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抗冻蛋白对冷冻猪肉品质的影响
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作者 廖洪梅 王尚龙 +3 位作者 张宝雪 丁寅寅 刘明广 熊国远 《食品科学》 EI CAS 北大核心 2025年第1期158-165,共8页
研究抗冻蛋白(antifreeze proteins,AFP)对猪肉冷冻过程中品质变化的影响。以商业抗冻剂海藻糖(4 mg/m L)的抗冻效果为参考,以未添加AFP组为对照组,研究不同添加量(0.05、0.1、0.2、0.3 mg/mL)AFP对冷冻猪肉品质、肌原纤维蛋白理化性质... 研究抗冻蛋白(antifreeze proteins,AFP)对猪肉冷冻过程中品质变化的影响。以商业抗冻剂海藻糖(4 mg/m L)的抗冻效果为参考,以未添加AFP组为对照组,研究不同添加量(0.05、0.1、0.2、0.3 mg/mL)AFP对冷冻猪肉品质、肌原纤维蛋白理化性质、微观结构和水分分布的影响。结果表明:AFP可以减少冷冻猪肉的水分损失,有利于维持猪肉色泽和微观结构;在冷冻贮藏过程中,0.3 mg/mL AFP组猪肉的蒸煮损失、解冻损失及色泽的保护效果最好,其次是0.2 mg/mL AFP组和4 mg/mL海藻糖组;0.2、0.3 mg/mL AFP组剪切力和肌原纤维蛋白总巯基含量显著高于未添加AFP组(P<0.05);核磁共振成像验证了AFP的渗入降低了猪肉中结合水和不易流动水损失;扫描电子显微镜结果显示,0.2 mg/mL AFP使猪肉肌纤维排列整齐,更加紧凑和致密。总体而言,添加AFP对改善冷冻猪肉品质有积极作用,是一种潜在的安全、高效冷冻保护方法。 展开更多
关键词 抗冻蛋白 冷冻猪肉 水分分布 肌原纤维蛋白 微观结构
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低温对菲律宾蛤仔热休克蛋白和抗冻蛋白基因表达的影响
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作者 张月 李宁 +3 位作者 黎强 聂鸿涛 霍忠明 闫喜武 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期33-41,共9页
为研究菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)“斑马蛤2号”在低温胁迫下热休克蛋白和抗冻蛋白基因表达的变化,将菲律宾蛤仔“斑马蛤2号”和南北方野生群体蛤仔急性低温(−1℃)胁迫9 d,存活率大小为斑马蛤2号(78.08%±2.14%)>大连... 为研究菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)“斑马蛤2号”在低温胁迫下热休克蛋白和抗冻蛋白基因表达的变化,将菲律宾蛤仔“斑马蛤2号”和南北方野生群体蛤仔急性低温(−1℃)胁迫9 d,存活率大小为斑马蛤2号(78.08%±2.14%)>大连群体(70.37%±3.70%)>北海群体(48.15%±7.71%)。低温胁迫下,挑选5个蛤仔抗低温相关的基因,热休克蛋白70基因(HSP70),HSC70,CSDE1,Y-box,抗冻蛋白Ⅱ型基因(AFPⅡ),研究这些基因在3个群体菲律宾蛤仔(斑马蛤2号、大连群体和北海群体)急性低温胁迫(−1℃)下鳃组织的表达变化。结果显示,5个基因在菲律宾蛤仔鳃组织中的时序表达与温度显著相关,其中HSP70、HSC70在3个群体中显著高表达。冷休克蛋白家族的基因CSDE1、Y-box基因只在低温处理的广西群体鳃组织中显著高表达。3个群体AFPⅡ基因相对表达量在12 h显著升高,达到峰值,相对表达量斑马蛤2号>大连群体>北海群体。不同群体蛤仔在低温胁迫时抗低温相关基因表达模式不同,斑马蛤2号的HSP70、HSC70和AFPⅡ表达量及存活率高于2个野生群体。 展开更多
关键词 菲律宾蛤仔 群体 低温 存活率 热休克蛋白 抗冻蛋白
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鱼类低温适应性机制与抗冻蛋白的研究进展
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作者 王彤 陈生熬 +4 位作者 刘一萌 隋智海 张海光 全先庆 刘云国 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2024年第4期509-519,共11页
