基因沉默番木瓜环斑病毒复制酶基因(PRSV-Nib)获得抗病毒病番木瓜的研究

番木瓜是重要的热带经济水果。番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)是番木瓜的重要病毒病,经常导致严重的产量损失和质量恶化。自从1998年第一例转基因番木瓜问世以来,使得基于“致病菌衍生的抗病性(pathogen-derived resistance,PDR)”的抗病育种策略获得成功广泛应用。然而依赖于序列同源性的抗病性与病毒突变导致多样性增加之间的矛盾成为番木瓜育种科学家的新挑战。本研究拟采用RNAi策略针对复制酶(nuclear inclusion b.Nib)获得广谱抗PRSV番木瓜新种质。通过团队已建立的胚性愈伤诱导-农杆菌介导转化-再生苗诱导的番木瓜遗传转化体系,共获得经过抗性筛选的再生苗52株,通过特异性PCR进行筛选共计获得24株转基因阳性植株。通过对T0代田间自然发病试验中,转基因番木瓜株系抗病性明显高于非转基因对照,其中NibB5-2田间抗病性最优。通过hiTAIL-PCR方法确定NibB5-2插入位点位于第2号染色体supercontig_30的1976766的位置。T1代接种试验中,无病毒积累且无发病症状,初步确认具有良好的病毒抗性,为番木瓜抗病育种提供新思路。

添加部分水解罗望子胶对酸木瓜果醋品质的影响

该研究以酸木瓜(Chaenomeles speciosa)为原料,通过部分水解罗望子胶(PHTG)对6株乳杆菌的增殖活性测定,选用鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)与酵母菌混菌进行酒精发酵,并从灵石醋醅中筛选鉴定出一株高产醋酸的巴氏醋杆菌巴士亚种(Acetobacter pasteuranus subsp. pasteuranus)LS-4用于醋酸发酵制备酸木瓜果醋。以未添加PHTG为对照,考察在酒精发酵阶段添加PHTG对酸木瓜果醋品质的影响。结果表明,添加1.0%PHTG,酒精发酵36 h后酒精度达3.3%vol,比对照组提高17.4%;醋酸发酵72 h后总酸含量达42.0 g/L,比对照组提高8.0%。香气成分分析表明,添加PHTG酸木瓜果醋共检出22种香气成分,其中醇类7种、酯类4种、酸类6种、醛酮类3种、酚类和烯烃类各1种,比对照新增了3种香气成分(正丁酸、2-戊酮和壬醛)。感官评价表明,添加PHTG有效提升酸木瓜果醋的口感和气味评分,改善酸木瓜果醋的感官品质。

番木瓜环斑病毒甜瓜分离物的基因组及其侵染性克隆

番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus,PRSV)是瓜类作物主要病毒之一,分析了甜瓜分离物HaNHK10的基因组序列和分子变异,构建了具有侵染性的全长cDNA克隆。结果显示,HaNHK10分离物基因组全长为10332 nt,与其他分离物的核苷酸和氨基酸序列一致性分别为74.60%~97.80%和85.30%~98.50%。基于全基因组序列的系统进化分析显示,HaNHK10与来自中国的所有分离物均聚集于II组中,并与中国山东的西葫芦分离物PRSV-SD亲缘关系最近。接种试验显示,HaNHK10分离物的全长cDNA克隆具有侵染性,它能系统侵染甜瓜、黄瓜、西瓜、南瓜、西葫芦和瓠瓜6种作物,经接种产生的病毒后代也能够通过摩擦接种侵染植株。

我国番木瓜种质资源保护及利用研究进展

阐述了我国目前加工型、鲜食型番木瓜品种的收集及选育应用情况,种子及种质圃、超低温、组织培养等番木瓜种质保存技术研究进展,传统杂交选育、引种驯化、诱变育种、细胞工程育种、基因工程育种、分子标记辅助育种等番木瓜育种技术研究进展。提出了超干贮存可作为番木瓜种子保存技术的一个研究方向,传统杂交育种可与多倍体育种及太空育种、分子模块设计育种等育种新技术相结合。

