抗酸染色联合PAS染色和六胺银染色在感染性疾病病理学实验教学中的应用

为配合医学整合课程体系改革,结合临床病理诊断常用的感染性疾病的辅助诊断方法,将抗酸染色、高碘酸-Schiff(periodic acid-Schiff,PAS)染色和六胺银染色阳性病例切片引入病理学感染性疾病章节的实验教学,显示出病变组织致病微生物。通过对不同班级进行问卷调研,绝大多数同学认可特殊染色在感染性疾病章节中的应用,认为不仅丰富了课堂内容,学习了结核杆菌和真菌在病变组织中的形态学特征及其导致的组织病理变化,而且加深了对感染性疾病理论知识的理解,深刻认识到病理学研究内容除了疾病的病理变化之外,还要探讨疾病发生的病因以及好发部位。同时,这些增加的特殊染色切片改变了本章节实验教学切片普通光学显微镜下色彩的单调性——单一的“红-蓝”色调,丰富了镜下色彩,提高了学生的学习兴趣,活跃了课堂气氛。

改良耻垢分枝杆菌抗酸染色法在实验教学中的应用

目的探索耻垢分枝杆菌抗酸染色操作的最佳条件,使其满足医学微生物实验教学需要。方法添加吐温-80至培养基中,将耻垢分枝杆菌培养48 h后制备成菌悬液,与金黄色葡萄球菌混匀后制成抗酸染色标本。在不同麦氏浊度及盐酸酒精浓度下,用石炭酸复红浸染10 min,酒精脱色30 s,亚甲基蓝复染30 s,筛选出最佳条件组合的染色结果,并与结核分枝杆菌染色对比分析。同时,连续染色一周,测试样本稳定性。结果吐温-80显著分散了耻垢分枝杆菌菌体,使其菌悬液颗粒细小,匀质性高,由此制备的抗酸染色标本在3.0 MCF浊度、1%酸性酒精浓度条件下,镜下蓝色背景清晰,对比度明显,抗酸杆菌排列均匀,形态典型,容易观察。制备好的标本4℃下存放一周,未发现明显的颜色及形态改变。结论优化后的耻垢分枝杆菌抗酸染色操作具有简单、快速,染色特异性好、稳定性高等优点,值得进一步推广。

一种抗酸染色阳性对照品的制作及其应用

抗酸染色是病理科或检验科用于检测组织或体液样本中是否存在分枝杆菌等抗酸性菌而常使用的一种特殊染色技术,为结核病等诊断和鉴别诊断提供重要辅助。按照质控要求,为确保染色质量需设立对照。但在实际工作中,一张优质的抗酸阳性对照片很难获得。

改良抗酸染色法联合GeneXpert法在提高疑似肺结核患者痰结核分枝杆菌检出中的应用

目的:评估改良抗酸染色法结合GeneXpert法在提高疑似肺结核患者痰中结核分枝杆菌检出率的有效性。方法:选取2022年1月—2023年1月赣州市第五人民医院收治的100例疑似肺结核患者作为研究对象。采用改良抗酸染色法和GeneXpert法检测结核分枝杆菌含量,以病理学联合临床检查诊断结果为金标准,使用受试者操作特征(ROC)曲线分析两种方法单独及联合检测的诊断效能。结果:两种方法对不同浓度结核分枝杆菌的检测结果比较,差异有统计学意义(P<0.05)。改良抗酸染色法对结核分枝杆菌阳性诊断的一致性中等(Kappa=0.500);GeneXpert法及联合检测对结核分枝杆菌阳性诊断的一致性较好(Kappa=0.822、0.950)。ROC曲线分析显示,联合检测的曲线下面积(AUC)为0.986,高于改良抗酸染色法、GeneXpert法的0.792、0.933。结论:改良抗酸染色法结合GeneXpert法能显著提高疑似肺结核患者痰中结核分枝杆菌的检出率,减少漏诊,对于提早诊断和切断肺结核的传播链具有重要意义。