温度对调节鱼类的生物功能至关重要,长期生活在极端寒冷环境中的鱼类通过发生适应性进化而存活下来,抗冻蛋白的产生是其中最重要的适应性特征之一。为全面了解鱼类的低温适应性机制研究进展,首先从内分泌系统、代谢系统和免疫系统3个方... 温度对调节鱼类的生物功能至关重要,长期生活在极端寒冷环境中的鱼类通过发生适应性进化而存活下来,抗冻蛋白的产生是其中最重要的适应性特征之一。为全面了解鱼类的低温适应性机制研究进展,首先从内分泌系统、代谢系统和免疫系统3个方面阐述了低温水环境对鱼类的基因表达和激素分泌的影响,以及对机体代谢过程的整体影响;其次,从鱼类的生理适应和进化适应两部分综述了鱼类的低温适应性机制;最后,详细阐述了抗冻蛋白的研究起源与结构特性、克隆与功能鉴定等方面的研究进展。相关研究现状表明,利用组学方法可以研究低温胁迫下鱼类的代谢途径和分子信号通路,在生物整体水平上分析低温适应机制;利用该方法,已经挖掘了多种低温耐受功能基因。由于不同鱼类及其温度适应性存在差异,未来还需要开展更多基础性研究工作。 展开更多
关键词 低温适应性 抗冻蛋白 克隆 功能鉴定 鱼类
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黄粉虫抗冻蛋白吸附天然气水合物过程中的行为研究
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作者 黄慧怡 张楠 刘俊杰 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第1期46-53,共8页
采用分子动力学模拟的方法,计算并分析了黄粉虫抗冻蛋白吸附甲烷水合物过程中局部结构的变化。研究表明,水合物结合位点上4号苏氨酸Thr4在靠近甲烷水合物表面时,其位置会发生变化以适应水合物的笼状结构,通过取代甲烷分子与水合物表面结... 采用分子动力学模拟的方法,计算并分析了黄粉虫抗冻蛋白吸附甲烷水合物过程中局部结构的变化。研究表明,水合物结合位点上4号苏氨酸Thr4在靠近甲烷水合物表面时,其位置会发生变化以适应水合物的笼状结构,通过取代甲烷分子与水合物表面结合,并促使其他苏氨酸靠近水合物,最终黄粉虫抗冻蛋白吸附在水合物上,抑制了冰固体生长。本研究结果对研发可降解的天然产物类水合物抑制剂具有参考意义。 展开更多
关键词 抗冻蛋白 甲烷水合物 分子动力学模拟 水合物结合位点
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抗冻蛋白与植物低温胁迫反应 被引量:9
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作者 王瑞云 李润植 +2 位作者 孙振元 任有蛇 岳文斌 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期551-556,共6页
植物抗冻蛋白是从许多抗冻植物中分离的、参与植物抵御冻害反应的一类新型蛋白.这类抗冻蛋白具有多个亲水性缚冰域,能直接作用于冰晶,阻止冰晶在细胞间隙形成和再结晶.一些植物抗冻蛋白与致病相关蛋白有序列同源性,具有抗冻和抗病双重活... 植物抗冻蛋白是从许多抗冻植物中分离的、参与植物抵御冻害反应的一类新型蛋白.这类抗冻蛋白具有多个亲水性缚冰域,能直接作用于冰晶,阻止冰晶在细胞间隙形成和再结晶.一些植物抗冻蛋白与致病相关蛋白有序列同源性,具有抗冻和抗病双重活性.植物抗冻蛋白的表达和积累,既受控于发育及转录因子调节,又受到低温、短日照、脱水及乙烯等因素的影响.异源超表达抗冻蛋白基因能赋予敏感宿主植物抗冻能力.文中论述了有关植物抗冻蛋白特性和鉴定,抗冻机制和表达调控,以及遗传转化等方面的研究进展. 展开更多
关键词 植物抗冻蛋白 抗冻蛋白的双重功能 抗冻性调控 遗传转化
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昆虫抗冻蛋白DAFP的原核表达、纯化和抗血清制备 被引量:5
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作者 王芸 吕国栋 +2 位作者 薛娜 张富春 马纪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期727-730,共4页
