无量山乌骨鸡肝脏组织发育特征及脂蛋白脂酶基因表达研究

【目的】明确无量山乌骨鸡肝脏组织发育过程中脂质沉积和脂酶活性的变化特征以及与脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)基因表达的相关性。【方法】以1(D1)、42(D42)、84(D84)、126(D126)日龄共4个阶段的无量山公鸡和母鸡为研究对象,测定体重和肝脏组织重量并计算肝脏指数,HE石蜡切片染色鉴定肝脏组织的形态学变化,采用甘油三酯(triglyceride,TG)检测试剂盒(单试剂GPO-PAP法)检测肝脏组织中TG含量,采用比色法检测LPL和肝酯酶(hepaticlipase,HL)活性,采用实时荧光定量PCR检测肝脏组织中LPL基因mRNA表达量,采用Pearson相关性分析确定LPL基因表达量和肝脏组织各指标之间的相关性。【结果】无量山乌骨鸡公鸡和母鸡在不同生长阶段肝脏重差异均显著(P<0.05),D42和D84肝脏指数分别与D1和D126相比差异显著(P<0.05);公鸡和母鸡肝脏组织中TG含量均在D84时出现峰值;母鸡LPL和HL活性在D126时达到顶峰且显著高于其他阶段(P<0.05),公鸡LPL和HL活性在D42时达到顶峰,公母鸡总脂酶活性分别在D42和D126时达到顶峰且显著高于其他阶段(P<0.05);公鸡和母鸡肝脏组织LPL基因mRNA表达的峰值分别在D42和D1,且母鸡LPL基因mRNA表达量在D1、D42和D126共3个发育阶段均与HL活性呈显著相关(P<0.05)。【结论】无量山乌骨鸡肝脏组织重量、肝脏指数、TG含量、脂酶含量和LPL基因mRNA表达量在不同发育阶段变化较大,而成鸡脂酶活性主要受性别影响,母鸡中LPL基因mRNA表达量与HL活性显著相关。结果为进一步研究无量山乌骨鸡肝脏脂肪代谢调控机制提供科学依据。

云南无量山乌骨鸡肉品质物理特性的研究

为了解云南无量山乌骨鸡肉品质,试验对5,6月龄乌骨鸡各60只(公、母各半)肉品质客观指标(肉色、失水率、嫩度、p H值、蒸煮损失、剪切力)进行测定。结果表明:5月龄时,公、母鸡腿肌p H45 min值、p H24 h值极显著(P<0.01)高于胸肌,母鸡腿肌亮度(L)值显著(P<0.05)低于胸肌,母鸡胸肌失水率极显著(P<0.01)高于腿肌;6月龄时,公鸡胸肌p H45 min值、p H24 h值、黄度(b)值与腿肌相比差异极显著(P<0.01),腿肌失水率显著(P<0.05)高于胸肌,母鸡胸肌p H24 h值、失水率、蒸煮损失率与腿肌相比差异极显著(P<0.01),腿肌p H45 min值显著(P<0.05)高于胸肌。5月龄时,公鸡胸肌剪切力显著(P<0.05)高于母鸡,母鸡胸肌失水率极显著(P<0.01)高于公鸡,公鸡腿肌p H24 h值极显著(P<0.01)高于母鸡;6月龄时,公鸡胸肌红度(a)值极显著(P<0.01)高于母鸡,公鸡腿肌a值和b值均极显著(P<0.01)高于母鸡腿肌。5月龄母鸡胸肌p H24 h值、b值、失水率显著(P<0.05)低于6月龄,5月龄母鸡腿肌p H24 h值显著(P<0.05)高于6月龄。5月龄无量山乌骨鸡p H45 min值与p H24 h值呈极显著正相关,与失水率呈极显著负相关,与L值和b值均呈显著负相关。p H24 h值与L值和b值均呈显著负相关,与失水率呈极显著负相关,其余指标间无显著相关性。6月龄无量山乌骨鸡,p H45 min值与p H24 h值呈极显著正相关,与剪切力呈显著正相关,与失水率呈极显著负相关。p H24 h值与b值呈极显著负相关,与失水率呈显著负相关,与蒸煮损失呈显著正相关。L值与失水率呈极显著正相关。a值与b值呈显著负相关。剪切力与失水率呈极显著负相关,其余指标间无显著相关性。

