日本沼虾表皮Serpin基因克隆及免疫功能的初步研究

丝氨酸蛋白酶级联反应介导的黑化是甲壳动物重要的免疫反应,丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine proteinase inhibitor,Serpin)是黑化反应的重要调节因子,而甲壳动物表皮Serpin的有关研究较少.为了探索表皮Serpin在日本沼虾(Macrobrachium nipponense)免疫反应中的功能,基于前期转录组数据,利用PCR、RACE和生物信息学从日本沼虾表皮克隆并鉴定了1个新的Serpin基因,命名为MnSerpin,利用RT-qPCR和RNAi等方法,研究了该基因时空表达模式、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)攻毒后表皮MnSerpin的转录水平以及日本沼虾死亡率的变化.结果显示,MnSerpin cDNA全长2181 bp,编码419个氨基酸,具有Serpin结构域.MnSerpin在腹背部表皮、鳃、血细胞、胃、心、肝胰腺等多种组织均有表达;表皮MnSerpin的表达与蜕皮周期有关,与蜕皮间期(C期)相比,在蜕皮后早期(A期)最高,增加6.06倍(P<0.01).嗜水气单胞菌攻毒后,表皮MnSerpin的相对表达量在6 h达到了峰值,比对照组增加3.77倍(P<0.01).在腹背部第二节的关节膜内注射3μg dsRNA溶液,每12 h注射1次,共注射3次,最后一次注射后12 h,干扰效率最高,表皮MnSerpin的相对表达量同比下降58%(P<0.01).在干扰效率最高的时间点攻毒,120 h内,干扰组虾的累计死亡率比未干扰组增加16%(P<0.01).结果表明,日本沼虾表皮MnSerpin是重要的免疫因子,MnSerpin的表达存在组织以及蜕皮周期不同阶段的差异,该基因表达下调能显著增加嗜水气单胞菌感染虾的死亡率.

日本沼虾高效生态养殖技术浅析

市场上日本沼虾的需求量不断增加,但目前日本沼虾亩产量已处于瓶颈阶段。面对不断增长的市场需求量,如何提高日本沼虾亩产量成了日本沼虾养殖的首要问题。本文通过对日本沼虾养殖的初步研究和对养殖户的随机调研等方法,研究当地的养殖流程及病害防治手段。结果发现,当地日本沼虾池塘养殖中存在近亲育苗从而导致种质退化严重、日常饲养管理过程中缺少预防意识而盲目用药、捕捞时使用溴氰菊酯赶捕等问题。针对以上问题,本研究针对性地提出了引进优质苗种、采取套养模式、树立以防为主的意识合理用药、采用轮捕与集中捕捞相结合替代赶捕等解决对策。

饲料中添加白术提取物对日本沼虾生长、健康和抗病力的影响

文章研究了饲料中添加不同水平的白术提取物(Extraction of Atractylodes macrocephala Koidz,EAMK)对日本沼虾(Macrobrachium nipponense)生产性能、器官指数、血液生化指标、抗氧化能力、消化系统健康和抗病力的影响。实验以初始体重为(0.21±0.05)g的日本沼虾为研究对象,设置6个饲料处理,白术提取物添加量为0、100、200、400、600和1200 mg/kg(Control、A100、A200、A400、A600和A1200)。每个饲料处理设6个重复,每个养殖缸放入60尾虾,实验周期为75d,每天记录采食量。养殖实验期间监测水体温度为(20±3)℃,pH为7.8—8.2,亚硝酸盐为0.16—0.2 mg/L,氨氮为0.02—0.1 mg/L,溶氧>6.0 mg/L。在实验结束后,分析日本沼虾生长性能、血清生化指标、肠道消化酶和免疫指标及肝胰腺抗氧化能力,观察日本沼虾的组织结构,用嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)进行攻毒并记录存活率。结果表明:饲料中添加200 mg/kg的白术提取物可以显著提高日本沼虾的增重率(WGR)和特定生长率(SGR),并显著降低饲料系数(FC;P<0.05)。各处理组间的肝体比、出肉率和体成分均无显著性差异(P>0.05);A100组的血清葡萄糖(Glu)含量显著高于对照组(P<0.05),并能显著降低谷丙转氨酶(ALT)活性(P<0.05);各白术提取物处理组的血清甘油三酯(TG)和总胆固醇含量(TC)均显著低于对照组(P<0.05);A400组的肝胰腺GSH-Px活性显著高于A100组和对照组(P<0.05),A600组的肝胰腺CAT活性显著高于其他各组(P<0.05),A200和400组的肠道iNOS的活性显著高于对照组(P<0.05);A400组的日本沼虾肠绒毛显著高于对照组(P<0.05),并且减轻了肝细胞的空泡化,促进了鳃的完整性;A100处理组的嗜水气单胞菌攻毒后存活率显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,白术提取物可以提高日本沼虾的生长性能和抗氧化能力,提高抗病力,在日本沼虾饲料中适宜添加量为100—400 mg/kg。