目的:制备昆虫抗冻蛋白DAFP特异性的鼠抗血清。方法:根据GenBank已发表的Dendroides canadensis抗冻蛋白基因序列(gi:2737939),人工合成加拿大拟步甲虫(Dendroides canadensis)的抗冻蛋白基因(dafp),并克隆到原核表达载体pGEX-4T-1和pMA... 目的:制备昆虫抗冻蛋白DAFP特异性的鼠抗血清。方法:根据GenBank已发表的Dendroides canadensis抗冻蛋白基因序列(gi:2737939),人工合成加拿大拟步甲虫(Dendroides canadensis)的抗冻蛋白基因(dafp),并克隆到原核表达载体pGEX-4T-1和pMAL-p2x中,在大肠杆菌中进行表达。表达的融合蛋白经Glutathione Sepharose4B纯化后,免疫小鼠制备抗DAFP的抗血清,抗体的效价及特异性分别采用ELISA和Western blot进行检测。结果:SDS-PAGE检测表明,人工合成的dafp基因在大肠杆菌中可表达相对分子质量(Mr)为38000的可溶性融合蛋白。以该融合蛋白免疫小鼠所制备的抗体,其ELISA滴度为1∶5000,Western blot证实BL21/pGEX-4T-1-dafp菌和TB1/pMAL-p2x-dafp菌的表达产物可特异性地与该抗体结合。结论:在大肠杆菌中成功地表达了DAFP的融合蛋白并制备出抗融合蛋白的鼠抗血清,为进一步研究DAFP的特性奠定了基础。 展开更多
关键词 昆虫 抗冻蛋白 原核表达 抗血清 蛋白印迹 抗冻蛋白基因 抗血清制备 原核表达载体 纯化 Western
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新疆准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因的克隆和抗冻活性分析 被引量:32
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作者 赵干 马纪 +3 位作者 薛娜 杨长庚 专芳芳 张富春 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期667-673,共7页
根据GenBank中已发表的昆虫抗冻蛋白基因的保守序列设计引物,利用RT-PCR技术结合3’-RACE扩增的方法,从新疆荒漠昆虫准噶尔小胸鳖甲Microderapunctipenisdzunarica中获得了长约294bp不含信号肽的抗冻蛋白cDNA片段,命名为MpAFP5,其全长... 根据GenBank中已发表的昆虫抗冻蛋白基因的保守序列设计引物,利用RT-PCR技术结合3’-RACE扩增的方法,从新疆荒漠昆虫准噶尔小胸鳖甲Microderapunctipenisdzunarica中获得了长约294bp不含信号肽的抗冻蛋白cDNA片段,命名为MpAFP5,其全长序列为363bp(GenBank注册号为AY821792)。基因测序结果表明,MpAFP5cDNA片段与加拿大拟步甲DendroidescanadensisAFP8基因片段、黄粉甲TenebriomolitorTHP4-9基因片段的核苷酸同源性分别达68.4%和71.8%,氨基酸序列同源性分别达70%和81%。将MpAFP5构建到原核表达载体pGEX4T-1中,重组质粒pGEX4T-1-MpAFP5在大肠杆菌BL21(DE3)中能够表达融合抗冻蛋白,SDS-PAGE分析显示融合蛋白的分子量约为37kD,Western印迹分析证明MpAFP5在大肠杆菌中正确表达。细菌的抗冻实验结果显示准噶尔小胸鳖甲融合抗冻蛋白对细菌具有显著的抗冻保护作用,保护效果与抗冻蛋白剂量呈正相关性。 展开更多
关键词 准噶尔小胸鳖甲 抗冻蛋白 RT-PCR 融合蛋白 抗冻活性
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昆虫抗冻蛋白基因转化烟草的抗寒性 被引量:27
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作者 王艳 邱立明 +4 位作者 谢文娟 黄薇 叶锋 张富春 马纪 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期397-402,共6页
