重组木聚糖酶的高密度发酵及其定向制备低聚木糖

为提高酶水解杨木木聚糖定向转化低聚木糖的效率,同时降低酶法制备低聚木糖的成本,围绕重组大肠杆菌(PET-PdoXyn10A-DE3)高密度发酵制备拟杆菌来源木聚糖酶PdoXyn10A的诱导表达条件和酶水解制备低聚木糖的工艺条件开展了研究。考察了在5 L发酵罐水平下诱导剂浓度、诱导光密度(OD_(600))值、诱导温度和诱导pH值等因素对PET-PdoXyn10A-DE3产重组木聚糖酶PdoXyn10A的影响,反应温度、pH值对玉米芯木聚糖酶水解过程中酶活力的影响,以及酶添加量、酶水解时间对杨木乙酸水解液制备低聚木糖的影响。研究结果表明:在诱导剂浓度0.25 mmol/L、诱导OD_(600)值55、诱导温度34℃和诱导pH值7.0的最佳诱导条件下,经高密度发酵重组酶酶活力可达362.67 U/mL,重组大肠杆菌生物量可达28.83 g/L。酶水解制备低聚木糖的最佳条件为酶反应温度40℃、pH值5.2、酶添加量12 U/mL和反应时间6 h,此条件下低聚木糖的量为3.21 g/L,其中木二糖、木三糖、木四糖、木五糖和木六糖的量分别为1.09、 0.97、 0.84、 0.18、 0.13 g/L,木糖为1.82 g/L。

木聚糖酶对育肥猪生长性能、血清生化指标及肠道形态的影响

本研究旨在探究日粮中添加木聚糖酶对育肥猪生长性能、血清生化指标及肠道形态的影响。试验将120头平均体重(61±0.71)kg的三元育肥猪随机分为4组,每组5个重复,每个重复6头。饲喂玉米-豆粕型日粮,分别向基础日粮中添加0、200、400、800 mg/kg的木聚糖酶。试验结果表明:日粮添加木聚糖酶显著提高育肥猪终末体重(P<0.05),日粮添加400和800 mg/kg木聚糖酶显著提高育肥猪平均日增重(P<0.05);日粮添加800 mg/kg木聚糖酶显著降低育肥猪料重比(P<0.05)。此外,日粮中添加木聚糖酶对育肥猪平均日采食量无显著影响(P>0.05)。日粮添加400 mg/kg木聚糖酶可显著提高育肥猪血清白蛋白、球蛋白和总蛋白含量(P<0.05);日粮添加800 mg/kg木聚糖酶可显著降低育肥猪血清尿素氮含量(P<0.05);日粮添加木聚糖酶对育肥猪血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、甘油三酯和总胆固醇含量无显著影响(P>0.05)。饲料添加木聚糖酶可显著提高育肥猪十二指肠和回肠绒毛高度和V/C值(P<0.05);此外,日粮添加木聚糖酶对育肥猪十二指肠、空肠和回肠的隐窝深度均无显著影响(P>0.05)。总之,本试验结果表明,育肥猪日粮木聚糖酶最适添加量为800 mg/kg。

响应面法模拟优化蜡样芽孢杆菌W-3菌株产木聚糖酶发酵条件

【目的】应用响应面法对产木聚糖酶的工艺进行优化,为进一步大规模生产提供参考依据。【方法】通过单因素试验分别考察碳源、氮源、pH、温度、接种量和转速6个因素对蜡样芽孢杆菌W-3产木聚糖酶的影响。通过Design Expert 10.0.3软件中的Box-Behnken进行响应面优化设计。通过对小麦麸皮、氯化铵、pH、温度、接种量和转速进行不同组合,系统地优化了发酵条件。利用二次响应面回归方法建立酶产量与各因素之间的数学模型,并通过回归分析确定各因素对酶产量的影响程度。【结果】小麦麸皮添加量、氯化铵添加量、pH和温度是影响发酵的主效应因素,单因子优化显示,蜡样芽孢杆菌W-3发酵产木聚糖酶条件为小麦麸皮35 g/L、氯化铵5 g/L、pH 8.0、温度70℃、接种量2%、转速210 r/min。在单因子优化的基础上进一步应用响应面优化,找到了更优的发酵参数,经过优化后的发酵条件为小麦麸皮33.0 g/L、氯化铵5.1 g/L、pH 8.3、温度73℃、接种量2%、转速210 r/min,该条件下蜡样芽孢杆菌W3发酵产生的木聚糖酶的酶活为523.24 U/mL。【结论】本试验通过响应面法优化了蜡样芽孢杆菌W-3发酵条件,在33.0 g/L小麦麸皮、5.1 g/L氯化铵、pH 8.3、73℃、2%接种量、210 r/min条件下,可获得较高的木聚糖酶的酶活(523.24 U/mL),比优化之前(225.53 U/mL)提高了2.32倍。

