祛瘀生新方对轻中度溃疡性结肠炎小鼠胆汁酸代谢的影响

目的观察祛瘀生新方对轻中度溃疡性结肠炎小鼠粪便中胆汁酸谱的影响,探讨其治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法取22只C57BL/6J小鼠,随机选择5只作为空白组,其余小鼠采用自由饮用4%葡聚糖硫酸钠溶液方法建立轻中度溃疡性结肠炎模型。将造模成功小鼠随机分为模型组、祛瘀生新方组与美沙拉秦组,每组5只,祛瘀生新方组与美沙拉秦组分别予相应药物灌胃,空白组和模型组给予蒸馏水灌胃,均1次/d,连续14 d。观察各组小鼠活动、饮食、排便等情况;末次灌胃结束后采用靶向代谢组学技术分析小鼠粪便胆汁酸代谢情况,HE染色观察结肠组织病理形态。结果模型组小鼠精神萎靡,体重减轻,毛发减少,便血,解稀便;结肠组织中有大量炎性细胞及中性粒细胞浸润。祛瘀生新方组及美沙拉嗪组小鼠灌胃结束时活动灵敏,毛发、饮食及排便无明显异常;结肠组织中有少许炎性细胞及中性粒细胞浸润。与空白组比较,模型组中熊脱氧胆酸(UDCA)、石胆酸(LCA)、牛磺-α-鼠胆酸(T-α-MCA)、牛磺猪胆酸(THCA)、甘氨猪胆酸(GHCA)、熊果胆酸(UCA)、猪胆酸(HCA)、脱氧胆酸(DCA)、α-鼠胆酸(α-MCA)、牛磺鹅脱氧胆酸(TCDCA)、牛磺脱氧胆酸(TDCA)、甘氨猪脱氧胆酸(GHDCA)、猪去氧胆酸(HDCA)、甘氨石胆酸(GLCA)、牛磺胆酸(TCA)、胆酸(CA)含量均明显降低(P均<0.05),鹅脱氧胆酸(CDCA)、β-鼠胆酸(β-MCA)、甘氨胆酸(GCA)、脱氢胆酸(dehydro-CA)含量均明显升高(P均<0.05);与模型组比较,祛瘀生新方组和美沙拉嗪组UDCA、LCA、T-α-MCA、THCA、GHCA、UCA、α-MCA、HCA、DCA、TCDCA、TDCA、GHDCA、HDCA、GLCA、TCA、CA含量均明显升高(P均<0.05),CDCA、β-MCA、GCA、dehydeo-CA含量均明显降低(P均<0.05)。结论轻中度溃疡性结肠炎小鼠粪便中胆汁酸谱发生明显改变,祛瘀生新方可通过调节粪便中胆汁酸谱而减轻肠道炎症及症状。

新方颠倒散体外抑制痤疮丙酸杆菌实验研究及皮肤毒性测试

目的:研究不同配比新方颠倒散水提物溶液对痤疮丙酸杆菌体外的抑菌作用。方法:配制不同组分新方颠倒散水提物溶液A、C、E、G、I、K,颠倒散水提物溶液(M)为阳性对照,另设阴性对照、空白对照;采用37℃厌氧培养法对痤疮丙酸杆菌进行培养,观察各溶液体外的抑菌效果;并采用单次限量法,取A进行大鼠急性经皮毒性试验。结果:培养48 h后,空白对照无菌落,其余均见菌落,各新方颠倒散水提物溶液分别与阴性对照比较,均有显著统计学意义(P<0.05),与阳性对照比较均无显著统计学意义(P>0.05)。大鼠急性经皮毒性试验:A组、对照组、M组反应平均值分别为0、0、1.2,生理情况正常。结论:不同配比新方颠倒散水提物溶液体外对痤疮丙酸杆菌均有抑制作用,相互比较以及与颠倒散比较均无显著差异,且新方颠倒散溶液无皮肤刺激及中毒反应。

白术黄芪新方镇痛抗炎作用和对胃肠运动影响的研究

目的:观察白术黄芪新方抗炎、镇痛作用和对胃肠运动的影响。方法:通过小鼠冰乙酸扭体试验、小鼠二甲苯耳廓致急性炎试验、小鼠包埋滤纸所致慢性肉芽肿试验、小鼠粪便炭末排出试验和番泻叶致小鼠腹泻试验观察该方的药效作用。结果:白术黄芪新方能减少冰乙酸所致小鼠扭体次数;减轻二甲苯所致的耳廓肿胀;能减轻小鼠包埋滤纸所致的慢性肉芽肿;减慢正常小鼠粪便炭末排出,但对小鼠番泻叶致泻无明显作用。结论:白术黄芪新方有抗炎、镇痛和减慢胃肠运动的作用。

