扶正透邪解毒化瘀方对不同时间点老年肺炎大鼠炎症及免疫功能的影响

目的:探讨扶正透邪解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌肺炎老年大鼠炎症反应与免疫功能的态影响。方法:将实验老年大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、西药对照组、中药组、中药提前给药组、中西医结合观察组,动态观察不同时间点各组老年大鼠炎症指标的变化及淋巴细胞增殖水平的变化。结果:中药提前给药组及中西医结合观察组疗效显著,中药组对感染早期的炎症水平改善明显;中西医结合观察组可使T淋巴细胞增殖能力趋于正常;中药提前给药组、中西医结合观察组能抑制感染后B淋巴细胞的增殖并使其趋于正常。结论:扶正透邪解毒化瘀方能够调节感染早期老年大鼠机体过度的免疫炎症反应,中西医结合治疗能够纠正多重耐药铜绿假单胞菌感染后紊乱的免疫状态,中药提前给药能够对多重耐药铜绿假单胞菌感染后的炎症反应及免疫紊乱起到一定的预防及治疗作用。

扶正透邪解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌肺炎老年大鼠炎症损伤的影响

目的探讨扶正透邪解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)肺炎老年大鼠不同时相炎症损伤的影响。方法将老年SD大鼠分为空白组、模型组、西药组、中药组、中药提前给药组、中西医结合治疗组,除空白组外使用经口气管插管法进行MDRPA肺炎造模,观察各组大鼠死亡保护率、生命延长率;在感染后不同时间点取大鼠血清及肺组织标本,应用ELISA试剂盒测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)水平,光镜下观察肺组织支气管、肺泡等结构;在感染后第3日取肺组织标本,电镜下观察各组肺组织超微结构。结果中药提前给药组和中西医结合治疗组可提高死亡保护率和生命延长率。中西医结合治疗组可明显降低MDRPA肺炎老年大鼠血清中促炎因子TNF-α水平,升高抑炎因子IL-10水平,其作用强度明显优于西药组,且可明显减少肺组织炎症细胞浸润和充血水肿,明显减轻肺泡结构的破坏。中药提前给药组可在炎症反应早期升高血清抑炎因子IL-10水平,降低促炎因子TNF-α水平。结论扶正透邪解毒化瘀方对老年MDRPA肺炎大鼠有着较高的死亡保护率和生命延长率,与头孢他啶联合治疗可纠正MDRPA感染后紊乱的炎症状态,减轻炎症损伤。中药提前给药可对MDRPA感染后造成的炎症损伤起到保护与治疗作用,对维持机体免疫稳态具有重要意义。

基于网络药理学及细胞实验探讨扶正透邪解毒方治疗铜绿假单胞菌肺炎作用机制

目的:筛选扶正透邪解毒方抑制铜绿假单胞菌肺炎的中药活性化合物,并通过体外细胞实验研究扶正透邪解毒方治疗铜绿假单胞菌肺炎的作用机制。方法:在GeneCard、OMIM等数据库筛选铜绿假单胞菌肺炎疾病靶点;明确扶正透邪解毒方活性成分与铜绿假单胞菌肺炎的共同潜在靶标;利用String数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,利用DAVID数据库进行基因本体(GO)功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;体外细胞实验中采用CD4^(+)T细胞与多重耐药铜绿假单胞菌共培养,以扶正透邪解毒方含药血清干预后,采用RT-PCR检测CD4^(+)T细胞中肿瘤蛋白P53(TP53)mRNA、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)mRNA、白介素-6(IL-6)mRNA、白介素-10(IL-10)mRNA、白介素-1β(IL-1β)mRNA、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达,采用Western blotting检测CD4^(+)T细胞中IL-6、TNF-α、AKT1、IL-1β、TP53、IL-10蛋白表达。结果:筛选出226种潜在活性成分及93个潜在靶点;TP53、AKT1、IL-6、IL-10、IL-1β、TNF-α等是扶正透邪解毒方治疗铜绿假单胞菌肺炎的关键靶点;扶正透邪解毒方主要通过炎症因子、趋化因子、免疫调控等信号通路来发挥治疗铜绿假单胞菌肺炎的作用。扶正透邪解毒方含药血清能降低CD4^(+)T细胞IL-6 mRNA、TNF-αmRNA、AKT1 mRNA、IL-1βmRNA表达(P<0.01),促进CD4+T细胞TP53 mRNA、IL-10 mRNA表达(P<0.01);扶正透邪解毒方含药血清能降低CD4^(+)T细胞IL-6、TNF-α、AKT1、IL-1β蛋白表达(P<0.05),促进CD4^(+)T细胞TP53、IL-10蛋白表达(P<0.05)。结论:扶正透邪解毒方可能是通过调控TNF-α、AKT1、TP53、IL-10等关键因子的表达抑制肺部感染而治疗铜绿假单胞菌肺炎。