超高效液相色谱-串联质谱法定量检测日本沼虾不同组织中氨基脲含量

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定日本沼虾(Macrobrachium nipponense)不同组织部位中不同形态氨基脲(semicarbazide,SEM)的检测方法。方法样品用66.7%甲醇溶液洗脱后,经盐酸酸化水解,2-硝基苯甲醛过夜衍生,调pH至7.3~7.4后,用乙酸乙酯提取,分析物采用UPLC-MS/MS定性检测,稳定同位素内标法进行定量测定。结果SEM在0.25~20.00μg/kg范围内线性关系良好,相关系数大于0.999,肌肉、头壳、背壳、头足胸、眼柄和鳃6个组织的方法检出限为0.25μg/kg(S/N≥3),定量限为0.50μg/kg(S/N≥10),肝胰腺的方法检出限为0.5μg/kg,定量限为1.0μg/kg,相对标准偏差不大于5.20%。虾壳中SEM含量最高,肌肉中含量最低,肌肉中SEM主要以游离态形式存在,虾壳中SEM主要以结合态形式存在。结论本方法灵敏度高、重现性好,可用于日本沼虾不同组织中不同形态SEM的定量测定。日本沼虾不同组织中SEM的存在形态与含量均存在巨大差异。

饲料中添加过氧化氢酶对日本沼虾生长性能、抗氧化能力、免疫性能和肠道菌群结构的影响

本试验旨在研究饲料中添加不同水平过氧化氢酶(CAT)对日本沼虾生长性能、抗氧能力、免疫性能和肠道菌群结构的影响。试验共配制6种饲料,分别在基础饲料中添加0(CAT1,对照组)、75(CAT2组)、150(CAT3组)、300(CAT4组)、600(CAT5组)和1200 U/kg(CAT6组)的CAT,饲喂1080只初始体重为(0.10±0.03)g的日本沼虾,每组3个重复,每个重复60只虾。试验期为8周。结果显示:1)各试验组日本沼虾的存活率未受到饲料CAT添加水平的显著影响(P>0.05),但当饲料添加150 U/kg CAT时,日本沼虾的增重率显著高于对照组(P<0.05)。2)各试验组日本沼虾肝胰腺超氧化物歧化酶(SOD)活性均无显著差异(P>0.05);CAT2、CAT3和CAT4组肝胰腺丙二醛(MDA)含量显著低于其余各组(P<0.05);随着饲料中CAT添加水平的增加,肝胰腺CAT活性呈现出先上升后下降的趋势,并在CAT2组其活性达到最高。同时,日本沼虾肝胰腺中多酚氧化酶(PPO)活性随着饲料中CAT添加水平呈先增加后降低趋势,CAT3和CAT4组肝胰腺PPO活性显著高于CAT5组(P<0.05);肝胰腺碱性磷酸酶(AKP)活性具有一定的波动,CAT3组肝胰腺AKP活性显著高于CAT1、CAT2和CAT4组(P<0.05)。3)日本沼虾各组之间肠道菌群的α多样性均无显著差异(P>0.05)。对日本沼虾肠道菌群进行β多样性分析发现,在门水平上,日本沼虾肠道菌群优势菌门为变形菌门、厚壁菌门和蓝藻菌门,CAT3和CAT4组中变形菌门的相对丰度显著低于对照组(P<0.05),而厚壁菌门相对丰度显著高于对照组(P<0.05);在属水平上,日本沼虾肠道菌群优势菌属为Tyzzerella、气单胞菌属和不动杆菌属,CAT4组中Tyzzerella相对丰度显著高于对照组(P<0.05),而CAT3、CAT4和CAT5组中气单胞菌属相对丰度显著低于对照组(P<0.05)。综上所述,饲料中添加150~300 U/kg的CAT可提高日本沼虾生长性能、抗氧化能力和免疫性能,增加肠道有益菌群的丰度,促进日本沼虾的健康养殖。