两种不同固定化方法对木聚糖酶Xyn11A酶学性质的影响及在低聚木糖制备中的应用

为了提高木聚糖酶Xyn11A的稳定性及在低聚木糖生产中的应用潜力,该研究利用有机-无机杂化纳米花技术和以氨基乙基-琼脂糖为载体共价结合法固定Xyn11A,制备了固定化酶Xyn11A-Cu_(3)(PO_(4))_(2)和Xyn11A-Agarose,并比较研究了2种固定化酶的酶学性质,发现2种固定化酶的pH稳定性和热稳定性均有所提高,Xyn11A-Agarose稳定性更佳,在pH 4.0~4.5处理24 h后仍有40%~65%的残余活性,50℃处理3 h后仍有60%的残余活性。以榉木木聚糖为底物,与游离酶相比,Xyn11A-Cu_(3)(PO_(4))_(2)和Xyn11A-Agarose对底物的亲和力和催化效率有所降低,但有较好的重复使用次数。特别是Xyn11A-Agarose循环使用12轮后,仍有90%的残余活性。Xyn11A-Cu_(3)(PO_(4))_(2)水解甘蔗渣和玉米芯粉生成的低聚木糖中木二糖和木三糖含量最高,木四糖含量最低;而Xyn11A-Agarose催化生成的不同低聚木糖含量相当。2种固定化方法均能显著提高Xyn11A的稳定性,但Xyn11A-Agarose的稳定性和重复性优于Xyn11A-Cu_(3)(PO_(4))_(2),表明Xyn11A-Agarose在生产低聚木糖中具有更大应用潜力。

高压电场选育高产酸性木聚糖酶菌株的研究

为获得适用于动物饲料的木聚糖酶高产菌株,并验证高压电场诱变方法的有效性,于农田土壤中筛选出高产菌株,在高压电场中进行诱变,筛选最佳的突变菌株。出发菌株初步鉴定为沙福芽孢杆菌,命名为Bacillus safensis B16。该菌株所产木聚糖酶在pH 5、60℃下酶活性为217.34 U/mL,且60℃时的半衰期为229 min,热稳定性良好。在6~24 kV、极间距为3 cm的高压电晕电场中处理0~10 min,最终在10 kV下处理6 min选育出一株木聚糖酶高产菌株B16106-2,酶活性达到256.73 U/mL,较出发菌株提升了18.12%,且传代7次后菌株的产酶能力基本不变,具有良好的遗传稳定性。突变菌株所产木聚糖酶的最适酶反应条件不变。研究证明,高压电晕电场是一种有效的诱变方式,且筛选出的菌株B16106-2性能良好。

基于计算设计的GH11家族木聚糖酶CDBFV的热稳定性改造及潜在机制研究

【目的】瘤胃真菌Neocallimastix patriciarum GH11家族木聚糖酶CDBFV在饲料、食品等领域具有良好应用前景,提高其热稳定性对其生产应用十分重要。【方法】使用分子动力学模拟、机器学习等策略设计潜在CDBFV热稳定性突变体,在大肠杆菌和毕赤酵母中进行异源表达纯化,测定最适反应条件、比酶活和85℃孵育3 min后相对剩余活力,通过结构分析明确热稳定性提高机制。【结果】位于CDBFV N端基序~(36)GNNS~(39)具有较高柔性,对其改造设计的单突变体N37P和N38V在85℃孵育3 min后,相对活力分别降低至70.3%和55.1%,较野生型(48.7%)提升了21.6%和6.5%;进而,在相对活力提升显著的N37P基础上叠加已报道优势突变体N88G,构建双突变体N37P/N88G,其相对活力达到了73.4%,较野生型提高了24.7%;此外,将N37P/N88G在毕赤酵母中进行了分泌表达,在85℃处理3 min后,相对活力达到了88.8%;结构分析表明,N37P突变的引入使得CDBFV形成了新的氢键相互作用,降低活性位点附近柔性,并干预了糖基化形成,进而提高了热稳定性。【结论】成功得到了高耐热双突变体N37P/N88G,为提高GH11家族木聚糖酶的热稳定性改造提供了新的思路和方法,有望推动CDBFV在饲料工业等高温环境下的广泛应用。

