miR-132-3p/CAMTA1对I-125粒子处理的面神经损伤大鼠施万细胞的调控作用

目的探讨miR-132-3p通过钙调素结合转录因子1(CAMTA1)对I-125粒子处理的面神经损伤大鼠(FNI)中施万细胞的调控作用。方法用I-125粒子辐射大鼠施万细胞,并在细胞中转染miR-132-3p mimic、miR-132-3p inhibitor以及sh-CAMTA1。免疫荧光检测S100B和β-TubulinⅢ荧光强度。RT-qPCR检测miR-132-3p的表达,Western blot检测CAMTA1蛋白表达。EdU染色评估细胞增殖,Transwell检测细胞迁移。同时,构建FNI大鼠模型并在大鼠面部植入I-125粒子,HE、LFB染色以及IF染色评估大鼠面神经组织的病理损伤。StarBase v2.0数据库和双荧光素酶报告实验验证miR-132-3p和CAMTA1的靶向关系。结果S100B和β-TubulinⅢ在大鼠施万细胞中显著表达。I-125粒子辐射组中miR-132-3p表达降低(P<0.001),抑制细胞的增殖(P<0.001)和迁移(P<0.001)。过表达miR-132-3p或敲降CAMTA1显著促进施万细胞的增殖(P<0.001)和迁移(P<0.05),敲降miR-132-3p则具有相反的作用。机制研究显示,miR-132-3p靶向负调控CAMTA1。体内实验结果显示,过表达miR-132-3p通过抑制CAMTA1的蛋白表达,减弱I-125粒子对FNI大鼠面神经损伤的促进作用。结论过表达miR-132-3p抑制CAMTA1的表达,促进施万细胞的增殖和迁移,抑制I-125对FNI大鼠面神经损伤的促进作用。

枸杞多糖通过增强自噬抑制饥饿诱导的施万细胞凋亡

目的:探讨枸杞多糖(LBP)抑制施万细胞(SCs)凋亡的作用及相关机制。方法:RSC96细胞饥饿处理12 h制备自噬模型,Western Blot检测自噬相关蛋白LC3、p62的表达;采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒筛选出LBP作用的最佳浓度。将RSC96细胞随机分为正常组(Control)、饥饿组(Starvation)、Starvation+LBP组,Western Blot或免疫荧光染色检测细胞自噬相关蛋白(LC3、p62)以及髓鞘相关蛋白(p75NTR、PMP22、S100β)的表达;采用Annexin V/PI荧光染色检测细胞的凋亡情况;应用流式细胞术分析细胞周期;Western Blot分析通路蛋白Erk1/2、Akt的磷酸化水平。结果:CCK8结果显示,LBP为300μg/ml时受损RSC96细胞活力最佳。与Control组相比,Starvation组LC3-II/LC3-I水平显著增高(P<0.05)。与Starvation组相比,Starvation+LBP组的凋亡和坏死细胞比例显著降低,处于S期和G2/M期的细胞比例升高;LC3-II、p75NTR、PMP22、S100β蛋白表达量增高,自噬底物蛋白p62的表达量降低;通路蛋白p-Erk1/2表达量增高(P<0.05),而p-Akt蛋白表达量略有下降。结论:LBP可通过增强细胞自噬抑制SCs凋亡,促进髓鞘相关蛋白的表达,其机制与Erk1/2激活和/或Akt抑制有关。