牛膝木瓜汤合半夏白术天麻汤治疗良性阵发性位置性眩晕的临床经验分析

目的 研究和探讨牛膝木瓜汤合半夏白术天麻汤治疗良性阵发性位置性眩晕的临床效果。方法 选择的研究对象为我院2020年1月到2020年12月期间内门诊的80例BPPV患者,根据随机抽签法,研究将参与者分为对照组和观察组。对照组按比例随机分组,其中接受常规的西医治疗干预。而观察组则接受牛膝木瓜汤合半夏白术天麻汤的治疗干预。研究将比较这两组患者在眩晕症状改善情况和生活质量方面的差异。结果 经过不同的治疗干预后,观察组患者的眩晕症状改善情况、生活质量水平明显高于对照组,且观察组患者的不良反应发生率明显低于对照组,数据经对比有统计学差异(P<0.05)。结论 牛膝木瓜汤合半夏白术天麻汤具有较好的临床疗效,该疗法在显著改善患者眩晕症状、提升生活质量以及降低不良反应发生率方面表现出色,因此具有临床推广和借鉴的价值。

番木瓜—芥菜轮作栽培经济效益及技术要点

为了解番木瓜连作及番木瓜分别与芥菜、甜玉米轮作模式下,番木瓜环斑花叶病的发病率及作物产量和经济效益情况,在广西横州市横州镇大和村开展调查。调查结果显示:番木瓜连作模式下,番木瓜环斑花叶病的发病率为70.7%,病情分级为5级,年平均收益为3837.5元/667 m^(2);番木瓜—甜玉米轮作栽培模式下,番木瓜环斑花叶病的发病率为17.7%,病情分级为1级,年平均收益为4582.5元/667 m^(2);番木瓜—芥菜轮作模式下,番木瓜环斑花叶病发病率为14.6%,比连作模式发病率减少56.1%,病情分级为1级,年平均收益为8625元/667 m^(2),比连作模式增收124.8%,比番木瓜—甜玉米轮作模式增收88.2%。同时总结番木瓜—芥菜轮作模式的栽培技术要点,为进一步推广提供参考依据。

木瓜酒中微生物控制的研究

目的:为了提高木瓜酒的稳定性,改善木瓜酒的品质,防止微生物在酒中引起酸败。方法:以木瓜汁为原料,用碳酸钙对木瓜汁进行降酸,以无菌处理的为实验组,未无菌处理的为对照组,从微生物污染途径和木瓜酒存储条件对木瓜酒中的微生物进行控制。利用二氧化硫对发酵过程中各酿造用具进行杀菌,对比不杀菌处理发酵组微生物数量。同时设计单因素实验和正交实验研究不同pH、温度和二氧化硫浓度对木瓜酒存储中微生物的影响。结果:实验表明,经过无菌操作的木瓜酒在各阶段的微生物数量都明显低于未经过无菌操作组的,pH 35℃时,木瓜酒不稳定;≥40 mg/L的二氧化硫浓度(游离硫)对微生物的抑制效果较明显;正交实验表明,对微生物影响效果从大到小排序为SO2浓度 > 温度 > pH,最佳的条件组合为:25℃,50 mg/L SO2和pH 3.5。结论:对酿造用具进行严格无菌操作,虽然不能完全阻断微生物污染来源,但是可以在实际生产中有效降低微生物数量。对微生物的三个影响因素中,SO2浓度造成的影响最大,其次是温度,控制木瓜酒中微生物最佳的组合条件为25℃,50 mg/L SO2和pH 3.5。

