护肝布祖热颗粒治疗药物性肝损伤的疗效观察

目的探讨护肝布祖热颗粒治疗药物性肝损伤的疗效及安全性。方法选取我院61例抗精神病药致药物性肝损伤患者,随机分为观察组(30例)和对照组(31例)。对照组在常规抗精神病用药治疗的基础上服用甘草酸二铵胶囊,观察组在常规抗精神病用药治疗基础上服用护肝布祖热颗粒,比较两组患者治疗6周后的临床疗效、肝功能及不良反应发生情况。结果观察组治疗6周后,肝功能谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)降低,指标优于对照组(P<0.05)。治疗后两组中医症候积分均有明显改善(P<0.05),且两组患者均未见明显不良反应。结论观察组在降低抗精神病药所致药物性肝损伤患者肝功能ALT、AST指标上优于对照组,起到较好的保肝护肝的作用,可有效帮助患者改善恶心呕吐、口干口苦等临床症状,且用药安全,值得临床推广应用。

护肝布祖热颗粒定性与定量质量控制方法的研究

目的建立护肝布祖热颗粒中各药材的薄层色谱(thin layer chromatography,TLC)鉴别和主要成分的高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)含量测定方法,完善其质量标准,以加强制剂质量的可控性。方法用TLC法分别对制剂中菊苣根和菊苣子中的秦皮乙素、小茴香和茴香根皮中的东莨菪素、芹菜根和芹菜子中的芹菜素以及菟丝子中的金丝桃苷进行鉴别。建立HPLC法测定护肝布祖热颗粒中秦皮乙素的含量。用SunFire C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇(A)-1 mL·L^(-1)磷酸溶液(B),梯度洗脱:0~2 min,5%A;2~5 min,5%~27%A;5~30 min,27%A。柱温为30℃;流速为1 mL·min^(-1);进样体积为10μL;检测波长为349 nm。结果护肝布祖热颗粒中秦皮乙素、东莨菪素、芹菜素和金丝桃苷经TLC鉴别,斑点清晰,分离度较好,缺方阴性对照无干扰;秦皮乙素在0.16~4.00μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r^(2)=0.9997,n=6),精密度、重复性、稳定性、加样回收率的RSD值均小于2.00%,该批次护肝布祖热颗粒中秦皮乙素的平均含量为2.66μg·g^(-1),RSD值为0.79%。结论建立的定性鉴别和含量测定方法操作简单,重复性好,可用于护肝布祖热颗粒的质量控制。

维药护肝布祖热颗粒保肝作用研究进展

护肝布祖热颗粒(HGB)是常用于各种肝脏疾病的经典维药,可补益肝胃、散气止痛、利胆利水。被维吾尔族族人民誉为“肝脏的保护神”。当前有关护肝布祖热颗粒临床应用相关的报道较少见,就护肝布祖热颗粒及其组方单味药材对肝脏的保护作用进行综述,为临床进一步应用于肝损伤引起的各种肝脏疾病的治疗提供参考。

护肝布祖热颗粒对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的治疗作用

为探讨护肝布祖热颗粒对小鼠肝纤维化的保护作用。采用将140只昆明种雄性小鼠随机分为7组的方法:正常组,模型组,给药4个剂量组(0.450、0.901、1.802、3.604 g/kg),益肝灵软胶囊阳性对照组(200 mg/kg)。除正常组外,其余各组均腹腔注射10 ml/kg 0.1%四氯化碳橄榄油混合液,每周2次,连续8周。于造模第5周起,给药组分别灌胃给予相应的受试药物,正常组与模型组灌胃给予等量生理盐水,疗程4周。测定谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯的含量,总蛋白的含量及羟脯氨酸含量;HE和MASSON染色观察肝组织病理学改变及纤维化程度。结果显示:护肝布祖热颗粒各剂量组能显著降低肝纤维化小鼠ALT、AST、TG、Hyp的含量(P<0.05或P<0.01),升高总蛋白水平(P<0.05),抑制小鼠肝组织中肝纤维化增生。由此可知,护肝布祖热颗粒有一定的抗肝纤维化作用,作用机制可能与其抑制胶原蛋白生成作用相关。

