时间分辨荧光技术及酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎两对半指标的比对分析

目的通过比对时间分辨荧光技术（TRFIA）及酶联免疫吸附试验（ELISA）对血清标本中乙型肝炎两对半指标的检测结果,验证这两种方法是否具有等效性。方法分别用TRFIA及ELISA检测160份临床标本的两对半指标,记录检验结果并对检验结果进行统计学分析。结果经过配对资料χ^2检验分析,两种方法测定乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎表面抗体（HBsAb）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、乙型肝炎e抗体（HBeAb）、乙型肝炎核心抗体（HBcAb）时结果差异有统计学意义（P〈0.05）。结论两种检测方法均可用于临床乙型肝炎两对半指标的检测,但TRFIA优于ELISA的灵敏度和特异度。

时间分辨荧光技术在乙肝病毒标志物定量检测中的应用

目的比较时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法在测定乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)时结果的符合程度,了解TRFIA测定HBV-M的可行性。方法分别用TRFIA和ELISA测定120份随机血清样本乙肝两对半并计算结果符合率。结果TRFIA、ELISA法测定120份随机样本HBV-M结果符合率较高,经配对资料的χ2检验,P>0.05,无显著性差异。结论TRFIA是定量检测HBV-M的方法,它可为临床诊断、临床疗效的观察及注射疫苗提供科学依据。

时间分辨荧光免疫分析技术与牦牛肉兽药残留检测研究进展

时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluorescence immunoassay.TRFIA)是一种以镧系元素或其微球作为标记物,测量标记物所发射荧光标记分析技术,其特点是灵敏度高且无放射性污染[1]。由于TRFIA技术有着传统方法所不具备的检测成本低,检测速度快等诸多优势,因此TRFIA技术为牦牛肉质安全检测开辟一条崭新的检测途径。该文就TRFIA技术及其在牦牛肉质安全检测应用进展做一简要综述。

时间分辨荧光免疫层析技术在PRRS检测中的应用

采用荧光免疫层析技术,以时间分辨荧光微球作为标记物,研制出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)荧光微球抗体检测试纸。对检测试纸的敏感性、特异性、重复性及符合率进行了试验研究。结果表明,研制出的猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光微球抗体检测试纸灵敏度高、特异性好,与IDEXX公司酶免试剂盒比较,符合率可达到92.5%。适用于临床样本的快速检测.

基于均相时间分辨荧光技术(HTRF)的HSP90-HOP相互作用抑制剂活性测试方法的构建及其应用

热休克蛋白90(HSP90)是细胞内大量表达的一类蛋白,其主要功能是辅助细胞内其他蛋白(客户蛋白)的成熟。HSP90的众多客户蛋白与肿瘤的发生发展有重要的关系,因此抑制HSP90的功能可以使这些癌症相关蛋白降解,从而诱导肿瘤细胞凋亡,达到治疗肿瘤的目的。HSP90在发挥功能时还需要与辅伴侣蛋白HOP相互作用,因此靶向HSP90-HOP的相互作用开展抑制剂研发成为抑制HSP90伴侣系统的新策略。本文基于均相时间分辨荧光技术(HTRF)构建了稳定的用于测试HSP90-HOP相互作用抑制剂活性的方法,并用该方法研究了HSP90 C-端五肽MEEVD及其突变肽段对HSP90-HOP相互作用的抑制活性,为新型HSP90-HOP相互作用抑制剂的筛选和发现提供了重要基础。

时间分辨荧光免疫分析技术在真菌毒素检测的应用

近些年，生物标记技术不断的发展。免疫分析技术得到了快速的发展。例如放射免疫分析技术，由于放射分析技术存在污染性和局限性，限制其进一步发展与应用，继由放射免疫分析技术之后，又研究形成了各种非放射免疫技术，包括酶标记分析技术、荧光免疫分析技术、化学发光免疫分析技术、时间分辨荧光免疫分析（Time．resolvednuoreimmuoassay，TRFIA）技术等。

应用时间分辨荧光免疫分析技术检测SARS病毒抗原的初步研究

目的建立定量检测SARS冠状病毒N蛋白的时间分辨荧光免疫分析(TRFIA).方法采用经SARS-CoVN蛋白和配对实验筛选的两株抗SARSN蛋白单克隆抗体,以双抗体夹心法为基础建立检测SARS-CoVN抗原的时间分辨荧光免疫分析技术,进行方法学的评价,并与相应ELISA试剂盒进行比较.结果该法的测量范围为(0.02～150)ng/ml,灵敏度为0.02 ng/ml;批内、批间CV分别为(3.3～6.2)%和(5.3～9.6)%,与采用ELISA试剂盒检测灭活SARS-CoV N蛋白情况比较的结果一致.结论本研究建立的检测SARSN蛋白的时间分辨荧光免疫分析技术灵敏度高,特异性好,具有潜在的临床应用价值.

