尾酒(IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2、polyⅠ∶C、CpG ODN)刺激DC的成熟。实验分为4组,对照组:GM-CSF、IL-4;传统组:传统细胞因子鸡尾酒;改良1组:IL-1β、IL-6、TNF-α、polyⅠ∶C、CpG ODN);改良2组:IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2、polyⅠ∶C、CpG ODN。用RTPCR法检测RNA的转染效率,流式细胞术检测DC和DC致敏T细胞的表面标志,ELISA法检测IL-12的分泌水平,MTT法检测T细胞的增殖。结果 1)RT-PCR检测:电穿孔法能使A549的总RNA成功转入DC,并使DC表达组织多肽特异性抗原(TPS)、癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白19片段(Cyfra21-1)等肿瘤抗原。2)流式检测:CD83各组表达率分别为(15.17±1.61)%、(64.33±7.58)%、(60.26±4.18)%和(82.89±3.06)%,CD1a表达率分别为(25.74±6.06)%、(69.37±8.16)%、(61.66±5.82)%和(86.07±5.63)%(P<0.05),各组CD8+T细胞比例分别为(36.43±3.15)%、(61.91±2.33)%、(54.81±2.55)%和(66.78±2.74)%(P<0.05)。3)各组IL-12的分泌水平分别为(55.86±14.07)、(1 243.49±57.57)、(744±49.51)和(2 385±128.98)pg/mL(P<0.05)。4)各组刺激指数分别为11.85±2.61、54.14±3.81、47.57±3.14和64.43±5.88,阳性对照组为135.29±5.06(P<0.05)。结论TLR配体polyⅠ∶C和CpG ODN可以促进DC的分化成熟。 展开更多
关键词 树突状细胞 细胞因子鸡尾酒法 改良 成熟诱导 A549-RNA 电转染 RT—PCR TLR配体 poly I C CPG ODN
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一种改进的水稻成熟胚愈伤组织高效基因转化系统 被引量:29
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作者 陈惠 赵原 种康 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2008年第3期322-331,共10页
以成熟胚愈伤组织为材料的农杆菌介导水稻转化法虽已建立,但转化频率仍有待提高。本文以粳稻(Oryzasativa)品种(中花10号和中花11号)的成熟胚诱导的愈伤组织为受体材料,对组织培养体系及影响遗传转化的因素进行优化,建立了一套改进的农... 以成熟胚愈伤组织为材料的农杆菌介导水稻转化法虽已建立,但转化频率仍有待提高。本文以粳稻(Oryzasativa)品种(中花10号和中花11号)的成熟胚诱导的愈伤组织为受体材料,对组织培养体系及影响遗传转化的因素进行优化,建立了一套改进的农杆菌介导的水稻高效遗传转化系统。农杆菌菌株为EHA105,质粒载体是pUN1301/OsRAA1,其中含有标记基因GUS和筛选基因HPT。愈伤组织诱导培养基为NBD2(NB+2mg·L^(-1)2,4-D),继代培养基为NBD0.5,预分化与分化培养基为RE1(MS+1mg·L^(-1)6-BA+0.25mg·L^(-1)NAA+0.5mg·L^(-1)KT+0.2mg·L^(-1)ZT)和RE2(MS+1mg·L^(-1)6-BA+0.5mg·L^(-1)NAA+0.5mg·L^(-1)KT+0.2mg·L^(-1)ZT)。另外,还分析了影响T-DNA转移的多种因素,如外植体种类、愈伤组织预培养基和愈伤组织继代次数等。采用优化的转化程序,水稻愈伤组织转化率和植株转化率可达70%以上。 展开更多
关键词 农杆菌介导的遗传转化 成熟诱导的愈伤组织 水稻
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蔗糖浓度对百子莲‘Big Blue’体胚成熟效果的影响 被引量:2
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作者 岳建华 王苗 +3 位作者 董艳 张华 刘松虎 张琰 《西部林业科学》 CAS 北大核心 2020年第5期81-89,103,共10页
揭示蔗糖浓度对体胚成熟诱导数量及生理特性的影响,为百子莲体胚发生体系优化提供参考。以百子莲‘Big Blue’小花梗起源的胚性愈伤组织(EC)为试材,研究了蔗糖浓度(3%~6%)对成熟胚数量、生理特性的影响,并根据相关性分析结果进行了生理... 揭示蔗糖浓度对体胚成熟诱导数量及生理特性的影响,为百子莲体胚发生体系优化提供参考。以百子莲‘Big Blue’小花梗起源的胚性愈伤组织(EC)为试材,研究了蔗糖浓度(3%~6%)对成熟胚数量、生理特性的影响,并根据相关性分析结果进行了生理指标验证。结果表明,蔗糖用量显著影响百子莲体胚成熟诱导效果,胚状体数量随蔗糖浓度的增加呈单峰曲线变化,其中4%蔗糖效果较佳。蔗糖浓度显著调节体胚成熟诱导糖代谢、内源激素代谢、氧化胁迫平衡。总糖、淀粉含量对体胚诱导相对重要,在4%蔗糖处理下最高,其中总糖与成胚数显著相关(P<0.05),相关系数为0.973,淀粉与成胚数相关系数为0.769;麦芽糖含量随蔗糖浓度增加呈单峰曲线变化,在5%蔗糖处理下较高;蔗糖含量则与培养基蔗糖用量趋势相反。结合态IAA、GA 4、CTK、ABA等内源激素与蔗糖浓度、胚状体数量关系密切,含量随蔗糖浓度增加呈单峰曲线变化,其中结合态IAA含量在4%蔗糖处理下最高,而GA 4、CTK、ABA在5%蔗糖处理下达最高水平。内源IAA是调节百子莲体胚诱导的关键激素,结合态IAA与自由态IAA变化趋势相反,其中结合态IAA与成胚数相关系数为0.977,为显著相关(P<0.05);GAs、GA 3与成胚数的相关系数为-0.708、-0.649,GAs含量增高对体胚成熟诱导不利;内源、外源ABA均可显著促进体胚诱导数量;适度氧化胁迫可促进体胚成熟诱导,H 2 O 2、POD对百子莲体胚诱导相对重要。 展开更多
