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星孢菌素产生菌Streptomyces sp.FIM18-327基因组的测序与遗传操作体系的建立
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作者 方志锴 谢立君 +3 位作者 林鹏辉 林如 周剑 江红 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1004-1012,共9页
目的通过基因组测序明确星孢菌素高产菌株Streptomyces sp.FIM18-327遗传背景,并建立该菌的遗传操作体系。方法通过第二代和第三代DNA测序技术相结合的策略对Streptomyces sp.FIM18-327进行全基因组测序并组装,利用antiSMASH软件预测该... 目的通过基因组测序明确星孢菌素高产菌株Streptomyces sp.FIM18-327遗传背景,并建立该菌的遗传操作体系。方法通过第二代和第三代DNA测序技术相结合的策略对Streptomyces sp.FIM18-327进行全基因组测序并组装,利用antiSMASH软件预测该菌的次级代谢产物生物合成基因簇分布。通过优化接合转移载体、培养基种类及镁离子浓度,建立了Streptomyces sp.FIM18-327的遗传操作体系。结果Streptomyces sp.FIM18-327基因组大小为9.73 Mb,由一条染色体、两个线性质粒及一个环状质粒组成。其中染色体大小为9.48 Mb,GC含量70.12%,包含了8431个蛋白编码基因与34个次级代谢产物生物合成基因簇;以pFIM4123为载体,MS为接合转移培养基,在MS中添加MgCl2至终浓度为20 mmol/L时,接合转移的效率达3.2×10^(-6)。结论Streptomycessp.FIM18-327基因组信息的解析及遗传操作体系的建立,为该菌的进一步开发与应用奠定了基础。 展开更多
关键词 星孢菌素 全基因组测序 代谢途径 接合转移
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星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体收缩的影响
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作者 保善英 包广洁 +2 位作者 唐玉尧 刘琳 康宏 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期275-279,共5页
目的探索不同浓度星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体收缩性及细胞外基质合成的影响。方法单层培养山羊颞下颌关节盘细胞至P3代,将5.5×10 ^6个细胞在不同浓度(0、0.1、1、10、100 nmol·L ^-1)星孢菌素的完全培养基中... 目的探索不同浓度星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体收缩性及细胞外基质合成的影响。方法单层培养山羊颞下颌关节盘细胞至P3代,将5.5×10 ^6个细胞在不同浓度(0、0.1、1、10、100 nmol·L ^-1)星孢菌素的完全培养基中分别接种于三维柱状琼脂糖井;每天每井换液,培养1周后观察自组装基体的形态变化;冰冻切片染色显示自组装基体细胞外基质及α-平滑肌动蛋白(α-SMA)的分布;酶联免疫吸附测定(ELISA)和Blyscan试剂盒检测基体细胞外基质含量的变化。结果山羊颞下颌关节盘细胞接种4 h后,星孢菌素组和对照组细胞均在琼脂糖井内自组装,形成一圆盘状基体,之后变成球形。各组自组装基体在1周时天狼星红染色可见基体内大量胶原纤维分布;番红染色显示基体内纤维软骨样细胞明显分泌糖胺多糖(GAGs);Ⅰ型胶原(ColⅠ)在免疫组织化学染色中呈强阳性;α-SMA免疫组织化学染色为弱阳性。星孢菌素组自组装基体内ColⅠ和GAGs较高,其中10 nmol·L^-1组最明显(P<0.01)。结论星孢菌素对自组装基体的收缩有一定干预效果,但不是非常突出;它更有利于细胞外基质的合成。 展开更多
关键词 星孢菌素 自组装基体 颞下颌关节盘
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星孢菌素干预组织工程化颞下颌关节盘自组装基体收缩的机制
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作者 罗银月 李鸿燕 +1 位作者 包广洁 康宏 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第30期4888-4893,共6页
背景:颞下颌关节盘细胞自组装基体在生长过程中出现的体积收缩现象机制不明,有研究认为可能与细胞骨架蛋白肌动蛋白的收缩效应有关。目的:探索星孢菌素对颞下颌关节盘细胞、肌动蛋白和细胞外基质代谢的影响,阐明可能导致自组装基体收缩... 背景:颞下颌关节盘细胞自组装基体在生长过程中出现的体积收缩现象机制不明,有研究认为可能与细胞骨架蛋白肌动蛋白的收缩效应有关。目的:探索星孢菌素对颞下颌关节盘细胞、肌动蛋白和细胞外基质代谢的影响,阐明可能导致自组装基体收缩的机制。方法:由第一作者检索2000至2018年PubMed、Web of Science核心合集数据库相关文献,检索关键词为"staurosporine,temporomandibular joint disc tissue engineering,chondrocyte tissue engineering,self-assembly";检索2000至2018年CNKI中文数据库相关文献,中文检索词为"星孢菌素,颞下颌关节盘组织工程,软骨细胞组织工程,自组装"。结果与结论:颞下颌关节盘细胞自组装基体收缩的可能原因:体外关节盘细胞的收缩;细胞类型的不同;基体营养通路障碍;肌动蛋白过表达;细胞外基质减少。星孢菌素减少肌动蛋白细胞骨架的表达,抑制细胞收缩,上调细胞外基质中重要基质蛋白胶原、聚集蛋白聚糖及软骨寡聚基质蛋白的量,抑制基体收缩。 展开更多
关键词 星孢菌素 颞下颌关节盘组织工程 软骨细胞组织工程 自组装 生物材料 细胞外基质 颞下颌关节盘 肌动蛋白类 组织工程
