高效液相色谱法测定中药辛夷中木兰脂素的含量

目的:建立高效液相色谱法测定中药辛夷中木兰脂素含量。方法:采用Zorbaz SB-C_8(4.6mm×150mm,5μm)柱,保护柱C_8(4.6mm×20mm,10μm),以乙腈-四氢呋喃-水(35:1:64)为流动相,流速1mL·min^(-1),检测波长为278 nm,柱温:室温。结果:木兰脂素的线性范围为0.1～1.5μg,r为0.999 9,平均回收率为97.5％,RSD为0.72％(n=5)。结论:该方法准确、简便、快速,灵敏度高,重现性好。为辛夷建立了新的质量控制方法。

市售不同产地辛夷中挥发油成分分析及木兰脂素的含量测定

目的分析比较市售湖南、广西两个不同产地辛夷中挥发油的化学成分,并对其木兰脂素的含量进行测定。方法采用GC-MS联用技术对湖南、广西两个产地的辛夷挥发油成分进行分析,采用HPLC对两个产地辛夷中木兰脂素含量进行测定。结果湖南、广西产地的辛夷挥发油分别分离鉴定出62和64种化合物,主要成分为桉油精、β-蒎烯、2-茨酮、香叶基芳樟醇、α-松油醇等。采用HPLC测定辛夷中木兰脂素的含量,结果显示,木兰脂素在2～256μg/m L浓度范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.999 96,n=6）,平均加样回收率为100.32%,RSD为0.04%（n=6）。木兰脂素含量为：湖南产地（0.87±0.05）%、广西产地（0.81±0.02）%。结论 GC-MS法能快速、简便、高效地检测辛夷挥发油的化学成分,HPLC简便可靠、重复性好,可用于辛夷中木兰脂素的含量测定。

木兰脂素对肾缺血再灌注损伤大鼠Toll样受体4表达的影响

目的:观察木兰脂素对大鼠肾缺血再灌注损伤时肾组织Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:采用大鼠肾缺血再灌注损伤模型,雄性SD大鼠45只随机分为假手术组(n=5)、对照组(n=20)和治疗组(n=20)。于再灌注开始前5min静脉注射木兰脂素2mg/kg或等量生理盐水。再灌注达相应时间点时,从各组大鼠取血备测血肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)以及血清细胞间黏附分子-1水平,肾组织用于观察病理变化以及作免疫组化分析肾组织TLR4表达情况。结果:治疗组BUN、Cr较相应时间点对照组明显降低,肾组织损伤也较对照组明显减轻。治疗组肾组织TLR4阳性表达多于假手术组,但较对照组明显减少。结论:木兰脂素预处理可减轻肾缺血再灌注损伤,其机制可能是通过抑制TLR4的表达而发挥作用的。

HPLC法测定穴贴定喘膏中木兰脂素的含量

目的建立穴贴定喘膏中有效成分木兰脂素的含量测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱为LichrospherC8柱(4.6m m×250mm,5μm),柱温30℃,检测波长为278nm,流速1mL m/in,流动相为乙腈-1.55%四氢呋喃水溶液(34∶66)。结果木兰脂素在0.42～5.25μg范围内与峰面积呈良好线性关系,相关系数r=0.9999,贴膏中木兰脂素的平均回收率为100.50%,RSD=2.22%(n=9)。结论该方法准确、简便、稳定,能有效地控制该制剂的质量。

HPLC法测定鼻通宁滴剂中木兰脂素的含量

目的：测定鼻通宁滴剂中木兰脂素的含量。方法：采用HPLC法，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱：DiamonsilC18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈一水（49：51）；流速：1．0mL／min；检测波长：278nm。结果：木兰脂素在36．00～84．00μg／mL范围内，浓度与峰面积线性关系良好（r=0．9994）。平均回收率为100.84％，RSD为1．32％（n=9），方法的精密度、稳定性及重现性良好。结论：分析方法简便，快速准确，可作为鼻通宁滴剂的质控标准。