宣木瓜药材烫晒法有效物质含量变化及干燥工艺优化

目的:以山楂酸、齐墩果酸、熊果酸含量来阐述宣木瓜药材烫晒法的科学内涵,以期确定宣木瓜最适宜的产地加工工艺和关键技术参数。方法:采用反相高效液相色谱法测定设计不同的干燥方法制备不同的样品。结果:通过对烫晒、生晒和直接烘干等9个不同干燥方法处理的宣木瓜样品进行含量测定,发现最佳干燥成药材的方法是烫晒;宣木瓜山楂酸、齐墩果酸和熊果酸分别是0.0076、0.5259和0.2571;发现最佳干燥成饮片的方法为烫晒后烘48 h用水润48 h再在60℃烘48 h的方法,其主要化学成分含量高,山楂酸、齐墩果酸和熊果酸分别是0.0071、0.4425和0.291。结论:本研究为宣木瓜药材烫晒法科学内涵及干燥工艺提供了试验理论依据。

数字PCR和荧光定量PCR检测转基因番木瓜中外源基因拷贝数方法的建立及其应用

传统的检测转基因植物中外源基因拷贝数的方法是Southern杂交,该方法成本高、周期长,难以满足高通量检测外源基因拷贝数的育种需求,因此,本研究旨在建立快速且高通量检测转基因番木瓜中外源基因拷贝数的方法。本研究从番木瓜基因组中筛选出2个单拷贝基因Cpa03g018830和Cpa03g018770,以已知外源基因为单拷贝整合的转基因番木瓜为参照,利用数字PCR鉴定其拷贝数,进一步以其为内参基因,以番木瓜转基因育种常用的筛选标记基因NPTⅡ为外源目的基因,建立利用数字PCR和荧光定量PCR技术检测转基因番木瓜中外源基因拷贝数的方法。结果表明:Cpa03g018830和Cpa03g018770均为单拷贝基因;建立的数字PCR方法对转基因番木瓜中的外源基因拷贝数的检测准确可靠,而荧光定量PCR对转基因番木瓜中外源基因单低拷贝整合的检测准确度较高,对外源基因多拷贝整合的检测准确度则较低,因此,荧光定量PCR适合用来在大量转基因植株中初筛出单低拷贝整合的植株。本研究鉴定的单拷贝基因Cpa03g018830和Cpa03g018770可作为转基因番木瓜中外源基因拷贝数检测的内参基因,且建立的利用数字PCR和荧光定量PCR技术检测转基因番木瓜中外源基因拷贝数的方法,操作简单,速度快,适合批量检测,可为番木瓜转基因抗病育种中单低拷贝株系的选育提供新的方法。

单一及混合乳酸菌发酵对番木瓜汁品质的影响

目的:探讨植物乳杆菌Lactobacillus plantarum(Lp)、鼠李糖杆菌Lactobacillus rhamnosus(Lr)、嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus(La)及两两混合菌(Lp+Lr、Lp+La、Lr+La)对番木瓜汁发酵后植物化学、微生物学、风味特性和功能特性的影响,并开发出一种具有改善功能和促进健康特性的番木瓜益生菌发酵饮料。方法:通过测定发酵过程中pH值、可溶性固形物、可滴定酸、活菌数、葡萄糖、果糖、蔗糖、有机酸和挥发性化合物的变化,考察各菌发酵过程中总酚、总黄酮含量和抗α-葡萄糖苷酶、抗酪氨酸酶的能力。结果:在72 h的发酵过程中,单一菌株培养和混合菌株培养的变化相似,pH值显著降低,酸度显著提高;乳酸和琥珀酸含量均显著提高,柠檬酸和苹果酸含量显著降低。发酵后,木瓜汁中总酚类物质和总黄酮含量均有所增加。Pearson相关分析表明,酚类物质的代谢可能有助于增强α-葡萄糖苷酶和酪氨酸酶的抑制作用。所有发酵组中,由植物乳杆菌单菌发酵的番木瓜汁乳酸、总酚、总黄酮含量最高,对α-葡萄糖苷酶和酪氨酸酶的抑制作用最强。未经发酵的番木瓜原汁中主要检出6种挥发性化合物,丁酸含量最大为89.742%,其次为芳樟醇。发酵后,从6组发酵果汁中共鉴定出25种主要挥发性成分,其中丁酸含量显著降低,减少了番木瓜不愉快气味的产生。所有发酵中,Lp单菌产生的挥发性成分最多(18种),混合菌Lp+Lr的较少(5种)。虽然混合菌Lp+Lr存在的活菌数最多[7.61 lg(CFU/mL)],但总体看来,单一菌种Lp可能更可取。结论:单菌种植物乳杆菌发酵可以改善番木瓜汁的感官特性,并增强其潜在的功能特性。