肺结核痰液标本分枝杆菌涂片抗酸染色镜检与结核杆菌培养试验结果分析

目的 探讨肺结核痰液标本分枝杆菌涂片抗酸染色镜检与结核杆菌培养试验结果。方法 选去2020年1月至2023年9月就诊于我中心的68例肺结核患者和68例非肺结核患者,均留取3~5 mL痰液,分别作为抗酸染色镜检组和结核杆菌培养试验组。以临床最终诊断结果为准,分析两种检查方式诊断肺结核的价值,并对比两种检查方式所需时间及费用。结果 两种检查方式诊断肺结核的特异度和阳性预测值均为100.00%,其中结核杆菌培养试验诊断肺结核的灵敏度为79.41%、准确度为89.71%,均高于抗酸染色镜检,差异具有统计学意义(P<0.05);两种检查方式诊断肺结核阴性预测值对比无统计学差异(P>0.05);结核杆菌培养试验检查所需时间和费用均高于抗酸染色镜检,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 结核杆菌培养试验、抗酸染色镜检诊断肺结核各有优缺点,前者诊断灵敏度与准确度高,后者能快速出结果且所需费用低,临床可先采用抗酸染色镜检筛查,再采用结核杆菌培养试验检查确诊。

结核杆菌检验中涂片抗酸染色法与荧光定量PCR法的价值对比

目的比较涂片抗酸染色法与荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法在检验结核杆菌中的价值,为肺结核诊断提供依据。方法选取2021年8月至2023年8月本中心就诊的60例疑似肺结核患者,采集患者痰液标本,分别采用荧光定量PCR法、涂片抗酸染色法对其进行检测,并将痰培养所得结果作为本研究的“金标准”,就两种检测方法的具体诊断效能(特异度、准确度与灵敏度、阳性预测值、阴性预测值)进行对比。结果在疑似肺结核患者60例当中,通过痰培养确诊肺结核患者38例,所占比重为63.33%;荧光定量PCR法诊断阳性36例,涂片抗酸染色法为34例。荧光定量PCR法检测的特异度(95.45%)、准确度(93.33%)、灵敏度(92.11%)、阳性预测值(97.22%)、阴性预测值(87.50%)均较涂片抗酸染色法(68.18%、70.00%、71.05%、79.41%、57.69%)高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用荧光定量PCR法对结核杆菌进行检测,其在诊断肺结核方面的效能,优于涂片抗酸染色法,更具适用性。

刍议活动性肺结核早期检验中半巢式全自动实时荧光定量PCR检测与涂片抗酸染色法的应用研究

目的评估半巢式全自动实时荧光定量PCR检测与涂片抗酸染色法在活动性肺结核早期检验中的应用效能。方法选取2022年9月—2023年9月于平邑县结核病防治所就诊的90例疑似肺结核患者为研究对象,采用Xpert MTB/RIF技术、涂片抗酸染色法检验及简单法固体培养法同时检测90例疑似肺结核患者痰标本,对检测结果进行比较。结果以固体培养结果作为金标准,痰培养阳性率85.56%,阴性率14.44%。Xpert MTB/RIF阳性率84.44%、阴性率15.56%。涂片抗酸染色法检验阳性率48.88%、阴性率51.11%。Xpert MTB/RIF检验的灵敏度97.40%、准确度96.67%、阳性预测值98.68%以及阴性预测值85.71%均高于涂片抗酸染色法检验50.64%、52.22%、88.64%、17.39%,差异有统计学意义(χ^(2)=43.768、46.722、5.922、22.546,P均<0.05)。结论与涂片抗酸染色法相比,在活动性肺结核早期检验中采用半巢式全自动实时荧光定量PCR检测(Xpert MTB/RIF)的应用效能更高。

