猪圆环病毒2型和3型检测方法建立及初步应用

为快速检测并鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病毒。本文研究参考GenBank中PCV2和PCV3高度保守片段分别设计了探针引物,成功建立了一种双重TaqMan荧光定量检测方法。结果显示:该方法特异性好,可鉴别PCV2、PCV3与其他猪病病毒;PCV2最低检测下限为1.00×10^(1)copies/μL,PCV3最低检测下限为1.00×10^(0)copies/μL;重复性高,批内、批间的变异系数分别为0.01%~0.02%和0.02%~0.05%;本研究采用建立的方法与商品试剂盒同步检测猪只样品440份,PCV2样品符合率为97.47%,PCV3样品符合率为96.85%;测序结果显示,PCV2均为2d亚型,PCV3均为3c亚型。结果表明,建立的双重TaqMan荧光定量检测方法具有良好的特异性、敏感性且快速、准确,节约成本,可为PCV2和PCV3的监测与防控提供技术支撑。

Waters ACQUITY UPC^2的应用进展和方法建立

Waters超高效合相色谱(Ultra Performance Convergence Chromatography,UPC2)作为近几年热门研究的分析仪器和热门话题,结合了超临界流体色谱(SFC)和超高效液相色谱(UPLC)的技术优点,具有分离效果好,分析时间大大缩短,溶剂绿色环保,成本低等优点,在生物医药,石油化工,食品行业使用广泛。因此对于UPC2的分析方法建立也突显重要。本文在对UPC2原理及应用进展简述的同时,对此仪器的分析方法建立做了详细的总结。

白色念珠菌形态学分型的实验室方法建立及临床应用

随着激素、免疫抑制剂及大量新的广谱抗生素的临床应用,导致酵母样真菌的感染逐年增加,已成为院内感染的常见菌.白色念珠菌是临床分离出酵母样真菌中最多的一种,占念珠菌感染的44.2%～67.2%[1].对常见菌进行分型,是医院感染及流行病学监控的重要内容.为此我们建立并应用简便的形态学分型方法对临床分离的162株白色念珠菌进行了分型,现将结果报道如下.

用系统科学方法建立合理人才培育体系

在社会主义市场经济深入发展的形势下,如何加速培养和造就社会主义建设者和接班人,是当前高等教育工作者面临的重要课题。从大学生的思想状况调查中发现,当代大学生的思想道德状况总体是好的,是积极、健康、向上的。绝大多数学生认为必须坚持四项基本原则,并表示要争取加入中国共产党,有报效祖国、回报社会的志向。但由于某些社会不良风气的侵蚀影响,大学生的思想道德状况也出现了一些新的情况。 1.在人生价值观上,一些学生用市场经济观念完全取代道德价值观念;拜金主义、享乐主义不同程度上存在;部分大学生的思想倾向于轻奉献重索取,轻理想重名利。

熔解曲线分析检测临床常见5种革兰阴性菌的方法建立

目的:构建熔解曲线分析法检测5种临床常见革兰阴性病原菌。方法:选取临床最常见的大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽单胞菌作为目标检测菌种。对目标菌种设计种特异性引物。构建熔解曲线法,并进行特异性验证。检测不同拷贝浓度稀释液进行敏感性分析。检测临床分离目标菌各20株,进行稳定性评价。结果:(1)经预实验后,对Tm值差异较大的铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌三对引物同时进行熔解曲线分析,对大肠埃希菌、嗜麦芽单胞菌两对引物同时进行熔解曲线分析。(2)特异性验证显示,目标菌种均有特异性的熔解曲线,各自的Tm值依次为88.37、86.32、80.86和87.56、86.32℃。(3)可检测到的拷贝浓度稀释液约为3.0×103copies/mL。(4)稳定性评价的结果显示,Tm值变化范围窄小,差异有统计学意义。结论:所构建的熔解曲线法具有较好的特异性、敏感性和稳定性。

鸡胚股骨体外培养方法建立和应用

鸡胚股骨体外培养方法建立和应用王凡羊惠君周德明李瑞祥（华西医科大学人体解剖学教研室）微量元素与人体代谢骨器官培养是研究骨的生长发育以及影响机理的一个重要方法；也为研究骨组织和软骨组织细胞与基质大分子之间关系提供十分便利的手段。将孵育１４ｄ的纯种来亨鸡...