木瓜姜醋治寒性荨麻疹

取木瓜(食用木瓜)100克,生姜9克,米醋100毫升。将木瓜、生姜、米醋一同放入沙锅中煎煮,待醋干后,取出木瓜、生姜食用,分早晚2次吃完,7天为1个疗程。一般连用1~2个疗程可见效。四川彭州胡佑志。成都中医药大学副研究员蒲昭和点评:荨麻疹属过敏性皮肤病。中医称为“瘾疹”,或俗称风团、风疙瘩。荨麻疹一般有风热型和风寒型之分,前者多见于急性期,后者以慢性荨麻疹居多。

番木瓜米酒酿造工艺

番木瓜又名为乳瓜、石瓜、万寿果、木冬瓜、木瓜,是番木瓜科番木瓜属的多年生热带水果。番木瓜营养丰富,含多种酶元素如木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶、过氧化氢酶,含多种有机酸和番木瓜碱、黄酮类等,含多种维生素、微量元素、氨基酸及矿物质等,深受广大消费者喜爱。中医认为,番木瓜味甘、性平、无毒,具有润肺、治喉炎、便秘及支气管炎等功效。

小果型非转基因番木瓜新品种黄花佑的选育

黄花佑番木瓜是以泰国红为母本、GZ201301301为父本杂交育成的鲜食番木瓜新品种。该品种植株生长旺盛,结果性状优良,受高温影响小,间断结果现象轻,连续坐果率94.3%,平均单株商品果为71.8个,平均单果质量为790.3 g,果实呈梨形,整齐度高,商品性状优良,平均纵径17.3 cm,横径10.3 cm。果实果皮光滑,果肉较厚呈橙红色,口感柔嫩多汁、无渣,风味清香。可溶性固形物含量(w,后同)为13.5%,还原糖含量为10.5 g·100 g^(-1),总糖含量为12.8 g·100 g^(-1),总酸含量为0.16 g·100 g^(-1),维生素C含量为84.7 mg·100 g^(-1),粗纤维含量为0.5 g·100 g^(-1)。在珠三角地区,组培苗春季定植至始花时间约59 d,定植至始采收时间约177 d,丰产性强,当年平均株产量约56.8 kg,每666.7 m2产量为6816 kg。果实在常温条件下保鲜贮藏期为7 d。适应性较强,适宜在我国番木瓜产区种植。感环斑花叶病毒病和畸叶病毒病,建议采用轮作方式种植,重点防控病毒病。

菜用型和果用型番木瓜表型性状表达差异性分析

为了给番木瓜品种DUS(特异性、一致性和稳定性)测试操作手册制订和测试指南修订提供依据,以为开展不同类型番木瓜种质创制及评价打下基础,对3个菜用型和3个果用型番木瓜品种的49个表型性状进行观测分析,比较菜用型和果用型番木瓜,及同类型不同品种间表型性状表达差异性。结果表明,菜用型和果用型番木瓜在果实纵径、果实形状、单果质量等24个性状上存在明显差异,且明显差异性状主要集中在果实完熟期,其中果实形状、单果质量、果实中部空腔形状等17个性状达到极明显差异。菜用型和果用型番木瓜品种间均在叶柄花青甙显色强度、花冠长度、果实纵径等14个性状上存在明显差异,可将其确定为菜用型和果用型番木瓜差异化表达的表型性状,并作为区分两者的主要性状。菜用型番木瓜品种间均在植株始花高度、株高、叶柄长度等4个性状上存在明显差异,可将其作为区分菜用型番木瓜品种的主要性状。这些差异性状可为修订番木瓜DUS测试指南提供参考。

