橄榄仁抗氧化肽的分离鉴定及分子对接

该研究利用酶解法结合凝胶色谱柱从橄榄仁中分离纯化得到6个抗氧化肽,采用分子对接模拟6种抗氧化肽与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的结合机制。采用酶解法从橄榄仁中提取抗氧化活性肽,以水解度、DPPH自由基清除率为指标,从6种商用酶中筛选出最适蛋白酶为木瓜蛋白酶,以底物浓度、酶底比、酶解时间、温度进行单因素试验,选取影响酶解反应的3个因素(酶底比>温度>时间)进行响应面法优化得出最佳工艺条件为底物质量浓度50 g/L、酶底比为3.3%(质量分数)、温度20℃、时间88 min。对最优条件下的粗肽液进行SephadexG-25和SephadexG-15分离纯化得到6个具有良好活性的抗氧化肽,分别为WLSF、TSVLR、LVYLVR、AGGKPFQ、YYPFKGFA、AFNVDERLAR。TSVLR显示出最高的DPPH自由基清除活性81.07%和羟自由基清除能力42.48%。分子对接研究表明,纯化的肽通过疏水效应和氢键与抗氧化相关的关键蛋白SOD有效结合。结果表明,橄榄仁可作为天然食物来源制取功能性食品的一个新的探究方向。

英国红芸豆抗氧化肽对氧化应激斑马鱼的保护作用研究

为探究英国红芸豆抗氧化肽组分(BRKBPAPC)的体内抗氧化作用,利用2,2′-偶氮二异丁基脒二盐酸盐诱导建立氧化应激斑马鱼模型,研究BRKBPAPC对氧化应激斑马鱼的影响。结果表明:BRKBPAPC能显著提高(P<0.05)斑马鱼体内过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力和总抗氧化能力(T-AOC),显著降低(P<0.05)丙二醛(MDA)含量;同时BRKBPAPC还具有调节斑马鱼脂代谢的能力,随着处理浓度的增加斑马鱼脂代谢指标逐渐恢复正常水平;高剂量BRKBPAPC可使斑马鱼行为轨迹增多,高速运动次数、时间、距离显著上升。高剂量抗氧化肽处理21 d时,CAT、SOD、T-AOC、GSH-Px分别增至(28.29±3.29)、(126.59±6.39)、(2.07±0.18)、(84.75±7.77)U/mg prot,MDA含量降至(3.35±0.29)nmol/mg prot。由此可见,BRKBPAPC具有较好的体内抗氧化作用及脂代谢调节能力。

AB-8大孔树脂-C18柱联用分离干腌牛肉抗氧化肽的研究

该文利用盐酸提取法提取了干腌牛肉多肽,借助AB-8型大孔树脂及C18球形硅胶柱的分离纯化出4种抗氧化肽,利用分子对接模拟了4种抗氧化肽与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的结合位点。利用盐酸提取法提取了抗氧化肽并测试其在1、2、3、4、5 mg/mL的抗氧化能力,发现在5 mg/mL时,DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和超氧阴离子自由基(·O_(2)^(-))清除率分别为86.24%、35.62%和54.34%。对比了AB-8、D101、S-8、X-S、HPD-500、NKA-9的吸附率与解吸率,AB-8的吸附率与解吸率最好,分别为92.55%和82.88%。研究优化了AB-8的上样流速、上样量、乙醇洗脱浓度和洗脱流速,在4 BV/h上样流速、39 mL上样量、75%(体积分数)乙醇溶液洗脱剂和1 mL/min洗脱流速时,可以分离出3个组分(A、B和C),测试3个组分的抗氧化能力,B组分的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基和·O_(2)^(-)清除能力最高,分别为73.33%、21.01%和63.33%。对B组分进行C18柱分离,分离出4个抗氧化肽:FDGDF、TGPGPW、FLSDH和KPFDAK。与SOD(PDB ID;1E9O)进行分子对接,发现FDGDF、TGPGPW、FLSDH和KPFDAK均可以与SOD形成氢键,结合能分别为-6.7、-6.55、-6.6、-7.35 kcal/mol,1 mg/mL的FDGDF可以有效增加SOD活力11.64%,酶活力单位增加697 U/mL,研究结果为干腌牛肉制品的开发提供理论基础。