基于尿酸酶-钯纳米粒子的比色分析定量检测血清尿酸的方法建立及初步应用评价

目的建立基于尿酸酶-钯纳米粒子(MCA-Pd NPs)的比色分析法进行临床血清尿酸的定量检测。方法应用比色分析方法检测吸光度值,通过专一性试验、线性范围确定、重复性试验和回收试验等对建立的检测体系进行方法学评价,并检测40份不同尿酸水平的临床血清标本,与生化分析仪结果进行比较。结果检测体系对尿酸具有较高的特异度和选择性;在50.0~1000.0μmol/L浓度范围内线性关系良好;批内和批间精密度分别为2.86%~3.51%和5.12%~7.63%;回收率为97.0%~104.0%;40份临床血清标本检测结果与生化分析仪检测结果线性相关回归方程为Y_(生化分析仪)=0.9964X_(新建方法)-0.4754,r=0.9958。结论所建立的方法对尿酸选择性高,线性范围宽,重复性好,准确度高,能够满足临床分析要求,与临床常规测定血清尿酸的结果具有较好的可比性。

熔解曲线分析检测临床常见4种革兰阳性菌的方法建立

目的构建熔解曲线分析法同时检测4种临床常见革兰阳性病原菌，为临床感染性疾病的诊疗提供快速、敏感的分子生物学检测信息。方法选取临床最常见的革兰阳性病原菌：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌做为本课题研究的检测菌种。根据检测菌种的不同，分别选取不同菌种的特异性靶序列，设计种特异性引物。对种特异性引物分别用标准菌株、临床分离目标菌株、临床分离非目标菌株、非细菌性病原体以及人源基因组DNA进行常规PCR扩增以及扩增产物测序，验证引物的特异性。对目标菌种引物进行荧光PCR预实验，筛选Tm值差异较大的多对引物，进行熔解曲线分析法实验，并对熔解曲线法的反应条件与反应体系进行优化。对优化后的熔解曲线法进行特异性验证。通过检洲加入人血液中的不同细菌浓度对该方法进行敏感性分析。应用所构建的方法分别检测临床分离目标菌种各20株，分析每种菌种的熔解曲线图，熔点温度（Tm值）及其标准差（SD）的变化，评价所构建方法的稳定性。结果①对所设计的种特异性引物经常规PCR扩增产物电泳分析显示，目标菌株均有目的特异性扩增产物，非目标菌株、非细菌性病原体以及人源基因组DNA未出现特片性电泳条带。特异性扩增产物测序所得序列比对分析显示与目的菌种序列相符。②对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌的4对引物同时进行熔解曲线分析和mecA基因熔解曲线分析的条什优化结果：预变性温度94℃、120s，变性温度94℃、20s：退火温度53℃、12s：延伸温度68℃、13s；扩增循环数为40个循环，熔解曲线分析温度75℃～95℃。最佳的引物浓度为300nmol／L。③所建立的方法经特异性分析显示，上述4种目标菌种均有特异性熔解曲线，Tm值依次为81．02℃；80．32℃；82．37℃；83．10℃，峰高（cm）／峰宽（cm）均大于2．6，以此为典型的熔解曲线判断标准，则非目标菌、非细菌性病原体以及人源基因组DNA分析未见典型的熔解曲线。④方法的敏感性分析显示，上述4种目标菌和mecA基因可检测到的血液细菌浓度依次为：550、520、470、500与203CFU／mL。⑤对上述4菌和MRSA的临床分离菌各20株进行检测，结果显示，其平均Tm值依次为（80．96±0．688）℃，（80.20±0．729）℃，（82．42±0．599）℃，（83．20±0．713）℃和（80．11±0．15）℃。结论本研究所设计的针对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌和HmecA基因检测引物具有较好的菌种特异性，可用于相应病原菌熔解曲线分析法的建屯；所构建的熔解曲线法具有较好的特异性、敏感性和稳定性；并具有快速、简便、成本低廉的特点，可用于临床样本的检测；但葡萄球菌属内和肠球菌属内的Tm值较接近，必要时，可进一步用单对引物检测分析以鉴定到种。

用模糊数学方法建立高校党政领导干部素质评价数学模型

一个高等院校的发展快慢与该校管理者的水平有很大关系。在改革开放和发展社会主义市场经济的今天，如何评价、选拔优秀干部是高校组织、人事部门的重要课题。而选拔、任用干部的第一步工作就是评价。评价干部的因素很多，因素间有主次、轻重之分，评价的主体和客体也具有...

