家兔显微受精影响因素及显微受精胚胎超微结构

以家兔为实验动物，利用胞质内精子注射技术和透明带下精子注射技术，对卵龄、精子获能、注射针管口径、操作室温和操作方法等影响显微受精的因素以及显微受精胚胎的超微结构进行了研究。结果显示：（１）胞质内单精子注射，ｈＣＧ后１５～１７ｈ卵的存活率为６９．４％，显著（Ｐ＜０．０５）高于ｈＣＧ后１９～２１ｈ卵的存活率（４７．３％）；而受精率和卵裂率（分别为５２．９％和４１．２％）分别低于ｈＣＧ后１９～２１ｈ卵的受精率（６５．４％）和卵裂率（４６．２％）。（２）将５～１０个在ＤＭ液中获能１２～１３ｈ的精子注入卵子的透明带下，ｈＣＧ后１９～２１ｈ卵的受精率（４９．２％）和卵裂率（４０．７％）分别显著（Ｐ＜０．０５）高于ｈＣＧ后１５～１７ｈ卵的受精率（２８．６％）和卵裂率（２２．５％）。（３）以ｍＨＩＳ１５ｍｉｎ＋ｍＤＭ３～４ｈ方法和ＨＩＳ１５ｍｉｎ＋ＤＭ５～６ｈ方法获能的精子带下注射的受精率（分别为６３．６％和５１．０％）和卵裂率（分别为５４．５％和４３．１％）分别显著（Ｐ＜０．０５）高于或略高于其他方法获能的精子带下注射的受精率和卵裂率。（４）内径７μｍ的注射针管用于胞质内单精子注射，卵的存活率（６９．４％）极显著（Ｐ＜０?

山羊卵母细胞的显微受精

探讨了显微操作条件的改善对山羊卵母细胞胞质内显微受精(ICSI)的影响。结果表明,将精子操作液中聚乙烯吡咯烷酮(PVP)浓度从10%(10g/L)降低到8%和5%后,ICSI胚的卵裂率差异不显著,但正常卵裂率、桑葚胚率和囊胚率随PVP浓度的下降而上升;PVP浓度为5%和10%时,正常卵裂率分别为69.6%和58.5%(P<0.05),桑葚胚率分别为45.6%和35.2%(P<0.05),囊胚率分别为26.9%和16.9%(P<0.05),表明含5%PVP的精子操作液更有利于ICSI胚的发育。显微注射时将卵母细胞第一极体置于相当于时钟6点的位置与12点位置相比,ICSI胚的分裂率没有差异,而正常卵裂率分别为69.9%和65.4%(P>0.05),桑椹胚率分别为45.5%和42.6%(P>0.05),囊胚率分别为26.7%和20.4%(P>0.05),表明注射时极体置于6点的位置有利于ICSI胚的体外发育。

牛卵胞质内显微受精中第一极体位置与激活方法研究

【目的】探讨牛卵母细胞胞质内显微受精(ICSI)操作中,卵母细胞第一极体位置以及受精卵化学激活方法对ICSI卵体外发育的影响。【方法】采集牛卵巢,成熟培养卵母细胞后,调整其第一极体分别位于相当于时钟6点和12点的位置,进行牛卵母细胞胞质内显微受精,以ICSI卵不进行激活处理为未激活组,分别采用乙醇、离子霉素及离子霉素联合6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)激活ICSI卵,统计ICSI卵的形态完整率、卵裂率和囊胚发育率。【结果】第一极体分别位于相当于时钟6点和12点的位置时,所获得的ICSI卵形态完整率(92.9%和94.0%)、卵裂率(37.1%和40.0%)和囊胚发育率(12.9%和12.2%)均无统计学差异(P>0.05)。未激活组ICSI卵的卵裂率较低,不能发育到囊胚;用乙醇或离子霉素激活时,ICSI卵的卵裂率(25.7%和27.6%)和囊胚发育率(3.3%和3.4%)均显著高于未激活组(7.5%和0)(P<0.05);用离子霉素与6-DMAP联合激活时,ICSI卵的卵裂率和囊胚发育率分别为38.9%和13.9%,显著高于乙醇激活组、离子霉素激活组及未激活组(P<0.05)。【结论】对牛卵母细胞进行ICSI操作时,第一极体分别位于相当于时钟6点和12点位置时,对ICSI卵的发育无显著影响;采用离子霉素和6-DMAP联合激活,有利于ICSI卵的体外发育。