日本沼虾StAR基因克隆及其低氧胁迫下表达分析

为了研究类固醇激素合成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein, StAR)在日本沼虾应答低氧胁迫过程中所发挥的作用,实验应用c DNA末端快速扩增(RACE)PCR技术克隆了日本沼虾StAR全长cDNA序列,并利用在线软件对其序列特征进行生物信息学分析,采用半定量RT-PCR方法分析StAR在日本沼虾不同组织的分布情况,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与免疫印迹(Western blot)技术对其在不同低氧胁迫阶段中的表达规律进行检测,观察低氧胁迫下精巢组织中StAR蛋白免疫组化定位。结果显示,日本沼虾StAR其cDNA全长3 361 bp (NCBI登录号:MW263908),包括5′-UTR 323 bp,3′-UTR 2 129 bp,开放阅读框909 bp,编码302个氨基酸。氨基酸序列比对及系统进化分析结果显示,日本沼虾StAR基因与三疣梭子蟹等甲壳动物StAR聚类一支,具有最近的亲缘关系。半定量RT-PCR检测结果显示,StAR在日本沼虾不同组织中均有表达,其表达量在肝胰腺和心脏组织中最低,在精巢组织中表达处于较高水平。使用qRT-PCR技术检测日本沼虾精巢中StAR在低氧胁迫下时空表达情况,结果表明,与对照组相比,低氧处理组精巢中StAR基因表达量在1~48 h均显著上调,而在低氧处理组96 h显著降低。此外,本实验对StAR进行了原核表达及抗血清制备,采用Western blot检测StAR蛋白表达丰度基本与基因表达模式相似,免疫组化结果显示,StAR蛋白在精细胞与间质细胞中均有表达。综上所述,长期低氧胁迫显著降低了StAR基因的转录表达水平,并且该基因可能在类固醇合成路径及精子发生过程中均发挥重要作用。本研究结果为进一步解析日本沼虾类固醇激素合成分子机制奠定基础。

日本沼虾Bax基因克隆及其在低氧胁迫过程中的作用

为探究细胞凋亡相关基因Bax(B-cell lymphoma-2 associated X protein)在日本沼虾低氧胁迫过程中所发挥的作用,实验采用cDNA末端快速扩增(RACE)PCR技术获得日本沼虾细胞凋亡相关基因Bax的cDNA全长序列,采用半定量RT-PCR与实时荧光定量PCR(qPCR)分析其在日本沼虾不同组织、不同低氧阶段的表达情况,同时采用Western blot与免疫组化分析了低氧下日本沼虾Bax蛋白的表达与定位。日本沼虾Bax基因cDNA全长2287 bp(NCBI登录号:MZ823353),包括5'非编码区(UTR)为42 bp,3'UTR为814 bp,开放阅读框(ORF)1431 bp,编码476个氨基酸。通过软件和生物信息网站对其序列进行分析,氨基酸相似度比对显示,日本沼虾细胞凋亡基因Bax富含高度保守的BH1、BH2及BH3结构域。系统进化树分析显示,日本沼虾Bax基因与斑节对虾等甲壳动物Bax聚为一支,具有最近的亲缘关系。RT-PCR结果表明,日本沼虾Bax基因在肝胰腺中表达量最高,在脑中表达量最低。在低氧胁迫1~96 h时,日本沼虾鳃和肝胰腺组织Bax基因表达量均显著高于对照组,这与日本沼虾Bax蛋白表达丰度基本相似。通过构建原核表达载体获得体外重组蛋白Bax,并将纯化重组蛋白免疫兔子获得抗血清。免疫组化结果显示,鳃和肝胰腺Bax蛋白阳性信号主要定位在鳃上皮细胞和肝细胞中。最后,采用流式细胞仪分析表明,日本沼虾血细胞凋亡率在低氧胁迫96 h时显著高于对照组,这与日本沼虾Bax基因转录水平和蛋白表达丰度相吻合。研究表明,日本沼虾Bax基因在日本沼虾不同组织应答低氧胁迫分子过程中均具有促凋亡作用。本研究可为探明日本沼虾不耐低氧的分子机制提供理论参考。