关键词 百子莲 蔗糖浓度 成熟诱导 生理特性
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复方守宫散联合唑来膦酸通过B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1/B细胞淋巴瘤因子6通路对肺癌骨转移的研究 被引量:2
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作者 张良军 蔡琪 +3 位作者 张思龙 黄璟 田敬海 夏黎明 《世界临床药物》 CAS 2023年第11期1152-1158,1178,共8页
目的探讨复方守宫散联合唑来膦酸对肺癌骨转移的治疗作用,及对B淋巴细胞诱导成熟蛋白(B lymphocyte induced maturation protein,Blimp)1/B细胞淋巴瘤因子(B-cell lymphoma factor,Bcl)-6通路的影响。方法建立肺癌骨转移小鼠模型,分为... 目的探讨复方守宫散联合唑来膦酸对肺癌骨转移的治疗作用,及对B淋巴细胞诱导成熟蛋白(B lymphocyte induced maturation protein,Blimp)1/B细胞淋巴瘤因子(B-cell lymphoma factor,Bcl)-6通路的影响。方法建立肺癌骨转移小鼠模型,分为骨转移组、中药低剂量(40 mg/kg复方守宫散)组、中药高剂量(120 mg/kg复方守宫散)组、西药(50μg/kg唑来膦酸)组以及联合用药(120 mg/kg复方守宫散+50μg/kg唑来膦酸)组,另设假手术组,每组10只。21 d后,观察胫骨损伤、病理形态、统计破骨细胞数目、骨转移细胞活体成像系统荧光信号以及胫骨组织中Blimp1、Bcl-6表达水平。结果与假手术组相比,骨转移组破骨细胞数目、肿瘤细胞荧光信号以及Blimp1表达增加,Bcl-6表达降低(P<0.01);与骨转移组相比,中药低、高剂量组以及西药组的破骨细胞数目、肿瘤细胞荧光信号以及Blimp1表达降低,Bcl-6表达增加(P<0.01);联合用药增强肺癌骨转移的治疗作用(P<0.01)。结论复方守宫散联合唑来膦酸治疗肺癌骨转移具有协同作用,其机制可能与抑制Blimp1/Bcl-6通路有关。 展开更多
关键词 复方守宫散 唑来膦酸 肺癌骨转移 B淋巴细胞诱导成熟蛋白1/B细胞淋巴瘤因子-6
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不同诱导方法对人外周血树突状细胞体外成熟的影响 被引量:1
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作者 刘璐 李琳 +4 位作者 伍衡 闵军 王捷 曾育杰 褚忠华 《中华普通外科学文献(电子版)》 2012年第1期36-39,共4页
目的探讨不同诱导方式对于体外培养的树突状细胞(dendritic cells,DC)免疫刺激活性的影响。方法通过rhGM-CSF和IL-4体外诱导的人外周血单核细胞来源的DC,分别用肿瘤坏死因子α(TNF-α)、脂多糖(LPS)、细胞因子鸡尾酒法诱导成熟,再以流... 目的探讨不同诱导方式对于体外培养的树突状细胞(dendritic cells,DC)免疫刺激活性的影响。方法通过rhGM-CSF和IL-4体外诱导的人外周血单核细胞来源的DC,分别用肿瘤坏死因子α(TNF-α)、脂多糖(LPS)、细胞因子鸡尾酒法诱导成熟,再以流式细胞仪、FITC-Dxtran内吞检测、MLR、ELISA法检测DC的表面标志、内吞能力、刺激淋巴细胞增殖能力和IL-12分泌的变化。结果在不同方法促进DC成熟中,细胞因子鸡尾酒法诱导下的DC成熟状态最佳,CD83指数表达高达84.87%,IL-12的分泌量[(656.18±38.52ng/L)]高于其他各组,且刺激淋巴细胞增殖能力最强(P<0.05)。结论细胞因子鸡尾酒法是体外诱导DC成熟的最佳方法。 展开更多
关键词 树突状细胞 细胞因子鸡尾酒法 成熟诱导
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Callus Induction from Mature Embryos of Maize 被引量:9
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作者 肖莉杰 王丽艳 闵丽 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2009年第6期67-68,93,共3页
In this study we studied the factors influencing the callus induction from mature embryos of maize inbred lines Qi 319, Zhen 58, Chang 7 -2, Lx 9801 and 81162, such as genotype, combination of plant growth regulators,... In this study we studied the factors influencing the callus induction from mature embryos of maize inbred lines Qi 319, Zhen 58, Chang 7 -2, Lx 9801 and 81162, such as