用微波萃取-HPLC法测定不同产地辛夷药材中木兰脂素的含量

目的：采用微波萃取-HPLC法测定木兰脂素的含量,并考察4个不同产地辛夷药材中木兰脂素的含量差异。方法：采用微波萃取法,以75%乙醇为溶剂,在76℃恒温800 s萃取辛夷药材中的木兰脂素。Shim-Pack VP-ODS柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相：乙腈-水（40∶60）,流速：0.8 ml/min;柱温：室温,检测波长：238 nm,采用HPLC法测定木兰脂素的含量。结果：以峰面积（A）对浓度（c）作线性回归,回归方程为A=2.922 7×104c-3 617.4（r=0.999 9）,在5.6~240.8μg/ml浓度范围内,木兰脂素的峰面积与浓度呈良好线性关系。该法的精密度、重现性和稳定性良好,低、中、高浓度（104.87、127.42和172.51μg/ml）的加样回收率分别为（100.39±1.58）%（、103.82±4.04）%和（103.74±0.13）%（n=3）。采用该法测得河南、河北、湖南、湖北4地所产的辛夷药材中木兰脂素含量分别为（6.59±0.39）%（、3.44±0.48）%、（2.73±0.28）%和（4.18±0.25）%（n=3）。其中河南产辛夷药材中木兰脂素含量最高。结论：本方法简便、准确、稳定、重复性好,可作为辛夷药材及相关制剂质量控制的定量方法。

正交试验法优选辛夷药材中木兰脂素的微波萃取工艺

目的采用正交试验法优选辛夷药材中木兰脂素的微波萃取工艺。方法以高效液相色谱法(HPLC)测定辛夷药材提取物中木兰脂素的含量作为检测指标,条件是:色谱柱(150mm×4.6mm),流动相为乙腈-水(40:60),检测波长238nm,进样量20μl。采用L9(34)正交试验,考察75%乙醇用量(75～85ml)、微波萃取时间(600～999s)和萃取温度(70～80℃)3个因素。结果通过正交试验法优选出微波萃取的最佳条件为75%乙醇用量85ml,萃取时间800s,萃取温度76℃,该方法提取出的木兰脂素平均含量为6.59%。结论用正交试验法优选得到的萃取工艺稳定、方法可行,与常规提取法相比,微波萃取技术具有提取时间短、萃取效率高等优点。

木兰脂素对肾缺血再灌注损伤大鼠P-选择素表达的影响

目的:探讨木兰脂素对大鼠肾缺血再灌注损伤是否具有保护作用及其可能机制。方法:雄性SD大鼠45只,随机分为假手术组、对照组和治疗组。除假手术组外,各组按再灌注时间又分为4个亚组,每组5只。治疗组和对照组分别在再灌注开始前5min静脉注射木兰脂素2mg/kg和等量生理盐水。再灌注达相应时间点时,从各亚组大鼠取血备测血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN),肾组织用于观察病理变化以及作免疫组化分析肾组织P-选择素表达情况。结果:对照组BUN、Scr较假手术组明显升高,治疗组BUN、Scr较相应时间点对照组明显降低(P<0.05);对照组的肾组织损伤较假手术组明显加重,而治疗组的肾组织损伤较对照组明显减轻;随着时间延长,对照组肾组织P-选择素阳性表达较假手术组显著增多,治疗组肾组织P-选择素阳性表达较对照组明显减少(P<0.05)。结论:木兰脂素对大鼠肾缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。

RP-HPLC法测定鼻炎口服液中木兰脂素的含量

目的建立鼻炎口服液中木兰脂素含量的RP-HPLC测定方法。方法采用ShimpackVP-ODS色谱柱:(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-四氢呋喃-水(35∶2∶63);流速:1.0ml/min;检测波长:278nm;柱温:室温;峰面积外标法定量。结果木兰脂素在0.64～6.40μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为100.39%,RSD为0.73%(n=6)。结论该方法测定样品分离度佳,灵敏度高,重现性好,结果准确可靠。