基于LC-MS/MS和靶点网络探讨扶正透邪解毒化瘀方对多重耐药铜绿假单胞菌的干预机制

[目的]从药物作用靶点层面探讨扶正透邪解毒化瘀方体外干预多重耐药铜绿假单胞菌的药效物质基础和直接/协同机制。[方法]通过液相色谱-串联质谱联用(LC-MS/MS)、中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)筛选扶正透邪解毒化瘀方化学成分;通过Stitch数据库查找上述成分以及亚胺培南、头孢他啶、环丙沙星作用于铜绿假单胞菌的蛋白靶点;运用Cytoscape 3.9.1构建“中药—化学成分—作用靶点网络图”和“蛋白质-蛋白质互作网络”;筛选该方与抗菌药物共同作用靶点;借助DAVID数据库对靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。[结果]LC-MS/MS共鉴定出108个化学成分,TCMSP数据库共筛选出155个化学成分,去重后共得到162个化学成分,其中42个化学成分能够直接作用于铜绿假单胞菌240个靶蛋白;网络药理学筛选出17个核心成分,以黄酮类、甾醇类、萜类为主,其中β-谷甾醇、槲皮素、木犀草素度值较高;该方分别与亚胺培南、头孢他啶、环丙沙星有3/3/17个共同作用靶点,4种药物共同作用靶点2个,共同作用靶点主要作用于细菌能量和生化代谢、DNA复制、蛋白质功能、表面多糖形成等途径;GO和KEGG富集分析提示该方主要与调节细菌能量和生化代谢、调控DNA/蛋白质稳态、影响细菌胞质胞膜以及干预对细菌起保护作用的表面多糖和生物被膜合成等密切相关。[结论]扶正透邪解毒化瘀方具有多成分、多靶点、多途径干预铜绿假单胞菌的特点,发挥主要干预作用的化学成分以黄酮类、甾醇类、萜类为主,直接/协同抗菌药物干预铜绿假单胞菌的机制与影响细菌遗传、代谢、生物被膜形成等相关。研究从药物作用靶点层面为从天然药物中开发抗菌药物提供了一定的思路和借鉴。

扶正透邪法治疗肺部多重耐药菌感染的临床观察

目的 观察应用中医扶正透邪理论治疗肺部多重耐药菌感染的临床疗效。方法 选取肺部多重耐药菌感染患者60例,按照随机数字表法分为两组各30例,对照组在临床药师的指导下选用抗生素治疗,试验组在对照组的基础上加用中药口服或鼻饲,中药方剂以扶正透邪理论的代表方芪归银方为主,观察患者的中医证候,并在治疗7、14 d行急性生理与慢性健康系统(APACHEⅡ)评分。结果 治疗7 d后行APACHEⅡ评分,组间比较差异无统计学意义(P> 0.05),治疗14 d后APACHEⅡ评分组间差异有统计学意义(P <0.05);中医证候评分,试验组低于对照组(P <0.05),总有效率高于对照组(P <0.05)。结论 扶正透邪理论的代表方芪归银方治疗肺部多重耐药菌感染效果显著。

扶正透邪方体外干预多重耐药铜绿假单胞菌研究

目的探讨扶正透邪方提取物及其组分和含药血清对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑制作用。方法运用二倍稀释法检测扶正透邪方提取物、提取物纯化组分(粗多糖、精多糖、皂苷、酚酸+香豆素、黄酮+蒽醌)及给予大鼠1/2等效剂量、等效剂量、2倍等效剂量、8倍等效剂量提取物灌胃后所得含药血清的体外抑菌情况。结果扶正透邪方提取物、提取物纯化组分中的皂苷具有较好的体外杀菌作用,其余组分在此次实验所用浓度下没有抑菌作用;给予大鼠2倍等效剂量和8倍等效剂量扶正透邪方提取物灌胃后所得的含药血清具有较好的体外抑菌作用。结论扶正透邪方提取物及其部分组分和含药血清具有体外抑菌作用,并能影响多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性,为其干预多重耐药铜绿假单胞菌的进一步研究提供了实验依据。