小鼠附睾精子的显微受精

目的 :建立显微受精的方法 ,并探讨小鼠附睾精子在显微注射进入卵母细胞后的受精能力。方法 :用显微注射法把小鼠附睾头和附睾尾精子注入卵母细胞的胞质内或卵周隙进行显微受精。结果 :把单个附睾尾精子注入卵细胞质中 ,培养后 14个存活的卵细胞中 ,有 5个卵裂为 2 -细胞期胚胎 ;将单个附睾头精子注入卵母细胞中 ,有 2 5个存活 ,其中 9个受精发育为 2 -细胞期胚胎 ;将附睾尾精子注入卵周隙进行带下受精 ,30个存活的卵细胞中有 4个卵裂为 2 -细胞期胚胎。结论 :建立的显微受精技术能用附睾精子受精 ,但受精率有待提高。

哺乳动物显微受精研究进展

全面系统地总结了哺乳动物显微受精的发展历史和现状，从注射部位、精子状态、精子发生、卵子状态、卵子激活等方面阐述了影响显微受精的主要因素，并指出了在我国开展显微受精的重要性和必要性。

水牛精子胞质内显微受精技术的初步研究

本研究探讨了水牛精子胞质内显微受精技术的可行性及操作条件的改善对水牛ICSI结果的影响。结果表明 :1.将精子操作液中PVP的浓度从 10 %降低到 5 % ,注射后卵母细胞的存活率无显著差异 (10 0 %vs .97.8% ;P >0 .0 5 ) ,分裂率明显提高 (79.4 %vs.88.6 % ;P <0 .0 5 ) ,囊胚率有所提高 ,但无显著差异 (2 3.5 %vs .2 4 .2 % ;P >0 .0 5 )。 2 .显微注射时卵母细胞第一极体置于相当于时钟 6点的位置与 12点位置相比 ,分裂率无显著差异 (89.5 %vs.86 .2 % ;P >0 .0 5 ) ,但囊胚发育率明显提高 (43.4 %vs.2 7.5 % ;P <0 .0 5 )。 3.离心和不离心的卵母细胞注射后的分裂率分别是 94 .3%和 91.3% ;囊胚发育率分别是 2 3.4 %和 2 7.5 % ,差异均不显著 (P>0 .0 5 )。结论 :1.适当降低PVP的浓度可以促进水牛卵母细胞获得胚胎发育的能力 ,并且不会增加精子显微注射的难度。 2 .注射时水牛卵母细胞的极体位于 6点的位置 ,卵母细胞获得胚胎发育的能力高于 12点位置。3.水牛卵母细胞的低透明度不会影响显微受精的效果。

显微受精研究进展

显微受精技术是体外受精与显微操作技术相结合的一项胚胎工程技术 ,使得由透明带和卵质膜所形成的生理受精障碍得以排除。本文综述了国内外显微受精研究近况 ,探讨了显微受精过程中的精卵互作机理 ,对卵龄、精子获能、注射针参数、操作技术和显微注射方法等影响显微受精的因素以及显微受精卵的超微结构进行了分析。

绵羊精子胞质内显微受精的影响因素分析

本文对影响绵羊精子胞质内显微受精的因素进行分析。结果如下:1、操作液中PVP浓度分别为8%和5%时,卵裂率为(83.6±2.98)%和(72.0±2.53)%,囊胚发育率为(30.5±1.95)%和(16.0±1.33)%,均差异显著(P<0.05)。2、操作液中添加CB和不添加CB,卵裂率为(77.5±3.17)%和(74.7±2.09)%,没有显著影响(P>0.05),但添加CB的囊胚发育率(29.2±2.81)%却显著高于对照组(14.3±1.99)%(P<0.05)。3、在培养液(IVC)中添加VEGF和不添加VEGF,卵裂率为(78.7±3.34)%和(83.9±1.95)%;囊胚发育率为(27.7±2.76)%和(23.6±1.29)%,差异不显著(P>0.05)。4、在ICSI过程中恒温和室温条件下,卵裂率为(80.1±3.18)%和(90.6±3.02)%,差异显著(P<0.05),囊胚发育率为(31.3±3.87)%和(28.2±3.34)%,没有显著影响(P>0.05)。5、在4 h以前注射卵裂率分别为(84.7±3.62)%、(86.0±2.89)%、(80.6±3.04)%,没有显著差异(P>0.05)。0～1 h注射的囊胚发育率(33.6±3.37)%,要显著高于1～2 h注射的(P<0.05),并极显著高于3～4 h的(P<0.01)。1～2 h与3～4 h注射的囊胚发育率分别为(18.3±2.52)%和(13.0±2.04)%,没有明显差异(P>0.05)。