补肾化瘀生新方优化缺血缺氧微环境对间充质干细胞旁分泌效应及分化率的影响

目的观察补肾化瘀生新方优化缺血缺氧微环境对间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)旁分泌效应调控作用,探讨其对MSCs增值分化能力的影响。方法采用无血清的1640培养基和低氧细胞工作站培养24 h建立缺血缺氧微环境细胞体外模型。随机分为:正常组:以完全培养基培养(L-DMEM+10%FBS);对照组:加入生理盐水血清培养基,放入低氧细胞工作站培养24 h;模型组:以完全培养基培养(L-DMEM+10%FBS),低氧细胞工作站培养24 h;治疗组:加入含有补肾化瘀生新方含药血清培养基,低氧细胞工作站培养24 h。采用液相色谱-串联质谱技术分析鉴定补肾化瘀生新方大鼠体内吸收入血成分。采用流式细胞仪检测MSCs细胞周期、ELISA法检测VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10和TNF-α含量变化;免疫细胞化学染色检测NF-κBp65的细胞核转位;实时荧光PCR技术检测microRNA-124a-mRNA表达情况;Western blot检测microRNA-124a蛋白表达;免疫荧光技术检测MSCs向内皮细胞、神经元、神经胶质分化情况。结果与正常组比较,模型组S期细胞数增多,G0/G1期明显降低(P<0.05),与模型组比较,治疗组、对照组S期细胞数减少,G0/G1期比例逐渐升高(P<0.05),与对照组相比,治疗组S期细胞数减少,G0/G1期比例逐渐升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10降低明显(P<0.05),与模型组比较,治疗组VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10增多明显(P<0.05),与治疗组相比,对照组VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10减少(P<0.05)。随缺血缺氧时间延长VEGF、bFGF、SDF-1、IL-10呈减少动态变化。与正常组比较,模型组NF-κBp65、TNF-α、microRNA-124a-mRNA和蛋白表达增多明显(P<0.05),与模型组比较,治疗组NF-κBp65、TNF-α、microRNA-124a-mRNA和蛋白表达降低明显(P<0.05),与治疗组相比,对照组NF-κBp65、TNF-α、microRNA-124a-mRNA和蛋白表达增多(P<0.05)。随缺血缺氧时间延长NF-κBp65、TNF-α、microRNA-124a-mRNA和蛋白表达呈升高动态变化。与正常组比较,模型组GFAP、Ⅲβ-Tubulin、VWF阳性细胞数增多明显(P<0.05),与模型组比较,治疗组GFAP、Ⅲβ-Tubulin、VWF阳性细胞数增多明显(P<0.05),与治疗组相比,对照组GFAP、Ⅲβ-Tubulin、VWF阳性细胞数降低明显(P<0.05)。随缺血缺氧时间延长GFAP、Ⅲβ-Tubulin、VWF阳性细胞数呈升高动态变化。补肾化瘀生新方动物含药血清共分析鉴定出阿魏酸、黄芩苷、梓醇、地黄苦苷、甲基异茜草素、大黄素甲醚6个为主要吸收入血成分。结论补肾化瘀生新方通过优化缺血缺氧微环境调控MSCs旁分泌效应可以提高MSCs增殖、分化能力,其体内吸收入血成分可能是参与此过程发挥药效的物质基础。

更年Ⅰ号新方治疗更年期综合征120例

从120例更年期综合征患者的临床观察中发现,更年期阴虚心火旺者尿儿茶酚胺增高,阴虚肝火旺者尿17-羟皮质类固醇增高,阴虚心肝火均旺者两者均增高,籍此证实阴虚心火旺、肝火旺、心肝火旺的类型特点及其在阴虚前提下火旺再分证的辨治需要。应用更年Ⅰ号新方治疗后,在改善症状的同时,以上各项指标均有所下降,临床治疗总有效率达89.2％。通过心理、社会因素的调查发现,阴虚天癸竭绝的过程加快或波动剧烈,或神经质的个性特征,是致病的前提,但心火、肝火所致心主神明、心主血脉的功能失调是产生综合征的主要原因,故在治疗时必须辅以心理治疗。