genotype, combination of plant growth regulators, and low-temperature pretreatment. The results showed that the induction rate of Qi 319 was the highest among the four genotypes tested; combination of 4.0 mg/L 2,4-D + 0.5 mg/L 6-BA was suitable for inducing callus from mature embryos; three days of 4℃ pretreatment can promote the callus induction significantly. The indices optimized in the present study are helpful for establishing genetic transformation system in maize without considering seasonal variation. 展开更多
关键词 MAIZE Mature embryos Callus induction
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Blimp-1和Bcl-6在不明原因复发性流产患者蜕膜组织中表达增强 被引量:8
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作者 龚巧巧 朱玥洁 +5 位作者 庞盼 黄玉红 赵骏达 赵静 腊晓琳 丁剑冰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期963-967,共5页
目的通过检测B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp-1)和B细胞淋巴瘤分子6(Bcl-6)在不明原因复发性流产(URSA)患者蜕膜组织中的表达水平,探讨两因子与URSA的关系。方法收集URSA患者(URSA组)和正常怀孕者(对照组)的蜕膜组织,采用实时定量PCR法... 目的通过检测B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp-1)和B细胞淋巴瘤分子6(Bcl-6)在不明原因复发性流产(URSA)患者蜕膜组织中的表达水平,探讨两因子与URSA的关系。方法收集URSA患者(URSA组)和正常怀孕者(对照组)的蜕膜组织,采用实时定量PCR法检测蜕膜组织Blimp-1和Bcl-6的mRNA水平,免疫组织化学技术检测蜕膜组织Blimp-1和Bcl-6的蛋白水平,采用Pearson相关分析Blimp-1和Bcl-6的相关性。结果与对照组相比,URSA组蜕膜组织中Blimp-1和Bcl-6的mRNA均增加,Blimp-1的蛋白水平也显著增加,而Bcl-6蛋白表达水平增加不明显。Blimp-1和Bcl-6的mRNA表达水平显著正相关。结论 URSA组患者蜕膜组织中Blimp-1和Bcl-6表达增强。 展开更多
关键词 不明原因复发性流产(URSA) 滤泡辅助型T淋巴细胞 B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp-1) B细胞淋巴瘤分子6(Bcl-6)
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多发性骨髓瘤患者化疗前后骨髓单个核细胞中Blimp-1 mRNA的表达水平 被引量:2
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作者 刘俊文 胡文坛 +1 位作者 李晋 刘红春 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第12期916-918,共3页
目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞(BMMNCs)中B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(Blimp-1)基因的表达水平及化疗治疗对其的影响。方法以30例缺铁性贫血(IDA)患者为相关疾病对照组,60例初诊MM患者为实验组。收集相关疾病对照组及MM患者... 目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞(BMMNCs)中B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(Blimp-1)基因的表达水平及化疗治疗对其的影响。方法以30例缺铁性贫血(IDA)患者为相关疾病对照组,60例初诊MM患者为实验组。收集相关疾病对照组及MM患者化疗前后的骨髓标本,对其临床生化指标进行检测,荧光定量PCR分析各组BMMNCs中Blimp-1mRNA的表达水平,并分析其与临床病理参数的相关性。结果与相关疾病对照组比较,MM患者治疗前Blimp-1 mRNA的表达水平升高,差异有统计学意义(q=32.54,P<0.01);MM患者经过化疗后,Blimp-1 mRNA的表达水平显著低于化疗前,差异有统计学意义(q=26.15,P<0.01);相关性分析结果显示,MM患者Blimp-1 mRNA的表达水平与β2-MG、LDH、CRP水平呈正相关(P均<0.05),与Alb水平呈负相关(P<0.05)。结论检测BMMNCs中Blimp-1 mRNA表达水平可反映MM患者体内肿瘤负荷,化疗可降低其表达水平。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1 化疗
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