基因干预MST2的施万细胞稳转株建立及其在线粒体膜电位检测的应用

目的构建稳定敲低及过表达哺乳动物Ste20样激酶2(mammalian ste20-like kinase 2, MST2)的大鼠施万细胞株,并初步探讨MST2对线粒体膜电位的调控作用。方法 大鼠施万细胞株(RSC96)分为正常对照组(对照组)、氧糖剥夺(oxygen and glucose deprivation, OGD)模型组、MST2敲低对照组、MST2敲低组、MST2过表达对照组、MST2过表达组。逆转录PCR法扩增大鼠Mst2基因全长序列,构建过表达Mst2基因的慢病毒表达载体重组质粒并鉴定。使用第二代慢病毒包装系统获取Mst2基因敲低及过表达的慢病毒毒液,并分别感染RSC96细胞株,建立基因干预MST2的稳转株。实时荧光定量PCR结合western blot检测基因干预效率,光镜结合S100荧光染色观察稳转株形态学变化。使用OGD模型处理细胞,以线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测细胞线粒体膜电位水平(mitochondrial membrane potential, MMP)。结果 经测序分析,成功构建Mst2慢病毒表达载体重组质粒。施万细胞稳转株具有施万细胞的形态特征,并且表达施万细胞特异性标志物S100。在慢病毒感染的施万细胞,MST2表达在mRNA及蛋白水平上均较对照组有稳定且显著的差异,敲低效率超过90%,过表达约为对照组的40倍。稳转株在OGD模型中,对于MST2蛋白的基因干预仍然维持稳定。OGD可显著增加MST2蛋白表达,并降低施万细胞MMP,提示线粒体功能受损;而敲低MST2则显著改善MMP。结论 本研究成功构建了稳定敲低及过表达MST2的大鼠施万细胞株,并且在OGD模型中,敲低MST2可改善线粒体膜电位,提示其对线粒体具有保护作用。

电刺激诱导miR-741-3p调控Radil促进施万细胞的迁移

背景:越来越多的动物实验和临床研究证实电刺激可以促进周围神经损伤修复,具体的机制尚未完全明确。目的:探讨电刺激诱导miR-741-3p调控Radil对施万细胞迁移的影响。方法:①12只雄性SD大鼠,随机分为电刺激组和对照组,电刺激组在坐骨神经挤压伤后连续电刺激7 d,对照组在坐骨神经挤压后不做任何处理。术后第7天取损伤处神经,利用荧光原位杂交技术检测两组miR-741-3p的表达差异。②通过miRDB、TargetScan和miRWalk数据库预测miR-741-3p靶基因。③将miR-741-3p模拟物及其对照、miR-741-3p抑制物及其对照、Radil siRNA及其对照、miR-741-3p抑制物+Radil siRNA及miR-741-3p抑制物+siRNA对照对施万细胞进行转染,采用RT-PCR检测转染效率,Transwell小室检测施万细胞的迁移能力。结果与结论:①电刺激组神经残端miR-741-3p荧光强度低于对照组;②数据库预测结果显示有69个基因可能是miR-741-3p靶基因,Radil是预测靶基因之一,主要参与细胞黏附和迁移;③与miR-741-3p抑制物对照组相比,miR-741-3p抑制物组施万细胞迁移数增多(P<0.05);与miR-741-3p模拟物对照组相比,miR-741-3p模拟物组施万细胞迁移数减少(P<0.05);与siRNA对照组相比,Radil siRNA组施万细胞迁移数减少(P<0.05);④与miR-741-3p抑制物对照组相比,miR-741-3p抑制物组Radil的表达水平升高;与miR-741-3p模拟物对照组相比,miR-741-3p模拟物组Radil的表达水平降低;⑤与miR-741-3p抑制物+siRNA对照组相比,miR-741-3p抑制物+Radil siRNA组施万细胞迁移数减少(P<0.05)。结果表明,电刺激通过下调miR-741-3p调控Radi的表达来促进施万细胞迁移。

TA-siRNA纳米凝胶靶向抑制PNI施万细胞Gzmb基因表达促进神经修复

目的 构建TA-siRNA纳米凝胶靶向抑制施万细胞死亡。方法 研究使用GEO数据库GSE244328的转录组测序数据进行生物信息学分析筛选焦亡相关基因并通过聚合酶链反应和蛋白质印记分析评估特定基因的表达水平。使用来自美国ATCC的小鼠施万细胞,采用LPS模拟炎症刺激。制备自组装TA-siRNA纳米凝胶,采用CCK8细胞增殖实验、骨架染色、划痕实验评估TA-siRNA纳米凝胶细胞功能。使用GraphPad Prism 8、ImageJ和R 4.2.1进行统计学差异分析。结果 Gzmb基因在施万细胞的焦亡过程中显著高表达(P <0.05)。TA-siRNA纳米凝胶具有优异的生物相容性,其大小为(68.65±7.35) nm,电位为-36.48 mV,可被施万细胞有效内化,且不会导致施万细胞的伸长和变形(P> 0.05)。TA-siRNA纳米凝胶能有效抑制施万细胞的Gzmb基因从而抑制施万细胞焦亡并提高施万细胞的存活率与活性(P <0.05)。结论 鉴于施万细胞焦亡在PNI中的作用,TA-siRNA纳米凝胶抑制施万细胞焦亡可能是未来PNI的一种潜在治疗策略。