将准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因MPAFP149亚克隆至pCAMBIA1302中,构建成单价植物表达载体pCAMBIA1302-MPAFP149,转化至农杆菌EHA105中,利用叶圆盘法转化烟草。通过PCR、PCR-Southern及RT-PCR检测表明,抗冻蛋白基因已整合至烟草基因组中,... 将准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因MPAFP149亚克隆至pCAMBIA1302中,构建成单价植物表达载体pCAMBIA1302-MPAFP149,转化至农杆菌EHA105中,利用叶圆盘法转化烟草。通过PCR、PCR-Southern及RT-PCR检测表明,抗冻蛋白基因已整合至烟草基因组中,并发生了转录。对T0代转基因烟草以-1℃处理48h,转基因烟草的相对电导率和表型明显优于野生型烟草。室温恢复试验验证,转基因烟草可存活并恢复生长,而野生型烟草受到了不可逆的低温冻害。研究证明,转化后携带昆虫抗冻蛋白基因的烟草比野生型烟草具有明显的抗寒能力,该结果为减轻冷敏感经济作物在春季遭受霜害提供了理论依据和应用基础。 展开更多
关键词 昆虫抗冻蛋白 植物表达载体 烟草 抗寒性
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胡萝卜抗冻蛋白在大肠杆菌中的高效表达 被引量:15
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作者 张党权 刘兵 +2 位作者 范云 何炎明 王金发 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期51-55,共5页
以pET - 11a为载体构建了胡萝卜抗冻蛋白非融合表达的重组质粒 ,并在大肠杆菌菌株BL2 1(DE3,pLysS)中成功地进行了高效表达。表达的蛋白质以包涵体的形式存在 ,相对分子质量为 36 80 0。经正交试验得到了优化的诱导表达条件。包涵体经... 以pET - 11a为载体构建了胡萝卜抗冻蛋白非融合表达的重组质粒 ,并在大肠杆菌菌株BL2 1(DE3,pLysS)中成功地进行了高效表达。表达的蛋白质以包涵体的形式存在 ,相对分子质量为 36 80 0。经正交试验得到了优化的诱导表达条件。包涵体经各种缓冲液洗涤纯化、溶解、复性和超滤浓缩后 ,经SDS -PAGE电泳检测 ,纯度达单一带水平。生物学活性研究表明 ,重组表达的胡萝卜抗冻蛋白具有很强的热滞活性和提高细菌耐寒性的作用。 展开更多
关键词 胡萝卜Daucus carota var.sativa 抗冻蛋白 表达 包涵体 诱导 复性
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天山寒区冰缘植物珠芽蓼叶片抗冻蛋白的发现 被引量:23
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作者 祭美菊 安黎哲 +4 位作者 陈拓 刘艳红 冯虎元 刘光琇 程国栋 《冰川冻土》 CSCD 北大核心 2001年第4期342-345,T001,共5页
以生长在天山海拔 34 5 0m处的珠芽蓼 (Polygonumviviparum)为实验材料 ,从叶片中提取质外体蛋白 .经SDS PAGE分析 ,发现在分子量为 15 .2~ 72 .3kD范围内出现七条多肽 ,PAS染色显示这些多肽中均含有糖基 .通过光镜组织切片显示 ,在珠... 以生长在天山海拔 34 5 0m处的珠芽蓼 (Polygonumviviparum)为实验材料 ,从叶片中提取质外体蛋白 .经SDS PAGE分析 ,发现在分子量为 15 .2~ 72 .3kD范围内出现七条多肽 ,PAS染色显示这些多肽中均含有糖基 .通过光镜组织切片显示 ,在珠芽蓼叶片细胞的质外体中存在丰富的蛋白质 ,PAS染色确定其含有糖蛋白 .通过测定其热滞值 ,进一步确定质外体蛋白是具有抗冻活性的糖蛋白 。 展开更多
关键词 天山 冰缘植物 珠芽蓼 抗冻蛋白 热滞值 抗冻机制
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植物抗冻蛋白研究进展 被引量:58
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作者 卢存福 王红 +1 位作者 简令成 匡廷云 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第3期210-216,共7页
