基于SiO_(2)纳米颗粒的无标记化学发光氯霉素适体传感器

经由食物链长期摄入氯霉素残留物会给人体带来各种危害和疾病。因此,建立快速、准确且高灵敏的食品中氯霉素检测方法具有重要意义。采用溶胶-凝胶法制备了表面氨基化的SiO_(2)纳米颗粒,并用X射线衍射、透射电镜和红外光谱对其进行了表征。然后,利用酰胺键和碱基互补配对作用在SiO_(2)纳米颗粒表面依次组装互补DNA链和氯霉素适配体,成功构建了无标记化学发光氯霉素适配体传感器。该传感器制备简便,其中的氯霉素适配体既可作为生物识别元件,又可与苯甲酰甲醛反应产生化学发光信号,无需标记信号分子。该传感器的氯霉素检出限为3.26×10^(-9) mol·L^(-1),且选择性较好。将该传感器应用于实际样品中进行加标,回收率在94.67%~103.00%之间,表明该适体传感器可用于食品中氯霉素的检测。

利用无标记动作捕捉技术对立定跳远测量的研究

目的:旨在探究无标记动作捕捉技术在立定跳远距离测量中的应用。方法:采用RGB-D深度相机进行动作捕捉,运用关键帧提取、图像分割和边缘检测等图像处理技术,结合机器学习算法,实现无标记精准测量立定跳远距离,并通过信效度分析检证其精准性和可靠性。结果:通过51个标准距离重复测量,重测信度检验得到克隆巴赫系数α=0.999和组内相关系数ICC=0.998,重测精准性达到99.64%;通过306次立定跳远试跳实测,标准效度检验的Pearson相关系数r=0.999,稳定可靠性达到99.69%。结论:本研究成功开发并验证了一种基于无标记动作捕捉技术的立定跳远距离测量方法,极高的精准性和可靠性展示了该方法的创新性和实用价值。

石油物探无标记施工技术新探索

无标记物探作业无需在地面做任何标记,具有节省人力成本,降低安全风险,减少环境损害等优势,是未来石油物探导航定位的一种新模式。在传统无标记施工的基础上,结合节点技术和激光雷达技术发展,给出了两种探索性方案。一是在节点仪器中记录GNSS原始数据,通过后处理获得高精度节点坐标;二是对节点记录的单点定位结果进行滤波平滑,获得亚米级平面位置,再利用激光雷达数据对高程数据进行替代,从而获得节点的高精度坐标。

一种面向无标记事件日志的案例识别方法

流程挖掘旨在从事件日志中提取有用信息,从而发现、监控和改进实际的业务流程。大部分流程挖掘技术依赖于标准化的事件日志,即事件日志中的每个事件对应于一个案例。然而,已有的流程挖掘技术无法处理案例属性缺失的事件日志,即无标记事件日志。针对这个领域难题,提出一种面向无标记事件日志的案例识别方法。该方法首先根据关联规则从无标记事件日志中挖掘活动间的依赖程度,从而挖掘活动间的依赖关系;其次,根据活动间的依赖关系,挖掘活动间可能的活动关系,即并发关系、互斥关系和循环关系;最后提出一种案例识别算法对无标记事件日志进行案例识别,得到带有标记的事件日志。所提无标记事件日志案例识别方法已在开源平台ProM工具中实现。基于仿真日志数据集和真实日志数据集,验证了所提方法的有效性,通过与当前领域内最优方法进行定量比较,进一步验证了所提方法的优势。

基于靶标诱导滚环扩增的无标记适配体生物传感器快速检测赭曲霉毒素A

该文构建一种基于靶标诱导滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)的无标记适配体快速检测赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)生物传感器。该生物传感器探针由RCA引物与OTA适配体两部分组成,在OTA存在的环境中,OTA适配体特异性识别靶标,探针结构被打开,RCA引物与环状DNA模板(circular DNA template,CT)结合开启RCA反应,加入核酸染料SYBR Gold产生荧光信号。此生物传感器具有较高的特异性,检测限为6.6×10^(-2)nmol/L,线性检测范围为6.6×10^(-2)~660 nmol/L,可用于具体的分析检测。此生物传感器无需复杂化学修饰且操作简单,在食品安全检测中具有良好的应用前景。