维吾尔药方护肝布祖热抗大鼠急性肝损伤作用的研究

目的探究维吾尔药方护肝布祖热对四氯化碳(CCl4)所致大鼠急性肝损伤的保护作用。方法将72只雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照复方鳖甲软肝片组(0.5g/kg)、护肝布祖热低(0.131g/kg)、中(0.263g/kg)、高剂量组(0.526g/kg)灌胃6w,最后一次灌胃后,除空白组外,其余大鼠按2mL/kg灌胃50%CCl4花生油溶液造急性肝损伤模型,正常组灌胃等体积蒸馏水。测定各组大鼠血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),碱性磷酸酶(ALP)水平,总胆红素(TB),白蛋白(ALB),甘油三酯(TG),胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),总蛋白(TP)含量,测定肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和还原性谷胱甘肽(GSH)水平,并观察肝脏组织病理学改变。结果与空白组比较,模型大鼠肝脏脏器指数和脾脏脏器指数升高,差异有统计学意义(P<0.05),护肝布祖热低、中剂量组大鼠睾丸脏器指数降低,差异有统计学意义(P<0.05),模型大鼠血清中AST、ALT、ALP活性升高,差异有统计学意义(P<0.05),同时TB含量升高,差异有统计学意义(P<0.05),模型大鼠血清中HDL-C、LDL-C、TC、TP及ALB含量及ALB/GLB下降,差异有统计学意义(P<0.05),模型大鼠GSH水平升高,SOD水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,护肝布祖热能降低急性肝损伤模型大鼠肝脏和脾脏脏器指数,差异有统计学意义(P<0.05),能降低急性肝损伤大鼠血清中AST、ALT、ALP活性,差异有统计学意义(P<0.05),同时能降低TB含量,差异有统计学意义(P<0.05),能降低模型大鼠球蛋白(GLB)水平,差异有统计学意义(P<0.05),能升高模型大鼠肝脏SOD水平,差异有统计学意义(P<0.05),肝脏病理切片HE染色显示,护肝布祖热给药组能改善模型组急性肝损伤程度。结论维吾尔药方护肝布祖热对CCl4所致大鼠急性肝损伤具有一定保护作用。

护肝布祖热对CCl4诱导人肝星状细胞LX-2活化的作用及机制研究

目的探讨护肝布祖热(HGBZR)抗肝损伤的作用及机制。方法体外培养人肝星状细胞LX-2,采用MTT法检测LX-2细胞存活率以确定四氯化碳(CCl)造模浓度和药物干预浓度。细胞实验分为6组:空白组、模型组、阳性组(水飞蓟素,10μg·mL)及HGBZR低、中、高剂量组(5、10、20μg·mL),除空白组以外,其余各组分别加入终浓度5 mmol·L^(-1)CCl损伤干预24 h,然后再进行药物干预24 h。采用MTT法检测各组细胞存活率;Annexin V/PE双染法检测细胞凋亡率;qRT-PCR法检测各组细胞α-平滑肌动蛋白(SMA)、TIMP-1、PTP1B、转化生长因子(TGF)-β、Smad3、Smad4、Smad7、CHOP、PERK、IRE1、ATF6 mRNA表达情况;Western Blot法检测各组细胞Jak1、Stat3、TGF-β、Smad3、Smad4、Smad7、CHOP、Caspase12、核因子(NF)-κB p65蛋白表达情况。结果随着CCl浓度(5~30 mmol·L^(-1))升高,LX-2细胞存活率逐渐下降,当CCl浓度为5 mmol·L^(-1)时细胞呈现增殖状态,故选择5 mmol·L^(-1)CCl处理24 h作为肝损伤模型复制条件。与模型组比较,HGBZR中、高剂量组的细胞存活率明显降低(P<0.05),细胞早期凋亡率和晚期凋亡率均明显升高(P<0.05);LX-2细胞的α-SMA、TIMP-1、TGF-β、Smad3、Smad4、CHOP、PERK、IRE1、ATF6 mRNA表达水平明显降低(P<0.05),PTP1B、Smad7 mRNA表达水平明显升高(P<0.05);LX-2细胞的Jak1、Stat3、TGF-β、Smad4、CHOP、Caspase12及NF-κB p65(核蛋白)蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Smad7、NF-κB p65(质蛋白)蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Smad3蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。结论HGBZR可能通过调控TGF-β/Smad、Jak/Stat和内质网应激信号通路相关目标基因转录水平及蛋白表达,促进活化LX-2细胞的凋亡,对CCl诱导的化学性肝损伤具有一定保护作用。