抗冻蛋白(AFPs)最初是从极区海鱼中发现的一种适应低温的特异蛋白质,它能阻止体液内冰核的形成与生长,维持体液的非冰冻状态.对近年来植物AFPs的发现过程,AFP的生化特性,抗冻作用机制,抗冻蛋白基因工程及其应用前景... 抗冻蛋白(AFPs)最初是从极区海鱼中发现的一种适应低温的特异蛋白质,它能阻止体液内冰核的形成与生长,维持体液的非冰冻状态.对近年来植物AFPs的发现过程,AFP的生化特性,抗冻作用机制,抗冻蛋白基因工程及其应用前景等作了系统的综述. 展开更多
关键词 植物 抗冻蛋白 分子生物学
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抗冻蛋白及其在植物抗冻基因工程中的应用 被引量:39
12
作者 尹明安 崔鸿文 +1 位作者 樊代明 郭立 《西北植物学报》 CAS CSCD 2001年第1期8-13,共6页
从应用的角度系统综述了抗冻蛋白 ( AFPs)的特性、活性、用途、生化特征、在细菌中的表达、在植物抗冻生理中的作用及其基因工程 ,简洁地讨论了抗冻蛋白的研究现状和最新进展。
关键词 抗冻蛋白 植物 分子生物学 抗冻基因工程
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抗冻蛋白及其在植物抗冻生理中的作用 被引量:50
13
作者 江勇 贾士荣 +1 位作者 费云标 谭克辉 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第7期677-685,共9页
抗冻蛋白(antifrezeproteins,AFPs)是一类抑制冰晶生长的蛋白质,能以非依数性形式降低水溶液的冰点,但对熔点影响甚微,从而导致水溶液的熔点和冰点之间出现差值。这种差值称为热滞活性(thermalhy... 抗冻蛋白(antifrezeproteins,AFPs)是一类抑制冰晶生长的蛋白质,能以非依数性形式降低水溶液的冰点,但对熔点影响甚微,从而导致水溶液的熔点和冰点之间出现差值。这种差值称为热滞活性(thermalhysteresisactivity,... 展开更多
关键词 抗冻蛋白 热滞活性 抗冻作用 过冷态 冷诱导
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沙冬青抗冻蛋白热滞活性的DSC研究 被引量:12
14
作者 周晓蕾 陈滔滔 +4 位作者 王保怀 李芝芬 高素琴 费云标 魏令波 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第1期66-69,共4页
Differential scanning calorimetry( DSC) was used to measure the thermal hysteresis activity(THA) of plant antifreeze proteins(AFPs). The results reveal that DSC is a good method to screen and study AFPs. In the sixt... Differential scanning calorimetry( DSC) was used to measure the thermal hysteresis activity(THA) of plant antifreeze proteins(AFPs). The results reveal that DSC is a good method to screen and study AFPs. In the sixteen components extracted from Ammopipanthus mongolicus leaves, one(P3S1) was found to have apparent thermal hysteresis activity by DSC. As the amount of ice nuclei in the sample decreased, the THA of P3S1 increased from 0.01℃ to 0.65℃ . It is notable that the two- peak thermal hysteresis effect was observed. Two endothermic peaks appeared in the melting process of P3S1, while the freezing peak also consisted of two peaks. The peaks appeared antecedently showed larger thermal effect. This phenomenon shows P3S1 has two different kinds of interaction with water and ice crystal. It is probably an important property of a class of AFPs. 展开更多