英国红芸豆抗氧化肽营养价值评价及体外模拟消化分析

为了提高英国红芸豆的经济效益,开发高附加值的功能性产品,以英国红芸豆蛋白抗氧化肽组分(BRKBPAPC)为研究对象,对其营养价值和粒径分布进行分析,并采用体外模拟消化法评价BRKBPAPC消化过程中抗氧化活性的变化。结果表明:BRKBPAPC含有8种必需氨基酸,与抗氧化活性相关的氨基酸含量较高;BRKBPAPC的氨基酸比值系数分(SRCAA)为66.01,必需氨基酸指数(EAAI)为86.13,生物价(BV)为82.18,必需氨基酸组成符合FAO/WHO标准模式,是一种良好的植物源多肽;BRKBPAPC的粒径分布均匀且只有一个峰,在400~800nm之间。体外模拟消化结果表明,与未超滤肽相比,BRKBPAPC的抗氧化活性和稳定性显著提高(P<0.05);BRKBPAPC消化物对DPPH自由基清除率最高可达81.83%,对羟自由基清除率最高可达82.76%,对ABTS自由基清除率最高可达48.84%。研究为英国红芸豆产品开发提供了理论依据。

青刺果抗氧化肽的分离纯化、结构鉴定及其分子对接解析

采用超滤、强阴离子交换层析法分离并纯化青刺果蛋白酶解物,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为评价指标,筛选具有较好抗氧化活性的肽组分。通过L C-MS/MS鉴定肽序列,结合生物信息学方法分析其理化特性,并进一步利用红外光谱、分子对接技术解析其二级结构特征及与Keap1蛋白的对接位点。研究结果表明,分离得到的4个组分中F-1组分具有更好的抗氧化活性,其DPPH自由基清除率达到27.67%。选择活性更高,且分子质量小于1 kDa的肽组分,测定得到的3条肽(TALDVPPPR、TLSDAGVGGL和DLINGGKDA)的DPPH自由基清除率,其IC 50值分别为0.43、0.83、0.51 mg/mL,其中TALDVPPPR的抗氧化活性相对较高。二级结构分析结果表明,3条抗氧化肽均由α-螺旋、β-折叠和β-转角构成,其中TALDVPPPR的α-螺旋含量相对较低,使其更易与自由基结合。分子对接结果显示,TALDVPPPR、TLSDAGVGGL、DLINGGKDA以氢键和疏水作用与Keap1蛋白紧密结合,释放Nrf2进入细胞核,并激活一系列具有抗氧化和细胞保护作用的蛋白质表达,即激活Keap 1-Nrf2/ARE通路而发挥抗氧化作用。因此,TALDVPPPR、TLSDAGVGGL、DLINGGKDA可作为新型抗氧化剂,研究旨在为青刺果功能性肽的开发利用提供理论参考。

骆驼胎盘抗氧化肽的制备及其稳定性研究

该研究以骆驼胎盘为原料,筛选蛋白酶及其抗氧化肽的最佳制备条件,再通过超滤分离出不同分子质量的骆驼胎盘抗氧化肽,评价其体外抗氧化活性和稳定性,结果表明,以木瓜蛋白酶酶解骆驼胎盘,以水解度为评价指标,通过单因素及响应面优化试验确定制备骆驼胎盘抗氧化肽的最佳条件为:酶解时间3 h、酶解温度57.5℃,酶添加量4770 U/g,酶解pH 6.3,此条件下水解度达到42.21%;骆驼胎盘抗氧化肽在高温、弱酸性和中性环境中活性保持稳定,碱性条件下抗氧化能力降低。经过胃肠蛋白酶消化后,DPPH自由基清除率先上升4.63%后下降,ABTS阳离子自由基清除率显著提升2.21%(P<0.05),该研究可为骆驼胎盘抗氧化肽在生产加工和应用中提供理论依据。

