HBsAg和抗HBs抗体同时阳性患者病毒学特征分析

目的分析HBsAg和抗HBs抗体同时阳性的HBV感染者病毒学特征及其临床意义。方法总计13 080例HBsAg阳性病例中,HBsAg与抗HBs抗体同时阳性476例,分析资料完整的113例患者(研究组)HBV血清标志物(HBVM)和HBVDNA定量、抗HBc IgM抗体及ALT结果,并与76例普通HBV感染者(对照组)进行比较。结果研究组与对照组在年龄、男女性别比及HBeAg阳性率间差异无统计学意义。研究组HBsAg水平显著低于对照组(P<0.05)。研究组抗HBc IgM抗体阳性率为30.9%,抗HBc IgM抗体阳性患者的血清HBsAg与HBV DNA水平、HBeAg阳性率及ALT水平均显著高于抗HBc IgM抗体阴性患者(P<0.05)。结论 HBsAg与抗HBs抗体同时阳性感染者HBsAg水平显著低于普通感染者,提示患者体内的抗HBs抗体可能仍起到一定作用;约30%患者可能处于HBV急性发作状态,应对其进行随访,观察疾病转归。

一步亲和纯化制备基因工程人源抗HBs单克隆抗体Fab片段

目的：探索亲和纯化人源单克隆抗体片段的简便实用方法。方法：应用自制的抗人免疫球蛋白片段抗体（Ａｎｔｉ－Ｆａｂ）与链球菌蛋白Ｇ亲和胶（Ｇａｍ ｍ ａ Ｂｉｎｄ）交联制备亲和层析柱，用一步法从工程菌培养上清中纯化人源抗ＨＢｓ单克隆Ｆａｂ 片段。经依沙吖啶沉淀、离子交换、分子筛纯化人混合血清提取ＩｇＧ组分，木瓜酶处理后分离、纯化出Ｆａｂ，免疫绵羊制备高效价抗血清。用Ｇａｍ ｍ ａＢｉｎｄ 一步纯化出抗血清中的ＩｇＧ组分，再将该ＩｇＧ经交联剂与Ｇａｍ ｍ ａ Ｂｉｎｄ 交联后制成亲和胶。人源抗ＨＢｓ阳性菌培养上清与亲和胶共育后装柱，ＰＢＳ洗去非特异结合蛋白，再用５ ｍ ｏｌ／Ｌ氯化锂洗脱特异Ｆａｂ。结果：聚丙烯酰胺电泳纯化产物显示，纯化后的抗体片段在电泳中形成单一区带，达到电泳纯；用酶标抗Ｆａｂ 抗体免疫印迹结果证明，电泳显示的单一区带为Ｆａｂ 蛋白区带；抗原特异Ｄｏｔｂｌｏｔ检测表明，该法制备出的Ｆａｂ 保持了抗原结合活性。结论：本实验建立的一步亲和纯化法具操作简便、纯化快速和高效的特点，是人源性单克隆抗体Ｆａｂ

重组人抗HBs-Fab抗体的纯化及结构分析

目的研究重组人抗HBs-Fab抗体的纯化工艺,并对其结构等特性进行分析。方法采用离子交换-分子筛层析法分离纯化由酵母工程菌(GS115/Fab)发酵的重组人抗HBsAg Fab抗体,并经ELISA检测其抗体活性,等电聚焦电泳法检测其等电点(pI),基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测其相对分子质量和肽质量图谱。结果纯化的重组Fab抗体的纯度可达90%以上,经Sephacryl-100进一步层析后,纯度达99%以上,总收率可达80%以上。Fab抗体具有较好的抗体活性,其pI值为7·6,为一碱性蛋白,相对分子质量为50494,比其理论值约多2579·35,经Endoglycosidase H内切酶消化后的相对分子质量为49609,证明Fab的一级结构中有糖基化现象,且分布于Fab抗体的H链和L链上。胰酶酶解肽段中有21个与理论肽段相符,另检测到1对二硫键正确。结论已建立了重组人抗HBs-Fab抗体的稳定的纯化工艺,且Fab抗体的一级结构正确。