关键词 抗冻蛋白 热滞活性 沙冬青 热滞机理 抗冻 差示扫描量热法
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转抗冻蛋白基因鲮鱼的初步研究 被引量:22
15
作者 朱新平 夏仕玲 +1 位作者 张跃 刘家照 《中国水产科学》 CAS CSCD 1997年第2期79-80,共2页
转抗冻蛋白基因鲮鱼的初步研究PRELIMINARYSTUDYONTRANSGENICMUDCARPOFANTIFREEZEPROTEINGENE朱新平,夏仕玲,张跃,刘家照(中国水产科学研究院珠江水产研究所,广州51... 转抗冻蛋白基因鲮鱼的初步研究PRELIMINARYSTUDYONTRANSGENICMUDCARPOFANTIFREEZEPROTEINGENE朱新平,夏仕玲,张跃,刘家照(中国水产科学研究院珠江水产研究所,广州510380)ZhuXinpingXi... 展开更多
关键词 基因转移 抗冻蛋白基因 鲮鱼
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抗冻蛋白研究进展 被引量:9
16
作者 李芳 王博 +2 位作者 艾秀莲 王志方 付建红 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2003年第6期349-352,共4页
抗冻蛋白是一种能抑制冰晶生长的蛋白质或糖蛋白质。自二十世纪60年代发现以来,研究对象先后从极区鱼类、昆虫、转移到植物材料上。抗冻蛋白包括抗冻糖蛋白、抗冻蛋白Ⅰ、抗冻蛋白Ⅱ、抗冻蛋白Ⅲ、抗冻蛋白Ⅳ。简要介绍了各种抗冻蛋白... 抗冻蛋白是一种能抑制冰晶生长的蛋白质或糖蛋白质。自二十世纪60年代发现以来,研究对象先后从极区鱼类、昆虫、转移到植物材料上。抗冻蛋白包括抗冻糖蛋白、抗冻蛋白Ⅰ、抗冻蛋白Ⅱ、抗冻蛋白Ⅲ、抗冻蛋白Ⅳ。简要介绍了各种抗冻蛋白的生化特征、抗冻机制及其应用研究,并对抗冻蛋白的基因工程作了系统综述。 展开更多
关键词 抗冻蛋白 研究进展 冰晶 生化特征 抗冻机制 基因工程
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胡萝卜抗冻蛋白基因的克隆及其在E.coli中的表达 被引量:9
17
作者 范云 刘兵 +2 位作者 王宏斌 王树启 王金发 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期52-55,共4页
对中国的一个胡萝卜品种进行了冷诱导前后幼苗总蛋白组成的比较、分析 ,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果表明两者在相对分子质量 36 0 0 0附近有一条蛋白带的差别。由此推测实验的胡萝卜品种在冷诱导过程中有抗冻蛋白 (AFP)表达。根据相关... 对中国的一个胡萝卜品种进行了冷诱导前后幼苗总蛋白组成的比较、分析 ,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果表明两者在相对分子质量 36 0 0 0附近有一条蛋白带的差别。由此推测实验的胡萝卜品种在冷诱导过程中有抗冻蛋白 (AFP)表达。根据相关的研究结果设计引物 ,以胡萝卜幼苗基因组DNA为模板 ,通过PCR扩增得到了长 10 99bp的抗冻蛋白基因。测序结果表明其与GenBank公布的afp序列仅有 3个碱基的差别。将此抗冻蛋白基因克隆进大肠杆菌表达载体pGEX4T1,在IPTG的诱导下表达出了含有AFP的约 6 0 0 0 0的融合蛋白 。 展开更多
关键词 胡萝卜 冷诱导 抗冻蛋白基因 AFP基因 基因克隆 基因表达 大肠杆菌 植物抗寒性
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赤翅甲抗冻蛋白基因的原核表达及蛋白生物活性检测 被引量:16