澳洲坚果抗氧化肽的分离纯化及肽段鉴定

为研究澳洲坚果抗氧化肽的抗氧化活性和氨基酸组成,以复配蛋白酶水解澳洲坚果粕制备粗多肽,利用超滤、大孔树脂纯化技术制备了抗氧化活性最佳的分子量小于1000 Da的多肽,采用Sephadex G-15凝胶对其分离并评价各组分对DPPH、羟基、ABTS+自由基的清除能力与还原能力,筛选出抗氧化活性最强组分,利用液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatography and tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)进行鉴定并分析。结果表明,葡聚糖凝胶柱层析分离出G1、G2、G3组分,其中G3具有最佳的抗氧化活性,其羟基自由基清除能力半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))6.18 mg/mL与还原能力IC_(50)2.19 mg/mL优于谷胱甘肽,DPPH自由基清除能力IC_(50)0.50 mg/mL,ABTS+自由基清除能力IC_(50)0.02 mg/mL;通过液相色谱-串联质谱鉴定G3含有46个肽段,肽段长度均小于10个氨基酸,匹配得分大于200分的9条肽段分子量为631~920 Da,均无毒性;筛选获得高抗氧化活性肽HLLPK、KEFFP、KEFFPA,其分子量分别为606.84、666.83、737.92 Da。本研究初步揭示了澳洲坚果抗氧化肽组成,深化了澳洲坚果抗氧化肽的研究,为澳洲坚果抗氧化肽的开发利用提供了理论参考。

基于分子模拟技术筛选牛乳清蛋白源抗氧化肽

传统抗氧化肽的筛选往往需要经过酶解、纯化、分离、鉴定及体外试验验证,时间和物力花费较大。本研究以生物信息学为理论基础,利用计算机虚拟消化、相关活性预测与评价、药物代谢动力学及分子模拟技术对牛乳清蛋白源抗氧化肽进行依次筛选,对其可能发生的Keap1-Nrf2-ARE抗氧化途径进行分析、解释,分析其分子反应过程中构象的稳定性。应用PeptideRanker程序对生物活性进行预测评分,筛选得到137条评分大于0.4的肽段,同时采用ToxinPred、Innovagen、Expasy-compute及Pepdraw程序进一步分析肽段的理化性质,并通过药物代谢动力学ADMET、TOPKAT分析对肽段进行筛选,得到14条无毒、无致敏性、无致突变性、无致癌性及水溶性良好的多肽,然后将其与Keap1受体进行分子对接。将分子对接评分前4位的多肽与Keap1的最优结合复合物进行构象作用机制分析,最终通过复合物构象分子间作用力评价CDEF序列最具抗氧化活性的潜力,并将CDEF-Keap1受体复合物进行分子动力学模拟,结果显示动力学模拟过程中构象变化较稳定,因此CDEF抗氧化肽可在人体中较好地发挥抗氧化活性。与传统酶解方法相比,本方法可快速、高效筛选抗氧化肽,为天然食品源抗氧化肽的快速筛选提供了新思路。

响应面法优化金鲳鱼皮抗氧化肽制备工艺及其组成分析

为促进金鲳鱼皮资源的综合利用,本研究以金鲳鱼皮为原料,探究其抗氧化肽的最佳制备工艺。以水解度和DPPH自由基清除率为考察指标,在单因素实验的基础上,结合响应面试验对金鲳鱼皮的酶解条件包括蛋白酶种类、酶解时间、加酶量、酶解温度以及酶解pH进行优化,得到金鲳鱼皮抗氧化肽的最佳酶解条件,并测定最佳条件下得到的酶解产物的分子量分布及氨基酸组成。结果表明,制备金鲳鱼皮抗氧化肽酶解效果最优的酶为碱性蛋白酶,其最佳酶解工艺为:酶解温度52.3℃、酶解pH10.0、酶解时间8.4 h、加酶量15409 U/g。通过最佳酶解条件制备得到的酶解产物的DPPH自由基清除率为81.59%±2.96%,其分子量主要分布在3000 Da以下,占比高达79.20%,其含有17种氨基酸,甘氨酸为主要氨基酸,疏水性氨基酸占比35.28%。本研究结果为金鲳鱼皮的高值化利用与抗氧化肽的筛选提供了一定的理论依据。

膜分离技术优化牛肉抗氧化肽制备及其活性评估

该实验旨在利用膜分离技术改进抗氧化肽的提取方法,提高其在食品工业和健康领域的应用潜力,并支持对抗氧化肽生物活性的深入研究。首先,通过盐酸提取法从干腌牛肉中提取抗氧化肽,并测试了其在不同质量浓度下(0.2、0.4、0.6、0.8、1 mg/mL)的抗氧化能力,发现随着浓度的增加,其抗氧化能力也随之增强。接着,利用膜分离技术对牛肉中的抗氧化肽进行了分离纯化,使用不同微孔滤膜(PTFE、CA、PVDF、CN-CA、PES、混合膜)进行分离,并测试了其DPPH自由基和羟自由基清除率。其中,CN-CA水系混合纤维微孔滤膜的清除率最佳,分别达到了77.45%和51.06%。优化后的BTESE/CN-CA复合膜制备条件为15 g/L溶胶浓度、7.5 min热处理时间、150℃热处理温度、1.25 MPa。通过多肽评分和半衰期分析,推测分离出的Phe-Asp-Gly-Asp-Phe(FDGDF)的活性最强,并利用量子化学模拟分析了FDGDF与超氧化物歧化酶的结合位点和力场。该项研究表明,膜分离技术能显著提升牛肉多肽的抗氧化活性,为食品和营养领域的研究提供了宝贵信息。