用高价人抗HBs在人体内诱导产生抗HBs

本文探讨用外源性人抗HBs在人体通过免疫网络诱导产生自身的抗HBs的可能性。志愿者经多次注射人高价抗HBs(Ab_1)后,体内产生了Ab_2,进而产生出特异性与Ab_1相同的Ab_3;当Ab_3水平升高时,Ab_2水平下降。此结果证实了人体内独特型网络的存在及其活跃的调节功能,表明用于被动免疫的人抗HBs在人体也能通过激活独特型网络产生主动免疫保护作用。此外,本文的结果还提示,注射人抗HBs后,人体内产生的Ab_2可模拟HBsAg,使常规的HBsAg检查出现假阳性结果。

抗HBs对HBsAg和抗HBs共存慢性HBV感染者的临床价值

目的研究抗HBs对HBsAg/抗HBs共存慢性HBV感染者的临床价值。方法对76例样本用化学发光法定量检测HBsAg、抗HBs、HBeAg,用RTPCR法检测HBVDNA,按HBsAg和抗HBs水平分组,分析其分布特征;采用X^2检验比较抗HBs不同水平组HBeAg阳性率和HBVDNA阳性率的差异。结果 76例HBsAg/抗HBs共存慢性HBV感染者中,抗HBs低水平者(<100mIU/mL)7.9%,中等水平者(100～1000mIU/mL)21.1%,高水平(>1000mIU/mL)者未见;抗HBs中等水平组的HBeAg阳性率(93.8%)明显高于抗HBs低水平组HBeAg阳性率(58.3%),抗HBs中等水平组的HBVDNA阳性率(100%)明显高于抗HBs低水平组HBVDNA阳性率(67.9%)。结论在HBsAg/抗HBs共存的慢性HBV感染者中,抗HBs具有重要的辅助诊断价值,表现为:大多数呈低水平且不可能出现高水平抗HBs;抗HBs水平与HBeAg和HBVDNA所反映的HBV复制水平有关。

慢性乙型肝病患者血清抗HBs阳性临床意义再评价

对１０２例抗ＨＢｓ阳性慢性乙型肝病（ＣＨＢ）进行临床分析，发现抗ＨＢｓ与其他血清ＨＢＶ标志物同时检出者以抗ＨＢｓ、抗ＨＢｅ／抗ＨＢｃ同时阳性多见（３２．４％），其次为抗ＨＢｓ与ＨＢＶＤＮＡ或ＨＢｓＡｇ共存（２４．５％，１３．７％），推测这些患者可能有ＨＢＶ前Ｓ／Ｓ区基因变异株感染。资料显示，抗ＨＢｓ阳性ＣＨＢ患者肝功损害程度相对较轻，但外周血淋巴细胞亚群分布及肝纤维化指标测定值，与抗ＨＢｓ阴性对照组相比差异无显著性（Ｐ＞０．０５），表明ＣＨＢ患者血清抗ＨＢｓ阳性并不意味着病情好转或ＨＢＶ被清除，部分病人仍有细胞免疫功能紊乱和活动性纤维化。因此，对ＣＨＢ患者抗ＨＢｓ阳性临床意义重新认识。

新生儿接种乙肝疫苗后抗HBs持续时间的探讨

新生儿接种乙肝疫苗后抗ＨＢｓ持续时间的探讨江苏省南通市卫生防疫站（２２６００６）徐张汉熊海平崔晓燕为了解新生儿接种乙肝疫苗后，机体的免疫应答及抗ＨＢｓ持续时间，我们对南通市城区接种乙肝疫苗０～５岁的部分婴幼儿抽样检测抗ＨＢｓ、ＨＢｓＡｇ和抗ＨＢｃ，结...

HBsAg阳性、抗HBs阴性和抗HBc阳性者乙肝病毒DNA的检测

ＨＢｓＡｇ阳性、抗ＨＢｓ阴性和抗ＨＢｃ阳性者乙肝病毒ＤＮＡ的检测蒋挺英，陈兆军，张腊红，楼德利，及晓英病毒性肝炎血清标志的检测方法，随着免疫学技术的进展而取得迅速发展［１］，其测定原理主要依赖于抗原与抗体间的特异性反应，如ＲＩＡ和ＥＬＩＳＡ。随着分子...