18
作者 刘忠渊 张富春 +1 位作者 王芸 吕国栋 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期179-183,共5页
根据GenBank中序列人工合成赤翅甲 Dendroides canadensis 的抗冻蛋白基因 (afp), 将其克隆到载体 pGEX_4T_1上, 构建融合表达的重组质粒, 转化大肠杆菌 BL21并进行原核表达。通过优化表达的诱导条件和SDS_PAGE检测, 证明人工合成的赤... 根据GenBank中序列人工合成赤翅甲 Dendroides canadensis 的抗冻蛋白基因 (afp), 将其克隆到载体 pGEX_4T_1上, 构建融合表达的重组质粒, 转化大肠杆菌 BL21并进行原核表达。通过优化表达的诱导条件和SDS_PAGE检测, 证明人工合成的赤翅甲抗冻蛋白基因能够特异性地表达, 并以可溶性融合蛋白形式存在, 相对分子质量约为40 kD。抗冻蛋白的生物活性检测表明, 赤翅甲的抗冻融合蛋白能够提高细菌的耐寒能力。 展开更多
关键词 赤翅甲 抗冻蛋白 原核表达 抗冻活性
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Tenebrio molitor抗冻蛋白基因家族cDNA片段的克隆、序列分析及原核表达 被引量:9
19
作者 刘忠渊 王芸 +3 位作者 吕国栋 王贤磊 张富春 马纪 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1532-1540,共9页
利用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法,克隆黄粉甲虫(Tenebriomolitor)抗冻蛋白基因cDNA片段并进行序列分析和原核表达。同源性分析表明,获得9条新cDNA片段,与黄粉甲虫抗冻蛋白基因家族的其他基因序列具有较高的同源性。重组质粒pGE... 利用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法,克隆黄粉甲虫(Tenebriomolitor)抗冻蛋白基因cDNA片段并进行序列分析和原核表达。同源性分析表明,获得9条新cDNA片段,与黄粉甲虫抗冻蛋白基因家族的其他基因序列具有较高的同源性。重组质粒pGEX-4T-1-tmafp-XJ430,转化E.coliBL21进行原核表达,SDS-PAGE分析结果表明,抗冻蛋白基因以可溶性融合蛋白表达,相对分子量为38kDa。构建真核表达载体pCDNA3-tmafp-XJ430,免疫小鼠,获得的抗血清滴度为1:2000。Westernblotting结果为单一的条带,证明该抗血清具有针对抗冻蛋白TmAFP-XJ430抗原的专一性。 展开更多
关键词 黄粉甲虫 抗冻蛋白 CDNA片段 序列分析 原核表达
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低温诱导唐古特红景天细胞分泌抗冻蛋白 被引量:32
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作者 卢存福 简令成 匡廷云 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第5期555-559,共5页
选择青海高原海拔 40 0 0m高山上生长的唐古特红景天为实验材料 ,以叶片为外植体 ,在MS +BA2 +NAA0 2 固体培养基上诱导出黄绿色、松脆愈伤组织 .愈伤组织细胞在同样成分的液体培养基中培养获得成功 .在悬浮培养液中可检测到分泌蛋白... 选择青海高原海拔 40 0 0m高山上生长的唐古特红景天为实验材料 ,以叶片为外植体 ,在MS +BA2 +NAA0 2 固体培养基上诱导出黄绿色、松脆愈伤组织 .愈伤组织细胞在同样成分的液体培养基中培养获得成功 .在悬浮培养液中可检测到分泌蛋白的存在 .经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明 ,低温锻炼或脱落酸 (ABA)诱导后 ,细胞分泌蛋白的多肽谱带数增加 .与此相对应的是 ,细胞的抗冻能力也明显提高 .PAS染色揭示多肽中均含有糖基 .通过测定热滞值 。 展开更多
关键词 高山植物 唐古特红景天 悬浮培养细胞 抗冻蛋白
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