共表达IL-7/CCL19的新抗原反应性T细胞对小鼠肺癌的抗肿瘤研究

背景与目的新抗原反应性T细胞(neoantigen reactive T cell,NRT)具有抑制表达特异性新抗原的肿瘤生长的能力。然而,由于免疫浸润困难和肿瘤微环境的抑制,NRT在实体瘤中的治疗效果有限。本研究针对小鼠肺癌细胞设计出可以同时表达白细胞介素7(interleukin 7,IL-7)和趋化因子19(chemokine C-C motif ligand 19,CCL19)的NRT细胞(7×19 NRT),并对7×19 NRT细胞和常规NRT细胞的抗肿瘤效果差异进行了评估。方法针对小鼠Lewis肺癌细胞(Lewis lung carcinoma,LLC)进行了新一代测序和新抗原预测,制备了RNA疫苗,培养了NRT细胞,构建了编码IL-7和CCL19的逆转录病毒载体,转导NRT细胞并成功表达IL-7和CCL19,成功获得了7×19 NRT,并在小鼠体内外对其抗肿瘤效果进行了评估。结果7×19 NRT细胞通过分泌IL-7和CCL19显著增强T细胞的增殖和侵袭能力,在小鼠肺癌中实现了显著的抑瘤作用,延长了小鼠的生存期。经7×19 NRT治疗后,T细胞浸润肿瘤组织及肿瘤组织坏死显著增加。此外,7×19 NRT治疗与常规NRT治疗均安全。结论通过IL-7和CCL19的表达,NRT细胞的抗实体瘤能力显著增强,这是一种对NRT安全有效的基因修饰。

新抗原在结直肠癌中的研究进展

目前,结直肠癌有多种治疗策略,包括手术、化疗、放疗和靶向治疗。最新的研究发现,新抗原是一类肿瘤特异性抗原,被视为许多癌症免疫治疗的新靶点。基于新抗原的免疫治疗策略包括肿瘤疫苗和过继细胞疗法,其目的是通过增强宿主T细胞对新抗原的免疫反应来消除肿瘤细胞。该文总结了目前发现的结直肠癌新抗原及其免疫原性,并列举了基于新抗原治疗结直肠癌的临床试验,最后对当前研究面临的问题与挑战提出思考。

肿瘤新抗原在肿瘤免疫治疗中的应用研究进展

肿瘤新抗原是由肿瘤特异性突变基因编码产生的抗原,具有高度特异性、显著外源性、突变随机性、分布集落性和基因突变相关性。这类抗原由于未受胸腺的阴性筛选,被T细胞识别为“异类”,不易受免疫耐受机制的影响且具有强免疫原性,是较好的免疫治疗靶点。肿瘤新抗原可用于制备治疗性疫苗,诱导培养靶向性更强的T淋巴细胞,用于肿瘤生存预后和免疫检查点封锁疗法应答的预测,在肿瘤诊断和治疗中的应用前景广阔。本文综述了近年来基于肿瘤新抗原免疫治疗的临床应用研究进展,并展望了未来的相关研究方向。

黑色素瘤个体化治疗策略:基于新抗原的特异性免疫治疗

免疫检查点抑制剂显著改善黑色素瘤患者预后,但原发及继发性耐药使治疗进入瓶颈期。T细胞受体与肿瘤抗原的结合是免疫治疗发挥作用的关键。肿瘤新抗原(neoantigen)由肿瘤特异性蛋白编码突变产生,在肿瘤细胞中特异表达,在正常组织不表达,不受中枢免疫耐受影响,是免疫治疗的理想靶点。靶向肿瘤新抗原的疫苗、过继性细胞回输及抗体药物等能有效加强和扩大肿瘤特异性免疫反应,促进T细胞识别并清除肿瘤,突破当前治疗瓶颈。本文就黑色素瘤新抗原的个性化治疗现状、最新进展、临床困境及未来发展方向进行讨论分析。