油茶饼粕抗氧化肽的鉴定及其稳定性

为提高油茶饼粕的附加值,采用复合蛋白酶酶解油茶饼粕蛋白,酶解产物通过超滤、凝胶层析分离纯化,LC-MS/MS序列鉴定结合PeptideRanker数据库筛选,获得具有较高抗氧化活性的肽段。探究不同温度、pH值、金属离子以及体外模拟胃肠道消化对抗氧化肽活性的影响。结果表明:酶解产物经超滤和Sephadex G-25凝胶柱逐级分离后,得到4个组分(F1~F4),F4组分的ABTS和DPPH自由基清除率最高,分别为(67.56±0.32)%和(52.40±1.64)%。经氨基酸序列鉴定、PeptideRanker预测与活性验证,得到3条抗氧化肽,分别为LCDQCPPHA(LC-9)、ATNPPCCQP(AT-9)、TSCSSPSYPFQ(TS-11)。AT-9和LC-9具有较好的热稳定性,且在pH 3~9范围,ABTS和DPPH自由基清除活性均未发生显著改变。5种金属离子中,Cu2+对3条肽活性的影响最为显著,当Cu^(2+)浓度为2 mmol/L时,LC-9的ABTS和DPPH清除活性保持率分别为(23.47±0.61)%和(44.57±0.58)%。此外,经体外模拟胃肠道消化后,AT-9的抗氧化活性保持率最高,ABTS和DPPH清除活性保持率均高于90%。3条肽中AT-9具有较强的抗氧化活性和良好的稳定性,可应用于食品领域。

羊血红蛋白水解物中新型抗氧化肽的纯化、鉴定和对H_(2)O_(2)损伤Caco-2细胞保护作用

以新鲜羊血为原料制备羊血红蛋白抗氧化肽,采用葡萄糖凝胶G-25色谱、DEAE葡萄糖凝胶A-50阴离子交换色谱、反相高效液相色谱和液相色谱-串联质谱对羊血红蛋白水解物进行分离纯化和鉴定,通过研究自由基清除能力、模拟胃肠消化后的稳定性及对H2O2诱导的Caco-2细胞保护作用评价羊血红蛋白肽的抗氧化活性。结果表明,从羊血红蛋白粗肽中纯化并鉴定出Ala-Tyr-Glu-Val-Asp(AYEVD)、Phe-His-Thr-Met-Glu(FHTME)、Ser-PheMet-Tyr-Glu-Lys(SFMYEK)3种新型抗氧化活性肽,分子质量分别为595.60、663.74、803.92 Da;其中AYEVD的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力最强;AYEVD在模拟胃肠道消化后显示出更强的抗氧化活性。此外,AYEVD还能抑制H2O2诱导Caco-2细胞的氧化损伤,显著减少活性氧积累、抑制早期细胞凋亡和丙二醛的形成,并提高细胞内抗氧化酶活性。该研究可为羊血红蛋白肽作为新型抗氧化剂应用于功能食品提供理论依据。

模拟酶解海参蛋白制备抗氧化肽及其抗疲劳活性研究

目的采用虚拟酶解和传统酶法相结合制备海参抗氧化肽,并进一步考察其抗疲劳功效。方法以海参为原料,借助在线数据库进行虚拟酶解,对水溶性、生物毒性、致敏性等特性预测,筛选制备抗氧化肽的最佳蛋白酶,通过单因素和响应面实验考察反应温度、时间、加酶量、pH、底物浓度对海参蛋白水解度、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率的影响,并确定最佳的抗氧化肽制备工艺参数,进一步采用负重游泳实验小鼠模型探讨其抗疲劳功效。结果经过多轮筛选最终获得亲水性、安全性、稳定性较好的蛋白酶为蛋白酶K,在反应时间2.0 h,加酶量350 U/g的条件下,最佳的工艺参数为温度50℃、pH 6.4、底物浓度1.0%,此条件下的DPPH自由基清除率为64.2%±1.1%,与理想值接近。抗疲劳功效研究表明海参抗氧化肽对小鼠体重影响不大,能够明显延长负重游泳时间(P<0.05),显著降低血清尿素氮、乳酸含量,增加肝糖原、肌糖原储备量(P<0.05),提升运动耐力。结论通过虚拟酶解和实际酶解相结合的方法制备的海参抗氧化肽具有明显的抗疲劳作用。