无量山乌骨鸡腿肌营养成分分析和评价

通过对无量山乌骨鸡腿肌的营养成分进行测定,对比不同性别无量山乌骨鸡腿肌的营养成分差异,评价其营养价值。结果表明:无量山乌骨鸡腿肌的粗蛋白含量为(23.02±0.69)%、粗脂肪含量为(2.00±0.97)%、灰分含量为(1.25±0.06)%、水分含量为(73.63±1.29)%;腿肌冻干粉中17种氨基酸的总量达(82.59±4.30)%,鲜味氨基酸总量为(28.78±1.56)%,必需氨基酸含量为(34.08±1.83)%,必需氨基酸/总氨基酸的值为(41.26±0.52)%,必需氨基酸/非必需氨基酸的值为(70.26±1.52)%,氨基酸组成比例均衡;腿肌冻干粉中18种脂肪酸的总量为(33.88±9.41)mg/g,必需脂肪酸含量为(10.21±2.89)mg/g,饱和脂肪酸含量为(14.13±4.41)mg/g,不饱和脂肪酸含量为(19.75±5.22)mg/g,不饱和脂肪酸占比高于50%;腿肌中磷元素含量为(721.25±294.75)mg/kg,镁、钙、铁、锌、铜含量分别为(240.03±63.06)、(24.28±5.56)、(14.94±2.76)、(11.40±1.94)、(1.51±0.85)mg/kg。无量山乌骨鸡腿肌的营养成分具有性别差异性,公鸡腿肌的水分含量、17种氨基酸总量、鲜味氨基酸、必需氨基酸及磷元素含量显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于母鸡,且公鸡腿肌的氨基酸比值系数分高于母鸡;母鸡腿肌的粗脂肪、灰分、饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸及锌元素含量显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于公鸡。

无量山乌骨鸡脂联素基因的多态性分析

采用PCR-RFLP(聚合酶链式反应—限制性片段长度多态)方法对无量山乌骨鸡208个个体的脂联素基因(NC_006096)第1外显子上的Hsp92Ⅱ酶切位点的c.A99G突变、第2外显子上的MvaⅠ酶切位点c.C565G突变进行检测。结果显示,在c.A99G位点有AA、AB和BB 3种基因型,c.C565G位点有CC、CD和DD 3种基因型。对2个位点群体遗传学特性分析的结果表明,c.A99G位点多肽信息含量为中度多态,而在c.C565G位点多肽信息含量为低度多态。经χ^2适合性检验表明群体在2个位点均处于平衡状态。

无量山乌骨鸡FSHR基因分离、表达及其蛋白功能分析

【目的】揭示无量山乌骨鸡FSHR基因的结构与功能。【方法】采用RT-PCR法克隆了无量山乌骨鸡FSHR基因的编码区全序列,并利用生物信息学方法对无量山乌骨鸡FSHR基因编码产物的理化特性、结构及功能进行了初步分析,最后采用实时荧光定量分析其组织表达情况。【结果】本研究获得的无量山乌骨鸡FSHR基因编码区全长为2 082 bp,编码693个氨基酸。生物信息学预测显示:无量山乌骨鸡FSHR无N-端信号肽。该蛋白含有3个保守结构域、7个跨膜区和6种功能活性位点。无量山乌骨鸡FSHR二级结构主要由无规则卷曲和α螺旋构成,分别占35.50%和31.17%。氨基酸序列比对显示:无量山乌骨鸡FSHR与其他禽类的同源性在87.4%以上。荧光定量结果显示:该基因在性腺组织中表达量最高,说明该基因与生产性能、繁殖性能等有关系。【结论】FSHR属于G蛋白偶联受体家族,可介导促卵泡作用的发生,可能在转运和结合、信号转导、修饰加工等过程中发挥重要作用。

