无子刺梨内生真菌拮抗活性菌株筛选及分子鉴定

为进一步开发利用无子刺梨枝条和叶片中具有生物防治潜力的内生真菌,以2种木腐菌和4种植物病原真菌为靶标,采用五点对峙法筛选对病原真菌具有拮抗活性的内生真菌菌株,并探讨活性菌株的分类地位。结果显示,菌株RSZF 36、RSZF 39和RSYF 34对2种木腐菌的抑制率均达80%以上,菌株RSZF 34和RSZF 36对4种植物病原真菌的抑制率均大于75%,菌株RSZF 36对6种病原菌的抑制率均高于75%,呈现强抑制能力。84株内生真菌中有12株对6种病原菌抑制率均在70%以上,属于活性菌株,其中9株来自枝条,3株来自叶片。对12株活性菌株进行分子生物学鉴定,将其归属为1门2纲3目3科4属,拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)为优势菌属,占活性菌株的41.67%。综上,无子刺梨内生真菌中广泛分布着抑菌活性菌株,且不同内生菌株对不同病原菌的拮抗能力表现出一定的选择性或专一性。本研究结果可为无子刺梨内生真菌资源的开发利用提供理论参考。

金黄色葡萄球菌拮抗细菌的分离鉴定及拮抗活性分析

该研究以自然发酵芥菜为原材料,通过分离筛选,得到9株对金黄色葡萄球菌PJ-1有拮抗活性的细菌,分别用点接法、牛津杯法筛选出拮抗活性较好的细菌,通过形态学观察和分子生物学鉴定确定细菌种类,用乙酸乙酯对拮抗细菌的发酵产物进行萃取,并用气相色谱-质谱(GC-MS)进行成分分析。结果表明,两种方法筛选出3株对金黄色葡萄球菌PJ-1拮抗作用较好的菌株SC-3、SC-6、SC-9,鉴定结果分别为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)、莫海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。菌株SC-3乙酸乙酯粗提物(AE)对菌株PJ-1有较好拮抗作用,其抑菌率达75.04%。通过GC-MS对菌株SC-3的乙酸乙酯粗提物进行成分分析,结果表明,主要物质为10-羟基-2-癸烯酸(41.99%)、1,4-二氮杂2,5-二氧杂-3-异丁基双环[4.3.0]壬烷(8.80%)、3-甲基二氧哌嗪(8.26%)、L-亮氨酸(5.83%)等,其可运用于食源性金黄色葡萄球菌的防治。

西藏地区土壤放线菌种群多样性及拮抗活性研究

从西藏不同海拔、不同气候条件的5个地区采集的10份土样中,使用选择分离培养基、ISP2(Yeast extract-malt extract agar)和高氏一号培养基,通过分散差速离心法(Dispersion and differential centrifugation,DDC)分离得到放线菌156株。根据形态和培养特征将其归入32个类群,并从中选出65个代表菌株进行全细胞壁氨基酸组分分析,结果表明:9株菌为非链霉菌胞壁类型,其余为链霉菌胞壁类型。16SrDNA扩增片段长度多态性(ARDRA)分析得到不同带型,对其序列分析结果表明:分离菌株分属链霉菌属(Streptomyces)和5个稀有放线菌属。同时测试了代表菌株抗耐药细菌和真菌的活性,其中38.5%的菌株具有拮抗活性。

植物叶片内生放线菌的分离、分类与拮抗活性

以四川采集的芍药和北京采集的三叶草的叶片为材料,经表面消毒程序后,分离出内生放线菌15株。通过表观特征比较和BOX-PCR基因指纹图谱分析的方法,将分离出的放线菌归并于12个不同的基因型,其中6个来自芍药,6个来自三叶草。结合16S rRNA基因序列分析可知,分离菌株除C4、C5属于假诺卡氏菌外,其余的13株都是链霉菌;菌株C12与最近模式种的16S rRNA基因序列相似性较低,为96.6%。对分离菌株的抗菌活性实验表明,有11株在一个或一个以上的测试中呈阳性;其中6株对植物致病菌立枯丝核菌有明显抗性,占阳性菌株的55%。

稻曲病菌拮抗菌的筛选及拮抗活性测定

从对稻曲病菌具有拮抗能力的18株芽孢杆菌中选出拮抗作用较强的2个菌株A1、H-51,分别对稻曲病菌进行抑菌率、致畸性、孢子萌发影响以及对水稻促生性试验。结果表明,拮抗菌2个菌株的发酵液对稻曲病菌最大抑制率分别为67.66％和62.87％,对病菌分生孢子的萌发抑制率分别为77.37％和59.74％,但对水稻促生作用不明显。