夹心酶联免疫吸附试验检测人表皮生长因子的方法建立及其应用研究

目的:建立临床适用的表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)酶联免疫检测方法,探讨EGF在临床常见肿瘤患者血清中的含量变化规律。方法:采用EGF单抗包被酶标板,兔抗EGF多抗为二抗,以辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG作为酶标抗体建立夹心法ELISA检测临床常见肿瘤患者及健康体检人群的血清EGF含量。结果:建立的EGF酶联免疫吸附法最小检测限达15.6ng/L,批内精密度为8.7%,批间精密度为11.6%,平均回收率为94.7%,符合临床检测要求。血清EGF含量在31名正常人为(1.305±0.382)ng/mL,24名乳腺癌病人术前值为(0.729±0.347)ng/mL,术后为(0.711±0.332)ng/mL,17名结直肠癌病人术前为(0.678±0.311)ng/mL,术后为(0.658±0.298)ng/mL,19名胃癌病人术前为(0.598±0.224)ng/mL,术后为(0.614±0.257)ng/mL。各肿瘤组患者血清EGF水平较健康对照组明显降低(P<0.01)。结论:建立了适用于临床检测的EGF酶联免疫检测方法,肿瘤患者血清中EGF含量较健康对照组明显下降,该检测方法的建立为进一步探讨肿瘤的发病机制提供了有效的手段。

用系统方法建立我国统计信息体系

随着国家经济体制改革的深入发展,我国统计改革无论在理论上,还是在实际统计工作上都有新进展。但是,怎样使我国的统计改革更顺利地深入开展下去,并建立一套完整的统计信息体系,满足国民经济各部门、各层次经营管理对统计信息的需求,仍是一个值得认真探讨的课题。

用控制论方法建立我国企业目标管理体制

当前,我国经济体制改革正在向纵深发展,搞活企业仍是这场改革的重要内容之一。在企业内部建立起什么样的管理体制,已经引起了广泛的重视和讨论。本文结合我国企业推行目标管理中存在的问题,运用控制论方法,探讨了建立我国企业目标管理体制问题。

用信息代码化方法建立西文联机检索系统

利用微型机开展联机检索，这在计算机应用领域中，还是一个新的尝试。本文主要介绍用信息代码化方法，在微型机上建立ＺＧＪＳ西文联机检索系统，供有关读者参考。

谈ICP-MS测定银的干扰现象与方法建立

使用恒温电热板对样品进行加热处理,对地质样品以四酸或者王水敞口分解,但在进行过程中离子体质谱法诸如电感耦合容易受到外界干扰,而这样的干扰会严重影响到最终测定结果的准确性,所以就测定银过程可能会出现的干扰源,以及干扰的程度进行研究,通过实验过程与结果的数据表明,109Ag所受到的干扰程度较小,而Nb与Zr对其的干扰具有一定规律性,一定的离线矫正便可解决。经过对水洗沉积物、土壤等国家标准物质进行检测,发现所得测试值和标准的推荐值一致,并且精密度与检出限均达到相关标准,从而建立了四酸分解、敞口王水分解以及电感耦合等准确测定银的方法,该方法多种元素以及银的连续测定提供了有效依据,并为敞口酸熔ICP-MS的准确测试提供帮助,十分适合用于大批量样品的连续测定中。

浅议薄层色谱及中药成方制剂的方法建立

本文通过简要分析薄层色谱原理及影响薄层色谱质量的因素,从而对建立中药成方制剂的薄层色谱检测方法提供依据。

应用现代科学理论和管理方法建立出口生产体系

当前我国对外贸易正面临严竣的国际竞争的挑战,在新的国际贸易环境中和我国当前的生产力不断发展的条件下,如何扩大出口、多创外汇,关键是在质量上要适应国际市场的要求并保证稳定的出口资源,而出口生产体系正是适应这一迫切要求应运而生,它是迎接国际贸易挑战而采取的有远见的战略措施。鉴于出口生产体系是在中国对外贸易土壤中诞生的一颗“新苗”,有必要在理论、方针、政策诸方面进行论证、探讨,使之茁壮健康成长。为此,我们热烈欢迎专家、学者和广大经贸工作者对建立出口生产体系展开讨论,畅所欲言,献计献策。本期发表的“应用现代科学理论和管理方法建立出口生产体系”一文的显著特点是:借鉴现代科学经济理论,移植、渗透于出口生产体系。这种研究方法为对外贸易理论的发展开辟了一条新路。该文读后令人耳目一新,不失为一篇佳作。

白色念珠菌形态学分型的实验室方法建立及临床应用

目的 :在实验室中建立 PHONGPAICHIT的形态学方法并应用其对临床白色念珠菌 (简称白念菌 )进行分型 ,了解本地区白念菌的感染型别 ,为白念菌感染治疗及流行病学监控提供依据。方法 :采用 PHONGPAICHIT改进的形态学方法对 5 6例病人 5 6株临床鉴定的白念菌进行了分型。结果 :5 6株白念菌分属于 型～ 型 ,其中 型 16株 ,占分型株的 2 8.6 % ; 型 10株占分型株的 17.9% ; 型 5株占 8.9% ,其他型别有不同的分型率。结论 :在临床实验室建立并应用其对临床感染菌进行分型。