HBsAg与抗HBs共存45例临床分析

目的探讨HBV感染者HBsAg与抗HBs共存模式,与HBV DNA、肝功能的关系。方法选择HBsAg与抗HBs共存的慢性乙型肝炎患者,采用微粒子酶免、荧光偏振及离子捕捉技术测定HBV标志物;采用荧光定量法检测HBV DNA含量;采用AU400全自动生化分析仪检测肝功能;采用直线相关或等级相关分析的方法,分析它们之间的相关性。结果39例患者的HBsAg均数为245.949±83.065(329.014～162.884)S/N,抗HBs均数为34.390±31.815(66.205～2.575)mIU;HBV DNA均数为2.691×106±9.581×106(12.272～6.89)copies/ml。抗HBs分别与HBeAg、HBV DNA之间均P>0.05,即抗HBs与HBeAg、HBV DNA之间没有直线相关关系。在此组病例中,TBIL、ALT、AST、GGT、GLB各项指标分别与HBeAg、HBV DNA之间均P>0.05,即TBIL、ALT、AST、GGT、GLB分别与HBeAg、HBV DNA之间没有直线相关关系。HBeAg与HBV DNA之间的P<0.05,有统计学意义,rs=0.624,即HBeAg与HBV DNA之间为正相关关系。结论在HBsAg与抗HBs共存模式的乙型肝炎患者中,在抗HBs>10.0mIU时,HBsAg仍高滴度存在;此组患者的HBeAg与HBV DNA间仍保持很好的正相关性,且抗HBs的存在并不影响乙型肝炎病毒的大量复制;同时此组患者的肝功能受损情况较轻。

抗HBs阳性HBV感染者彩色多普勒及血清学模式的改变

目的对抗HBs(乙肝表面抗体)阳性HBV(乙型肝炎病毒)感染者作5年临床前瞻性随访,观察病情演变及影像学改变。方法40例抗HBs阳性不同血清学模式的感染者随访5年血清学标志物ABBOTT检测、PCR(聚合酶联反应)定量检测HBVDNA及彩色多普勒超声检查。结果5年后肝脏超声总积分、门静脉主干内径及门静脉平均流速较5年前有所增高,差异有统计学意义;HBsAg(乙肝表面抗原)、抗HBs、HBeAg(乙肝e抗原)阳性组超声积分5年前后有统计学差异;HBVDNA(乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸)高载量组、抗HBs低水平组5年前后门静脉内径、门静脉平均流速有统计学差异。结论血清抗HBs阳性时,并不意味着病情好转,影像学提示病情仍在进展,其中HBsAg、抗HBs、HBeAg均阳性模式,高病毒载量,低抗HBs水平属于抗HBs阳性HBV感染者病情进展快、预后差的危险因素。

分离小鼠腹水中抗HBs/a单克隆抗体杂交瘤细胞制备小鼠腹水

探讨利用从小鼠腹水中分离获得的单克隆抗体杂交瘤细胞 ,大量制备小鼠单克隆抗体腹水的方法 :收集已接种单克隆抗体杂交瘤细胞的小鼠腹水 ,用淋巴细胞分离液离心分离腹水中的杂交瘤细胞 ;再将此分离出的杂交瘤细胞 ,注入其他小鼠腹腔又制得腹水。每只小鼠分离得到的杂交瘤细胞可供 5只小鼠腹腔注射 ,平均每只小鼠产腹水 3.97m l。

重组HBsAg用于ELISA检测抗HBs的研究

用高纯度酵母菌基因工程重组HBsAg替代国产抗HBs ELISA试剂盒中的血源HBsAg作为包被抗原,比双抗原夹心法和BA-双抗原夹心法的敏感性均显著提高。用重组HBsAg包被的双抗原夹心法的敏感度为5IU/L。用于检测乙肝疫苗接种7个月和8个月后的婴儿血清,抗HBs转阳率分别为80.7%和92.6%。上海地区义务献血者检测结果,抗HBs阳性率为33.66%。重组HBsAg的应用有利于提高抗HBs ELISA试剂的质量。