基于中医传承辅助平台对张景岳《新方八阵》用药规律分析

目的：分析和挖掘张景岳《新方八阵》用药规律和组方特点。方法：应用中医传承辅助平台软件V2.5,构建新方八阵的方剂数据库,采用频次分析、关联规则、复杂系统熵聚类及无监督的熵层次聚类等数据挖掘方法进行数据分析。结果：通过对186首方剂分析,涉及中药208味,使用频次≥10次的药物共21味,进而演化到3-4味的核心药物组合26个,形成新处方13个。结论：张景岳擅长应用熟地、当归和人参等药物,治疗上以温补思想为主,重视阴阳互济、气血互生。

基于数据挖掘的备选新处方“成分-疾病-靶标-通路”预测分析——以抗抑郁新方发现为例

目的:预测抗抑郁新方(香蒲解郁方)治疗抑郁症的分子作用机制。方法:使用整合药理学平台V1. 0对通过文本挖掘获取的香蒲解郁方的中药成分及抑郁症疾病靶标数据进行靶标预测、蛋白质-蛋白质相互作用信息(PPI)、基因功能和通路富集等分析,构建香蒲解郁方治疗抑郁症疾病'成分-靶标-通路'多维网络并可视化展示,筛选核心成分、关键标靶与主要通路。结果:预测分析发现香蒲解郁方中有219个成分和1925个靶标与抑郁症相关,其中姜黄酮、姜黄素、挥发油、α-细辛醚,β-细辛醚等为发挥抗抑郁作用的主要成分,五羟色胺受体(HTR2C)、δ型阿片受体(OPRD1)、μ型阿片受体(OPRM1)、κ型阿片受体(OPRK1)等为候选关键靶标,神经系统、神经网络信号通路、趋化因子信号通路等为主要通路。结论:通过整合药理学分析预测发现抗抑郁新处方-香蒲解郁方抗抑郁药化成分主要来自郁金、石菖蒲、香附、生姜、合欢皮,对神经和内分泌系统进行网络状综合调节为其主要作用机制。

补肾化瘀生新方对缺血缺氧微环境下骨髓间充质干细胞生存率及凋亡率的影响

目的:观察补肾化瘀生新方对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)在缺血缺氧微环境下生存率、凋亡率、活性氧水平的影响。方法:采用无血清的DMEM(dulbecco's modified eagle medium)培养基及低氧工作站,观察6 h、12 h、24 h、36 h、40 h、44 h、48 h、60 h 8个时间点各组BMSCs的生存率、凋亡率和氧化应激水平。CCK-8法检测细胞生存率(cell viability rate),流式细胞仪检测BMSCs凋亡率及细胞内ROS(reactive oxygen species)含量变化,倒置荧光显微镜观察胞内ROS荧光强度改变,以探究BMSCs缺血缺氧模型成功最佳时间点。继以补肾化瘀生新方含药血清干预BMSCs,测定其对缺血缺氧微环境的调控及细胞生存率、凋亡率的影响。结果:与正常组比较,缺血缺氧组随着时间增加生存率降低,凋亡率升高,40 h时BMSCs生存率最低、凋亡率最高(P<0.05),胞内ROS荧光表达增强,60 h细胞大量死亡(P<0.05);与缺血缺氧组比较,补肾化瘀生新方组BMSCs生存率明显提升,细胞凋亡率和胞内ROS表达下降(P<0.05)。结论:BMSCs缺血缺氧模型建立成功的最佳时间点为40 h,补肾化瘀生新方可提高BMSCs在缺血缺氧微环境下的生存率,延缓细胞凋亡进程。

新方桂枝芍药汤治疗肠易激综合征临床研究

目的观察新方桂枝芍药汤治疗肠易激综合征(IB)的临床疗效。方法将患者S149例随机分为西药组、中药对照组和中药治疗组,在接受心理治疗的同时,西药组给予多虑平、丽珠肠乐胶囊、匹维溴胺治疗,中药对照组给予痛泻要方和/或麻子仁丸原方煎剂治疗,中药治疗组给予新方桂枝芍药汤治疗;疗程45d。结果西药组及中药对照组疗效相近,而中药治疗组的疗效显著优于前两组。结论新方桂枝芍药汤治疗IBS效果显著。