高效液相色谱法测定辛兰芷喷雾剂中木兰脂素的含量

目的:建立辛兰芷喷雾剂的含量测定方法。方法:应用高效液相色谱法,以乙腈-四氢呋喃-水(35∶1∶64)为流动相,检测波长为278nm,对辛兰芷喷雾剂中木兰脂素的含量进行测定。结果:木兰脂素在0.08～4.0μg范围内线性关系良好(r=0.9998);平均回收率为99.87%(RSD为1.40%,n=6)。结论:本方法简便、快速、重现性好,可作为本制剂的含量测定方法。

高效液相色谱法测定鼻渊糖浆木兰脂素含量

目的建立鼻渊糖浆含量测定方法。方法采用高效液相色谱法。色谱柱:Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-甲醇-四氢呋喃-水(30:15:1:54);检测波长:278nm;柱温:30℃;流速:1.0mL·min-1。结果木兰脂素在0.14～1.72μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999)。平均加样回收率为100.8%,RSD=0.9%(n=6)。结论该方法简便,准确,重现性好,可用于鼻渊糖浆的质量控制。

高效液相色谱法测定苍辛滴鼻剂中绿原酸及木兰脂素的含量

目的运用高效液相色谱法对苍耳子中的绿原酸及辛夷中的木兰脂素进行含量测定。方法绿原酸采用高效液相色谱法,色谱柱为Shim-Pack CLC ODS C18柱(250×4.6 mm,5μm);乙腈-0.4%磷酸溶液(10∶90)为流动相;检测波长为327nm;流速:1.0 m L/min。木兰脂素的色谱条件为:用辛基键合硅胶为填充剂Hypersil C8柱(250×4.6 mm,5μm)为色谱柱;乙腈-四氢呋喃-水(35∶1∶64)为流动相;检测波长为278 nm;流速:1.0 m L/min。结果绿原酸在12.99~129.90μg/m L(r=0.999 9)范围内及木兰脂素在19.67~196.70μg/m L(r=0.999 9)范围内线性关系良好,绿原酸回收率为99.28%,RSD为1.15%(n=9);木兰脂素回收率为99.42%,RSD为0.68%(n=9),3批样品中绿原酸的平均含量为0.818 4、0.818 5、0.818 9 mg/m L;木兰脂素的平均含量为0.163 7、0.163 4、0.164 1 mg/m L。结论高效液相色谱法简便、灵敏、准确,可作为苍辛滴鼻剂的定量质量控制。

高效液相色谱法测定鼻通合剂中木兰脂素的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)法测定鼻通合剂中木兰脂素的含量。方法色谱柱为Hypersil BDS柱(4.6mm×200mm,5μm);流动相为乙腈-四氢呋喃-水(44:1:55);流速为1.0mL·min-1;检测波长278nm;柱温为30℃;灵敏度为0.10AUFS。结果木兰脂素在7.28～232.96μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率为98.6%(RSD=1.31%),97.8%(RSD=1.25%),99.5%(RSD=0.96%)。结论该方法操作简便,快捷,可靠性高,准确性和重现性好,其他组分对测定无干扰,可作为鼻通合剂的质量控制方法。

鼻窦炎颗粒中木兰脂素的薄层鉴别与含量测定

目的:建立鼻窦炎颗粒中木兰脂素的鉴别与含量测定的方法。方法:采用TLC法对鼻窦炎颗粒中木兰脂素进行定性鉴别;HPLC法进行含量测定,色谱柱Symmetry C18(150 mm×6 mm,5μm),流动相:乙腈-水(45∶55),流速:1.0 mL/min,进样量:10μL,检测波长:203 nm。结果:TLC定性鉴别:阴性对照无干扰,斑点清晰;HPLC法含量测定:木兰脂素在1～50μg/mL范围内与峰面积呈现良好线性关系(R2=0.9996),平均回收率为99.50%。结论:TLC、HPLC方法简单、准确,灵敏度高,重复性好,可用于鼻窦炎中木兰脂素的鉴别和含量测定。