小鼠结肠癌新抗原Glud1-V546I及其DC疫苗能够在体内和体外诱导有效的抗肿瘤免疫应答

目的:开发针对结直肠癌(CRC)个性化治疗的新抗原肽疫苗,探讨新抗原肽及其诱导的新抗原反应性T(NRT)细胞治疗CRC的可行性和有效性。方法:提取小鼠结肠癌CT26细胞的DNA和RNA,采用全外显子和转录组测序分析肿瘤基因的突变及表达。通过基于机器学习的新抗原预测体系,筛选、合成具有高免疫原性多肽。用合成的多肽经皮下注射免疫小鼠,通过流式细胞术检测免疫鼠脾细胞的IFN-γ分泌水平,筛选具有强免疫原性多肽。用免疫原性多肽负载小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC)免疫结肠癌建模小鼠,通过ELISPOT检测效应细胞分泌IFN-γ的能力,时间分辨荧光免疫分析法检测免疫鼠脾细胞对相应靶细胞的杀伤力,观察荷瘤小鼠肿瘤生长情况和小鼠存活期。结果:新抗原肽Glud1-V546I具有更强的诱导NRT细胞分泌IFN-γ的能力(P<0.0001)。与野生肽(Glud1-WT)相比,Glud1-V546I在荷瘤鼠体内诱导的NRT细胞有更高的IFN-γ分泌能力(P<0.0001)和细胞毒作用(P<0.0001)。同时,Glud1-V546I能明显抑制小鼠肿瘤生长(P<0.001)并延长荷瘤鼠的生存期(P<0.01)。结论:小鼠CT26细胞的新抗原肽Glud1-V546I能够显著促进小鼠NRT细胞的IFN-γ的分泌,用其制备的DC疫苗在结肠癌荷瘤鼠体内显示出有效的抗肿瘤反应,提示开发基于新抗原的CRC个性化免疫治疗是可能的。

新抗原脉冲树突状细胞疫苗在肿瘤免疫治疗中的作用

新抗原脉冲树突状细胞疫苗(Neo-DCVac)是一种新型肿瘤免疫治疗手段。新抗原是指肿瘤细胞突变产生的具有较强免疫原性和肿瘤特异性的肽段。Neo-DCVac是基于新抗原被树突状细胞摄取、加工后递呈并激活T细胞引发机体免疫反应,从而发挥抗肿瘤作用。在高通量测序基础上发展而来的个体化Neo-DCVac有望成为肿瘤精准免疫治疗的新方向。本文从个体化Neo-DCVac构建、在实体瘤中联合治疗的临床应用、适宜接种人群和目前存在的局限性等方面进行综述,旨在为肿瘤免疫治疗的相关研究提供参考。

肿瘤新抗原疫苗的研究现状与挑战

个性化新抗原疫苗作为癌症免疫治疗的前沿技术,近年来备受关注。新抗原是由肿瘤细胞特异性突变产生的独特抗原,能够被免疫系统识别并激发特异性的抗肿瘤免疫反应。本文综述了肿瘤新抗原疫苗的研究现状,包括新抗原的产生机制和筛选方法、疫苗设计与制作、临床前及临床研究进展,以及当前面临的挑战和未来的发展趋势。我们探讨了新抗原疫苗在个性化治疗中的潜力,以及其在提升癌症患者生存率和生活质量方面的重要作用。同时,本文还总结了目前研究中的关键问题,并提出了可能的解决方案,为未来的研究提供参考。

肿瘤新抗原疫苗的设计与优化策略

随着免疫检查点抑制剂和嵌合抗原受体T细胞疗法在不同适应证中的研究和临床应用,免疫治疗已经彻底改变了多种肿瘤的治疗方式。肿瘤新抗原疫苗作为一种前景广阔的免疫治疗方法,旨在激发针对新抗原的特异性T细胞反应。新抗原具有高度特异性,能够诱导和扩展肿瘤特异性T细胞库,即表位扩展。初步临床研究表明,通过快速、经济、高效的合成生物学技术,新抗原肿瘤疫苗已经展现出强大的肿瘤特异性免疫原性和抗肿瘤活性的初步证据。本文详细探讨了肿瘤新抗原的来源、发现与鉴定,以及新抗原疫苗的分类和免疫接种方案。还总结了肿瘤新抗原疫苗的优化策略,包括对预测算法、疫苗结构、免疫原性、给药方式和递送系统等方面的优化,以及联合佐剂、放化疗、免疫检查点抑制剂等方式,为个性化免疫疗法的发展提供了新的思路。

