早衰蛋白-1基因内含子多态性与Alzheimer’s病的关系

为探讨早衰蛋白－１（ＰＳ－１）基因多态性与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ病（ＡＤ）的关系，用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法检测５１例散发性ＡＤ患者ＰＳ－１外显子８的３’端内含子基因型，其中４０例晚发性ＡＤ患者，同时检测８７例健康对照者ＰＳ－１基因型。结果发现散发性ＡＤ组１／１基因型和１等位基因频率分别为０．５１０和０．６９６，显著高于对照组的０．２９９和０．５２２（Ｐ＜０．０５）；晚发性ＡＤ组１／１基因型和１等位基因频率分别为０．５５０和０．７２５，极显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）。与年龄、性别匹配对照组比较，ＰＳ－１１／１基因型和１等位基因可增加散发性与晚发性ＡＤ发病风险。

早衰蛋白基因家族与阿尔茨海默病

通过定位克隆方法识别两个密切相关的基因:早衰蛋白1和早衰蛋白2基因。早衰蛋白1和早衰蛋白2基因在早发性阿尔茨海默病呈常染色体显性遗传,早衰蛋白1基因在14q^(24.3),早衰蛋白2在1q^(31)～q^(42)。早衰蛋白2与早衰蛋白1核苷酸序列高度同源,均由十个外显子编码,早衰蛋白转录物编码450个氨基酸的内在跨膜蛋白,至少有7个跨膜区。迄今为止,早衰蛋白1已发现30种不同的错义突变和1种框内剪接位点突变,而早衰蛋白2只有两种错义突变。研究表明早衰蛋白1突变在家族性早发性阿尔茨海默病多见,早衰蛋白2突变引起阿尔茨海默病的发病年龄较晚。

盘基网柄菌早衰蛋白结构与功能生物信息学分析

早衰蛋白(presenilin, PS)是γ分泌酶的组成成分,其突变可造成阿尔兹海默病(Alzheimer disease,AD)的形成。因PS所造成AD的发病机理较复杂,因而我们想探究一下模式生物盘基网柄菌(Dictyostelium discoideum)是否能够作为研究早衰蛋白的模型。从NCBI网站中得到盘基网柄菌早衰蛋白DdPsenA和DdPsenB氨基酸序列,随后利用ProtScale、ProtParam理化性分析工具、保守结构域、TMHMM2跨膜区分析网站、进化树软件MEGA6.0、二级结构PredictProtein以及三级结构SWISS-Model服务器对上述蛋白进行生物信息学分析。DdPsenA的氨基酸长度为622,是亲水性蛋白,其相对分子质量为69 502.79,等电点为4.53。DdPsenB的氨基酸长度为473,属于疏水性蛋白,其相对分子质量为52 558.74,等电点为4.49,与DdPsenA同属于Peptidase_A22B超家族。跨膜分析出DdPsenA和DdPsenB均有8个跨膜区。DdPsenA与人类presenilin-2序列相似性为67%,Dd PsenB与人类presenilin-1序列相似性分别为60%。盘基网柄菌可以作为研究早衰蛋白功能和作用机制的模型。

胰岛素样生长因子-1通过调控核内p53-progerin通路减轻肝细胞衰老

H_(2)O_(2)刺激原代肝细胞构建细胞衰老模型,采用p53 siRNA、早衰蛋白(pmgerin)siRNA或胰岛素样生长因子(IGF)-1腺病毒载体转染原代肝细胞,检测β-半乳糖背酶染色阳性细胞数及p53、progerin的表达。结果显示,p53 siRNA和progerin siRNA敲低p53和progerin的表达,肝细胞衰老减轻;转染IGF-1腺病毒载体至原代肝细胞过表达IGF-1,β-半乳糖背酶阳性细胞数减少,细胞核中p53和progerin表达下调、细胞质中p53表达上调;p53与progerin共沉淀及共定位于肝细胞核区减少。过表达IGF-1可通过抑制p53核转位,减少核内p53-progerin相互作用,减轻肝细胞衰老。