碳水化合物结合域对木聚糖酶酶学性质的影响

【目的】旨在探究不同来源碳水化合物结合域(CBM)对山毛榉木聚糖的结合能力,并将具有较高结合能力的外源CBM融合到链霉菌L10904木聚糖酶(XYN)的C端和N端,以探究外源CBM对木聚糖酶酶学性质的影响。【方法】通过底物吸附方法,利用考马斯亮蓝G250法检测溶液中CBM在吸附前后的浓度,计算CBM的底物结合率,筛选到了结合木聚糖能力较好的CBM1和CBM4。为了探究对底物结合能力高的CBM融合位置对木聚糖酶酶学性质的影响,将CBM1和CBM4通过柔性连接肽分别与XYN的C端和N端融合,并在大肠杆菌中表达获得4种重组酶,分别命名为CBM1-XYN、XYN-CBM1、CBM4-XYN和XYN-CBM4。【结果】CBM1和CBM4与木聚糖结合率分别为89%和95%。在60℃,pH 7.0反应条件下,XYN、CBM1-XYN、XYN-CBM1、CBM4-XYN和XYN-CBM4的比活力分别是32 274.81、49 342.21、602.48、230.42和2 362.24 U/mg,CBM1-XYN比活力较XYN比活力提高了1.5倍。酶学性质分析表明,CBM1使XYN温度稳定性和pH稳定性得到了提高,将XYN和CBM1-XYN分别在60℃孵育1 h,CBM1-XYN残余酶活力和XYN残余酶活力分别为81%和28%;在pH 3-11范围内,CBM1-XYN在4℃孵育12 h后能够保持90%以上的酶活力。【结论】在大肠杆菌中成功异源表达了链霉菌来源的木聚糖酶,筛选到了对底物结合率高的两种CBM1和CBM4,并通过蛋白质融合技术成功将CBM融合到XYN上,获得酶学性质得到改良的CBM1-XYN,能够提高木聚糖酶的温度稳定性、pH耐受性及比酶活。

响应面法优化木聚糖酶的修饰工艺

探究化学修饰对木聚糖酶(XY)相对活性的影响,以XY相对活性为指标,利用丁二酸酐、乙酸酐、马来酸酐(MA)和邻苯二甲酸酐对XY进行化学修饰。采用单因素试验筛选出最优酸酐修饰剂,并进行响应面法优化酸酐修饰条件。结果表明:MA为最优修饰酸酐,最佳修饰条件为修饰温度14℃、修饰时间4h、pH7.0、MA添加量40%(以XY质量计)。在此条件下,马来酸酐修饰木聚糖酶(MA-XY)的相对活性为154.62%±1.24%。

饲用木聚糖酶的生物学功能及其在畜禽生产中的应用

饲用木聚糖酶是能够分解植物性饲料原料细胞壁中木聚糖的一类酶,可通过水解木糖苷键,降解饲料中的木聚糖,削弱其抗营养作用,在提高营养物质的消化率、改善肠道健康、增强免疫功能、改善畜禽生产性能等方面发挥着积极作用,是一类绿色、高效的饲料添加剂。然而,木聚糖酶也可能在消化过程中带来负面影响,如过量添加可能导致食糜黏度升高。本文综述了饲用木聚糖酶的生物学功能及木聚糖酶在畜禽生产中的应用,以期为木聚糖酶的研究和应用提供理论依据。

木聚糖酶在青贮及反刍动物日粮中的应用

青贮饲料与反刍动物日粮中木质纤维素占比高,直接进行利用会造成能量流失。酶制剂在青贮或日粮中应用广泛,通过酶制剂预处理可提高饲料的利用效率。木聚糖酶与其它酶制剂混合添加可有效降解青贮中的纤维含量,增加可代谢糖含量,有利于微生物生长,促进青贮发酵,进而提高青贮饲料的利用效率。在反刍动物日粮中,木聚糖酶可以辅助瘤胃微生物分解饲料中的纤维成分,改善瘤胃发酵环境,使反刍动物获得更多的能量来供其生长和代谢,进而提升反刍动物的生产性能。本文介绍了木聚糖与木聚糖酶,通过综述木聚糖酶在青贮及反刍动物日粮中应用,阐释了木聚糖酶在青贮与反刍动物日粮中的添加量、利用效果,为后续木聚糖酶的利用提供理论参照。