日本沼虾表皮酚氧化酶原激活因子基因的克隆及功能

为了探索表皮酚氧化酶原激活因子(prophenoloxiase activating factors,PPAFs)在甲壳动物免疫反应中的功能,基于前期转录组数据,本实验利用PCR和RACE技术从日本沼虾表皮克隆并鉴定了一个新的PPAF基因,命名为MnPPAF1 (GenBank登录号为OP784577),利用生物信息学、实时荧光定量PCR (qPCR)和RNA干扰(RNAi)等方法,研究了该基因序列特征、时空表达模式、嗜水气单胞菌攻毒后表皮MnPPAF1的转录水平、酚氧化酶(phenoloxidase,PO)活性以及日本沼虾死亡率的变化。结果显示,MnPPAF1 cDNA全长1 718 bp,编码460个氨基酸,具有夹子结构域丝氨酸蛋白酶(clip-domain serine proteinases,Clip-SPs)和胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶(trypsin-like serine proteases,Tryp-SPs)结构域。MnPPAF1在腹背部的表皮、血细胞、鳃、胃、心脏、肝胰腺等多种组织均有表达;表皮MnPPAF1的表达与蜕皮周期有关,与蜕皮间期(C期)相比,蜕皮前晚期(D4期) MnPPAF1表达量增加857%。嗜水气单胞菌攻毒后,表皮MnPPAF1表达水平在6 h达到了峰值,较对照组增加227%,而表皮PO活性在12 h达到峰值,同比增加24%。在腹背部第2节注射3μg dsRNA溶液,每12小时注射1次,共注射3次,最后1次注射后12 h,干扰效率最高,表皮MnPPAF1表达同比下降71.79%,至24 h,表皮PO活性降低72.31%。在干扰效率最高的时间点攻毒,在120 h,攻毒+干扰组虾的累计死亡率比攻毒+未干扰组增加26%。结果表明,MnPPAF1是表皮重要的免疫因子,参与调节酚氧化酶原系统的激活,该基因表达下调能显著增加嗜水气单胞菌感染虾的死亡率。本研究为阐明表皮在甲壳动物免疫系统中的作用积累了资料。

放养模式对日本沼虾生长性状与肌肉营养成分的影响

对3种放养处理[T1,与中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)和少量鱼类共养;T2,与沙塘鳢(Odontobutis obscura)共养;T3,与鳙(Aristichthys nobilis)共养]条件下日本沼虾(Macrobrachium nipponense)虾体的生长性状和肌肉营养成分进行分析与比较,以期为淡水经济虾类养殖模式的优化提供参考。结果发现:日本沼虾的全长、头胸甲长、体长和体重在不同放养模式下差异显著(P<0.05),肌肉中的粗蛋白、粗脂肪、粗灰分和水分含量分别为16.54%~17.97%、1.86%~2.25%、0.95%~1.12%和78.69%~80.56%,粗灰分含量在各处理间差异显著。共检出氨基酸17种,其中,必需氨基酸7种,必需氨基酸指数为70.88~73.13,不同处理间丙氨酸含量差异显著;共检出脂肪酸16种,不同处理间脂肪酸种类组成和C18:2 n-6、多不饱和脂肪酸的含量差异显著;检测的9种矿物质元素(Na、K、Ca、Mg、Fe、Cu、Zn、Mn、Cr)中,Na、Mn、Fe、Zn含量在不同处理间差异显著。研究表明,放养模式对日本沼虾的生长性状和肌肉营养具有显著影响,可能与不同放养结构和管理措施造成的养殖环境和食物资源差异有关,生产中需根据放养模式调节营养成分的添加。相较之下,日本沼虾与中华绒螯蟹和少量鱼类共养时,虾肉的鲜美程度、营养价值和保健价值相对更高,可选择该模式来改善养殖虾的营养品质。