干腌火腿抗氧化肽的研究进展

自由基过量累积会导致人体许多慢性疾病的产生,如衰老、慢性炎症、心血管疾病等,目前常规的解决方法是使用抗氧化剂。然而人工合成的抗氧化剂对人体有潜在危害,因此无毒副作用的抗氧化肽成为了当今研究的热点。作为发酵肉制品之一的干腌火腿,因其蛋白质含量丰富,且在发酵过程中受到内源酶和微生物的影响,会对蛋白质进行分解,从而产生具有抗氧化活性的小肽。大量的研究表明,来源于干腌火腿的肽具有极强的抗氧化活性。因此,干腌火腿作为天然抗氧化肽的潜在来源,备受研究人员的关注。本文综述了干腌火腿中抗氧化肽研究的最新进展,主要包括抗氧化肽的形成、制备、纯化鉴定及抗氧化机制4个方面,其中特别指出外源微生物对抗氧化肽形成的影响,以期为干腌火腿抗氧化肽的进一步研究提供理论基础。

响应面法优化辣椒籽抗氧化肽的酶解制备工艺

以辣椒籽蛋白质为原料,采用酶法制备辣椒籽抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为评价指标,在单因素试验基础上,通过响应面法优化辣椒籽抗氧化肽的酶解制备工艺。结果表明:碱性蛋白酶为最适蛋白酶,最优酶解工艺参数为酶添加量0.11 g(以0.30 g辣椒籽蛋白质质量计)、pH 9.0、酶解温度55℃、酶解时间3.75 h,在此条件下,DPPH自由基清除率达到37.71%±0.83%。

核桃抗氧化肽的酶法制备、鉴定及其对脂氧合酶的抑制机理

作者以核桃粕为原料制备抗氧化肽,用胰酶酶解核桃蛋白质,以超氧阴离子自由基清除率为主要指标优化酶解条件,分离纯化酶解产物。通过LC-MS/MS技术鉴定多肽序列,通过最低对接结合能、蛋白质稳定指数等参数筛选抗氧化肽。结果表明,最优酶解条件下,酶解液的超氧阴离子自由基清除率为26.57%。酶解液经Smartdex G-50分离纯化得到4个组分,在相同质量浓度下,D-4组分超氧阴离子自由基清除率最高。对D-4组分进行序列鉴定,经计算机虚拟筛选推测R.AGIQFPVG.R为D-4组分抗氧化活性的主要贡献物。该肽段和脂氧合酶最低对接结合能为-21933.85 J/mol,蛋白质预测结果为稳定蛋白质。对接结果表明,R.AGIQFPVG.R和脂氧合酶非活性位点Glu186结合,说明该肽段主要起非竞争性抑制作用,该研究为天然抗氧化剂的筛选提供参考。