时间分辨荧光免疫分析技术及临床应用

标记免疫分析技术的出现使临床生化分析由常量分析向微量分析转变。20世纪80年代出现的时间分辨荧光免疫分析技术,以其独特的优势成为最有发展前途的非放射免疫标记技术。本文主要介绍时间分辨荧光免疫技术基本原理、基础试剂、基本技术以及近年来临床应用。

时间分辨荧光免疫技术在梅毒特异性抗体筛查中的应用研究

目的探讨时间分辨荧光免疫技术(TRFIA)在梅毒特异性抗体检测中的应用价值。方法收集240例梅毒患者和150例健康者血清标本,采用TRFIA、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)进行梅毒特异性抗体检测,比较检测灵敏度、特异度及阳性率。结果TRFIA、TP-ELISA、TPPA检测灵敏度分别为100.00%、98.75%、97.92%,比较差异无统计学意义(P>0.05);特异度分别为99.33%、98.67%、100.00%。TRFIA检测假阳性率为0.67%,假阴性率为0.00%;TP-ELISA检测假阳性率为1.33%,假阴性率为1.25%,TRFIA检测假阳性率和假阴性率均低于TP-ELISA(P<0.05)。结论 TRFIA检测梅毒特异性抗体灵敏度和特异度高,结果准确可靠,可用于梅毒特异性抗体的常规筛查,值得推广应用。

时间分辨荧光免疫技术在检测HBV血清学标志物中的应用

目的比较时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)和ELISA法在检测HBV血清学标志物的价值。方法分别采用TRFIA和ELISA法检测359例低浓度乙肝表面抗原(HBsAg)标本的HBV血清学标志物,比较两种方法的检测结果的差异。结果TRFIA法检测HBV血清学标志物的各项结果阳性率均高于ELISA法,HBsAg、乙肝e抗原(HBeAg)和乙肝核心抗体(HBcAb)阳性率结果差异有统计学意义(P<0.05),而乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗体(HBeAb)阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论与ELISA法相比,TRFIA在检测含有低浓度HBsAg标本时具有更高的灵敏度,具有良好的临床应用价值。

固相时间分辨荧光免疫标记技术研究

通过固相时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂 4 ,7 二氯磺基苯 1,10菲罗啉 2 ,9 二羧酸标记抗 乙型肝炎表面抗体 (HBsAb)IgG实验 ,对于BCPDA标记蛋白质的方法进行了研究。结果表明 :BCPDA在相对温和条件下能与蛋白质反应 ,反应后蛋白质的相对生物活性高于 78% ,标记比为 2 3～ 5 5 ,蛋白回收率达6 0 %以上。在一定条件下与铕离子形成稳定的BCPDA Eu3 + (HBsAb)IgG标记物。利用自建的分析方法 ,测定了标记过程的有关参数。并对标记物的某些光学特性进行了研究。

时间分辨荧光免疫技术在乙肝病毒标志物检测中的应用

目的以微粒子酶免疫分析(MEIA)为参照,探讨时间分辨荧光免疫技术(TRFIA)定量测定乙肝病毒标志物的临床应用价值。方法采用TRFIA与酶免疫吸附试验技术(ELISA)对623份随机标本做5项乙肝病毒标志物测定,其中95份标本用MEIA复测。结果TRFIA法检测乙肝五项指标与MEIA法比较,差异无显著性(P>0.05)。结论TRFIA法测定乙肝五项指标的相对特异性、灵敏度及符合率较ELISA法高,为临床疗效观察及乙肝疫苗的接种提供科学依据。

利用时间分辨荧光免疫分析技术进行肺癌标记物检测

肺癌是目前全世界发病率和死亡率最高、预后最差的恶性肿瘤之一，严重影响着人类的健康和生存。肺癌标记物在早期肺癌中的异常表达已成为肺癌早期诊断研究领域中最有前景的科学探索。但由于现有检测方法灵敏度较差，使广大肺癌患者可能错失了早期发现的机会，我们利用时间分辨荧光免疫分析技术进行肺癌标记物的血清含量检测，与传统肺癌标记物检测方法相比较，具有较高精密度和准确度，可在极短时间内实现对大量病人高通量、高灵敏度的肺癌标记物快速检测，满足大范围筛查早期肺癌的需要，报道如下。

时间分辨荧光免疫技术检测梅毒特异性抗体的应用评价

目的探讨时间分辨荧光免疫技术(TRFIA)检测梅毒特异性抗体在梅毒诊断、疗效判断和预后评价方面的应用价值。方法对986份血清同时用TRFIA、梅毒明胶颗粒凝集试验(TPPA)和梅毒甲苯胺红试验(TRUST)检测,比较各种检测结果的异同。结果 TRFIA阳性121例,阳性率12.3%;TPPA阳性118例,阳性率12.0%;TRUST阳性93例,阳性率9.4%;三种检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论利用TRFIA检测梅毒特异性抗体,与TPPA结果有很好的符合率,准确可靠,且智能化程度较高,值得推广应用。