无量山乌骨鸡肉质性状及养分含量的性别差异分析

本研究以无量山乌骨鸡7月龄公母鸡(各8只)为研究对象,对其胸肌肉质性状及养分含量进行测定,采用独立样本T检验对测定结果进行性别差异分析,并用Pearson相关性分析方法进行肉质性状之间的相关性分析。结果表明:母鸡胸肌肉色亮度(L^*)、滴水损失极显著高于公鸡;公鸡胸肌的肉色L^*与红度(a^*)、剪切力与滴水损失均呈极显著负相关,母鸡胸肌的肉色L*与滴水损失呈极显著正相关;母鸡胸肌水分含量极显著高于公鸡,公鸡胸肌粗蛋白含量显著高于母鸡;公母鸡胸肌中3种常量元素含量由高到低依次为磷>镁>钙,公鸡胸肌中镁、铁、铜、锌和硒元素含量均显著或极显著高于母鸡;公鸡胸肌氨基酸总量显著高于母鸡,非必需氨基酸总量及风味氨基酸总量极显著高于母鸡;在氨基酸组成中,母鸡胸肌必需氨基酸总量极显著高于公鸡,而非必需氨基酸和风味氨基酸极显著低于公鸡。本研究结果表明无量山乌骨鸡胸肌肉质性状及养分含量存在显著的性别差异,为无量山乌骨鸡遗传资源保护和利用提供了科学依据。

无量山乌骨鸡胚胎期脂肪组织发育特征分析

为研究无量山乌骨鸡胚胎期脂肪组织的发育特征,对胚胎期12日胚龄(E12)到出定、检测单位重量脂肪组织DNA含量、HE染色鉴定脂肪组织的形态学变化并结合Image J软件定量分析细胞面积、RT-qPCR检测FAS、ACCα、SREBP-1和ATGL mRNA表达量。结果表明:从E12~E16显著下降(P<0.05);脂肪细胞面积在D0达到了峰值;FAS、ACCα和SREBP-1 mRNA于其他时期(P<0.05)。综上所述:无量山乌骨鸡在胚胎发育后期通过增加脂肪细胞体积而使脂肪组织重量增加,脂肪组织中4个脂代谢相关基因存在不同的表达模式。

基于RNA-Seq的无量山乌骨鸡肝脏组织脂代谢相关基因筛选及其表达分析

旨在通过分析不同日龄无量山乌骨鸡肝组织mRNA表达谱,挖掘肝脂代谢相关基因及其所参与的调控通路,并确定部分关键基因在肝发育中的表达特征。本研究采集1日龄(D1)和168日龄(D168)各3只母鸡肝组织样品,利用DNBSEQ平台进行转录组测序,随机选取10个差异表达基因进行RT-qPCR验证。以|log2FC|≥2、Q value≤0.01和差异基因KEGG分析筛选参与脂代谢的差异表达基因,对筛选出的脂代谢相关差异表达基因进行GO富集、KEGG通路和蛋白互作分析。100只雌性雏鸡以出壳体重组间无差异随机分为5组,每组20只鸡,在D1、D42、D84、D126和D168共5个阶段每组随机屠宰2只健康母鸡(n=10),并提取肝组织RNA,RT-qPCR构建部分差异基因mRNA表达谱。结果,筛选出50个与脂代谢相关的差异表达基因,其中38个基因表达上调,12个基因表达下调。差异表达基因主要富集在脂质代谢、氧化还原、脂肪酸生物合成、脂肪酸代谢、胆固醇生物合成和甾醇生物合成等过程;差异表达基因参与了类固醇生物合成、脂肪酸代谢、甘油脂类代谢、不饱和脂肪酸生物合成和PPAR信号通路。蛋白互作分析筛选出SCD、ACSBG2、SQLE、HSD17B7、LCAT和LPIN1等关键蛋白基因,通过其mRNA表达量不同参与脂代谢调控。通过转录组测序挖掘出与脂代谢相关的差异表达基因50个,且42个差异表达基因之间存在相互作用关系,该研究结果为进一步解析优质鸡脂代谢相关基因的分子调控提供了理论依据。

无量山乌骨鸡胚胎期肝脏组织发育特征分析

为了明确肉蛋兼用品种无量山乌骨鸡胚胎期肝脏组织的发育特征,试验同时孵化爱拔益加肉鸡(AA鸡)、海兰灰蛋鸡与无量山乌骨鸡3个品种的种蛋,在10,12,14,16,18,20胚龄(E10、E12、E14、E16、E18、E20)和出壳当日(D0)分别测定胚胎重和肝脏重,比较品种间相对肝脏重;取肝脏制备石蜡切片(H.E.染色)和冰冻切片(油红O染色)检测肝脏中脂质沉积情况;通过实时荧光定量PCR扩增检测脂代谢相关基因(FAS基因和ATGL基因)的mRNA相对表达量。结果表明:在E10和E14时,无量山乌骨鸡相对肝脏重分别显著高于AA鸡和海兰灰蛋鸡(P<0.05);在E18时,肝脏组织油红O染色红色最深;无量山乌骨鸡FAS基因和ATGL基因mRNA相对表达量在E10、E12、E14、E16、E18时最高且与AA鸡和海兰灰蛋鸡差异显著(P<0.05);无量山乌骨鸡FAS基因和ATGL基因均在D0时达到表达高峰,且与其他胚龄相比差异极显著(P<0.01)。说明无量山乌骨鸡脂代谢活动在出壳后更为活跃。