纳米凝胶搭载的siRNA通过靶向抑制施万细胞铁死亡促进周围神经损伤修复

目的:探究周围神经损伤(PNI)后施万细胞的死亡机制,使用纳米凝胶搭载的siRNA靶向抑制施万细胞死亡。方法:下载GEO数据库中PNI的转录组数据,依次进行数据处理、差异分析、GO功能富集分析、铁死亡通路鉴定以及靶基因的筛选。通过蛋白印记和qPCR实验验证靶基因的差异性。自组装单宁酸(TA)-siRNA纳米凝胶,通过丁达尔效应实验、粒径和电位测量、细胞吞噬实验、细胞骨架染色和CCK-8细胞活力实验鉴定纳米凝胶的物理学和生物学特性。通过划痕实验、免疫荧光染色实验、蛋白印记和qPCR实验验证TA-siRNA纳米凝胶抑制施万细胞铁死亡的有效性。结果:PNI后施万细胞出现明显的铁死亡现象,Bex1是调控施万细胞铁死亡的关键基因。TA-siRNA纳米凝胶具有优良的物理学和生物学特性,能够将siRNA成功地携带到损伤的施万细胞中并沉默靶基因,从而有效地抑制施万细胞损伤后的铁死亡。结论:纳米凝胶搭载的siRNA可以靶向抑制施万细胞铁死亡,为临床治疗PNI提供新的方向。

施万细胞促进头颈癌增殖、侵袭机制的研究进展

头颈癌存在着广泛的神经周围浸润和肿瘤神经支配,在促进肿瘤进展的同时带来更差的预后。施万细胞(SCs)是一种神经胶质细胞,广泛分布于外周神经系统,参与了神经损伤修复。近年来,越来越多的研究表明,SCs在肿瘤微环境(TME)中扮演着重要角色。重编程SCs通过与肿瘤和神经进行信号交互,一方面,促进神经周围浸润和肿瘤神经支配;另一方面,直接作用于TME成分并促进肿瘤进展。该文主要讨论了SCs与癌症-神经的信号串扰模式,以及SCs相关信号在TME中的作用机制,并探讨了SCs相关头颈癌治疗干预的潜在靶点。

白藜芦醇联合施万细胞样细胞对大鼠坐骨神经损伤的修复作用

目的:探讨白藜芦醇联合脂肪源性干细胞(ADSCs)分化的施万细胞样细胞(SCLCs)对大鼠坐骨神经损伤的修复作用。方法:ADSCs原代培养并向SCLCs诱导分化,扫描电镜观察细胞形态;Western Blot方法检测S100钙结合蛋白β(S100β)、p75神经营养素受体(p75NTR)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。大鼠随机分为对照组(Control)、施万细胞样细胞组(SCLCs)、白藜芦醇组(Res)、白藜芦醇+施万细胞样细胞组(Res+SCLCs),坐骨神经损伤模型造模成功后8周通过足迹实验检测各组坐骨神经功能指数(SFI);von Frey丝刺激针测定机械缩足阈值(MWT);称重法测定胫前肌湿重比率(WR);Western Blot、RT-qPCR方法检测损伤处神经营养素-3(NT-3)、神经生长因子(NGF)、类胰岛素生长因子-1(IGF-1)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达情况。结果:ADSCs诱导8 d后细胞两极细长,细胞外成分增多;S100β、p75NTR、GFAP蛋白高表达。给予SCLCs、Res及Res+SCLCs治疗后,治疗组SFI、WR明显优于Control组(P<0.05);Res+SCLCs组、SCLCs组大鼠MWT降低(P<0.05)。Western Blot结果显示:Res+SCLCs组大鼠NT-3、IGF-1、NGF、BDNF蛋白表达高于其余各组(P<0.05);SCLCs组大鼠NT-3、NGF、BDNF蛋白表达高于Control组(P<0.05);Res组大鼠NT-3、NGF蛋白表达高于Control组(P<0.05)。RT-qPCR结果显示:Res+SCLCs组大鼠NT-3、IGF-1、NGF、BDNF mRNA高表达;SCLCs组大鼠NT-3、IGF-1、NGF、BDNF mRNA表达高于Control组(P<0.05);Res组大鼠IGF-1、NGF mRNA表达高于Control组(P<0.05)。结论:Res联合ADSCs分化的SCLCs对大鼠坐骨神经损伤具有良好的修复作用。