新抗原肿瘤疫苗临床试验的研究现状与展望

近年来,新抗原肿瘤疫苗的蓬勃发展开启了肿瘤免疫治疗的新篇章。随着各种组学和生物信息学等技术的不断进步,新抗原肿瘤疫苗的研发和临床转化成为了最令人瞩目的研究方向。肿瘤疫苗在实体瘤的临床前研究及相关临床试验均显示出了抗肿瘤潜力,可分为预防性疫苗和治疗性疫苗。本文主要从新抗原肿瘤治疗性疫苗中的信使RNA疫苗、树突状细胞疫苗、合成肽疫苗和病毒载体疫苗等角度,论述2021—2024年国内外新抗原肿瘤疫苗相关的临床试验,并归纳研究现状、存在问题、应对措施和展望未来研究方向。

负载胃癌新抗原肽和CD73抑制剂纳米粒子的中性粒细胞疫苗的制备和抗肿瘤效果评价

目的:制备负载胃癌细胞新抗原肽和CD73抑制剂的中性粒细胞(NEs)疫苗并表征,初步评价其在荷瘤615小鼠中的抗肿瘤效果。方法:通过Percoll梯度密度离心法分离纯化小鼠骨髓来源的NEs。分别制备仅负载胃癌细胞来源新抗原肽疫苗(DP-Ag-MFC-NEs),以及同时负载新抗原肽和CD73抑制剂纳米粒子的联合疫苗(DP-Ag-MFC-NEs+antiCD73+CpG),观察疫苗对荷瘤小鼠的治疗效果。结果:一只10周龄615小鼠可分离纯化到平均约1.5×10^(6)个NEs,细胞活性在95%以上,纯度在90%以上。和对照组相比,DP-Ag-MFC-NEs可显著抑制小鼠皮下肿瘤生长,使部分小鼠痊愈(CR),小鼠淋巴结中CD4^(+)、CD8^(+)阳性细胞比例显著增高(P<0.05)。CR小鼠再次接种MFC胃癌细胞,没有小鼠肿瘤复发。联合疫苗的治疗效果确切,小鼠存活率最高(75%,P=0.038)。结论:负载胃癌细胞来源的新抗原肽和CD73抑制剂的中性粒细胞疫苗对小鼠无明显毒性,可显著抑制肿瘤生长,甚至治愈小鼠。同时,该疫苗可在小鼠体内激活记忆型免疫应答。

基于高通量测序肺腺癌个体化新抗原预测结果分析

肿瘤新抗原(Tumor Neoantigen)又称为肿瘤特异性抗原,该抗原只在肿瘤细胞内表达而在正常细胞内不表达,并能被人白细胞分化抗原(HLA)I类分子识别、结合并递呈到肿瘤细胞表面,激活特异性T淋巴细胞,引发机体抗肿瘤免疫反应[1]。

基于新抗原筛选的肿瘤疫苗改造策略研究进展

近年来,肿瘤新抗原在个体化肿瘤免疫治疗领域颇受关注。利用肿瘤突变基因序列体外合成的新抗原肽制备的肿瘤治疗性疫苗具有更精准个体化治疗和更低脱靶效应等特征,现已成为当前抗肿瘤特异性免疫治疗的研究热点之一。越来越多的研究致力于新抗原的筛选与改造流程,以鉴定出免疫原性更高的新抗原,提高其与抗原提呈细胞表面人类白细胞抗原分子的结合亲和力和稳定性等重要免疫特征,从而进一步增强其免疫应答效率。鉴于新抗原在肿瘤免疫治疗领域中的巨大潜力,本文对新抗原研发中的高效筛选和优化改造研究进展作一综述。

新抗原mRNA肿瘤疫苗在中枢神经系统肿瘤治疗中的研究进展

中枢神经系统肿瘤的发病机制较为复杂,其存在巨大的异质性以及遗传物质不稳定性,呈浸润性生长,且与周围正常脑组织没有清晰的边界,中枢神经系统肿瘤处于脑实质功能区,所以在临床治疗时无法彻底将肿瘤全部清除,应予以有效的辅助治疗方式。现如今,mRNA肿瘤疫苗是肿瘤免疫治疗的主流研究方向之一,其具有获取容易、稳定性较好、更为安全可靠等特点,逐渐成为抗中枢神经系统肿瘤的重要免疫治疗方式。本研究针对新抗原mRNA肿瘤疫苗的研究进展及其在中枢神经系统肿瘤治疗中的研究现状展开综述,为后续的研究方向提供新思路以及新方法。