Caldicellulosiruptor owensensis木聚糖酶的融合表达、酶学性质研究及在面包烘焙中的应用

木聚糖酶是一种新型的安全无毒面粉改良剂,能有效改善面团性能和烘焙质量。为了挖掘新的木聚糖酶资源,并评估其在面包烘焙中的应用,该研究在大肠杆菌中融合Sumo标签重组表达了来自嗜热微生物Caldicellulosiruptor owensensis的木聚糖酶,并对融合木聚糖酶SumoXyn的酶学性质和对面包烘焙的品质影响进行了初步研究。大肠杆菌能高效表达C.owensensis的木聚糖酶,且仅需通过75℃加热细胞破碎液30 min这种简单操作即可得到纯度较高的融合木聚糖酶SumoXyn,微量差示扫描荧光分析发现该酶热变性中点温度值为83.5℃。对其酶学性质研究发现该酶最适pH值为9.0,但在pH 5~10时仍有60%以上的活性。在pH 4~10的缓冲液中处理24 h,SumoXyn仍有80%以上的残余活性;该酶在80℃时酶活性最高,但在100℃仍有50%的酶活性,75℃加热1 h后仍有约75%的残余活性,表明SumoXyn具有较好的pH稳定性和热稳定性。以榉木木聚糖为底物,测得其v max为2354.52μmol/(min·mg),K m为2.26 mg/mL,K cat为214.68 s^(-1)。以200 g高筋全麦面粉为原料制作面包,研究添加量分别为3、6、9 mg的SumoXyn对全麦面包品质的影响,发现随着SumoXyn添加量的增加,面包比容和弹性增加、硬度和咀嚼性降低,全麦面包品质得到显著改善,说明SumoXyn是一种具有潜力的面粉改良剂。

嗜热脂肪地芽孢杆菌木聚糖酶XynA的异源表达、酶学表征及低聚木糖的抗氧化性研究

试验旨在开发木聚糖酶XynA,为饲用木聚糖酶提供新的资源。研究毕赤酵母中异源表达嗜热脂肪地芽孢杆菌XynA的最佳发酵条件、酶学性质及水解产物低聚木糖(xylo-oligosaccharide,XOS)的抗氧化性。结果显示,1.0%的甲醇诱导96 h,即可产生酶活约为33.7 U/mL的XynA粗酶液。XynA最适反应pH值为9.0,最适反应温度为65℃,在pH值5.0~10.5、45~75℃时能发挥80%以上活性。薄层层析(TLC)分析发现,XynA水解甘蔗渣木聚糖的主要产物为木三糖-木六糖,1000 mg/L的XOS对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除率达到72.04%,对羟自由基的清除率达到99.16%。研究表明,异源表达后的XynA具有较好的酶活和稳定性,能够高效水解木聚糖产生XOS,有助于其在饲料工业中的应用。

稀土选育枯草芽孢杆菌1.108高产木聚糖酶菌株的研究

论文考察了稀土离子对枯草芽孢杆菌1.108液态发酵产木聚糖酶的影响,以期选育高产木聚糖酶的枯草芽孢杆菌。结果表明,于0~6 h时添加1×10^(-4) mol/L的Er^(3+),30℃液态发酵12 h,木聚糖酶活达到133.79 U/mL,获得一株木聚糖酶高产菌Bacillus subtilis X-Er,与原始菌株相比提高10.48%;连续传代培养8次,木聚糖酶活力没有显著变化,表明菌株具有良好的遗传稳定性;电镜结果发现Er^(3+)的加入使该菌细胞壁的通透性增大,推测这可能是木聚糖酶活增加的原因之一。