施万细胞在周围神经疾病中的免疫调节研究进展

施万细胞(SCs)是周围神经系统最丰富的神经胶质细胞。SCs对神经纤维的生物学特性具有动态调节作用,为轴突提供代谢支持。SCs具有高度的分化可塑性,在损伤和疾病时可再分化和去分化,并积极参与再生和炎症过程。SCs在许多病理过程中发挥着重要作用,包括损伤诱导的神经修复、神经退行性疾病、炎症、神经性疼痛和癌症,部分原因是其免疫调节作用。该文围绕近几年开展的关于SCs在周围神经系统损伤和病变时的免疫反应的研究进行了综述。

HYOU1对高糖环境施万细胞自噬和凋亡的影响及其机制

目的观察内质网分子伴侣复合物缺氧上调基因1(HYOU1)对高糖环境施万细胞自噬和凋亡的影响,并基于ROS/PI3K/AKT通路探讨相关机制。方法培养RSC96细胞,构建HYOU1重组表达质粒,采用随机数字表法将细胞分为高糖组、高糖+对照质粒组和高糖+HYOU1质粒组,三组均以高糖培养,其中高糖+对照质粒组和高糖+HYOU1质粒组分别转染对照质粒和pEGFP-HYOU1质粒。采用Western blotting法检测各组细胞中的自噬相关蛋白(LC3、ATG5、ATG12、Beclin1、p62)、JAK/STAT通路相关蛋白(JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、STAT6)、ROS/PI3K/AKT通路相关蛋白(PI3K、AKT、mTOR、pPI3K、pAKT、pmTOR),采用流式细胞术测算细胞凋亡率,采用RT-PCR法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2,采用DCFH-DA染色检测各组ROS水平。结果高糖+HYOU1质粒组LC3、ATG5、ATG12、Beclin1蛋白表达低于高糖组和高糖+对照质粒组,p62蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组(P均<0.05)。高糖+HYOU1质粒组凋亡率、Bax mRNA表达低于高糖组和高糖+对照质粒组,Bcl-2 mRNA表达及JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、STAT6蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组(P均<0.05)。高糖+HYOU1质粒组PI3K、AKT、mTOR、pPI3K、pAKT、pmTOR蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组,ROS水平低于高糖组和高糖+对照质粒组(P均<0.05)。结论HYOU1过表达可下调高糖环境施万细胞的自噬和凋亡,作用机制可能与调控ROS/PI3K/AKT通路有关。

直肠黏膜施万细胞错构瘤3例临床病理分析

目的探讨黏膜施万细胞错构瘤临床病理特征,以提高病理医生对该病的认识与诊断水平。方法收集2015年6月至2022年7月上海市松江区中心医院3例直肠黏膜施万细胞错构瘤患者资料,从内镜特征、组织形态学特征及免疫组织化学等方面分析讨论,并复习文献。结果3例黏膜施万细胞错构瘤患者中,男2例,女1例,年龄47~54岁,3例均发生在直肠。临床症状主要为腹痛或无明显症状。内镜下2例为扁平息肉样隆起,长径0.2~0.3 cm;1例为亚蒂息肉,长径0.8 cm。病理学形态表现为黏膜固有层间质中梭形细胞增生。免疫组化梭形细胞表达S-100、SOX-10。结论消化道黏膜施万细胞错构瘤是一种罕见的错构瘤性息肉,起源于神经施万细胞,掌握该病的内镜及病理学特征,了解其鉴别诊断,有助于提高病理医生对该病的诊断率。