时间分辨荧光免疫技术在乙肝病毒血清学检测中的研究

目的:探讨时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)检测乙肝病毒血清标志物的临床价值。方法:用酶联免疫吸附试验(ELISA)和时间分辨荧光免疫分析对185例血清标本进行乙肝标志物的定性、定量检测和比较,对结果进行分析。结果:TRFIA检测乙肝五项指标具有良好的准确性和重复性。与ELISA相比,TRFIA在HB s Ag、抗-HB s、HB e Ag、抗-HB e的测定上差异无统计学意义(P>0.05),而在抗-HB c的测定上差异有统计学意义(P<0.05)。高、中浓度标本两种方法检测HB s Ag阳性均为10例,而在低浓度中,TRFIA阳性率要高于ELISA。经两种方法检测,测得9种模式,其中6种模式两着检出的阳性例数接近,3种模式(4-5、5、全阴)差异较大。结论:TRFIA法定量检测乙肝标志物的灵敏度更高,特异性更好,并有助于对治疗效果作出有效的判断。

酶联免疫吸附试验和时间分辨荧光免疫技术在乙型肝炎病毒血清标志物检测中的临床价值

目的:对酶联免疫吸附试验和时间分辨荧光免疫技术在乙型肝炎病毒血清标志物检测中的临床价值进行分析和比较。方法:选取本院2014年3月-2015年3月收治的40例乙型肝炎患者,分别使用酶联免疫吸附试验和时间分辨荧光免疫技术对患者的血清标本进行检测,对比两种检测方法结果的有效性。结果:时间分辨荧光免疫技术HBc Ab、HBe Ab的阳性检出率均显著高于对酶联免疫吸附试验,差异均有统计学意义(P<0.05),两种方法 HBs Ab、HBe Ag、HBs Ag检出阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:两种检测方法有较高的阳性符合率,均适用于乙型肝炎病毒的临床检测;时间分辨荧光免疫技术拥有更高的阳性检出率、敏感性及特异性,临床检测效果更加稳定和显著,值得推广使用。

血清糖类抗原153基于磁珠的时间分辨荧光免疫分析试剂的研制

目的在传统的时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)技术基础上,结合生物素-亲和素放大技术和磁性微粒技术优势,建立一项新方法进行血清中糖类抗原153(carbohydrate antigen153,CA153)含量的测定。方法利用磁性微粒表面的链霉亲和素分子与生物素-CA153包被抗体快速高效结合,从而在固相载体磁性微粒表面形成双抗体夹心复合物。并对新方法的各项性能指标进行评价。结果获得的CA153TRFIA线性方程为y=54638x+7052.2,R^(2)=0.9995;该方法的灵敏度为0.48U/mL,批内和批间的变异系数分别为2.09%~5.95%,1.54%~7.15%,平均回收率为94.48%,与其他肿瘤标志物无明显干扰,正常范围参考值为0~35U/mL。用该方法检测乳腺癌与健康体检者血清的CA153结果与化学发光法一致,相关系数为0.9782。结论该方法灵敏度优于传统技术,是TRFIA的一种新方法,反应时间短,操作简单,敏感度、特异性、准确度等均符合临床应用要求。

时间分辨免疫荧光技术在检验医学中的发展现状

标记免疫分析法创立于60年代初期,是将多种标记示踪技术的高度敏感性和医学免疫学抗原抗体反应的高度特异性相结合的产物,包括放射免疫(RIA),酶联免疫分析法(EIA)、化学发光免疫分析法(CLIA)、电化学发光免疫分析法(ECLIA)、时间分辨荧光免疫分析(TRFIA).TRFIA具有零本底、灵敏度高、重复性好、特异性强、线性范围宽和应用广泛等特点,是继放射免疫分析之后,标记免疫分析法发展的一个新的里程碑,是当代配基分析中最有发展前景的分析手段.本文就时间分辨免疫荧光分析技术作如下综述.

时间分辨荧光免疫分析技术研究

时间分辨荧光免疫分析(Time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)是一种全新的国际上公认的最有发展前途的非同位素免疫分析技术.镧系元素(Eu、Tb、Sm、Dy等)螯合物有突出的固有特点:激发最大波长到发射最大波长之间的Stokes位移很大,前者对后者无干扰.激发光谱段较宽,可增加激发能;发射光谱带窄,50%发射谱带宽度不足10nm,本底荧光很小;荧光衰变时间很长,有的达1ms.