糖渍野木瓜鲜切片加工及保鲜工艺研究

目的优化糖渍野木瓜的制作工艺和保鲜工艺参数,并评估其货架期。方法以糖液质量分数、超声糖渍时间、真空糖渍时间为因素,进行正交实验,筛选出糖渍野木瓜鲜切片的最佳制作工艺。在最佳糖渍工艺基础上,筛选糖渍野木瓜鲜切片的保鲜处理工艺参数。在糖液中添加纳他霉素和D-异抗坏血酸钠,真空包装后巴氏杀菌。根据筛选出的最佳工艺参数制作产品,并进行产品检验。结果糖渍野木瓜鲜切片最佳工艺参数:超声糖渍时间为60 min,真空糖渍时间为90 min,糖液质量分数为40%,纳他霉质量浓度为60 mg/L,D-异抗坏血酸钠质量浓度为200 mg/L,杀菌条件为70℃、30 min。结论该工艺生产出的糖渍野木瓜鲜切片相较于市售产品具有更高的安全性和更长的货架期。

木瓜提取物MGE30OA对吲哚美辛诱导的大鼠胃黏膜损伤的保护作用

目的:探究木瓜提取物MGE30OA对吲哚美辛诱导的大鼠胃黏膜损伤的保护作用及其可能的机制。方法:将SD大鼠随机分为正常组,模型组,MGE30OA低、中、高剂量(25、50、100 mg/kg)组,每组5只。模型组灌胃4 mg/kg吲哚美辛;MGE30OA各剂量组灌胃吲哚美辛0.5 h后,灌胃相应剂量的MGE30OA;1次/d,持续14 d。末次给药后取大鼠胃黏膜组织,HE染色观察组织学表现,Western blot法检测胃组织中PI3K/AKT信号通路相关蛋白和MAPK3蛋白的表达;取全血,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β1、IL-4、IL-10、COX-1、COX-2、PGE2水平。结果:模型组大鼠胃黏膜损伤明显,MGE30OA各剂量组胃黏膜损伤较模型组减轻。与正常组比较,模型组大鼠血清中促炎因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平升高,抗炎因子TGF-β1、IL-4、IL-10水平降低,PGE2和COX-1水平降低,COX-2水平升高(P<0.05);胃组织中磷酸化(p-)PI3K/PI3K和p-AKT/AKT降低,MAPK3表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,MGE30OA各剂量组血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平降低,IL-4、IL-10、TGF-β1水平升高(P<0.05);COX-2水平降低,COX-1及PGE2水平升高(P<0.05);p-PI3K/PI3K与p-AKT/AKT升高,MAPK3表达下调(P<0.05)。结论:MGE30OA对吲哚美辛诱导的大鼠胃黏膜损伤有较好的保护作用,其作用机制可能与调节PI3K/AKT、MAPK信号通路有关。

川木瓜对传统药膳鸭汤的风味影响

以川木瓜粉、川木瓜片为研究对象,分别熬制药膳鸭汤,采用定量感官描述法评价其风味特征,并使用电子舌、气相色谱-离子迁移谱技术检测药膳炖煮中化合物的变化情况,从而考察不同形态川木瓜对药膳鸭汤风味的影响。结果表明:川木瓜粉炖鸭汤的感官评价最好,具有麦芽香味和金属气味;电子舌的鲜味强度值由高到低分别为川木瓜粉剂组、川木瓜片剂组、无川木瓜组;气相色谱-离子迁移谱技术共检测出54种挥发性化合物,包括醛类23种、醇类7种、烯烃类9种、酮类7种、酯类3种、杂环类3种以及酸类2种;川木瓜粉剂熬制药膳鸭汤后烯类化合物溶出较高,而川木瓜片熬制药膳鸭汤后醇类、酮类、醛类化合物溶出较高,从烯类化合物活性分析认为川木瓜粉剂药理作用最佳。研究结果为药膳鸭汤风味品质提升提供理论参考。