肿瘤新抗原疫苗研究进展

免疫疗法作为一种变革性的肿瘤治疗手段,使肿瘤免疫学重新焕发活力。肿瘤免疫治疗有多种途径,包括免疫检查点抑制剂、细胞治疗及肿瘤新抗原疫苗等。肿瘤新抗原疫苗是根据患者的基因突变信息设计开发的个性化治疗疫苗,能够特异性清除肿瘤细胞且具有较小的不良反应,在临床上有广阔的应用前景。本文围绕肿瘤新抗原疫苗的概念、开发流程及其临床应用等方面的研究进展进行阐述,并通过关注具有里程碑意义的研究总结新抗原疫苗的优势及当前和未来的挑战。

个体化新抗原特异性T细胞过继免疫:任重道远,砥砺前行

近年来,肿瘤新抗原掀开了个体化免疫治疗的新篇章,作为基于新抗原个体化免疫治疗的重要组成部分,新抗原特异性T细胞的过继输注(ACT)疗法备受瞩目。本文将首先从新抗原特异性T细胞ACT治疗应用策略及临床应用现状介绍新抗原特异性T细胞ACT治疗这一新兴的精准免疫治疗的发展现状,然后从新抗原的预测、新抗原特异性T细胞筛选及扩增等方面系统地总结新抗原T细胞ACT治疗所面临的阻碍和挑战,最后从优化新抗原预测、增加新抗原特异性T细胞数量和多样性、防止新抗原特异性T细胞过度分化或死亡、缩短生产周期和减少生产成本及探索联合治疗方式等五个方面对该领域的未来发展机遇和研究方向进行重点阐述。

个体化新抗原疫苗临床转化的机遇与挑战

肿瘤疫苗(tumor vaccine)作为一种举足轻重的免疫疗法,已日益在恶性肿瘤治疗中显示其重要价值。然而,针对肿瘤相关抗原(tumor associated antigen,TAA)的传统疫苗由于免疫耐受、诱发自身免疫疾病的风险,难以在临床大规模推广。来源于肿瘤体细胞突变、异于正常细胞的新抗原(neoantigen)近年来被认为是理想的疫苗靶点。在测序的基础上发展而来的个体化新抗原疫苗(personalized neoantigen vaccine)特异性靶向新抗原,有望成为精准治疗肿瘤的重要突破口。本文围绕个体化新抗原疫苗的概念、特点、制备流程及临床试验等方面的研究进展进行详细阐述,并对其临床转化面临的机遇与挑战作一展望。

肿瘤新抗原肽诱导献血者PBMC特异反应性T细胞

目的观察异基因献血者来源PBMC(peripheral blood mononuclear cells)是否可被来自于肿瘤患者测序来源的新抗原肽诱导为特异反应性T细胞。方法取健康献血者新鲜外周血白膜层,分离获得PBMC后,粘附获得单核细胞,同时冻存PBL(peripheral blood lymphocytes)。单核细胞以每三天加入细胞因子GM-CSF和IL-4进行细胞诱导培养,7天后收获成熟DC(dendritic cells),24孔铺板后分别装载16条肿瘤新抗原肽,其中13条为本项目组前期研究所得,5 h后加入4~10倍细胞数量已复苏的PBL共培养,每三天加入IL-2,对照为不加抗原肽(DC/PBL),加入PHA(Phytohemagglutinin,植物血凝素)PBL孔作为阳性对照;第14天、第21天分别再行新抗原肽脉冲刺激,第22天留取上清液用ELISA方法测量IFN-γ浓度,剩余细胞用流式细胞仪分析CD3^(+)IFN-γ^(+)/CD8^(+)IFN-γ^(+)T细胞占比。结果发现10/13中的每条多肽至少可诱导3份PBL分化为分泌IFN-γ反应性CD3^(+)或CD8^(+)T细胞,同步ELISA测得上清液中IFN-γ浓度也升高,以上结果具有一定的相关性(CD3^(+)或CD8^(+)T细胞r值分别为0.66、0.58,P<0.05)。结论我们成功地建立了用来自肿瘤患者的肿瘤新抗原肽诱导健康献血者的PBMC分化为肿瘤新抗原肽特异性的T细胞。