四川省不同流域日本沼虾群体遗传多样性分析

【目的】四川省河流众多,野生日本沼虾资源丰富,深入了解四川省日本沼虾种质资源现状,开展不同流域日本沼虾遗传多样性评估具有重要意义。【方法】基于线粒体Cytb序列,对四川省巴河(BH)、涪江(FJ)、嘉陵江(JLJ)、岷江(MJ)和思蒙河(SMH)5个日本沼虾野生群体的遗传多样性进行分析。【结果】所有群体的201尾日本沼虾中共检测出36种单倍型,单倍型多样性(H_(d))值为0.345~0.959,Hd均值为0.802,其中JLJ群体的Hd值最高(0.959),而MJ、SMH和BH群体的Hd值相对较低,H_(d)值均小于0.5。所有群体的核苷酸多样性(P_(i))值为0.00225~0.01547,P_(i)均值为0.01583,其中JLJ群体的P_(i)值最高(0.01547),BH群体的P_(i)值最低(0.00225)。日本沼虾的遗传变异主要来自群体间(68.20%),群体间存在显著的遗传分化,系统发育树分析显示所有群体呈现3个较明显分支。单倍型MJ网络图显示所有单倍型也呈现3个明显谱系,其中谱系A包含优势单倍型Hap 14,谱系B包含优势单倍型Hap 16,谱系C包含优势单倍型Hap 1。【结论】日本沼虾群体遗传多样性总体上处于较高水平,但不同流域的群体间遗传多样性水平差异较大,其中MJ、BH和SMH群体的遗传多样性相对较低,对这些流域内日本沼虾种质资源的保护有待进一步加强。本研究为四川省日本沼虾种质资源的保护与合理开发利用提供了参考依据,有利于促进四川省日本沼虾产业的可持续发展。

日本沼虾桩蛋白基因的克隆与镉胁迫对其表达的影响

镉(Cd)是蓄积性和毒性较强的生物非必需重金属元素之一,会对水生生物造成较大的危害。为更好地了解镉对日本沼虾的分子毒性作用,为水环境镉污染的生态风险预警和评估提供生物标志物,克隆了日本沼虾(Macrobrachium nipponenes)桩蛋白(paxillin)基因MnPXN,并检测了镉胁迫对其表达的影响。MnPXN基因全长为3655 bp,包含1491 bp的编码区,编码496个氨基酸;MnPXN蛋白具有6个低复杂区域和3个保守的LIM结构域,与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)聚成一支,与家蚕(Bombyx mori)、赤拟谷盗(Tribolium castaneum)等昆虫的亲缘关系较近,与线虫(Nematoda)亲缘关系最远。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,MnPXN在日本沼虾的肝胰腺、胃、鳃中表达水平较高,在心脏和肌肉中表达水平较低。在0.2427 mg·L^(-1)CdCl_(2)中暴露24 h,肝胰腺中MnPXN基因表达水平较对照组均显著升高,0.0200 mg·L^(-1)CdCl_(2)胁迫6 h后MnPXN基因表达水平显著升高,24 h表达量达到最大值,96 h恢复至起始水平。RNA干扰能显著(P<0.05)降低MnPXN在肝胰腺中的表达水平,显著(P<0.001)增加日本沼虾的死亡率,表明MnPXN基因能够降低镉胁迫对日本沼虾的毒性作用,其作用机理尚需进一步研究。