恩替卡韦联合护肝布祖热颗粒治疗维吾尔族、汉族慢性乙型肝炎患者的疗效比较

目的比较恩替卡韦联合护肝布祖热颗粒治疗维吾尔族、汉族慢性乙型肝炎患者的临床疗效。方法采取前瞻性、配对研究方法,选取2015年1月至2015年5月新疆和田地区传染病医院就诊的初始治疗的慢性乙型肝炎患者为试验组,维吾尔族:汉族按照4:1配对分组,维吾尔族300例,汉族75例,均接受恩替卡韦联合护肝布祖热颗粒治疗12周,随机抽取20例汉族慢性乙型肝炎患者与80例维吾尔族慢性乙型肝炎患者为对照组,仅使用恩替卡韦治疗12周。观察各组患者病毒学应答率、血清学应答率、生物化学应答率以及不良反应发生率。结果治疗4周、8周、12周病毒完全应答率分别为:试验组中维吾尔族9.0%、20.7%、30.3%,汉族8.0%、21.3%、29.3%,对照组中维吾尔族2.5%、12.5%、21.3%,汉族5.0%、10.0%、20.0%;部分应答率分别为:试验组中维吾尔族48.3%、64.3%、69.3%,汉族46.7%、62.7%、64.0%,对照组中维吾尔族46.3%、62.5%、66.3%,汉族45.0%、65.0%、65.0%;生化学应答率分别为:试验组中维吾尔族88.7%、94.7%、99.3%,汉族85.3%、90.6%、98.6%,对照组中维吾尔族83.8%、87.5%、96.3%,汉族85.0%、90.0%、95.0%;血清学应答率分别为:试验组中维吾尔族31.7%、汉族29.3%、对照组中维吾尔族和汉族均为45.0%。治疗前后各组患者均未见明显脏器功能损伤。结论恩替卡韦联合护肝布祖热颗粒治疗维吾尔族慢性乙型肝炎患者的疗效比治疗汉族慢性乙型肝炎患者的疗效更好。

护肝布祖热胶囊原料药制备工艺研究

目的:研究护肝布祖热胶囊原料药制备工艺。方法:水蒸气蒸馏法提取芹菜子、小茴香中挥发油,在单因素试验的基础上,以挥发油量为指标,正交试验法确定出挥发油提取最佳工艺和挥发油β-CD包合工艺。以秦皮乙素含量和醇提取物得率作为评价指标,正交试验考察乙醇提取复方其余药材的最佳工艺。结果:确定出挥发油提取工艺为药材加入12倍量水,浸泡2 h后提取8 h。挥发油最佳包合工艺为挥发油与β-CD比例为1∶6,包合温度40℃,包合时间1 h。乙醇提取最佳工艺为10倍量50%的乙醇提取3次,每次2 h。结论:优选得到的提取工艺合理、可行,将挥发油包合物、水提取物和乙醇提取物充分混匀作为胶囊原料药。

护肝布祖热颗粒通过抑制凋亡减轻小鼠免疫性肝损伤

目的研究护肝布祖热颗粒治疗刀豆蛋白A(Concanavalin A,ConA)诱导的小鼠急性免疫性肝损伤的作用机制。方法对小鼠尾静脉注射ConA(20 mg·kg^(-1))诱导免疫性肝损伤。小鼠随机分空白组、模型组、1.6 g·kg^(-1)和3.2 g·kg^(-1)护肝布祖热颗粒治疗组、泼尼松龙治疗组。灌胃给药10天,第11天注射ConA,4h后取肝脏组织,苏木精-伊红(H&E)染色观察肝脏病理学变化,采用DCFH-DA探针检测活性氧(ROS)水平。免疫组织化学法测定磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的表达。TUNEL(TdT-mediated dUTP NickEnd Labeling)染色检测肝脏细胞凋亡情况。Western blot测定Bax、Bcl-2的表达。结果经检测发现,ConA造模后的小鼠肝脏出现大量肝细胞死亡和肝脏结构损伤。与模型组相比,1.6 g·kg^(-1)和3.2 g·kg^(-1)护肝布祖热颗粒治疗组ROS表达明显降低;肝脏内p-JNK的表达得到明显下降;肝细胞凋亡得到显著改善。结论以上结果表明护肝布祖热颗粒减轻小鼠免疫性肝损伤的机制为抑制ROS的产生,从而减少JNK激活引起的细胞凋亡。