显微受精试管婴儿的基础及临床应用系列研究

目的:进行显微受精试管婴儿的基础及临床应用系列研究。方法:采用显微受精试管婴儿(卵胞浆内单精子显微注射,ICSI)治疗男性不孕症,同时进行了系列基础研究:显微激光薄化人胚胎透明带进行辅助孵出的效果研究;应用显微激光系统附带软件测量人胚胎透明带厚度(ZPT)及厚度变化率(ZPTV)与体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系的研究。结果:显微受精试管婴儿应用于临床取得了可喜的成绩,我省首例显微受精试管婴儿于1999年11月在我中心妊娠成功并顺利分娩,填补了省内空白。截止2004年11月,共行显微受精试管婴儿533个周期,临床妊娠率达30%,已出生健康婴儿140个,系列基础研究为提高临床妊娠率提供了理论基础。结论:显微受精试管婴儿是目前治疗男性不孕症最有前景的辅助生殖技术。显微激光薄化人胚胎透明带可有效地增加胚胎种植潜力,提高临床妊娠率。ZPTV而非ZPT是评价胚胎质量的一个有效指标,对妊娠结局有很高的预测价值。

影响精子胞质内显微受精的关键因素

精子胞质内显微受精(ICSI)在人方面已很成熟,但在啮齿类试验动物方面还有待进一步研究,作者就ICSI操作过程中的关键因素作一简要综述。

影响胞质内显微受精的因素

胞质内显微受精(ICSI)技术是20世纪80年代兴起的一项辅助受精技术,对育种和治疗男性不育有着重要的意义,文章对影响ICSI的因素和目前存在的问题及争议进行了系统的阐述。

哺乳动物显微受精及其研究进展

显微受精是体外受精与显微操作手术相结合而形成的一项新技术，该技术在动物受精发育机理研究、畜牧业生产及人医临床实践中有着极为广阔的应用前景。近十几年来显微受精技术发展十分迅速，并已先后获得小鼠、兔、牛和人的显微受精后代。本文仅就国内、外目前的显微受精研究概况及进展作一综述。

显微受精

显微受精法作为对重度男性不育症的疗法已引以注目。不管是透明带开窗法,围卵腔内精子注入法,还是卵细胞质内精子注入法均有妊娠分娩的报告。所谓显微受精法是指通过显微机械性辅助,以消除受精过程的障碍,继而藉配子间的相互作用,使受精过程能因在功能方面的辅助操作而完成。作为临床应用,就有关精子功能检查及精子调整法加以概述,并以围卵腔内精子注入为中心的显微受精法作重点探讨。

冻融成熟卵母细胞显微受精后冻融胚胎移植成功并分娩1例及文献分析

目前精子冷冻和胚胎冷冻技术比较成熟，但卵母细胞冷冻，尤其是玻璃化冷冻仍处于应用的初级阶段。将卵母细胞冷冻技术、胚胎冷冻技术结合运用并获得成功妊娠更是困难。据检索，至今，冻融卵母细胞显微授精后冻融胚胎移植成功并分娩的病例仍鲜有报道。

显微受精试管马在英问世

英国纽马基特镇的马受精研究中心最近宣布已培育出欧洲首例显微受精试管马。本项目的具体事务由正在中心做博士后研究的中国学者李喜和负责。他说:他们将马的卵子放在显微镜下,将一个精子注入其中使之受精,受精卵发育5—6天后,成为含有100—150个细胞的囊胚。然后再通过非手术移植的方法,将6个胚分别移入6匹母马体内,其中4匹成功受胎。

显微受精的现状与展望

显微受精的现状与展望人为地施加操作、让配子进行受精从而达到妊娠，这一系列的技术称之为辅助生殖技术（ａｓｓｉｓｔｅｄｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．ＡＮＴ）。ＡＲＴ曾经一度出现辉煌，这就是通过体外受精－胚胎移植技术（ｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｔ...

猪卵母细胞与猪、水牛及食蟹猴精子的胞质内显微受精

为探讨猪精子、水牛精子及食蟹猴精子分别注入到猪卵母细胞后原核形成及早期胚胎发育情况,利用屠宰场收集的猪卵母细胞,经体外成熟44～48h后,进行胞质内显微受精(ICSI)操作。试验1:体外培养18～19h,用Ho-echst33342荧光染色,检查原核形成情况。试验2:进行体外培养,ICSI后2d检查分裂率,7d记录囊胚率。试验1结果显示:在原核形成率上,猪同种显微受精,原核形成率(50.10%)显著高于注入水牛精子(37.06%)及食蟹猴精子(37.48%),且差异显著(P<0.05),注入水牛精子和食蟹猴精子间差异不显著。试验2结果显示:猪同种显微受精所得的分裂率(86.58%)和囊胚率(29.93%)与水牛精子注入(70.98%,18.48%)、食蟹猴精子注入(78.69%,16.92%)差异显著(P<0.05)。结果表明,水牛精子、食蟹猴精子分别注入到猪卵母细胞后,观察到雌雄原核和精子解聚;水牛精子注入猪卵母细胞与食蟹猴精子注入猪卵母细胞,经体外培养发育到囊胚。