比较荧光定量PCR与涂片抗酸染色在肺结核诊断中的应用

对比荧光定量聚合酶链反应(PCR)和涂片抗酸染色在诊断肺结核方面的效果。方法 将桂林市第三人民医院2021年6月到2022年8月90例疑似肺结核患者痰液样本进行痰培养、荧光定量PCR检测结核杆菌DNA、涂片抗酸染色检测。研究患者的肺结核检出情况,并比较荧光定量PCR和抗酸染色两种方法的诊断效能。结果 荧光定量PCR与抗酸染色检测特异度、阳性以及阴性预测值无明显差异(P>0.05);荧光定量PCR检测的灵敏度和准确度更高(P>0.05)。结论 相比较涂片抗酸染色,荧光定量PCR检测作为一种分子生物学诊断技术,在肺结核的早期诊断中具有重要的应用价值和优势。

肺泡灌洗液改良抗酸染色和基因芯片法在肺结核中的诊断价值

目的探讨肺泡灌洗液(BALF)改良抗酸染色和基因芯片法诊断肺结核的价值。方法选取2017年1月至2020年12月江西省胸科医院收治的150例疑似肺结核患者作为研究对象,患者均行肺泡灌洗液改良抗酸染色和基因芯片法进行诊断,观察两者对肺结核的诊断价值。结果150例疑似肺结核患者中,最终诊断肺结核105例,非肺结核45例,以临床最终诊断为金标准,肺泡灌洗液改良抗酸染色灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值分别为63.81%、95.56%、73.33%、97.10%、53.09%;肺泡灌洗液基因芯片法灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值分别为80.00%、97.78%、85.33%、98.82%、67.69%;肺泡灌洗液基因芯片法检测结核分枝杆菌的灵敏度和准确度高于改良抗酸染色,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺泡灌洗液基因芯片和改良抗酸染色法诊断肺结核具有良好价值,相比改良抗酸染色法基因芯片法可以更灵敏、准确地诊断肺结核,值得临床借鉴。

改良抗酸染色法诊断结核性胸膜炎的应用价值分析

目的 分析改良抗酸染色法在结核性胸膜炎诊断中的应用价值。方法 47例胸腔积液患者为研究对象,根据胸水常规、生化等检查结果分为病例组(结核性胸腔积液,35例)及对照组(非结核性胸腔积液,12例)。两组患者的胸水标本均进行传统抗酸染色法、改良抗酸染色法、结核分枝杆菌培养及结核分枝杆菌核酸检测。观察传统抗酸染色法、改良抗酸染色法、结核分枝杆菌培养、结核分枝杆菌核酸检测的结果;以结核分枝杆菌培养结果作为金标准,对比改良抗酸染色法与传统抗酸染色法的诊断效能。结果 病例组传统抗酸染色法阳性检出率为5.71%,改良抗酸染色法阳性检出率为8.57%,结核分枝杆菌培养阳性检出率为17.14%,结核分枝杆菌核酸检测阳性检出率为45.71%。传统抗酸染色法与改良抗酸染色法的阳性检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。以结核分枝杆菌培养结果作为金标准,改良抗酸染色法诊断灵敏度为50.00%,特异度为100.00%;传统抗酸染色法诊断灵敏度为33.33%,特异度为100.00%。改良抗酸染色法与传统抗酸染色法的诊断灵敏度、特异度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 单一的检测方法在结核性胸膜炎的诊断中各有优劣势,价值有限,需要联合多种检测方法,以提高胸腔积液中结核分枝杆菌检出率,由于本研究样本例数偏少,故应扩大样本量进一步研究,为结核性胸膜炎的早期诊断提供依据。