纤维素酶和木聚糖酶处理甘蔗梢青贮对水牛养分表观消化率、泌乳性能和血清生化指标的影响

本试验旨在研究纤维素酶和木聚糖酶处理对甘蔗梢青贮品质以及其对水牛养分表观消化率、泌乳性能和血清生化指标的影响。选取泌乳期和胎次相近、体况健康、体重[(726.40±6.45)kg]相近的摩拉母水牛24头,随机分为4组,每组6个重复,每个重复1头牛。对照组饲喂不添加酶制剂处理的甘蔗梢青贮,试验组分别饲喂添加200 mg/kg纤维素酶(试验Ⅰ组)、200 mg/kg木聚糖酶(试验Ⅱ组)以及200 mg/kg纤维素酶+200 mg/kg木聚糖酶(试验Ⅲ组)处理的甘蔗梢青贮。酶制剂的添加量以青贮原料鲜重为基础。各组饲粮精粗比均为7∶3。预试期2周,正试期4周。结果表明:1)与对照组相比,各试验组甘蔗梢青贮常规营养成分含量均无显著差异(P>0.05);各试验组乳酸含量均显著提高(P<0.05),且试验Ⅲ组乳酸含量显著高于试验Ⅰ组和试验Ⅱ组(P<0.05);各试验组pH、乙酸以及氨态氮(NH_(3)-N)含量均显著降低(P<0.05)。2)与对照组相比,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组水牛干物质采食量(DMI)显著降低(P<0.05),各试验组中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)表观消化率显著提高(P<0.05)。各组间产奶量、乳成分、饲料转化效率以及血清生化指标均无显著差异(P>0.05)。综上所述,在甘蔗梢中单独或联合添加纤维素酶与木聚糖酶均能提高其青贮品质,且能提高水牛NDF和ADF表观消化率,对泌乳性能和血清生化指标无显著影响。

重组木聚糖酶XynH的C/N端及“Thumb”结构对其酶学性质的影响

木聚糖酶在造纸、饲料、能源、食品和医药等行业广泛应用,利用基因工程技术快速挖掘适用于工业生产需求的木聚糖酶资源具有重要意义。该文基于生物信息学分析,针对木聚糖酶XynH的C/N端及“Thumb”结构进行分子改造,成功构建突变体X-N、X-C、X-f。各突变体与原酶XynH相比,X-N的最适pH值为5.5,其他酶均是在pH 5.0时表现出最高酶活力;各突变体与XynH在pH 4.0~6.0的残余酶活力均在60%左右,具有良好的耐酸性。X-N的最适温度(60℃)与其他酶相比提高了5℃;在55℃下保温1 h后,X-N和X-f的残余酶活力高于XynH,X-N的耐热性表现更好。各突变体对榉木木聚糖的亲和力较弱,但表现出更高的转化率。该文利用基因工程手段对木聚糖酶进行分子改造,构建了3个突变体,均表现出较好的耐酸性,X-N的最适pH略高于原酶,而且在高温下稳定性更好。N端替换改善了木聚糖酶的热稳定性,C端替换可能涉及到催化结构域的一部分,从而导致酶活性的变化。而“Thumb”末端的改造可能使活性位点的裂缝变窄,阻止了底物的进入,导致酶的催化效率降低。突变体凸显出的与原酶酶学性质的差异,从中展现出的结构与功能的关系,为木聚糖酶的改良和应用提供了一定的思路和策略。

黑曲霉固态发酵稻谷壳粉制备木聚糖酶活力饲料辅料研究

试验旨在获取具备木聚糖酶活性的发酵稻谷壳粉,以提高稻谷壳粉的饲用价值。试验用黑曲霉对稻谷壳粉进行固态发酵,以发酵产物中木聚糖酶活力为指标,采用单因素结合响应面法优化发酵条件并测量发酵产物营养物质的含量。结果显示,发酵基质质量为10 g、初始含水量为10.1 mL、添加1.0%的硫酸铵、培养温度为30.9℃、培养时间为3.1 d时,发酵产物中木聚糖酶活力最高,为135.643 U/mL,较优化前提高了3.6倍。在此条件下,发酵稻谷壳粉中粗蛋白和真蛋白含量均有提高,真蛋白的含量达12.35%,较发酵前提高了107.21%,粗纤维和粗脂肪含量有所降低,粗灰分含量提高。研究表明,发酵稻谷壳粉中木聚糖酶活力达到饲用标准,提高了蛋白质含量,可以作为辅料制备饲料。

日粮添加木聚糖酶对肉牛生长性能、氮钙磷代谢的影响

文章旨在研究日粮中添加木聚糖酶对肉牛营养物质氮、钙和磷代谢的影响,试验将80头身体健康且饲养背景相同的肉牛随机分为4组,每组4个重复,每个重复5头,分别饲喂添加0mg/kg(对照组)、100mg/kg(T1组)、200mg/kg(T2组)、300mg/kg(T3组)木聚糖酶的基础日粮,试验结果表明,(1)与对照组相比,随着木聚糖酶添加量的增加,肉牛末重持续升高,各处理间差异显著(P<0.05);T3组日平均增重显著高于T1组和对照组(P<0.05);(2)与对照组相比,各处理食入氮、粪氮、尿氮、食入钙、粪钙、食入磷、粪磷、氮保留量、钙保留量、磷保留量呈持续上升趋势(P<0.05);T1组尿钙含量显著高于其他处理(P<0.05);T3组尿磷含量显著低于其他处理(P<0.05)。综上所述,日粮中添加木聚糖酶能增加食入氮钙磷、粪中氮钙磷、尿中氮含量,表明木聚糖酶可通过促进肉牛氮钙磷代谢而提高生长性能,以300mg/kg添加量效果最佳。