咪唑类物质KK-42对日本沼虾几丁质酶基因表达的影响

为探讨咪唑类物质KK-42提高感染嗜水气单孢菌的日本沼虾幼虾成活率的机制,首次克隆了日本沼虾几丁质酶基因-3部分序列,研究了其时空表达及酶活力的变化。将体长3.5~5.0cm的日本沼虾幼虾随机分为两组,分别用1.95×10-4 mol/L的咪唑类物质KK-42溶液（试验组1）或不含咪唑类物质KK-42的溶液（对照组1）浸泡处理1min,12h后,分别注射嗜水气单胞菌菌悬液（菌攻毒试验组和菌攻毒对照组）或生理盐溶液（试验组2和对照组2）,不同时间测定幼虾的成活率,分析几丁质酶基因-3mRNA水平及其酶活力的变化。结果显示,12-48h时,菌攻毒试验组的成活率比菌攻毒对照组增加133%以上。克隆的日本沼虾几丁质酶基因-3部分mRNA序列与其他甲壳类具有90%以上同源性。几丁质酶基因-3表达水平在肝胰腺中最高,以蜕皮前期最为显著。与对照组1相比,在12h,试验组1几丁质酶基因-3mRNA水平和酶活力分别增高了150%和75%;菌攻毒试验组mRNA水平在12~48h明显高于菌攻毒对照组,尤其在24h,增幅高达304%,酶活力在24h比菌攻毒对照组增高48%。咪唑类物质KK-42预处理能显著上调感染嗜水气单胞菌的日本沼虾幼虾肝胰腺几丁质酶基因-3的转录、诱导酶活力增强,这可能是咪唑类物质KK-42提高幼虾成活率的机制之一。

四川省日本沼虾养殖现状综述

日本沼虾味道鲜美,营养丰富,深受广大消费者喜爱,是我国重要的淡水名优品种。据《2021年中国渔业统计年鉴》统计,2020年全国有24个省(自治区、直辖市)进行日本沼虾养殖,全国养殖年总产量22.88万t,已成为我国淡水养殖的主要品种之一,在促进农业增效、农民增收方面发挥着重要作用。近十年来,尤其是2020年自然流域十年禁捕政策的正式实施,显著带动了日本沼虾的消费量,消费者数量和人均消费量持续增长。在养殖产量逐年增加的情况下,日本沼虾市场价格仍长期坚挺并呈现上升之势。本文就四川省日本沼虾产业发展状况、存在问题及其对策建议作一概述。

日本沼虾4种群的形态差异分析

4种群日本沼虾（Macrobrachium nipponensis）分别取白洪泽湖、太湖、广西3地大然水域和浙江德清人工养殖池塘。经在相似条件下暂养7个月后，运用3种多元分析方法对四者的10项形态比例参数进行比较研究。聚类分析结果表明，养殖种群与洪泽湖种群的形态最接近，而与太湖种群、广四种群的趋异程度逐渐增加。主成分分析结果显示，养殖种群的成体规格小于吲期的3个野生种群，而3个野生种群中又以洪泽湖种群的规格最小。以判别分析建立了4种群的判别函数，判别准确率分别为：76．7％-86．7％（P1）和74．3％～96．0％（P2），综合判别率81．7％。3种多冗分析结果均认为，4种群R本淄虾在形态上已产生一定程度的差异，且集中表现在头胸甲部的性状上，但所有差异均未达到业种水平，须有多项参数综合判别才能辨别；养殖种群的小型化与选种不当密切相关。

日本沼虾4种群肌肉营养品质的比较

4个种群日本沼虾(Macrobrachium nipponensis)于2001年8月分别取自太湖、洪泽湖、广西南宁3地天然水域及浙江德清养殖种群。肌肉营养成分测定结果表明,养殖种群的粗蛋白含量为(15.83±0.32)％(质量分数),显著低于3个野生种群(P<0.05),而粗脂肪质量分数为(1.37±0.02)％显著高于野生种群(P<0.05)。3个野生种群中洪泽湖种群鲜味氨基酸含量最高;但太湖种群粗蛋白含量(17.71±0.38)％最高,必需氨基酸组成最为均衡,且单不饱和脂肪酸总量和多不饱和脂肪酸总量均为最高,分别达25.904％和35.953％。比较得出太湖种群日本沼虾肌肉的营养品质最高,养殖种群最低。

日本沼虾能量收支和利用效率的初步研究

本实验采用实验生态学技术对日本沼虾摄食螺蛳的能量收支，主要环境条件（温度、盐度）对能量利用效率的影响进行了研究。建立了日本沼虾摄食螺蛳的能量收支平衡方程式。结果表明：其吸收能量，可占摄食能量的８０．７％；用于生长的能量占摄食能量的３４．７％，证实螺蛳向是一种热值大，又容易被虾消化吸收的天然饵料。研究还表明，水温２５℃和盐度３‰时，其代谢耗能和排泄耗能最少，因而有利于提高摄食能量利用效率。本实验还测定了日本沼虾的摄食量和体重等因素对特殊动力作用（ＳＤＡ）的影响，并提出生物能量学等应用基础研究是提高名、特种水产品养殖产量和经济效益的有效途径。