无量山乌骨鸡HMOX 1基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究

【目的】扩增无量山乌骨鸡血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HMOX1)基因CDS区并进行生物信息学分析,检测其组织表达特征,为后续该基因的功能研究奠定基础。【方法】以无量山乌骨鸡皮下脂肪组织cDNA为模板,PCR扩增HMOX 1基因,连接PESI-T载体后进行测序分析,使用DNAMAN软件对所获序列进行翻译并与原鸡进行序列比对;使用BLAST、Mega 7.0、SOPMA、ProtParam和ExPASy等在线软件进行相似性比对、系统进化树构建、编码蛋白的理化性质及蛋白结构预测;利用STRING软件预测HMOX1互作蛋白;通过实时荧光定量PCR检测HMOX 1基因在无量山乌骨鸡不同组织中的表达水平。【结果】无量山乌骨鸡HMOX 1基因CDS区长为891 bp,编码296个氨基酸,与原鸡HMOX 1基因(登录号:NM_205344.1)核苷酸序列相比存在3处突变,其中2处为同义突变,第217 bp处G>C为错义突变,导致第73位的天冬氨酸突变为甘氨酸。HMOX 1基因与原鸡和日本鹌鹑的氨基酸序列相似性较高(99.6%和95.0%),与马的相似性最低(60.2%)。系统进化树分析发现,无量山乌骨鸡与原鸡和日本鹌鹑亲缘关系较近,与非禽类的亲缘关系较远。HMOX1蛋白具有不稳定性和亲水性,主要定位在细胞质中,不存在信号肽裂解位点,属于非分泌蛋白;存在1个跨膜螺旋结构,共有47个磷酸化修饰位点;二级结构以α-螺旋为主。HMOX1蛋白与HMOX2、BLVRA、HEPH、CP、COX10等10个蛋白可能存在相互作用。组织表达分析发现,HMOX 1基因在无量山乌骨鸡各组织中均有表达,其中在肝脏中表达量最高,在心脏中表达量最低。【结论】无量山乌骨鸡HMOX 1基因CDS区长为891 bp,编码296个氨基酸;预测其与10个蛋白存在相互作用;HMOX 1基因在无量山乌骨鸡肝脏组织中高表达。研究结果为进一步探究HMOX 1基因在鸡脂代谢中的作用及功能提供了理论依据。

景东县无量山乌骨鸡产业发展存在的问题及对策

无量山乌骨鸡是云南省景东县人民经过长期选择、培育成的优良地方品种。分析景东县无量山乌骨鸡的价值,指出其当前发展存在的问题,提出"十二五"期间,景东县打造无量山乌骨鸡品牌推动无量山乌骨鸡产业跨越发展的对策,以使其成为景东县农民增收致富新的增长点。

无量山乌骨鸡产业发展前景分析

近几年,南涧无量山乌骨鸡市场价格持续攀升,良好的经济效益促使广大农户投资转向无量山乌骨鸡产业,各级政府重视,畜牧部门狠抓落实,广大农户积极参与,使南涧无量山乌骨鸡产业呈现出勃勃生机。从无量山乌骨鸡产业发展背景、环境条件、发展模式、市场行情、潜在的问题及应对策略几个方面阐述了南涧无量山乌骨鸡产业发展前景。

无量山乌骨鸡规模放养场球虫病的防控

无量山乌骨鸡属于肉蛋兼用型地方鸡品种,原产于无量山、哀牢山及两山之间,具有肉质细嫩、汤清味美,营养丰富等特点。近年来,由于地方大力推进特色发展,无量山乌骨鸡养殖规模不断扩大,球虫等疾病的防治显得更为重要。本人就放养无量山乌骨鸡的球虫防治措施提出如下见解,仅供参考。

景东县无量山乌骨鸡产业发展探讨

分析景东县无量山乌骨鸡饲养的资源优势及经济效益,针对养殖过程中存在的问题,提出做好无量山乌骨鸡产业长远发展规划,建立资金及政策扶持机制;注重遗传资源保护;抓好标准化、规模化饲养,提高饲养管理水平,为推动无量山乌骨鸡产业发展、促进农民增收提供参考。