施万细胞发育研究进展

在周围神经系统中,施万细胞属于胶质细胞,在整个神经发育过程中与轴索有密切的关系。施万细胞形成绝缘鞘,并给其包裹的神经元提供必不可少的营养支持。施万细胞前体细胞来源于神经嵴干细胞,一套高度有序的发育程序控制其发育为成熟的髓鞘形成施万细胞或非髓鞘形成施万细胞。本文将结合最新研究发现及近期研究进展,从细胞-细胞及细胞-基质信号通路角度探讨驱动施万细胞发育和髓鞘形成的分子机制。

脂肪间充质干细胞来源外泌体对施万细胞增殖功能及早期神经再生特征影响的研究

背景施万细胞是神经系统的重要构成部分,为促进轴突再生和诱导靶神经再生提供必要的信号和空间线索。脂肪间充质干细胞来源广泛,在再生医学方向效果明确,外泌体作为神经系统细胞间的重要信息媒介,在调节再生方面发挥着重要作用。目的探索脂肪间充质干细胞来源外泌体(adipose-derived stem cells-derived exosomes,ADSCs-exos)对施万细胞增殖功能及早期神经再生特征的影响。方法提取ADSCs-exos进行鉴定;利用显微镜和流式细胞学对ADSCs鉴定,通过超速离心法提取ADSCs来源外泌体并通过透射电镜拍摄图片;将ADSCs-exos与大鼠施万细胞进行直接共培养,观察ADSCs-exos对施万细胞增殖的影响;取雌性SD大鼠8只,Matrigel基质胶搭载ADSCs-exos注入商用硅胶管构建神经移植物为外泌体组,Matrigel搭载PBS注入商用硅胶管为空导管组(Hollow),每组4只。构建坐骨神经1 cm缺损模型,将神经移植物缝合于近端和远端神经残端之间,缝合伤口后放回笼中安置。3周取出神经移植物评价轴突再生情况。结果成功提取ADSCs,能够表达间充质干细胞表面标记蛋白CD73、CD90、CD105。成功提取ADSCs-exos,能在透射电镜下观察到磷脂双分子层结构。在ADSCs-exos和施万细胞共培养体系中,比较24 h和48 h施万细胞增殖情况,施万细胞增殖与ADSCsexos浓度呈剂量依赖性。动物实验结果表明,外泌体组3周时轴突生长优于Hollow组(P<0.05)。结论ADSCs-exos可以促进施万细胞增殖,负载ADSCs-exo神经移植物的轴突生长长度在3周时即具有优势。

施万细胞可塑性和自噬对周围神经损伤修复的作用

周围神经系统在神经损伤后会表现出比中枢神经系统更强的再生能力,这得益于施万细胞显著的可塑性。可塑性是指施万细胞对损伤作出的反应,即去分化、激活或重新编程,其中包括激活自噬清除髓鞘碎片,而髓鞘清除对周围神经损伤的再生至关重要。自噬是神经元发育和生存所必需的细胞降解过程,尤其是在抵抗异常应力时,通过消除受损的蛋白质和细胞器来维持细胞稳态发挥了不可替代作用。神经受损后的自噬调节作用与施万细胞可塑性密切相关,自噬广泛参与了神经损伤后施万细胞可塑性的调节,其中包括促分化,以及调节轴突发生等。

施万细胞条件敲除SEMA3B通过AKT/GSK3β信号通路抑制神经损伤后的华勒变性

目的探究Semaphorin3B(SEMA3B)在施万细胞调控周围神经损伤后华勒退变进程中的作用及分子机制。方法使用施万细胞敲除SEMA3B小鼠(cKO)为实验组,同窝Cre工具小鼠为对照组。通过体内横断坐骨神经和坐骨神经外植块培养分别建立体内和体外华勒退变模型,5d后取材开展免疫荧光染色和蛋白质印迹检测MBP、NF、c-Jun、MAG、p-AKT、AKT、p-GSK3β、GSK3β、p-ERK、ERK、p-JNK、JNK的表达差异,并用AKT激动剂在体外模型开展逆转验证实验。结果神经损伤5d后,cKO组体内外模型中MBP和NF的表达均高于Cre组,提示其华勒变性减慢。同时,cKO组的c-Jun表达下调而MAG表达量增高,提示施万细胞去分化程度降低;p-AKT和p-GSK3β表达下调,而p-ERK和p-JNK无显著差异;使用AKT激动剂(SC79)能逆转SEMA3B导致的MBP和NF的表达变化。结论施万细胞敲除SEMA3B后可以通过AKT/GSK3β信号通路延缓华勒变性过程。