无标记运动捕捉系统在临床步态分析上的研究进展

步态分析是临床研究的重要组成部分,传统的三维步态分析由于设备成本高、专业技术要求高等原因难以广泛应用。随着计算机视觉技术的发展,无标记运动捕捉系统的精确度得到极大提升,无需标记、成本较低的优势逐渐显现,并被应用于步态分析,但由于研究人员和临床医生缺乏对该系统的整体了解,使得该技术尚不能得到广泛推广,本综述拟对无标记运动捕捉系统在临床步态分析上的应用进展进行回顾,分析目前各项技术的优势和局限性,展望无标记运动捕捉系统在临床步态分析上的发展方向,为今后无标记运动捕捉系统在临床上的推广使用提供了研究思路。

基于cMWCNTs/Cys无标记型电化学适配体传感器定量检测肌红蛋白

以适配体作为分子识别和结合敏感元件,功能化修饰电极为换能元件,构建无标记型电化学适配体传感器用于血清肌红蛋白定量检测。利用L-半胱氨酸(L-Cys)和羧基化多壁碳纳米管(cMWCNTs)氨基、羧基和巯基分别共价连接5’端修饰氨基适配体和金盘基础电极表面,获得Apt/cMWCNTs/Cys修饰功能化电极,明确其电化学性能。实验结果表明,Mb浓度在0.01~10 ng/mL范围内,电化学传感体系的差分脉冲峰电流值与Mb浓度对数呈现良好的线性关系,相关系数为0.993。cMWCNTs/Cys无标记型电化学适配体传感器具有良好的特异性,可实现血清Mb的定量检测,其检测限LOD为0.016 pg/mL,相对标准偏差RSD为2.09%~3.10%,回收率为94.26%~101.30%。

术中无标记显微成像技术发展与应用(特邀)

无标记显微成像技术利用样品的固有特性进行成像,不会破坏生物样本的自身结构与功能,无需耗时繁琐的染色等操作,有利于实现术中快速癌症诊断。首先介绍了不同种类的无标记显微成像技术的成像原理,并讨论了其成像速度与空间分辨率等成像性能,随后介绍了无标记显微成像技术在人类典型癌症诊断中的应用,最后探讨了术中无标记显微成像技术在未来的发展方向。

应用无标记高内涵成像分析技术检测乳酸对肿瘤细胞增殖与迁移的促进作用

目的:探究高内涵成像分析技术在无标记检测细胞增殖与迁移中的应用效果。方法:体外培养小鼠黑色素瘤B16-F10细胞,实验组分别添加2.5、5、10、15、30 mmol/L不同浓度的乳酸,对照组加入磷酸缓冲盐溶液(PBS),使用高内涵成像分析系统每15分钟拍摄1次、连续拍摄36 h,检测不同浓度的乳酸对B16-F10细胞的增殖与迁移的影响。结果:高内涵成像分析技术检测显示,不同浓度的乳酸处理后,实验组细胞增殖速度明显快于对照组,且添加15、30 mmol/L乳酸的实验组细胞密度明显高于其他各组。使用高内涵成像分析系统软件进行细胞计数显示,处理后12 h,15、30 mmol/L乳酸添加实验组细胞数较对照组显著增加;且随着培养时间延长,15、30 mmol/L乳酸添加实验组的细胞数均显著高于对照组(均P<0.05)。高内涵成像分析系统软件统计各组处理后0~6 h细胞迁移距离,显示各实验组细胞平均迁移距离均显著高于对照组(均P<0.05),其中5 mmol/L乳酸添加实验组的细胞平均迁移距离最大;各实验组中出现迁移行为的细胞比例均显著高于对照组,随着乳酸浓度增加,迁移行为细胞比例出现降低的趋势。结论:成功建立了应用高内涵成像分析技术快速、无标记、可靠且准确的定量评价细胞增殖和迁移的方法,实验操作较为简单,且能获取直观的图像及多样化的数据统计结果。

单个颗粒无标记光学显微成像实现

据报道,中国科学技术大学物理学院张斗国教授课题组,提出并实现了一种基于矢量光场调控原理的动量空间偏振滤波器件。该滤波器件安装于传统无标记光学显微镜后,可采集到单个纳米尺度物体的高对比度、高信噪比光学显微图像。研究成果日前在线发表于综合性学术期刊《美国国家科学院院刊》。

形容词的有无标记用法与疑问句式的交错关系

形容词的有无标记用法与疑问句式的交错关系石毓智引言前文（黄国营、石毓智１９９３）在以下三类问句中详细考察了汉语形容词的有无标记用法：（Ⅰ）Ｎ＋Ａ＋吗？（Ⅱ）Ｎ＋Ａ＋不＋Ａ？（Ⅲ）Ｎ＋有多＋Ａ？指出形容词有无标记用法与疑问句型之间的交错关系，并从形容词...