抗酸染色、TB-IGRA与Xpert MTB/RIF联合检测在结核病中的诊断价值

目的探究抗酸染色、结核分枝杆菌γ-干扰素体外释放试验(TB-IGRA)与结核分枝杆菌及利福平耐药实时荧光定量核酸扩增(Xpert MTB/RIF)联合检测在结核病中的诊断价值。方法回顾性分析2020年1月至2021年12月接收的338例结核病确诊患者和60例健康体检人员的抗酸染色、TB-IGRA和Xpert MTB/RIF实验室检测结果。比较抗酸染色、TB-IGRA、Xpert MTB/RIF单项及联合检测对结核病的诊断结果;以结核分枝杆菌培养结果为诊断金标准,比较抗酸染色、TB-IGRA、Xpert MTB/RIF单项及联合检测对结核病的诊断效能。结果Xpert MTB/RIF对结核病的阳性符合率为79.0%(267/338),明显高于抗酸染色的57.1%(193/338)、TB-IGRA的68.3%(231/338)(P<0.05);抗酸染色对结核病的阳性符合率低于TB-IGRA(P<0.05)。三者联合检测诊断结核病的灵敏度、准确度、阴性预测值明显高于抗酸染色、TB-IGRA、Xpert MTB/RIF、抗酸染色+TB-IGRA、抗酸染色+Xpert MTB/RIF(P<0.05);不同方法诊断结核病的特异度和阳性预测值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论TB-IGRA和Xpert MTB/RIF在结核病检测方面优势明显大于抗酸染色,三者联合检测可显著提高结核病的诊断效能,值得临床推广。

一种Ziehl-Neelsen抗酸染色试剂盒方法的改良

结核病是由结核分枝杆菌感染引起的传染病,发病率、死亡率高,严重危害人类健康。病理科常用Ziehl-Neelsen抗酸染色试剂盒检测结核杆菌,但镜下观察结核杆菌与背景对比不清、抗酸染色的阳性率较低,笔者摸索出一种新的抗酸染色方法,使相同视野下着色的结核杆菌数量明显增多,抗酸染色阳性率也显著提高,现介绍如下。

支气管肺泡灌洗液应用涂片抗酸染色T-SPOT.TB与GeneXpert MTB/RIF联合检测对菌阴肺结核的诊断价值

目的探究支气管肺泡灌洗液应用涂片抗酸染色、结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(GeneXpert MTB/RIF)联合检测对菌阴肺结核的诊断价值。方法分析2021年1月至12月期间安徽省胸科医院102例疑似菌阴肺结核患者的住院资料及临床标本(支气管肺泡灌洗液)检测结果。使用涂片抗酸染色、T-SPOT.TB与GeneXpert MTB/RIF分别进行检测,以培养出病原菌为金标准,比较3组检测方式单一及联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值,分析这3组检测方式单一及联合检测对菌阴肺结核的诊断价值。结果根据最终诊断,67例菌阴肺结核患者纳入菌阴肺结核组,其余35例患者纳入非菌阴肺结核组。菌阴肺结核组涂片抗酸染色、T-SPOT.TB、GeneXpertMTB/RIF的肺泡灌洗液检出率分别为11.94%、50.75%、55.22%。非菌阴肺结核组涂片抗酸染色、T-SPOT.TB、GeneXpertMTB/RIF的肺泡灌洗液检出率分别为28.57%、42.86%、48.57%。T-SPOT.TB、GeneXpertMTB/RIF的检出率均高于涂片抗酸染色,差异均具有统计学意义(χ^(2)=23.443、28.138,P<0.05)。以培养出病原菌为金标准,涂片抗酸染色、T-SPOT.TB、GeneXpert MTB/RIF与三种方法联合诊断菌阴肺结核的灵敏度分别为29.86%、58.71%、71.64%、82.09%,特异度分别为85.71%、91.43%、88.57%、100.00%,阳性预测值分别为80.00%、92.86%、96.00%、100.00%,阴性预测值分别为38.69%、53.33%、62.00%、74.47%。涂片抗酸染色、T-SPOT.TB、GeneXpert MTB/RIF三种方法联合检测的灵敏度高于三者单独检测。结论支气管肺泡灌洗液应用涂片抗酸染色、T-SPOT.TB与GeneXpert MTB/RIF联合检测对菌阴肺结核患者诊疗具有重要价值,可较快分析结果,有效提高菌阴肺结核的诊断准确率。