辛鹅温敏原位凝胶经鼻给药后木兰脂素血浆含量的测定及药动学研究

目的建立辛鹅温敏原位凝胶经鼻给药后大鼠血浆中木兰脂素的液相色谱-串联质谱(liquid chromatography mass spectrometry/mass spectrometry,LC-MS/MS)检测方法,并探讨其在大鼠体内的药动学特性。方法大鼠滴鼻给予辛鹅鼻用温敏原位凝胶(1.5 mL/kg)后于不同时间点腹主动脉取血,应用梯度洗脱程序进行色谱分离,用LC-MS/MS技术检测,以采样时间对血药浓度建立药-时曲线,采用DPS 15.10软件计算药动学参数。结果在2~500 ng/mL范围内,木兰脂素与内标的峰面积比值与浓度的线性关系良好。大鼠滴鼻给予辛鹅鼻用温敏原位凝胶,其主要药动学参数分别为达峰时间T_(max)为(0.46±0.03)h,达峰浓度C_(max)为(230.83±55.17)ng/mL,半衰期T_(1/2)为(2.98±0.43)h,体内平均驻留时间MRT为(4.30±0.62)h,药-时曲线下面积值AUC_(0-24)为(1035.34±200.65)ng·h/mL、AUC_(0-∞)为(1089.22±201.00)ng·h/mL,总清除率CL为(1278.30±226.46)L/(kg·h)。结论建立的LC-MS/MS检测方法灵敏度高、专属性强,适用于大鼠体内的木兰脂素药动学研究。辛鹅温敏原位凝胶经鼻给药后,木兰脂素在大鼠体内的过程符合一室模型。

HPLC测定鼻炎片中木兰脂素的含量

运用高效液相色谱法,建立测定鼻炎片中木兰脂素含量测量方法;采用Kromasil Cs(250mm×4.6mm,4m);ODS色谱柱,流动相为乙唏乙晴-水(38:62);检测波长:278nm,流速1.0mL/min。结果:此方法线性关系良好,平均回收率97%,RSD=1.9%。结论:方法灵敏,重复性好,可用于制剂的含量测定及质量控制。

HPLC法测定鼻敏清丸胶囊中木兰脂素的含量

目的建立鼻敏清丸胶囊中木兰脂素的含量测定方法。方法采用HPLC法：色谱柱为DiamonsilC18（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈-四氢呋喃-水（体积比42∶2∶56）;流速为1.0 mL/min;柱温为35℃;检测波长为278 nm。结果木兰脂素的质量浓度在1.856-46.40μg/mL范围内呈良好线性关系,平均回收率为98.34%,RSD为1.53%。结论本方法准确可靠、重现性好,可用于鼻敏清丸胶囊的质量控制。

高效液相色谱法测定不同生长期武当玉兰中木兰脂素含量

目的建立测定不同生长期武当玉兰中木兰脂素含量的反相高效液相色谱法。方法采用Agilent HC-C8(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-四氢呋喃-水(35∶1∶64),流速为1.0 mL.min-1,柱温30℃,检测波长为278 nm。结果木兰脂素在0.05～1.02 mg.mL-1(r=0.999 8)范围有良好的线性关系,平均加样回收率为97.9%;RSD<2.0%。结论树龄10～15年武当玉兰中木兰脂素含量最高。

木兰脂素联合5-氟尿嘧啶对人胃癌细胞的影响

目的探讨木兰脂素联合5-FU对胃癌细胞增殖、凋亡、克隆形成、侵袭性的影响和作用机理。方法用木兰脂素联合5-FU处理胃癌细胞,用MTT法检测细胞增殖,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,用Hochest染色检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭能力,比较联合用药与单独给药对胃癌细胞增殖、克隆形成、凋亡、侵袭性的影响。WB检测单独给药和联合用药对胃癌细胞中AKT、ERK信号通路的影响。结果木兰脂素与5-FU联合应用对胃癌细胞增殖的抑制作用较两药单独显著增强,呈协同作用(CI值<1),木兰脂素可以提高5-FU诱导的细胞凋亡、增强对胃癌细胞克隆形成能力、侵袭性的抑制作用。木兰脂素对5-FU的增强作用与AKT、ERK信号通路的抑制有关。结论木兰脂素通过抑制AKT、ERK信号通路增强了5-FU对胃癌细胞的抗肿瘤作用。