无标记定量法研究冠心病不稳定性心绞痛血瘀证的差异蛋白质组

应用高解析离子淌度质谱(HDMS)与纳升级超高效液相色谱(UPLC)联用,寻找冠心病不稳定性心绞痛血瘀证血浆差异蛋白,探索冠心病不稳定性心绞痛血瘀证的蛋白质组学特点.采用美国Agilent公司多克隆抗体亲和柱去除冠心病不稳定性心绞痛血瘀证患者和健康人血浆中6种丰度最高的蛋白后,进行无标记定量蛋白质组(Label free proteome)分析.结果表明,本方法的离子强度变异系数小于5%,保留时间变异系数小于3%,具有良好的重现性.动态范围约104数量级.总蛋白数3843种,差异倍数大于1.5倍的差异蛋白数25种,上调蛋白数13种(包括心绞痛血瘀证患者独有蛋白3种),下调蛋白数12种.ACTA1,ITIH3和LBP仅在冠心病不稳定性心绞痛血瘀证患者血浆中表达,Haptoglobin,SAA,CP,C6,MYH11,APOH和ANXA6在冠心病不稳定性心绞痛血瘀证患者中高表达,而HBB,HBA,HBE,HBD,HBG,HRG,IGHG,GSN和TF在冠心病不稳定性心绞痛血瘀证患者中低表达.表达上调的差异蛋白根据功能可分为:(1)急性时相反应蛋白;(2)补体蛋白;(3)细胞骨架蛋白;(4)凝血相关蛋白.表达下调的差异蛋白根据功能可分为:(1)载脂蛋白;(2)运输蛋白;(3)抗凝血相关蛋白;(4)免疫球蛋白;(5)细胞骨架调控蛋白.以上结果提示,冠心病不稳定性心绞痛血瘀证可能属于一种炎症反应;冠心病不稳定性心绞痛血瘀证患者可能同时存在心肌损伤、凝血因子异常、脂代谢紊乱与氧运输障碍;这些方面相互影响,互为因果.这些差异蛋白可为研究或发现抗心绞痛药物作用的新靶标提供线索.本研究结果表明,非标记定量蛋白质组学(Label freeproteomics)是疾病及证候生物标志物研究的一种有效手段.

抗甘蔗花叶病毒的无标记反向重复转基因玉米

构建了无标记基因源自玉米矮花叶病的主要病原——甘蔗花叶病毒(sugarcane mosaic virus,SCMV)复制酶基因的反向重复序列表达载体,通过农杆菌介导法以该表达载体和除草剂标记基因表达载体共转化玉米自交系综3的幼胚,用除草剂梯度筛选,获得了可育的再生株。对T1和T2代群体作PCR和DNA点杂交,结合温室和田间人工接种病毒进行抗病性鉴定,获得了比较稳定的对SCMV高抗的无标记转基因玉米株系。

蛋白质质谱分析的无标记定量算法研究进展

作为发现疾病相关生物标志物的重要途径,定量研究已成为蛋白质组学的热点问题.随着实验方法的发展和改进,定量数据处理算法也在不断更新和完善.将现有的无标记定量方法归纳为需要/不需要鉴定结果两类方法,分析比较了两类方法的异同及优缺点,详细讨论了所涉及的主要算法,总结了一些常用的无标记定量软件及对应的网络资源.展望了无标记定量数据分析的未来研究方向.

一种马铃薯高效无标记转基因技术的建立

用农杆菌介导法转化马铃薯栽培品种紫花白的叶盘,通过1/4 MS培养基预培养、热激处理、低pH、高糖培养基共培养,之后利用PCR直接检测转化体,结果表明遗传转化效率可达5.1%,建立了马铃薯无标记转基因技术.该技术受基因型的限制小,用于其它3个不同的栽培品种东北白、晋薯7号和早大白,遗传转化效率亦达到了4.1%－8.3%.利用这项无标记转基因技术,在载体构建时就剔除了标记基因,遗传转化后直接分化培养,不必对转化细胞进行抗性筛选,缩短了遗传转化周期,省去了费时费力的标记基因剔除步骤,亦为重复转化聚合多个优良基因提供了便利.