纯钛表面硅烷偶联剂复合氧化石墨烯涂层对施万细胞生物学行为的影响

背景:研究种植体表面处理时更看重是否能提高种植体骨结合的效率,而有关口腔种植体骨感知功能的研究则相对较少。目的:探讨纯钛表面硅烷偶联剂共价连接氧化石墨烯涂层对体外施万细胞生物学行为的影响。方法:在TA4钛片表面通过硅烷偶联剂的氨基基团共价连接制备不同质量浓度的氧化石墨烯涂层(0.25,0.5,0.75,1.0 mg/mL,分别命名为0.25-Ti-APTES-GO组、0.5-Ti-APTES-GO组、0.75-Ti-APTES-GO、1.0-Ti-APTES-GO组),通过扫描电镜、拉曼光谱和接触仪对涂层的微观结构、成分及接触角进行表征。分别在光滑钛片、硅烷偶联改性钛片及不同质量浓度氧化石墨烯涂层改性钛片上培养大鼠施万细胞,采用CCK-8法检测各组施万细胞的增殖活性,RT-qPCR和Western blot检测钛片上施万细胞分泌神经生长因子、胶质细胞源性神经营养因子的能力。结果与结论:①扫描电镜下可见,不同质量浓度的氧化石墨烯涂层呈云雾状,高质量浓度氧化石墨烯涂层呈现的云雾状突起更加致密;②与光滑钛片组相比,硅烷偶联改性组钛片表面接触角较小(P<0.05);随氧化石墨烯质量浓度的增加,钛片表面接触角逐渐变小,其中0.75-Ti-APTES-GO组、1.0-Ti-APTES-GO组组接触角小于光滑钛片组(P<0.05);③CCK-8实验显示,与光滑钛片组比较,硅烷偶联剂改性组、0.25-Ti-APTES-GO组、0.5-Ti-APTES-GO组细胞增殖无明显变化(P>0.05),0.75-Ti-APTES-GO组、1.0-Ti-APTES-GO组细胞增殖受到抑制(P<0.05),所以后续实验选择0.25-Ti-APTES-GO组、0.5-Ti-APTES-GO组;④RT-qPCR检测显示,0.5-Ti-APTES-GO组神经生长因子mRNA表达量高于其他3组(P<0.05);0.25-Ti-APTES-GO组胶质细胞源性神经营养因子mRNA表达量低于其他3组(P<0.05),0.5-Ti-APTES-GO组胶质细胞源性神经营养因子mRNA表达量高于光滑钛片组、硅烷偶联剂改性组(P<0.05);⑤Western blot检测显示,0.5-Ti-APTES-GO组神经生长因子蛋白表达量高于光滑钛片组、0.25-Ti-APTES-GO组(P<0.05),胶质细胞源性神经营养因子蛋白表达量高于其他3组(P<0.05);⑥结果表明,硅烷偶联剂复合0.5 mg/mL氧化石墨烯涂层有良好的生物相容性,能较好地促进纯钛表面施万细胞神经生长因子及胶质细胞源性神经营养因子的表达。

结肠黏膜施万细胞错构瘤2例临床病理分析并文献复习

目的分析结肠黏膜施万细胞错构瘤(Mucosal Schwann cell hamartoma,MSCH)的临床病理形态、鉴别诊断、治疗及预后情况。方法回顾性分析2例结肠MSCH患者临床特点、镜下形态、免疫表型,并复习相关文献。结果2例患者均为女性,内镜下显示直径分别为5mm和3mm的扁平或广基息肉样隆起,组织学黏膜内梭形细胞呈穿插生长或交织状排列,无包膜,细胞边界不清,细胞质弱嗜酸性,细胞核长椭圆形或相对肥胖的长梭形,未见明显小核仁,未见核异型及核分裂象。免疫表型:病变细胞表达S-100及SOX-10。随访2例结肠MSCH患者30个月和14个月,总体表现良好,均无恶变及复发。结论结肠MSCH位于黏膜内、病变细胞呈梭形,结合组织病理学特征及免疫表型等检测有利于MSCH准确诊断,预后良好,无需过度治疗。