黄色瘤胃球菌木聚糖酶基因xynB的异源表达与酶学性质研究

该试验以黄色瘤胃球菌基因组为模板,通过PCR扩增获得目的基因xynB,将xynB与表达载体PET28a连接,获得重组载体PET28a-xynB。用IPTG对含有重组载体的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,镍离子层析柱纯化后检测其酶学性质。生物信息学分析表明,XynB理论大小为47 kDa,预测等电点为4.49,不含信号肽,含有1个糖苷水解酶11家族结构域和1个碳水化合物结合结构域。酶学性质研究结果表明,该酶的最适pH值为5.0,最适反应温度为40℃,金属离子Mg^(2+)、Na^(+)、K^(+)和Ba^(2+)对木聚糖酶XynB有较好的激活效果。综上可知,黄色瘤胃球菌木聚糖酶XynB属于GH11家族,最适pH值为5.0,最适温度为40℃,酶比活力为62.94 U/mg。

小麦型饲粮中添加不同类型木聚糖酶对肉鸡生长性能、免疫与抗氧化功能、食糜黏度与pH的影响

为研究比较小麦型饲粮中添加不同类型木聚糖酶对肉鸡生长性能、养分消化率、免疫与抗氧化功能、食糜黏度与pH及肠道紧密连接蛋白(ZO-1)的影响,试验选取1日龄罗斯308雏鸡800只,随机分为4组,每组10个重复,每个重复20只鸡,公母各半。对照组饲喂基础饲粮,试验1~3组分别添加4 U/g中性木聚糖酶和2、4 U/g酸性木聚糖酶,试验期42 d。结果表明:(1)1~21日龄,各组间肉鸡生长性能无显著差异(P>0.05),从数值上看,试验组3的21日龄体重最高,料肉比(F/G)最低;22~42日龄,试验组3肉鸡42日龄体重较试验组1显著提高2.95%,平均日增重(ADG)提高3.58%(P<0.05),F/G显著降低2.92%(P<0.05);1~42日龄,试验组3 F/G较试验组1显著降低1.89%(P<0.05)。(2)试验组3粗蛋白质(CP)消化率较试验组1显著提高5.67%,总能(GE)消化率提高3.03%(P<0.05)。(3)试验组3血清总蛋白(TP)、球蛋白(GLB)和免疫球蛋白A(IgA)含量较试验组1显著提高9.22%、10.46%、18.14%(P<0.05)。(4)试验组3回肠和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活性较试验组1显著提高17.15%、8.13%(P<0.05),肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性提高46.15%(P<0.05)。(5)试验组3 ZO-1表达量较对照组显著提高28.00%(P<0.05),食糜黏度较试验组1显著降低了21.19%(P<0.05)。综上所述,50%小麦型饲粮中添加木聚糖酶可提高养分消化率、增强肠道屏障功能和免疫与抗氧化功能,同时降低食糜黏度与pH,促进肉鸡生长性能,且4 U/g酸性木聚糖酶效果优于4 U/g中性木聚糖酶。

黑曲霉固态发酵葡萄皮渣产木聚糖酶的工艺研究

试验以黑曲霉固态发酵葡萄皮渣为研究对象,以木聚糖酶的活性为指标,应用响应面法对产木聚糖酶的工艺进行优化。首先对5个因素进行单因素试验,通过Plackett-Burman设计确定了3个显著性因素,分别是发酵时长、黑曲霉接种量和初始pH。经过Box-Behnken设计试验,建立二次回归模型,得到最佳发酵参数。结果表明,当初始pH为7、发酵时长为58 h、接种量为10%、初始含水量为60%、料层厚度为2.5 cm时,木聚糖酶最高活性为246.98 U/g,相较于优化前(88.62 U/g)提高了179%。由此可见,通过优化黑曲霉固态发酵葡萄皮渣的工艺条件可显著提高木聚糖酶活性。