无量山乌骨鸡体重和胫长的相关性研究

为研究无量山乌骨鸡发育过程中体重和胫长之间的关系,以无量山乌骨鸡母鸡为研究对象,将出壳当日记为第0周(0 W),测定0 W、6 W、12 W、18 W和24 W共5个阶段的体重和胫长,并对其进行相关性分析。结果表明,体重在不同阶段持续增加且各阶段之间差异显著(P<0.05);胫长在0 W、6 W、12 W和18 W各阶段之间差异显著(P<0.05),18 W和24 W之间差异不显著(P>0.05);对不同阶段的体重和胫长的相关性分析表明,12 W体重和胫长之间存在显著相关(P<0.05)。综上所述,无量山乌骨鸡母鸡体重和胫长在12 W存在显著相关,该研究结果可为无量山乌骨鸡的选种选育及种质特性等研究提供参考。

无量山乌骨鸡器官指数比较分析

内脏器官是消化和吸收各类营养物质的主要区域,是身体的功能性器官,对于家禽的生长发育起着极其重要的作用.通过对40只五月龄无量山乌骨鸡器官指数的比较分析得出:公鸡的活重、肺脏重、心脏重、性腺重、肝脏重均极显著高于母鸡(P<0.01),而肌胃重则显著高于母鸡(P<0.05);公鸡的性腺、肺脏和心脏指数均显著高于母鸡(P<0.05),而肝脏和肌胃指数显著低于母鸡(P<0.05);公鸡的心脏和性腺指数均与活重呈极显著正相关(P<0.01),母鸡的心脏、肾脏、肺脏和腺胃指数均与活重呈极显著正相关(P<0.01),肝脏和腺胃指数与活重呈显著正相关(P<0.05).内脏器官的重量和器官指数在一定程度上反映了动物机体的机能状况,对于理论研究和生产实践有重要的指导意义.

无量山乌骨鸡养殖及疫病防控探讨

无量山乌骨鸡是居住在无量山系的先民将当地红色原鸡经饲养驯化、长期选育形成的地方鸡品种。2009年无量山乌骨鸡被列入国家畜禽品种资源遗传名录,2011年被评选为云南省"六大名鸡"之一,2013年通过国家农产品地理标志产品认证,2021年无量山乌骨鸡被列为云南省省级畜禽遗传资源保护名录。

云南省无量山乌骨鸡传染性支气管炎和大肠杆菌混合感染的诊断

研究旨在诊断某鸡场发生混合感染的情况,对发病鸡开展临床观察、病理剖解。采集150日龄无量山乌骨鸡病料2份,采用分子生物学技术、细菌分离培养、生化鉴定、药敏试验及病理组织切片进行诊断。结果显示:乌骨鸡表现为精神沉郁、腹泻、呼吸有啰音;病理解剖发病鸡可见鼻腔及气管内有大量黏液,肺部出血瘀血,肠道鼓气,肠壁变薄内有黄色泡沫样液体。分子生物学诊断结果显示,发病鸡呈鸡传染性支气管炎阳性;细菌分离培养及生化鉴定结果显示,致病菌为大肠杆菌。药敏试验结果显示,该大肠杆菌对头孢喹肟、阿莫西林、磺胺甲恶唑、四环素、多西环素和头孢曲松钠等6种抗生素显示耐药,对新霉素显示敏感;病理组织切片结果显示,患病鸡肺部病变明显。研究表明,该鸡场内发病鸡为鸡传染性支气管炎及大肠杆菌混合感染,根据诊断结果建议用药后,该场病情得到控制。

南涧无量山乌骨鸡产业发展建议

无量山乌骨鸡属地方优良品种,是南涧富民增收的重点支柱产业之一,肉质细嫩,汤清味美,有药用价值,备受消费者的青睐。如何促使南涧无量山乌骨鸡产业更好的发展是目前探讨的主要目的。

文龙镇无量山乌骨鸡林下养殖现状分析

无量山乌骨鸡养殖历史悠久,肉质鲜嫩有特殊香味,深受消费者喜爱。通过农业农村部和省级无公害绿色产品认证,列入《国家畜禽遗传资源库》名录。传统饲养模式,已经满足不了市场需求,需要利用现代新技术,为消费者提供量多质优的产品。