人富血小板血浆来源外泌体促进体外培养施万细胞的增殖

目的探究人富血小板血浆来源外泌体(PRP-exos)对体外培养的施万细胞(SC)增殖能力的影响。方法采用聚合沉淀结合超速离心法提取PRP-exos,透射电镜观察其形态,纳米颗粒跟踪分析技术测定其浓度及粒径分布,Western blot检测外泌体表面标志蛋白CD63、CD81、CD9及血小板膜糖蛋白CD41。分离培养大鼠SC,免疫荧光染色检测SC标记分子S100β的表达。荧光标记PRP-exos,与SC体外共培养,观察两者的相互作用。EdU实验检测PRP-exos对SC增殖能力的影响,CCK-8法检测不同浓度(0、10、20、40、80、160μg/ml)PRP-exos对SC增殖能力的影响。结果提取的PRP-exos呈均匀的圆形囊泡,具有外泌体典型的茶托状形态,平均粒径(122.8±38.7)nm,浓度为3.5×1012个/ml,PRP-exos表面高表达CD63、CD81、CD9及CD41(P<0.001,P=0.025,P=0.004,P=0.032)。分离培养的SC表达S100β,PRP-exos可被SC摄取。浓度为40、80、160μg/ml的PRP-exos可促进SC的增殖,且40μg/ml PRP-exos的促增殖效果最佳(P均<0.01)。结论PRP中可提取较高浓度的PRP-exos,体外培养条件下,PRP-exos能够被SC摄取,且对SC具有促增殖作用。

施万细胞在恶性肿瘤进展中的作用

施万细胞(Schwann cells,SCs)是外周神经系统中最重要的神经胶质细胞类型,在神经损伤修复过程中起重要作用。近年来研究显示,SCs作为连接神经和肿瘤细胞的“桥梁分子”,通过与肿瘤细胞、免疫细胞、间质细胞等相互作用,改善局部肿瘤微环境,进而促使肿瘤嗜神经生长和神经支配、促进肿瘤的生长、迁移和侵袭,产生免疫抑制并出现肿瘤疼痛等一系列恶性生物学行为。本文就SCs在非神经肿瘤中的作用及其机制进行综述,以期为将来抗肿瘤治疗联合靶向SCs的治疗策略提供理论基础。

大鼠脂肪源性干细胞来源的施万细胞特性分析

目的探讨脂肪源性干细胞(ADSCs)及其分化的施万细胞(SCs)在形态、活性和标志物表达上的区别。方法取SD大鼠腹股沟处脂肪制备ADSCs,用流式细胞术检测细胞表面标志;钙钴金属盐沉淀法检测碱性磷酸酶(ALP),茜素红染色观察矿化结节;油红O染色观察脂滴;随机分对照组和诱导组,加入条件培养基向SCs诱导分化;MTT法检测诱导后第2、4、6和8 d各时间点的细胞活性;扫描电镜及免疫染色观察S100的表达。结果光镜下可见ADSCs呈梭形贴壁生长;ADSCs表达抗原分化簇90(CD90)和抗原分化簇105(CD105),不表达抗原分化簇45(CD45);成骨诱导后可见ALP呈强阳性表达,茜素红染色可见橘红色矿化结节,油红O染色可见胞内红染脂滴聚集;向SCs诱导后第4 d,可见多数细胞呈纺锤形,第8 d纺锤状细胞增多;MTT检测显示第4 d诱导组的吸光度明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);组内相比,诱导组和对照组的吸光度均随着时间的延长而逐渐增大,差异有统计学意义(P<0.05);第6、第8 d诱导组与对照组吸光度差异无统计学意义(P>0.05);扫描电镜可见诱导后第8 d细胞细长,细胞外成分多,S100阳性表达;ADSCs表面呈山脊状,纤毛密集,细胞外成分少,不表达S100。结论ADSCs与其分化的SCs形态差异显著,分化而来的SCs活性良好,表达SCs标志蛋白。