水肥耦合对香蕉和番木瓜幼苗生长的影响

分析不同氮、磷、钾含量配比与基质相对含水率的耦合对香蕉和番木瓜幼苗生长的影响,为节约型精准化苗木培育提供理论依据。以‘巴西蕉’和‘紫晖’番木瓜假植苗为材料,采用双因素随机区组设计4个水平氮、磷、钾含量配比和3个水平基质相对含水率的交互组合,共12个处理(T1~T12),以传统水肥处理为对照(CK),测定不同处理的香蕉和番木瓜幼苗株高、茎粗、叶片数、叶片SPAD值、叶面积、地上部干重及根系总长度、表面积、平均直径、根尖数等生长形态指标,并对地上部生长指标进行PCA综合评价。在香蕉幼苗试验中,T6处理对株高、叶面积、地上部干重及根系总长度、表面积、平均直径影响最大,T1处理的茎粗最大,T1、T5和T6处理叶片数最多,均为7.60片,T5处理的叶片SPAD值最高,T7处理的根尖数最多,地上部生长指标PCA综合评价得分为T6>T5>T1>T2>T10>T3>T9>T7>T11>T12>T4>T8>CK。在番木瓜幼苗试验中,T10处理对株高、叶面积、叶片数、地上部干重影响最明显,T9处理的叶片数、地上部干重与T10处理一致,并显著增加根系总长度、表面积、根尖数,T11处理的叶片SPAD值最高,T2处理的根系平均直径最大,地上部生长指标PCA综合评价得分为T10>T9>T1>T11>T6>T3>T2>T5>T7>CK>T12>T8>T4。培育香蕉和番木瓜幼苗的最佳氮、磷、钾含量配比均为20:10:20,最佳基质相对含水率分别为80%和70%。

非转基因番木瓜新品种比较试验

本研究旨在筛选到综合农艺性状优良,适宜在广东及相近气候产区大面积推广的非转基因番木瓜新品种。以非转基因番木瓜新品种‘紫晖’、‘黄花佑’、‘贮丰’和‘泰国红’为对象,调查其两性株组培苗种植后的物候期、植株生长势、结果特性、果实商品性、果实品质、丰产性及抗性表现,并进行比较分析。参试品种生长势旺盛,综合农艺性状在各试点表现稳定,其中‘紫晖’与‘黄花佑’番木瓜具有结果部位低、花序主轴长度中等、节位坐果率高、丰产稳产、果实一致性好、果面光滑、色泽度好等优点;‘贮丰’具有可溶性固形物含量高、丰产稳产、耐贮藏等优点;‘紫晖’‘、黄花佑’和‘贮丰’3个品种品质均表现优良‘。黄花佑’与‘贮丰’番木瓜适宜鲜食‘,紫晖’既可以作鲜食也可以作加工型非转基因优质高产型新品种,以上3个品种均适宜在广东及相近气候产区推广种植。

超声波联合木瓜蛋白酶降解壳聚糖的工艺研究

采用超声波技术联合木瓜蛋白酶对壳聚糖进行降解,以还原糖释放量为指标,通过单因素实验研究了壳聚糖质量浓度、溶液p H、超声功率及超声时间对壳聚糖降解的影响。并利用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)及X-射线衍射(XRD)分别对降解前后的壳聚糖进行结构表征分析。结果表明:超声波联合木瓜蛋白酶可以有效降解壳聚糖,在壳聚糖质量浓度为6 g/L、溶液p H为4.5、超声功率为480 W、超声时间为180 min条件下,加入木瓜蛋白酶,降解效果最明显,还原糖释放量达到1.456 g/L;FT-IR结果表明,降解后壳聚糖的结构基本没有变化;XRD结果表明,降解后壳聚糖的晶体结构受到了破坏。