环境因子对日本沼虾消化酶和碱性磷酸酶的影响

研究了水环境中不同Ca2 + 浓度 (2 0、35、6 0、80和 15 0mg·L-1)、盐度 (7、14和 2 0‰ )和 pH(7 6、8 8和 9 8)对日本沼虾 (Macrobrachiumnipponense)肝胰腺中消化酶 (胃蛋白酶和类胰蛋白酶 )和碱性磷酸酶的影响 .结果表明 ,Ca2 + 对日本沼虾的胃蛋白酶有促进作用 ,Ca2 + 浓度为 15 0mg·L-1时酶活力最高 ;高浓度的Ca2 + 对类胰蛋白酶有抑制作用 ,而在一定范围内 ,碱性磷酸酶活力随Ca2 + 浓度的增高而增高 .盐度为 14‰时 ,日本沼虾的胃蛋白酶、类胰蛋白酶和碱性磷酸酶活力均高于 7‰和 2 0‰组 .随着 pH值升高 ,蜕皮率和 3种酶活力也随之增高 ,pH9 8时均达到最高值 ,但增长率和增重率则降低 .

湖北武湖日本沼虾的生长特性

从1998年9月至1999年9月对人工养殖湖泊——武湖日本沼虾生长特性作了研究. 以月龄来研究日本沼虾的生长,研究结果表明日本沼虾在7-1月份(1-7月龄)呈等速生长,在2-6月份(8-12月龄)呈异速生长.日本沼虾体重(W)与体长(L)呈幂函数相关,但在7-1月份时其b值接近于3,而在2-6月份时其b值明显小于3,其关系式如下: 1-7月龄:W♂=0. 0148L3. 2419(r=0. 9978,n=390),W♀=0. 0206L3. 0117(r=0. 9968,n=372); 8-12月龄:W♂=0. 0857L2. 1788(r=0.9854,n=188),W♀=0. 1450L1. 8165(r=0. 9974,n=278). 1-7月龄雄虾的生长规律符合Von Bertalanffy方程,雌虾的生长规律符合Logistic方程;8-12月龄雌雄虾的生长规律都符合Logistic方程.

饲料蛋白水平对日本沼虾生长、消化酶和免疫酶的影响

按等能量不等蛋白的原则，配制蛋白水平分别为28％、32％、36％、40％、44％的5组饲料投喂日本沼虾[体重（0．28±0．07）g]。饲养52d时测定虾的增重率、饲料系数、成活率、消化酶活性和免疫酶活性等指标。结果显示：投喂不同蛋白质水平饲料的各组日本沼虾之间，增重率、饲料系数、成活率和肝胰腺中蛋白酶活性有显著差异（P〈0．05）；当饲料蛋白水平为40％时，日本沼虾的成活率和增重率最高，饲料系数最小；肝胰腺中蛋白酶活性随饲料蛋白水平的增加而增加，但当饮料蛋白水平超过36％时胃蛋白酶活性下降，当饲料蛋白水平超过40％时类胰蛋白酶活性下降；胃中蛋白酶有随饲料蛋白水平增加而上升的趋势，但饲料不同蛋白水平对其影响差异不显著（P〉0．05）；饲料不同蛋白水平对ACP酶活性的影响有显著差异（P〈0．05），但对AKP、SOD酶活性影响的差异不显著（P〉0．05）。以增重率为指标，采用直线回归法，拟合出线性方程Y=0．3548x＋46．3380。采用抛物线回归法，拟合出抛物线方程Y=-0．0771x^2＋5．9691x-53．4200。由两个回归方程计算出日本沼虾饲料中的最适蛋白质含量为38．7％～40．3％。结合饲料系数、消化酶活性和免疫酶活性等指标的考察，建议在日本沼虾生产中，中期配合饲料的适宜蛋白质水平为38．7％～40．3％。