护肝布祖热颗粒对酒精诱导小鼠急性肝损伤的保护作用和作用机制

目的探讨护肝布祖热颗粒对酒精性小鼠急性肝损伤的保护作用以及对NF-κb p65,Bax, Bcl-2及p-IκBɑ蛋白表达水平的影响。方法将72只昆明小鼠随机分为6组,分别为:空白组,模型组,护肝布祖热颗粒低剂量治疗组(1.25 g·kg^(-1)),护肝布祖热颗粒中剂量治疗组(2.5 g·kg^(-1)),护肝布祖热颗粒高剂量治疗组(5.0 g·kg^(-1))和阳性药复方益肝灵组(0.2 g·kg^(-1)),每组12只。对每组小鼠灌胃给予适当浓度的治疗药物,对于空白组给与生理盐水灌胃处理,持续14 d,在第13天时,对除空白组以外的小鼠给予无水乙醇灌胃处理(12 mL·kg^(-1)),制备酒精性急性肝损伤模型。在第15天时将小鼠称重,对肝组织进行生化指标,肝脏系数以及病理学指标的检测,使用蛋白质免疫印迹法对小鼠肝组织中的NF-κB p65,Bax, Bcl-2及p-IκBɑ蛋白含量进行测定。结果研究表明,护肝布祖热颗粒可明显降低小鼠肝脏系数;抑制肝组织中的肝细胞病变,并且抑制肝组织中ALT和AST活性,MDA以及总胆红素的含量,升高SOD活力值;抑制肝组织中蛋白NF-кB p65,p-IκBɑ,Bax的蛋白表达水平,提升Bcl-2蛋白表达。结论护肝布祖热颗粒对酒精致小鼠急性肝损伤有保护作用,其作用机制可能与抑制炎症和抑制肝细胞凋亡,下调NF-кB p65,p-IκBɑ的蛋白表达以及促凋亡蛋白Bax的表达,上调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。

超高效液相色谱法测定护肝布祖热颗粒中秦皮乙素含量

目的建立测定护肝布祖热颗粒中秦皮乙素含量的超高效液相色谱（UHPLC）法。方法色谱柱为Acquity UPLC BEH C18柱（100 mm×2.1 mm,1.7μm）,流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液梯度洗脱,流速为0.21 m L/min,柱温为30℃,检测波长为349 nm,进样量为1μL。结果秦皮乙素质量浓度在1.06-21.16μg/m L范围内与峰面积线性关系良好（r=0.999 7）;加样回收率为100.65%,RSD为0.97%（n=6）。结论该方法简便、准确,测得结果稳定性、重复性好,可用于该制剂中秦皮乙素含量测定。

维药护肝布祖热醋糖浆治疗脂肪肝20例

方法:20例脂肪肝患者给予护肝布祖热醋糖浆和红宝舒心口服液的合剂。结果:病程45天,观察结果可知,治愈5例(25%);好转12例(60%);未愈3例(15%)总有效率:85%。结论:护肝布祖热醋糖浆治疗脂肪肝疗效满意,值得临床推广。

护肝布祖热颗粒通过EGFR/Ras/PI3K/AKT信号通路改善免疫性肝损伤:一项网络药理学研究和实验验证

护肝布祖热颗粒是维吾尔族传统的护肝方。作者在先前的一项研究中通过调节免疫平衡和抑制IRF1/JNK信号诱导的细胞凋亡,探讨了HBG抗免疫性肝损伤(ILI)的机制。但不是所有的机制都得到了探讨。本研究通过体内实验及网络药理学进一步研究了HBG降低小鼠刀豆球蛋白A(ConA)诱导的ILI的机制。首先,TCMSP、PharmMapper和GeneCards数据库确定了HBG治疗ILI的活性化合物和关键靶点。通过网络药理学和分子对接对确定的关键靶点和相关信号通路进行筛选。ConA诱导的小鼠ILI模型探讨了HBG对抗ILI的疗效和机制;蛋白质印迹分析检测关键蛋白的表达水平;网络药理学鉴定了16个化合物和53个靶标。成分-靶向通路(C-T-P)网络和分子对接表明,EGFR、HRAS、AKT1和PIK3R1是HBG对抗ILI的关键靶点。此外,分子对接显示,前八种活性化合物的对接得分高于阈值。与ConA组相比,HBG显著上调p-EGFR、Ras、p-AKT、p-PI3K、p-BAD和Bcl-2的表达,并下调Bax、裂解caspase 9和3的蛋白水平。HBG通过EGFR/Ras/PI3K/AKT信号通路抑制细胞凋亡,从而减轻ILI。