具有稻瘟病菌拮抗活性的枯草芽孢杆菌的分离与鉴定

采用梯度稀释分离法,从黄河稻区水稻根际土壤中分离出耐高温芽孢菌722株。通过真菌生长抑制试验,获得具有稻瘟病菌拮抗活性的菌株27株。通过形态学观察和生理生化指标鉴定,获得具有稻瘟病菌拮抗活性的枯草芽孢杆菌疑似菌株7株。挑取其中抑菌活性最强的1株进行16SrDNA鉴定,将其16SrDNA基因序列与GenBank中基因序列进行同源性比较,发现与枯草芽孢杆菌16SrDNA有99%同源性,判定此菌为枯草芽孢杆菌,命名为BS501a。

真菌病害拮抗菌的筛选及其对多种植物病原真菌的拮抗活性测定

针对广西境内常见多发的12种植物真菌病害,对柑橘、香蕉、甘蔗、辣椒、药用植物等作物根际土壤进行拮抗菌筛选试验。结果从不同作物根际土壤中共分离得到386株菌株,其中有拮抗作用的34株,平皿拮抗效果较好的16株;再经复筛,得到一株对柑橘炭疽菌有较好抑制效果的拮抗菌Bs55;对峙培养试验表明,Bs55菌株对12种常见病原真菌具有较强的抗菌活性,抑菌率最高达87.7%。拮抗菌Bs55具有拮抗作用强、能大量繁殖、抑菌谱广等特点,是具有较好利用前景的生物防治材料。

水稻白叶枯病菌拮抗细菌B56菌株的拮抗活性研究

B56 菌株经30 ℃振荡培养去菌体,其上清液经2 m ol/L 硫酸铵沉淀获得对水稻白叶枯病菌有拮抗活性的初提液。该初提液具有耐热性,经一定强度热处理后仍保持强的抑菌能力;抑菌效果在pH3～9 之间无明显差异;用胰蛋白酶、蛋白酶K 等处理后拮抗活性无明显变化。利用PhenylSepharose CL-4B疏水色谱柱和DEAE-Sephacel阴离子交换柱分离B56 菌株初提液, 得到一个具有拮抗活性的洗脱峰。该洗脱峰经SDS-PAGE检测发现具有一条分子量约为36 kD 的蛋白带。质粒提取和检测发现B56菌株存在一个稳定的内源质粒。

4-(2-呋喃基)-2-氧代四氢嘧啶-5-羧酸酯的合成及其钙拮抗活性

利用Biginelli反应合成了 1 0个 4 (2 呋喃基 ) 2 氧代 1 ,2 ,3 ,4 四氢嘧啶 5 羧酸酯 ,并利用熔点、质谱、红外光谱和核磁共振氢谱进行表征 ,其中 9个为未见文献报道的新化合物 ,并对部分化合物进行了钙拮抗活性筛选。药理实验结果表明 ,这些化合物具有一定的钙拮抗活性。

桑白皮醇提取物对白三烯拮抗活性的研究(2)

目的对本实验室自行制备的桑白皮醇提取物 (MA)进行了抗白三烯作用的研究。方法通过整体实验 ,研究样品对白三烯D4(LTD4)引起的微血管渗漏 ,LTD4、组胺引起支气管收缩的影响。结果该提取物对LTD4引起豚鼠呼吸道微血管渗漏有明显抑制作用 ,且与选择性白三烯受体拮抗剂普仑司特 (Pranlukast)对呼吸道的作用相类似。同时对白三烯及组胺引起支气管痉挛也具有一定的改善作用 ,显示出与普仑司特不同的作用特点。结论桑白皮醇提取物具有白三烯拮抗活性 ,提示其抗哮喘作用可能与此有关。

5-酰胺基-1H-咪唑并[5,4-b]吡啶类衍生物的合成及其血管紧张素Ⅱ受体拮抗活性研究

在对已上市及正在临床研究阶段的非肽类血管紧张素(A)受体拮抗剂的结构参数和定量构效关系研究的基础上,应用计算机辅助药物设计、生物电子等排及结构拼合等药物设计方法,设计并合成了16个结构全新的5-酰胺基-1H-咪唑并[5,4-b]吡啶类衍生物,其结构经过IR,1HNMR和MS确证.初步生物活性研究结果表明,部分目标化合物对A引起的兔胸主动脉环收缩反应具有显著的拮抗活性.构效关系分析提示,5-酰胺基-1H-咪唑并[5,4-b]吡啶类衍生物具有良好的A受体拮抗活性,N-苯基-1H-吡咯四氮唑基团可作为新型A受体拮抗剂设计的侧链替代结构.

苯并呋喃并香豆素的合成及其钙拮抗活性初步研究

A series of benzofurocoumarin derivatives have been synthesized. Three of them and a simple coumarin have beendatermined for their Ca2+ atagonizing activity. Preliminary results show that all of them possesses potent activity.