活动性肺结核早期检验中荧光定量检验PCR与涂片抗酸染色法的价值分析

目的探讨活动性肺结核早期检验中荧光定量检验PCR与涂片抗酸染色法的价值。方法80例肺结核患者入院后均收集痰标本分别进行荧光定量检验PCR与涂片抗酸染色法检测。以临床诊断结果为金标准,比较两种诊断方法对活动性肺结核的诊断效能。采用κ检查分析荧光定量检验PCR及涂片抗酸染色法与金标准的一致性。结果80例肺结核患者经临床诊断确诊活动性肺结核70例,非活动性肺结核10例。κ检验分析结果显示,荧光定量检验PCR检查结果与金标准的一致性较好(κ=0.940,P<0.05);涂片抗酸染色法检查结果与金标准的一致性中等(κ=0.591,P<0.05)。荧光定量检验PCR诊断活动性肺结核的灵敏度(100.00%vs.75.71%)、特异度(90.00%vs.20.00%)及准确度(98.75%vs.68.75%)均高于涂片抗酸染色法(P<0.05)。结论荧光定量检验PCR对活动性肺结核早期检验的诊断效能较高,适合作为该类疾病临床鉴别诊断的优先选择。

基于石蜡包埋组织比较荧光PCR方法和抗酸染色法对结核分枝杆菌的检出率

结核病(Mycobacterium tuberculosis,MTB)是由结核杆菌感染引起的慢性传染病,在新型冠状病毒感染(COVID-19)流行之前,结核病是单一传染病媒介死亡的主要原因,排名高于艾滋病。我国结核病人数较多,同时呈现高度耐药[1],结核病防治难度极大,因此早期准确诊断结核是治疗及控制结核的关键。本研究通过荧光PCR、抗酸染色对结核分枝杆菌检出率的比较,探讨抗酸及PCR在临床病理诊断中的差异及应用价值。

环保脱蜡液用于坏死性肉芽肿性炎抗酸染色的效果

目的探讨环保脱蜡液对坏死性肉芽肿性炎石蜡切片的抗酸染色效果。方法回顾性收集病理诊断结果为坏死性肉芽肿性炎的163例组织标本作为研究对象,分别使用二甲苯(二甲苯组)和环保脱蜡液(环保脱蜡液组)作为切片的透明脱蜡液。采用齐-内抗酸染色法检测两组切片的结核分枝杆菌,比较两组切片的抗酸染色效果、结核分枝杆菌阳性率和数量及两组切片的结核分枝杆菌的符合率和诊断吻合系数。结果两组切片抗酸染色均背景清晰,呈灰蓝色;细胞核蓝色,胞浆粉红色;结核分枝杆菌清晰可见,呈鲜红色;肺泡腔内壁见粉染渗出物。环保脱蜡液组切片的结核分枝杆菌阳性率高于二甲苯组,差异有统计学意义(χ^(2)=105.20,P<0.001)。两组切片的结核分枝杆菌符合率为87.12%,结核分枝杆菌诊断吻合度较强且差异有统计学意义(kappa=0.723,P<0.001)。环保脱蜡液组检出的结核分枝杆菌均数高于二甲苯组,差异有统计学意义(t=40.106,P<0.001)。结论与二甲苯相比,使用环保脱蜡液有利于提高坏死性肉芽肿性炎石蜡切片的结核分枝杆菌抗酸染色检出率和数量。

改良抗酸染色和结核与非结核基因检测在结核病病理诊断中的应用比较

目的比较分析改良抗酸染色和结核与非结核基因检测在结核病病理诊断中的差异。方法收集赣州市第五人民医院2020年1-12月确诊肺结核患者96例,组织经病理常规取材、石蜡包埋、切片、苏木精-伊红(HE)染色,之后进行改良抗酸染色与结核与非结核基因检测。结果96例肺结核患者病理中,抗酸染色阳性例数48例,阳性率50%;结核与非结核基因检测结核阳性例数70例,阳性率73%,差异有统计学意义(P<0.05);两种方法联合检测阳性例数75例,阳性率78%,与基因检测相比,差异无统计学意义(P>0.05),与改良抗酸染色相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在结核病病理诊断中,结核与非结核基因检测阳性率显著高于改良抗酸染色法,两种方法联合检测更有利于提高确诊率。