扶正透邪方联合抗生素体外干预多重耐药铜绿假单胞菌研究

目的探讨扶正透邪方含药血清联合抗生素对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抑制作用。方法运用二倍稀释法检测单用抗生素、空白血清、含药血清及血清联合抗生素的体外抑菌情况。结果空白血清对多重耐药铜绿假单胞菌无体外抑菌作用,含药血清则具有明显的体外抑菌作用;抗生素联合含药血清较单纯抗生素和抗生素联合空白血清的抑菌情况有明显差异。结论扶正透邪方含药血清能够降低抗生素的最低抑菌浓度值、最低杀菌浓度值,含药血清与抗生素具有体外协同抑菌作用。

扶正透邪方对耐药铜绿假单胞菌肺炎大鼠晚期炎症反应的影响

目的探索扶正透邪方对耐药铜绿假单胞菌肺炎大鼠晚期炎症反应的影响。方法12只大鼠随机分为空白组、模型组和扶正透邪组,造模成功后,空白组和模型组蒸馏水灌胃,扶正透邪组扶正透邪方灌胃。7天后采集各组外周血和肺组织,苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)检测大鼠肺组织病理情况,酶联免疫吸附剂测定(enzyme linkedimmunosorbent assay,ELISA)检测外周血中高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)和白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)含量,逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerasechain reaction,RT-PCR)检测肺组织中HMGB1和核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)基因表达,蛋白免疫印迹法(western blot,WB)和免疫组化检测肺组织中HMGB1和NF-κB蛋白表达。结果HE病理表现上,模型组气管壁充血水肿,大量炎症细胞浸润,上皮细胞排列紊乱、脱落;扶正透邪组管壁较模型组光滑,气管壁肿胀、管腔狭窄和炎症细胞浸润数量较模型组明显减轻。ELISA结果显示,模型组外周血中HMGB1和IL-6的含量均明显高于空白组(P<0.05),扶正透邪组外周血中HMGB1和IL-6的含量均明显低于模型组(P<0.05)。模型组肺组织中HMGB1、NF-κB mRNA和蛋白表达量均明显高于空白组(P<0.05),扶正透邪组HMGB1、NF-κB mRNA和蛋白表达量均明显低于模型组(P<0.05)。结论扶正透邪方可减少HMGB1的释放来抑制NF-κB的核转位,进而抑制IL-6的释放,可能通过HMGB1/NF-κB/IL-6通路起到控制晚期炎症反应水平,保护肺组织的作用。

阮诗玮基于伏邪理论运用透邪法治疗慢性肾脏病经验

阮诗玮教授认为慢性肾脏病反复发作、迁延难愈与伏邪关系密切,总体病机为“正气虚损,邪气深伏”,正气虚损为伏邪蛰藏之夙根,具体可分三类:正虚精亏,伏邪羁藏;外伤淫邪,伺机而发;内生伏邪,蜇机而动。故治疗上以透邪为法,扶正透邪为基本原则,扶正贯穿始终。重视三焦分治:上焦用药以轻宣为法,祛邪务尽;中焦用药以芳香透达、苦燥健运、淡渗利泄为法;下焦用药以固涩收敛、厚味填精、虫蚁捜剔为主。此外,强调病后调护对透达邪气的重要作用。

扶正透邪方对耐药铜绿假单胞菌肺部感染大鼠免疫稳态的影响及机制

目的:探讨扶正透邪方及其不同功效在不同时点对耐药铜绿假单胞菌肺部感染大鼠免疫稳态的影响及其机制。方法:将168只大鼠随机分为空白组(n=8),模型组(n=40),单纯透邪组(n=40),早期扶正组(n=40)和延迟扶正组(n=40),空白组予蒸馏水灌胃;模型组在感染后予蒸馏水灌胃;单纯透邪组在感染后予清热透邪药物免煎颗粒(3.5 g·kg^(-1))灌胃;早期扶正组在感染后予扶正透邪全方免煎颗粒(10.75 g·kg^(-1))灌胃;延迟扶正组在清热透邪药物免煎颗粒灌胃的基础上于感染后第3天加扶正药物免煎颗粒[(3.5+10.75)g·kg^(-1)]灌胃;3个治疗组灌胃每日2次,每次2 mL。除空白组外将每个组根据3 h,1 d,3 d,5 d,7 d时间点分为5个小组(n=8)。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α),高迁移率族蛋白B1(HMGB1),白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样分子-2(TIPE2)的水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HMGB1蛋白表达水平。结果:3 h时,与空白组和模型组比较,单纯透邪组、早期扶正组、延迟扶正组TNF-α含量均明显升高(P<0.05)。3 d时,与模型组比较,早期扶正组和延迟扶正组TNF-α含量明显降低(P<0.05);与透邪组比较,早期扶正组和延迟扶正组TNF-α含量均明显降低(P<0.05)。1 d时,与模型组比较,单纯透邪组、延迟扶正组HMGB1含量均明显升高(P<0.05)。5 d时,与模型组比较,延迟扶正组HMGB1含量明显降低(P<0.05)。7 d时,与空白组比较,模型组HMGB1蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,早期扶正组HMGB1蛋白表达明显降低(P<0.05)。3 d时,与模型组比较,早期扶正组、延迟扶正组IL-10含量均明显升高(P<0.05)。5 d时,与单纯透邪组比较,早期扶正组IL-10含量明显升高(P<0.05);7 d时,与单纯透邪组比较,早期扶正组、延迟扶正组IL-10含量均明显降低(P<0.05)。5 d时,与模型组比较,早期扶正组TIPE2含量明显降低(P<0.05)。7 d时,与模型组比较,单纯透邪组、延迟扶正组TIPE2含量均明显降低(P<0.05)。结论:扶正透邪全方或加用扶正药物在早期可促进炎症反应消除病原菌,晚期抑制炎症反应,避免炎症级联效应和肺组织损伤,说明扶正药物在感染后对维持机体免疫稳态具有重要作用。