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响应面法优化链霉菌HY6-S36产星孢菌素的发酵条件 被引量:6
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作者 项仁鑫 杨小虎 +3 位作者 方佳双 应灵萍 姜南 张灵坚 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期749-755,共7页
目的优化链霉菌HY6-S36产星孢菌素的发酵条件,以提高星孢菌素的产量。方法在单因素试验的基础上通过Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验、Box-benhnken(BB)响应面法优化发酵条件。结果优化后,最佳培养条件为麦芽糊精69.8g/L,豆粉49.6g/L... 目的优化链霉菌HY6-S36产星孢菌素的发酵条件,以提高星孢菌素的产量。方法在单因素试验的基础上通过Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验、Box-benhnken(BB)响应面法优化发酵条件。结果优化后,最佳培养条件为麦芽糊精69.8g/L,豆粉49.6g/L,烟酸0.5g/L,碳酸钙4.0g/L,转速200r/min,pH7.2,装液量30mL/250mL,接种量5%,温度28℃,发酵时间7d,摇瓶产量为996mg/L。经50L发酵罐放大培养,发酵效价达1063mg/L。结论在此优化条件下,星孢菌素的摇瓶产量提高了177%。 展开更多
关键词 链霉菌 发酵条件 星孢菌素 响应面分析法
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一株新的星孢菌素产生菌的鉴定及其诱变选育 被引量:1
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作者 方佳双 杨小虎 +4 位作者 项仁鑫 张灵坚 姜南 朱文明 张辉 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期557-563,共7页
目的对自主分离得到的星孢菌素产生菌HY1进行分类鉴定和诱变选育。方法通过16S rDNA基因序列同源性比对分析,结合其形态特征、培养特征、生理生化特性对菌株HY1进行分类研究;以HY1为出发菌株,通过紫外-氯化锂(UVLiCl)、常压室温等离子体... 目的对自主分离得到的星孢菌素产生菌HY1进行分类鉴定和诱变选育。方法通过16S rDNA基因序列同源性比对分析,结合其形态特征、培养特征、生理生化特性对菌株HY1进行分类研究;以HY1为出发菌株,通过紫外-氯化锂(UVLiCl)、常压室温等离子体(ARTP)及亚硝基胍(NTG)诱变,结合含色氨酸、甲硫氨酸的抗性平板进行筛选。结果菌株HY1为链霉菌属的菌株,通过多次诱变得到突变高产菌株HY6-S36,且遗传性能稳定,发酵效价达360mg/L,比原始菌株提高了80%。结论获得一株高产稳定的星孢菌素生产菌株,为星孢菌素产业化提供优良的菌种。 展开更多
关键词 链霉菌HY1 分类鉴定 星孢菌素 诱变选育
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宿主细胞磷酸激酶在新城疫病毒感染中的作用 被引量:4
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作者 詹媛 陈鸿军 +3 位作者 仇旭升 孙英杰 于圣青 丁铲 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第2期1-7,共7页
为探讨磷酸化通路在新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染中的作用,使用多种蛋白磷酸激酶抑制剂和激活剂预处理细胞,比较处理后NDV在细胞上生长状况的差异。结果显示NDV在PKC蛋白激酶抑制剂处理的细胞上的生长受到抑制,这种... 为探讨磷酸化通路在新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染中的作用,使用多种蛋白磷酸激酶抑制剂和激活剂预处理细胞,比较处理后NDV在细胞上生长状况的差异。结果显示NDV在PKC蛋白激酶抑制剂处理的细胞上的生长受到抑制,这种抑制作用能够被PKC蛋白激酶激活剂中和,而PKA蛋白激酶抑制剂和p38MAPK蛋白激酶抑制剂对其影响不大。通过PKC蛋白激酶抑制剂的细胞毒性试验证实,这种抑制作用不是由于药物对细胞的毒性或者因药物加入而改变培养基pH值而造成的。病毒在staurosporine处理的细胞上的生长曲线试验显示,浓度在20~200 nmol/L能对病毒感染产生抑制作用,并且药物浓度越高,上清中病毒的滴度相对越低。本研究结果表明PKC磷酸化通路在新城疫病毒的感染过程中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 新城疫病毒 磷酸激酶 星孢菌素 蛋白激酶C 增殖迟缓
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蛋白激酶抑制剂PKC412对膀胱癌T24细胞生长增殖的影响
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作者 张建国 苏昀 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2011年第6期476-480,共5页
目的:观察蛋白激酶C(PKC)抑制剂N苯甲酰星孢菌素(PKC412)对膀胱癌T24细胞株生长、增殖、侵袭功能和细胞周期的影响。方法:用不同浓度PKC412(0.01,0.1,1.0,10μmol/L)作用于对数生长期T24细胞24,48,72 h。采用软琼脂克隆形成试验测定T24... 目的:观察蛋白激酶C(PKC)抑制剂N苯甲酰星孢菌素(PKC412)对膀胱癌T24细胞株生长、增殖、侵袭功能和细胞周期的影响。方法:用不同浓度PKC412(0.01,0.1,1.0,10μmol/L)作用于对数生长期T24细胞24,48,72 h。采用软琼脂克隆形成试验测定T24细胞克隆形成抑制率,MTT法检测细胞生长抑制率,Transwell小室法检测细胞的侵袭能力,流式细胞术分析细胞周期的变化。结果:当PKC412浓度从0.01μmol/L增加到10μmol/L时,T24细胞克隆形成抑制率从-0.62%增加到80.46%,细胞生长抑制率从1.17%增加到73.62%,细胞侵袭抑制率从1.8%增加到73.72%(P<0.05),均呈时间和剂量依赖性。PKC412作用48 h后,随着浓度的增加,G2/M期细胞比例从12.26%增加到58.41%,呈G2/M期细胞阻滞。结论:PKC412对体外培养的T24细胞克隆形成、生长和侵袭具有抑制作用,其机制与G2/M期细胞阻滞有关。 展开更多