荧光定量PCR法与涂片抗酸染色法在活动性肺结核早期诊断中的应用价值

目的:探讨荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法与涂片抗酸染色法在活动性肺结核早期诊断中的应用价值。方法:选取2020年1月—2023年7月清远市清新区人民医院收治的69例疑似活动性结核患者作为研究对象,收集痰液标本并实施荧光定量PCR与涂片抗酸染色检测,以临床综合诊断结果为“金标准”,比较两种检验方式的诊断效能。结果:临床综合诊断活动性肺结核35例,阳性率为50.72%(35/69)。荧光定量PCR法诊断活动性肺结核阳性率高于涂片抗酸染色法,差异有统计学意义(P<0.001)。荧光定量PCR法诊断早期活动性肺结核的特异度、准确度、灵敏度高于涂片抗酸染色法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:与涂片抗酸染色法相比,荧光定量PCR法诊断早期活动性肺结核的阳性率、特异度、准确度、灵敏度更高,值得临床应用并予以推广。

改良抗酸染色联合CPA检测技术在肺结核诊断的应用

目的:探究改良抗酸染色联合交叉引物恒温扩增(CPA)检测技术在疑似肺结核临床诊断中的应用。方法:收集疑似肺结核患者痰标本,采用痰涂片、罗氏培养、改良抗酸染色、CPA及改良抗酸染色联合CPA检测技术检测标本中的结核分枝杆菌(MTB)。比较不同方式的阳性率及以罗氏培养为金标准时,其他方式的诊断效能。结果:在218例疑似肺结核患者中,罗氏培养法与痰涂片比较,差异有统计学意义(P<0.05),与改良抗酸染色法、CPA及改良抗酸染色法联合CPA比较,差异无统计学意义(P>0.05);以罗氏培养法结果为金标准,改良抗酸染色法联合CPA的敏感度、准确度均高于痰涂片、PPD、改良抗酸染色法及CPA,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:改良抗酸染色法联合CPA诊断疑似肺结核患者具有较高的敏感度、特异度。

荧光定量PCR检测结核分枝杆菌DNA与涂片抗酸染色在肺结核诊断中应用比较

目的:比较荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测结核杆菌脱氧核糖核酸(DNA)与涂片抗酸染色在肺结核诊断中的应用价值。方法:选取2019年1月至2022年1月周口市中心医院和周口市传染病医院收治的98例疑似肺结核患者作为研究对象。所有患者均采集痰液标本,进行荧光定量PCR检测结核杆菌DNA、涂片抗酸染色及痰培养检查,比较肺结核检出情况,并以痰培养结果为标准,比较荧光定量PCR、抗酸染色诊断肺结核的诊断效能;以Kappa检验分析荧光定量PCR、抗酸染色诊断与痰培养一致性。结果:98例疑似患者经痰培养确诊82例,荧光定量PCR检出79例,抗酸染色检出70例;荧光定量PCR与抗酸染色特异度、阳性预测值、阴性预测值比较,差异均无统计学意义(P> 0.05);荧光定量PCR诊断肺结核灵敏度、准确度均高于抗酸染色,差异均具有统计学意义(P<0.05);Kappa检验显示,荧光定量PCR与痰培养一致性高(κ=0.757,P<0.001);抗酸染色与痰培养一致性尚可(κ=0.484,P<0.001)。结论:荧光定量PCR检测结核杆菌DNA诊断肺结核的效能较涂片抗酸染色更高,能够提高检测的灵敏度、准确度,降低漏诊、误诊的概率。