一种简便的获得无标记耐盐转基因水稻植株的NaCl有效筛选浓度选择法

以4个粳稻品种(日本晴、秀水11、武运粳7号、中花11)为材料,研究发现,在含NaCl的NB培养基上,NaCl对水稻种子发芽的抑制率与对成熟胚愈伤组织生长的抑制率之间呈线性正相关。水稻种子发芽抑制率达50%左右时的NaCl浓度与愈伤组织生长抑制率达80%左右时的NaCl浓度一致,可以作为耐盐基因转化水稻时NaCl有效筛选浓度的重要参考。由此获得日本晴、武运粳7号和中花11NaCl有效筛选浓度为200mmol/L,秀水11NaCl有效筛选浓度为250mmol/L。采用上述浓度的NaCl对BADH基因转化的日本晴和秀水11愈伤组织进行筛选,成功获得了无标记基因的转基因水稻植株,转化率分别达到38.9%和32.0%。建立的NaCl筛选浓度确定法通过测定NaCl对水稻种子的发芽抑制率来确定水稻耐盐基因转化时合适的NaCl筛选浓度,操作简便,实验周期短,无需其他抗性标记基因。

基于回音壁谐振模的无标记光学生物传感技术

光学生物传感器在新药研制和生命科学等领域得到广泛关注,重点对基于回音壁谐振模的无标记光学生物传感器做了评述。根据谐振腔结构将传感器分为三类。基于微球的生物传感器由于微球腔的高品质因子而成为最初研究的重点,已实验研究了对蛋白质分子、病毒和细菌的传感响应,建立了基于单光子谐振能量和微扰理论的理论模型;基于微盘的生物传感器能够利用成熟的平面光刻微加工技术,传感构想提出更早,但直到回流热处理技术的应用才使得微盘品质因子大幅提高,从而实现了单分子测量;基于微环的生物传感器具有简单的谐振模式,有利于信号探测,已采用聚合物,氮化硅,以及硅基二氧化硅等材料制作成功,作为其在三维上的扩展,微管式传感器由于能够将光通道和流体通道合二为一而在近年得到关注。

用EM算法改进鸟枪法蛋白质鉴定中的无标记定量方法

蛋白质定量是探索疾病发生发展状况和寻找新药靶标的重要手段。在shotgun蛋白组学中,目前常用定量方法包括综合同位素标记后的质谱峰强度方法和无标记定量方法。根据数据类型无标记定量方法可以分为两类:基于鉴定蛋白的质谱数的方法和基于质谱峰强度的方法。本研究主要用EM算法改进基于鉴定蛋白质谱数的定量方法,并用免疫印迹实验获得的酵母全蛋白的丰度来验证EM算法改进后定量的有效性结果表明,改进后的质谱数和蛋白丰度的相关性比改进前有一定的提高。同时,利用这些数据对主要的几种基于鉴定蛋白的质谱数的模型进行了比较,发现PAI模型最好,SpS模型次之,emPAI模型最不适合于蛋白质定量。

蛋白质组学研究中的无标记定量方法

蛋白质定量是探索疾病发生发展状况和寻找新药靶标的重要手段.该领域最常用的技术是比较染色后的二维凝胶上蛋白点的光密度值或综合同位素标记后的质谱峰强度方法.但此二者的样品处理方法都比较麻烦,不利于进行大规模蛋白质组的定量研究.最近几年出现了利用质谱数据进行无标记定量的方法,根据数据类型这些方法可以分为2类基于鉴定蛋白的肽段数的方法和基于质谱峰强度的方法,在高通量大规模蛋白组定量研究中有很大优势.本综述主要介绍了这2类无标记定量方法的模型及优缺点,并比较了2类方法的灵敏度和准确度.肽段计数方法在检测蛋白丰度变化时更灵敏,而峰面积强度在评估蛋白比率时更准确.

表面等离子体共振生物芯片无标记实时检测虾血蓝蛋白

利用自行研制的便携式表面等离子体共振生物芯片检测系统,在生物芯片表面分别固定虾血蓝蛋白、虾血蓝蛋白的单克隆抗体、虾血蓝蛋白的单克隆抗体腹水作为生物探针,利用免疫反应的特异性,研究虾血蓝蛋白与其单克隆抗体的相互作用,分析动力学反应过程,建立标准曲线。用同一个生物芯片检测了8个抗体样品、7个未纯化的抗体腹水,为现场检测大量食品中过敏原、检测临床血清中过敏原特异性抗体进行基础研究。表面等离子体共振生物芯片检测过敏原,仪器便携、操作简便、无需标记、无污染、成本低,可进行现场大量样品的实时连续检测和快速筛选,适用于超市、集市、工厂等需要实时快速检测和质量监控的场所,也可以应用于临床上患者血清样品的过敏原抗体检测。