关键词 膀胱癌 N苯甲酰星孢菌素 克隆 侵袭 细胞周期
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In vitro Sensitivity of Three Bacterial Pathogens of Koi Carp (Cyprynus carpio L.) to Certain Antibiotics
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作者 Algama Dessanayakelage Wasantha Rohine Rajpakshe Kurcheti Pani Prasad +4 位作者 Subhas Chandra Mukherjee Kumar Kundan Rajeev Kumar Brahmachari Charandas Tembhurne Meena Neeraj Kumar 《Journal of Agricultural Science and Technology(B)》 2012年第1期93-98,共6页
Three gram negative bacteria isolated from infected koi carp, Cyprinus carpio L. and screened for sensitivity to thirty antibiotics by the Bauer disc diffusion method. Bacteria evaluated were Aeromonas hydrophila, Pse... Three gram negative bacteria isolated from infected koi carp, Cyprinus carpio L. and screened for sensitivity to thirty antibiotics by the Bauer disc diffusion method. Bacteria evaluated were Aeromonas hydrophila, Pseudomonas aeruginosa and Edwardseilla tarda. A. hydrophila was resistant to ampicilin, cephalothin, sulphatriad, cefpodoxime and cefoxitin. Highest sensitivity was recorded to Colistin methane sulphonate and Ceftriaxone. High resistance was observed for P. aeruginosa in Kanamysin, Cephalothin, Sulphatriad, Colistin methane sulphonate, Tobramysin, Nitro Furantoin, Cefpodoxime, Cefoxitin and Aztreonam. Highest sensitivity recorded with Moxifloxacin. High resistance was observed in Co-trimoxamole and higher sensitivity performed for E. tarda by Tetracyclin, Cephotaxime, Ciprofloxacin, Norfloxacin, Ofloxacin, Moxifloxacin, Gatifloxacin and Levofloxacin. Out of that highest sensitivity recorded with Moxifloxacin High sensitivity was recorded for Moxifloxacin, Ciprofloxacin, Gatifloxacin, Levofloxacin. By means of antibiotic sensitivity test highest resistance was recorded to P. aeruginosa (MAR index-0.3) and least resistant was recorded to E, tarda (MAR index- 0.033). 展开更多
关键词 Koi Carp Aeromonas hydrophila Pseudomonas aeruginosa Edwardseilla tarda antibiotics.
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肌动蛋白聚合抑制剂对细胞骨架的作用 被引量:4
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作者 刘琳 包广洁 《重庆医学》 CAS 2020年第4期654-659,共6页
肌动蛋白是一种在所有真核细胞中均存在的高度保守蛋白质,微丝是由球形肌动蛋白单体聚合形成的多聚物,是必不可少的细胞骨架成分,参与细胞运动、细胞分裂等许多重要的生物功能。破坏肌动蛋白的聚合可能对细胞结构和细胞运动产生巨大的影... 肌动蛋白是一种在所有真核细胞中均存在的高度保守蛋白质,微丝是由球形肌动蛋白单体聚合形成的多聚物,是必不可少的细胞骨架成分,参与细胞运动、细胞分裂等许多重要的生物功能。破坏肌动蛋白的聚合可能对细胞结构和细胞运动产生巨大的影响,肌动蛋白聚合抑制剂可以作为对抗恶性细胞的潜在药物,可以有针对性地开展进一步研究。基于以上原因,本文对能够抑制肌动蛋白聚合的细胞松弛素、拉春库林、Swinholide A和星孢菌素进行了综述。 展开更多
关键词 肌动蛋白类 细胞松弛素类 拉春库林 Swinholide A 星孢菌素
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