新生儿乙肝疫苗免疫后抗HBs持续时间探讨

对1990～1995年出生并接种过10μg×3针乙肝疫苗的新生儿作血清流行病学调查,免后0～5年6个组304人,抗HBs刚性率分别为90.7％、84.9％、71.6％、70.6％、61.3％和59.1％;P/N平均值各为45.3,36.6、21.6、18.7、14.4和10.8。1例(0.33％)抗HBs阴性、HBsAg、HBeAg和抗HBc阳性者,其母亲HBsAg、HBeAg和抗HBc阳性。对8例抗HBs P/N<10的新生儿加强注射30μg一针乙肝疫苗,有7例(87.5％)抗HBs阳转或增高。

中药益肝丸对豚鼠产生抗HBs的调节作用

对益肝丸调节豚鼠抗HBs的作用进行研究,实验组与正常对照组相比,除能提前产生抗-HBs外,还能提高抗-HBs滴度,说明益肝丸对豚鼠产生抗HBs有显著的促进作用,免疫作用的强弱与所用剂量呈依赖性关系。

赤峰市1～8岁乙肝疫苗接种人群HBsAg携带率及抗HBs免疫水平调查分析

我市自1992年将乙肝疫苗接种纳入计免管理,逐步推广其接种.1996年针对乙肝疫苗接种进展缓慢、接种率低的状况,对乙肝疫苗接种实行专项推进,并在1996/1997和1997/1998年脊灰疫苗强化免疫期间开展了乙肝疫苗突击接种,使全市学龄前儿童总体接种率由33%提高到86.27%,现将乙肝疫苗免疫后人群HBsAg携带率及免疫状况报告如下.

西安市人群乙肝疫苗接种效果和血清抗-HBs阳性率抽样调查分析

目的调查西安市人群血清抗-HBs水平,评估乙肝疫苗接种的效果,为完善乙型肝炎防治策略和健康教育提供科学依据。方法随机在西安市12个社区抽取已接种过乙肝疫苗者1160名,未接种疫苗者840名,采用ELISA法检测血清HBsAb,血清HBsAb≥10 IU/L被判定为阳性,其水平大于100 IU/L为达标。结果在被调查的2000人中,血清HBsAb阳性1578例(78.9%),血清HBsAb达标1407例(74.3%);接种组血清HBsAb阳性率为100.0%,明显高于未接种组的49.8%(P<0.05),血清HBsAb达标率为97.0%,明显高于未接种组的33.6%,组间差异显著(P<0.05)。结论血清HBsAb水平可对乙肝疫苗接种效果进行评价,定期进行监测,有利于HBV感染的监控和控制。目前应用的乙肝疫苗接种很有效。

人源抗-HBs Fab与IFN-α融合蛋白的克隆与原核表达

目的:构建人源单克隆抗-HBs Fab-IFN-α表达载体,探讨该融合蛋白原核表达的可行性及其生物学活性。方法:用PCR体外扩增目的基因IFN-α,单酶点插入已含人源抗-HBs Fab基因的载体,插入点位于轻链基因3′未端。利用酶切、PCR鉴定筛选正确插入的阳性克隆,转化大肠杆菌,挑选单克隆表达、纯化目的蛋自,用ELISA 方法检测融合蛋白IFN-α的抗原性及其抗体亲和性,用WISH细胞检测IFN-α生物学活性。结果:利用插入了人源抗-HBs Fab基因及IFN-α基因的pBAD／gⅢA原核表达系统,成功表达了具生物活性的λ轻链与IFN-α的融合蛋白,其既具有与抗-HBs Fab相近的HBsAg的亲和力,又具有干扰素的活性。结论:λ轻链与IFN-α融合蛋白的成功表达表明,应用原核系统能够同时表达某些特异抗体和其介导的部分生物活性因子,是一种经济、有效的方法,为特异抗体及其介导融合蛋白的制备和临床应用提供了线索。