米糠蛋白酶解物类阿片拮抗活性的研究(英文)

采用水解度(DH)对酶解米糠蛋白进行了研究,比较六种蛋白酶对米糠可溶性蛋白的水解作用,结果发现胰蛋白酶对米糠可溶性蛋白的水解作用最强,它的最适作用条件为:pH8.0,温度为37℃,[E]/[S]为12.5usp-u/kg。采用离体豚鼠回肠(GPI)检定法测定上述酶解物的类阿片拮抗活性,结果发现胰蛋白酶水解产物具有明显的类阿片拮抗活性,DH为11.9%时,其水解产物(样品A)的类阿片拮抗活性最高。体积排阻高效液相色谱测定它的相对分子质量分布范围在125～24233Da之间。

两株生防芽孢杆菌的分子鉴定及拮抗活性测定

对两株分离自青海年宝玉泽及玛多高寒草甸根围土壤的拮抗菌株GL18和MD1进行鉴定分析。生理生化试验鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌群;16SrDNA分子鉴定表明,菌株GL18、MD1与Ba-cillus methylotrophicus及Bacillus amyloliquefaciens的序列相同(或一致)性均为99%;gyrB分子鉴定表明,菌株GL18、MD1与B.methylotrophicus具有最高序列相同(或一致)性;以两株菌株的16SrDNA及gyrB基因序列与模式菌株序列构建系统发育树,结果表明,两株菌株均与B.methylotrophicus具有更近亲缘关系;综合几种鉴定结果最终将菌株GL18、MD1鉴定为B.methylotrophicus。平板对峙试验表明,菌株GL18和MD1对油菜菌核菌具有显著拮抗活性;油菜离体叶片接种试验表明,菌株对油菜菌核病菌的侵染具有较好的防效。

哌嗪取代二氢吡啶新衍生物的合成及其钙拮抗活性研究

设计并合成了 5个哌嗪取代二氢吡啶新衍生物 ,并用 45Ca跨膜内流动测定方法研究了目标物对大鼠主动脉电压依赖性钙离子通道 (PDC) Ca2 +内流的影响。结果显示 5个化合物对 PDC的阻滞作用强于阳性对照物硝苯吡啶 ,表明它们均具有较强的钙拮抗活性 。

一株西沙群岛野生诺尼内生细菌NG14的分类鉴定及拮抗活性

植物的内生菌与植物生长健康及其功效性成分产生具有一定的相关性。以分离自我国西沙群岛野生诺尼成熟果实的内生细菌菌株NG14为对象,利用形态学观察,生理生化特征鉴定及系统发育学分析,对其菌种的分类地位进行研究,将其鉴定为多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa);并通过选择多种植物及人体病原菌作为生防对象进行拮抗试验,发现了该菌株具有广谱且良好的拮抗病原菌活性。

紫黑吸水链霉菌(Streptomyces violaceoniger-hygroscopicus)发酵代谢产物对几种常见果蔬病原菌的拮抗活性

从南昌地区不同土质中采得约300份土样,用平板分离法筛选得到8株放线菌,经分类鉴定,其形态、培养特性、生理生化特性与紫黑吸水链霉菌形似,命名为紫黑吸水链霉菌Streptomycesviolaceoniger-hygroscopicusS-1、S-2、S-3、S-4、S-5、S-6、S-7和S-8.用其代谢产物对果蔬病原真菌———青椒疫霉病菌Phytophthoracapsici、番茄灰病菌Botrytiscinerea、黄瓜枯萎病菌Fusariumoxysporumf.sp.cucumerinum、黄瓜灰霉病菌BotrytiscinereaPers、苹果黑腥病菌Venturiainaeualis、白菜黑斑病菌Alternariabrassicae等进行拮抗实验研究,结果表明有2株菌株的代谢产物对青椒疫霉病菌有明显的抑制作用,1株对黄瓜枯萎病菌有较好的抑制作用,1株对番茄灰霉病菌有一定的抑制效果.

一株产生抑菌气体内生真菌的拮抗活性评价

HND5是一株分离自臂形草的内生真菌,对其拮抗作用评价结果表明,该菌株能够产生对11株病原真菌有较好拮抗作用的挥发性气体,对峙培养表明其对这些菌株有较好拮抗作用,而其无菌滤液仅对部分病原真菌有一定的拮抗作用,挥发性气体可能是其抑菌作用的主要机制。

4-(2-呋喃基)-2-硫代-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-羧酸酯类化合物的合成及其钙拮抗活性

以硫脲、2-呋喃甲醛和乙酰乙酸酯为原料,利用Biginelli反应合成了6个4-(2-呋喃基)-2-硫代-1,2,3,4-四氢嘧啶-5-羧酸酯类化合物,并利用熔点、质谱、红外光谱和核磁共振氢谱进行表征,其中4个是未见文献报道的新化合物。考察了其中4个目标化合物对家兔离体主动脉条血管收缩的抑制作用。药理实验结果表明,部分目标化合物具有一定的钙拮抗活性。

柑橘内生放线菌CR20的鉴定与拮抗活性

从不同橘园取不同柑橘品种的根部,共分离获得42株内生放线菌,经抑菌试验,筛选到1株对柑橘绿霉病菌和青霉病菌具有较高拮抗活性的放线菌菌株,将其编号为CR20。通过对菌株形态学特征和生理生化特性的观察,并结合对其16S rDNA的序列分析,将菌株CR20初步鉴定为弗吉尼亚链霉菌。