扶正透邪方联合拉米夫定治疗耐药性慢性乙型病毒性肝炎临床研究

目的:观察扶正透邪方联合耐拉米夫定治疗耐药性慢性乙型病毒性肝炎的临床疗效和对HBV-YMDD变异的影响。方法:将30例耐拉米夫定的慢性乙型病毒性肝炎患者随机分为治疗组和对照组,每组15例。治疗组给予拉米夫定联合扶正透邪方(黄芪30 g,三七5 g,苦参5 g,叶下珠15 g,三叶香茶菜15 g)治疗,对照组给予拉米夫定联合阿德福韦酯治疗,两组患者疗程均为24周。治疗后观察两组患者的临床疗效、中医证候积分、肝功复常率、HBV-DNA复常率、HBeAg血清学应答及HBV-YMDD位点的恢复情况。结果:30例患者均完成24周的临床研究。治疗组有效率为86.7%,对照组有效率为60.0%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。疗程结束后治疗组在中医证候积分、生物化学应答、病毒学应答、HBe Ag血清学应答方面均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗结束后对照组未发现变异位点恢复,治疗组发现1例变异位点恢复,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:扶正透邪方可提高耐拉米夫定后慢性乙型病毒性肝炎患者的临床疗效,并有可能促进HBV-YMDD变异位点的恢复。

芪归银方对多重耐药铜绿假单胞菌感染大鼠血清IL-1β水平的影响

目的:探讨芪归银方对多重耐药铜绿假单胞菌感染大鼠血清IL-1β水平的影响。方法:将SD大鼠随机分为空白组、模型组、西药对照组、芪归银方组、中西医结合组5组,运用ELISA检测采用不同干预方法的各组大鼠血清IL-1β水平,比较各组之间的差异。结果:模型组大鼠血清IL-1β水平在各时间点均较空白组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);西药对照组、芪归银方组、中西医结合组大鼠血清IL-1β水平在3 h、8 h、24 h较空白组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);西药对照组、芪归银方组、中西医结合组大鼠血清IL-1β水平在72 h、5 d较空白组无统计学意义(P>0.05);西药对照组大鼠血清IL-1β水平在72 h、5 d较模型组降低,差异有统计学意义(P<0.01);扶正透邪方组大鼠血清IL-1β水平在24 h较模型组升高,差异有统计学意义(P<0.05),在5 d较模型组降低,差异有统计学意义(P<0.01);中西医结合组大鼠血清IL-1β水平在24 h较模型组升高,在72 h、5 d较模型组降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:与抗生素相比,芪归银方能够在炎性反应早期增强促炎递质的释放,二者联用则作用更明显,有利于积极清除细菌及毒素,并随着时间的推移,使促炎递质的释放迅速下降,维持正常炎性反应水平以免太长的过激炎性反应不利于损伤的修复,充分体现了"阴平阳秘""以平为期"的中医理论。