纳豆抗氧化肽对H2O2诱导HEK293细胞氧化应激损伤的保护作用

目的评价纳豆肽的抗氧化能力以及对对H_(2)O_(2)诱导HEK293细胞氧化应激损伤的保护作用。方法首先以1,1-二苯基-2-三硝基苯(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基(DPPH·)、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)ammonium salt,ABTS]阳离子自由基(ABTS^(+)·)、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(·O^(2-))清除能力以及总还原能力为指标,测定酶解得到纳豆肽粗品的抗氧化能力。利用超滤技术对纳豆肽进行分离,测定分离后各组分在不同浓度下对DPPH·及ABTS^(+)·清除活性。将活性最强的两个组分作为纳豆抗氧化肽,测定其对H_(2)O_(2)诱导氧化损伤HEK293细胞抗氧化酶含量的影响,评价其对氧化损伤HEK293细胞的保护效果。结果纳豆肽粗品在8.00 mg/mL时具有良好的DPPH·、ABTS^(+)·、·OH和·O^(2-)清除能力以及总还原能力。超滤后得到了相对分子质量分别大于30、10~30、3~10、小于3 kDa的4个纳豆肽组分,其对DPPH·及ABTS^(+)·清除活性均随着质量浓度的增加呈现上升趋势,特别是在8 mg/mL时,相对分子质量为3~10 kDa和小于3 kDa组分表现出最强的抗氧化活性,后续的细胞试验表明,这两个组分能够显著提高氧化应激下HEK293细胞的存活率。在300μg/mL的剂量范围内,小于3 kDa组分的纳豆抗氧化肽可使细胞存活率恢复至未损伤时的水平,而3~10 kDa组分也使损伤细胞的存活率提高了40.8%。同时,纳豆抗氧化肽均能提高氧化损伤HEK293细胞中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GPX)和过氧化氢酶(catalase,CAT)等抗氧化酶的含量,<3 kDa组分和3~10 kDa组分的纳豆抗氧化肽分别使SOD含量提高了49.52%和50.80%,GPX含量提高了49.52%和50.81%,CAT含量提高了93.64%和91.97%。结论纳豆肽具有抗氧化潜力,纳豆抗氧化肽可以有效地缓解H_(2)O_(2)诱导的HEK293细胞的氧化应激损伤,为纳豆抗氧化肽在功能食品中的应用提供理论依据。

枯草芽孢杆菌发酵法制备鸡骨抗氧化肽的工艺优化

为增强畜禽加工副产品的综合利用价值,研发高附加值新产品,以鸡骨为原料,通过枯草芽孢杆菌发酵法制备鸡骨抗氧化肽,以OD值为指标,确定葡萄糖添加量对枯草芽孢杆菌生长的影响,以抗氧化性和水解度为评价指标,探究鸡骨粉添加量、培养基初始pH值、菌种接种量、装液量和培养时间对发酵鸡骨制备抗氧化肽的影响,以抗氧化性为评价指标通过响应面试验探究最优发酵条件;并对发酵液进行膜分离,对不同分子量的组分进行抗氧化活性测定,同时通过扫描电子显微镜观察发酵前后鸡骨粉形态结构变化。结果表明,培养基中不添加葡萄糖时枯草芽孢杆菌长势更好。优化后的最佳发酵条件为鸡骨粉添加量3.2%、培养基初始pH6、菌种接种量4.0%、装液量59 mL/250 mL、培养时间20 h。在此条件下,DPPH·清除率为69.55%,水解度为77.93%。经过膜分离得到的组分中,分子量1~10 kDa的肽段均表现出良好的抗氧化活性,各组分的DPPH·清除率均达到50%以上;ABTS^(+)·清除率均达到89%以上;邻苯三酚自氧化速率均在20%以上。扫描电子显微镜结果显示,鸡骨粉形态结构发生改变,表面出现凹陷破损,判断鸡骨粉已被水解。

畜禽源抗氧化肽的酶解工艺优化

以鸭肝为原料,通过酶解法制备鸭肝抗氧化肽。从8种蛋白酶中筛选出风味蛋白酶为酶解鸭肝肽的最佳用酶。以水解度和抗氧化性为评价指标,通过单因素试验、响应面试验探究料液比、酶解温度、酶解时间、酶解pH值和酶用量对鸭肝抗氧化肽活性和水解度的影响。响应面优化的最佳酶解条件为料液比1∶10(g/mL)、酶解温度50℃、酶解时间3.9 h、酶解pH6.2、酶用量4100 U/g。在此条件下,鸭肝肽的DPPH·清除率可达93.25%,水解度为15.03%。

益生菌发酵提取榆耳抗氧化肽工艺优化及其抗运动疲劳作用研究

以榆耳为原料,采用益生菌发酵提取榆耳抗氧化肽。以ABTS自由基清除率为指标,筛选益生菌并优化沉淀pH,再在单因素试验基础上,采用响应面法优化益生菌发酵提取榆耳抗氧化肽的工艺,并研究榆耳抗氧化肽对运动大鼠的抗疲劳作用。结果表明:最优发酵工艺条件为使用枯草芽孢杆菌、沉淀pH为6液料比4.0∶1(mL/g)、发酵温度34℃、榆耳用量53 g、发酵时间24 h。在此条件下,榆耳抗氧化肽对ABTS自由基的清除率为93.44%。抗氧化能力试验表明,分子质量小于3 kDa的榆耳抗氧化肽的抗氧化活性最好。运动大鼠抗疲劳试验表明,灌胃榆耳抗氧化肽可以提高大鼠的耐力和抗疲劳能力。