护肝布祖热颗粒对慢性肾功能不全小鼠的保护作用与物质基础研究

目的采用UPLC-MS/MS技术分析护肝布祖热颗粒(HBG)的化学成分并探究HBG对慢性肾功能不全小鼠(CRF)的治疗作用。方法采用腺嘌呤诱导的CRF小鼠模型,检测小鼠血清中肌酐(Cr)和尿素(BUN)水平;HE染色和MASSON染色检测肾脏组织的增生和损伤等情况;利用部分对照品的色谱和质谱数据,从一级和二级碎片离子推断裂解规律,从而完成对化合物的定性分析。结果与模型组比较,HBG高剂量组具有最好的治疗效果。经HBG治疗后,小鼠血清中Cr和BUN含量均显著降低;HE染色结果表明HBG组对肾损伤的组织学特征明显改善,空泡减少,肾小管扩张现象减少。MASSON染色结果可知HBG组显示肾损伤的组织学特征明显改善,空泡减少,纤维增生减少。利用MassLnx V4.1软件和对照品从HBG甲醇提取物中共解析出83个化合物,其中黄酮类化合物最多。此外还含有脂肪酸类化合物、苯丙素类化合物和其他类型化合物等。结论HBG能够减轻CRF小鼠的肾脏的组织损伤,改善小鼠的肾功能和组织纤维化,对CRF小鼠有一定的保护作用,具有良好的抗CRF作用。

护肝布祖热颗粒提取新工艺及其对小鼠肝损伤保护作用的研究

目的:确定护肝布祖热颗粒提取新工艺,比较不同提取物对小鼠肝损伤的保护作用。方法:通过正交试验确定护肝布祖热颗粒中挥发油的提取工艺、挥发油包合条件、乙醇提取工艺。建立BCG+LPS诱导免疫肝损伤小鼠模型和CCl4致小鼠急性肝损伤模型,检测血清中ALT和AST水平,测定肝匀浆中MDA,SOD含量,取肝脏称重计算肝体指数,确定护肝布祖热颗粒提取物对肝脏损伤的保护作用。结果:挥发油提取工艺为加入12倍量水,浸泡2 h后提取8 h。挥发油的最佳包合工艺为挥发油与β-环糊精(β-CD)1∶6,包合温度40℃,包合时间1 h。乙醇提取的最佳工艺为10倍量50%的乙醇提取3次,每次2 h。与模型组相比,新工艺提取物可明显降低免疫性肝损伤小鼠血清中ALT(P<0.01)和AST(P<0.05)活性,升高肝匀浆SOD活性(P<0.05),可降低CCl4致小鼠急性肝损伤模型中AST活性(P<0.01)。结论:护肝布祖热颗粒提取新工艺可行,用该工艺制备的颗粒对小鼠肝损伤具有保护作用,药效作用优于原工艺提取物。

维药护肝布祖热对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的保护作用

目的:研究维药护肝布祖热对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的保护作用。方法:将大鼠随机分为空白组、模型组、复方鳖甲软肝片组、秋水仙碱组、护肝布祖热0. 131g/kg、0. 263g/kg、0. 526g/kg组。除空白组外,其余各组大鼠给予40%CCl_4-花生油溶液(1mL/kg)制备肝纤维化模型,造模9周。第5周起,给药组大鼠灌胃给以相应的药物,空白组和模型组大鼠给予等体积生理盐水,每天1次,连续治疗5周。实验结束后,计算肝脏、脾脏器指数。测定各组大鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、三酰甘油(TG)、总蛋白(TP)、层黏连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、羟脯氨酸(Hy P)的水平。测定各组大鼠肝组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量,肝脏形态学观察和苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肝组织病理变化。结果:与模型组比较,护肝布祖热0. 131g/kg、0. 263g/kg、0. 526g/kg组呈剂量依赖性地降低大鼠血清中AST、ALT、ALP、TG、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、Hy P含量和肝组织中MDA含量、肝脏指数、脾脏指数,显著升高血清中ALB、TP、HDL含量和肝组织中SOD含量。与空白组比较,模型组大鼠肝组织形态和HE染色显示肝组织发生明显纤维化病。与模型组比较,护肝布祖热0. 263g/kg、0. 526g/kg组可明显减轻CCl_4所致的大鼠肝细胞变性、坏死及肝组织损害程度。结论:护肝布祖热对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠有很好的保护作用。