基于多肽阵列技术探讨芪归银方对多重耐药铜绿假单胞菌感染大鼠的干预作用

目的利用多肽阵列技术探讨芪归银方对多重耐药铜绿假单胞菌感染大鼠抗原抗体反应的影响。方法雄性SD大鼠36只,采用随机数字表法分为空白组、模型组、芪归银方组共3组各12只。参考文献建立多重耐药铜绿假单胞菌腹腔感染大鼠模型。采用多肽阵列检测各组大鼠血清对金属酶VIM-1、SPM-1和超广谱内酰胺酶TEM-13种具有代表性的耐药蛋白抗体表达,比较各组之间的差异。结果空白组大鼠血清对耐药蛋白VIM-1的重叠多肽片段产生不同程度的抗体反应,而铜绿假单胞菌感染后,血清抗体反应的明显变化表明,多肽片段指征的耐药蛋白VIM-1的抗原决定簇能够激发大鼠的免疫反应。芪归银方组大鼠中,针对表位7~11和36-40的抗体表达强度大于空白和模型组的抗体表达强度(均P<0.05);模型组中,针对53-54和56-58表位的抗体反应强度降低(均P<0.05),而芪归银方组的抗体反应虽较正常组为低,但高于模型组大鼠(P<0.05);与空白组比较,模型组和芪归银方组大鼠均产生针对23-25表位的较强抗体反应,两者之间比较差别不大(P>0.05);而模型组对80-81表位产生显著的抗体反应,但在空白组和芪归银方组中则无明显反应(均P>0.05)。空白组大鼠血清对耐药蛋白SPM-1的重叠多肽片段产生不同程度的抗体反应,但各组间差别不大(均P>0.05)。感染刺激大鼠产生新的更多地针对13-15和39-40表位的抗体,然而,相较于空白组和芪归银方组产生的针对16-19和82-85抗原的免疫反应,模型组大鼠则产生的抗体反应更弱(P<0.05)。铜绿假单胞菌感染后刺激大鼠免疫系统并且产生更强的针对多肽19-21、26-27、52-55和66-70的反应。3组大鼠血清中抗体针对的阳性表位数目差别不大(均P>0.05);芪归银方组对TEM-1蛋白19-21和52-55表位的抗体反应强于模型组和空白组(均P<0.05)。结论芪归银方能够通过刺激感染后大鼠产生抗耐药蛋白VIM-1、SPM-1和TEM-1的保护性抗体,达到提高多重耐药铜绿假单胞菌感染大鼠免疫应答的目的。

浅析《伤寒论》太阳少阴合、并病及其临床运用

伤寒六经病变,其实质为正气与病邪的不断抗争,从表层的太阳病到里层三阴病,每段条文的描述,代表着不断变化的疾病状态,也反映着不断发展的病因病机,其中太阳病与少阴病二者联系紧密,二者合病、并病的状态在现代临床中十分常见,特别是心肺肾疾病的发生,而在此基础上的临床应用也屡见不鲜,然其实质,是在表里相传路径上邪气的深入,正气的衰退,同时也反映了扶正透邪治则的内涵,对于指导临床疑难杂症的诊疗具有重要的意义。

从伏邪学说论治回纹型风湿病

回纹型风湿病在临床上属于疑难病,现代医学认为本病发病与遗传、感染、环境等因素有关,本病发病因素属于伏邪范畴,其反复发作、缠绵难愈的发病特点与伏邪致病特点相似,文章从伏邪学说的角度探讨回纹型风湿病与遗传、感染、环境之间的关系,以期指导临床治疗。认为本病是在内有伏邪的基础上,机体阴阳失调,正邪失衡,新邪引动伏邪发病。治疗上主张急性期以"祛邪"为要,缓解期以"扶正透邪"为主。

从伏邪理论看耐药菌感染

中医伏邪理论的应用为治疗耐药菌感染的问题拓宽了思路。从感邪途径、发病特点、病机及其治疗等方面进行了探讨,提出在耐药菌治疗上应用抗生素联合中药扶正、透邪是非常有必要的,其中扶正重点强调温阳。

溃疡性结肠炎缓解期复发的病因病机及治疗研究述评

目的:探讨溃疡性结肠炎缓解期复发的病因病机及治疗研究进展。方法:总结、归纳和分析近年来的相关文献,从中医学角度探讨溃疡性结肠炎缓解期复发的病因病机、治疗原则及治疗进展。结果:外邪侵袭、饮食起居失宜、情志失调、诊治失当,病后体虚。溃疡性结肠炎缓解期多以补脾益肾、温通下利、消积导滞、解毒通络、滋阴、扶正透邪等为治则。中医学对于本病缓解期复发的病因病机较为明确,依据整体观念,重视人体阴阳平衡,调节机体五脏六腑、气血津液关系,辨证论治。结论:中医药治疗溃疡性结肠炎缓解期复发疗效显著,复发率低。