抗人补体膜攻击复合物新抗原单克隆抗体的制备及鉴定

目的 研制针对人补体膜攻击复合物 (MAC)新抗原的特异性单克隆抗体。方法 在兔红细胞表面组装人MAC ,分离纯化RBC膜蛋白。以初步纯化的MAC免疫Balb c小鼠 ,取免疫小鼠脾细胞与SP2 0骨髓瘤细胞融合 ,采用免疫斑点杂交的方法分别以纯化的单一补体成分C5、C6、C7、C8、C9和MAC同时进行阴性和阳性筛选。结果 获得了 2株仅与MAC反应而不与各单体成分反应的单克隆抗体。进一步以体外组装的补体终末复合物进行鉴定 ,证实所获单克隆抗体可特异性识别MAC复合物中C9分子暴露出的新抗原。经ELISA法测定 ,2株杂交瘤细胞的培养上清液和腹水效价分别为 1× 1 0 -3 ,1× 1 0 -3和 1× 1 0 -6,1× 1 0 -7;单克隆抗体的重链均属小鼠IgG1亚类 ,轻链均为κ型。结论 获得了 2株特异性识别MAC新抗原的单克隆抗体。

乳腺癌HLA-A2限制性新抗原表位的生物信息学分析

目的:通过生物信息学方法筛选乳腺癌HLA-A2限制性新抗原候选表位,寻找乳腺癌新抗原高频突变位点。方法:利用NCBI、GDC数据库,从已报道的文献与测序数据中寻找乳腺癌单核苷酸变异形成的错义突变位点,通过HLA-A2抗原表位预测网站BIMAS、SYFPEITHI与基于人工神经网络的NetMHC4.0预测新抗原表位,剔除TAP结合力低于Intermediate的表位,按突变频率与预测结果对候选表位进行优先级排序。结果:使用上述方法共筛选出了BTLA、ERBB2、NBPF12等17个相对高频突变基因,共26个新抗原表位,不同表位BIMAS、SYFPEITHI预测结合力有较大差异(P<0.05),高优先级表位如GSTP1(A114V,突变频率5.94%)、BRCA2(N991H,突变频率5.40%)等有望成为新抗原候选位点,但其突变频率较低,难以做到真正的"通用",其作为乳腺癌通用新抗原疫苗表位的可能性较小。结论:乳腺癌共有突变低于其他肿瘤,寻找"通用"乳腺癌新抗原表位较为困难;"个体化"新抗原疫苗也许更有前景,但仍需要进一步研究来证实。

肿瘤新抗原疫苗的研究进展

肿瘤新抗原来自于体细胞突变,在肿瘤中十分普遍,且个体间有很强的异质性。由于肿瘤新抗原只表达于肿瘤细胞中且具有免疫原性,因此可成为精准免疫治疗的特异性靶点。随着二代测序技术与生物信息学的快速发展,我们对肿瘤新抗原的鉴定能力已经大大提升。近年来,临床前以及早期临床研究初步表明,基于肿瘤新抗原制备的疫苗在恶性黑色素瘤、乳腺癌、结肠癌、肉瘤等肿瘤中可以激活CD8+和CD4+T细胞来治疗肿瘤。目前主要的新抗原疫苗类型包括合成长多肽疫苗、RNA疫苗以及树突细胞疫苗,这些疫苗皆具有良好的安全性。但是,新抗原的筛选与疫苗制备尚处于探索阶段,尚未有标准的流程与参数;不同类型肿瘤抗原具有异质性,在肿瘤发生和治疗过程中,随着肿瘤细胞的进化肿瘤抗原也会发生变化以及免疫逃逸。因此,有效的新抗原的鉴定、疫苗的开发以及与其他治疗策略的联合应用是未来重要的研究方向。