张景岳《新方八阵》之锡灰、脑荷药物考

对张景岳《新方八阵》中的几味在中药材标准和权威药学典籍中没有明确记载的药物进行了引据考证,以便为其以后的研究提供文献依据;通过考证历代本草对"锡灰""、脑荷"的记载,并对其加以比较、分析后,认为《新方八阵》所记载的中药"锡灰"为铅灰,"脑荷"应该是指苏州龙脑薄荷。

基于中医传承辅助系统的现代中医文献治疗抑郁症新方发现研究

目的:提炼中医药治疗抑郁症的备选新方及药物。方法:检索CBM、CNKI、VIP、Wanfang等国内中文数据库中医药治疗抑郁症的内服方药,运用中医传承辅助系统(V2.0)软件进行逐一录入并进行数据处理,对筛选出治疗抑郁症的方剂进行用药频次、药物组合及备选新方等分析。结果:筛选出符合要求的116首治疗抑郁症的处方,确定了处方中药物出现的频次、2味新方核心药物与2首备选新方。结论:治疗抑郁症应以疏肝解郁、健脾养心为主要治法,所获备选处方主要适用于治疗肝气郁结型与肝郁脾虚型抑郁症,其具体疗效仍需经临床实践加以验证。

右归饮新方活性部位及其配伍的筛选

目的:明确右归饮新方中的各味药材的主要活性部位及最佳配伍。方法:以大鼠成骨细胞样细胞为模型细胞,考察各味药材不同提取部位及其配伍对成骨细胞增殖及分化的影响。结果:续断、淫羊藿及蛇床子的正丁醇部位的配伍具有最为显著的成骨细胞增殖活性。结论:右归饮新方活性部位及其配伍的筛选为后续创新中药的开发奠定基础。

张景岳《新方八阵》运用干姜之规律

明代杰出医家张景岳,其善用熟地多为人知,但他巧用干姜,则未被普遍注意。从炮制、配伍等方面探讨景岳运用干姜的规律,发现景岳不单熟谙干姜的药性,并能在组方上灵活配伍以达到临床不同需要。在用量与使用禁忌上,景岳用干姜以温阳散寒,在汤剂一般用3～9g,阴虚内热多汗、热毒较盛者慎用干姜。景岳在《新方八阵》中广泛地运用干姜,他通过炮制和配伍,使干姜或发散外寒,或温通里寒,或上或下,随宜而用,体现了景岳用药之娴熟。

基于WRI曲线图的截瘫FES行走稳定性评估新方法

本研究介绍了利用步行器倾翻指数 (WRI)曲线图来评估截瘫功能性电刺激 (FES)行走稳定性的新方法。其主要构件是一套基于标准步行器的测试系统 ,该系统可以实时获得三维上肢支撑力数据 ,进而转化成行走过程中的纵向和侧向WRI曲线图来显示量化的行走稳定性水平。有关实验校准和临床测试结果均表明新方法在稳定性评估方面有很好的临床应用前景 ,并有望在截瘫FES设计及康复训练中发挥作用。

补肾化瘀生新方对不同代次骨髓间充质干细胞增殖、凋亡影响的研究

目的:探讨补肾化瘀生新方对不同代次骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖、凋亡的影响。方法:对BMSCs进行提取纯化、分选及培养,第3代细胞随机分为正常组,加入杜氏培养液(Dulbecco’s modified eagle medium,DMEM);补肾化瘀生新组,加入补肾化瘀生新含药血清;生理盐水组,加入生理盐水含药血清。MTT法检测各组不同时间点和不同代次BMSCs细胞活性、生长曲线和群体倍增时间;比色法检测β-半乳糖苷酶活性变化。流式细胞术检测不同时间点和不同代次羧基荧光素乙酰乙酸(Carboxy-fluorescein diacetate succinimidyl ester,CFDA-SE)标记、BMSCs增殖率和细胞周期变化;实时荧光PCR技术检测不同代次BMSCs端粒酶活性表达情况。结果:与正常组比较,生理盐水组β-半乳糖苷酶活性、24 h、48 h、72 h时间点不同代次BMSCs增殖率和群体倍增时间、端粒酶活性、不同代次G0/G1期差异无统计学意义(P> 0.05);与生理盐水组比较,补肾化瘀生新组不同代β-半乳糖苷酶活性、端粒酶活性降低,24 h、48 h、72 h时间点不同代次BMSCs增殖率、群体倍增时间、不同代次G0/G1期升高(P <0.05)。结论:补肾化瘀生新方延缓细胞衰老作用可能与降低β-半乳糖苷酶活性、激活端粒酶活性、提高BMSCs增殖分化能力有关。