Th17细胞和自然杀伤性T细胞在胰岛素抵抗的慢性丙型肝炎患者外周血中的变化

目的研究胰岛素抵抗的慢性丙型肝炎患者外周血辅助性T(Th)17淋巴细胞和自然杀伤性T(NKT)细胞数量和功能的变化。方法筛选52例慢性丙型肝炎患者(其中合并胰岛素抵抗26例),采用流式细胞仪检测患者外周血Th17和NKT细胞频率,细胞内染色技术检测细胞内白细胞介素4(IL-4)和IFN-γ染色阳性的NKT细胞的比例,ELISA法检测患者白细胞介素17(IL-17)的水平。数据行t检验。结果胰岛素抵抗的慢性丙型肝炎患者外周血Th17细胞频率、IL-17水平和细胞内IFN-γ阳性的NKT细胞的比例明显高于慢性丙型肝炎患者[分别为(6.60±1.70)%与(4.52±1.05)%,t=5.205,P<0.01;(180.0±35.6)与(82.0±17.0)pg/mL,t=12.674,P<0.01;(39.5±9.1)%与(32.0±6.5)%,t=3.420,P<0.01];而NKT细胞频率明显降低[(0.42±0.09)%与(0.62±0.14)%,t=9.325,P<0.01]。胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)≥4患者组Th17细胞频率、IL-17水平和细胞内IFN-γ阳性的NKT细胞比例明显高于HOMA-IR<4患者[分别为(7.35±1.80)%与(5.82±1.47)%,t=3.292,P<0.01;(243.3±61.2)与(144.7±37.5)pg/mL,t=6.938,P<0.01;(44.3±10.2)%与(34.7±7.5)%,t=3.866,P<0.01];NKT细胞频率明显下降[(0.33±0.08)%与(0.52±0.12)%,t=6.718,P<0.01]。结论随着胰岛素抵抗程度加重,慢性丙型肝炎患者外周血Th17细胞频率升高,分泌IL-17增加;NKT细胞频率减少,分泌IFN-γ增加,导致炎症反应向Th1漂移。

维生素D3衍生物对激素依赖性皮炎豚鼠CD8^+杀伤性T细胞功能影响的机制

目的探讨维生素D3衍生物对激素依赖性皮炎豚鼠CD8^+杀伤性T细胞功能影响的机制。方法48只激素依赖性皮炎豚鼠按数字表法随机分为3组-模型组、他克莫司组与维生素D3组,每组各16只。他克莫司组与维生素D3组给予他克莫司与1,25-二羟维生素D3治疗,模型组不给予治疗,治疗观察时间为4周。评价3组豚鼠总体疗效,比较3组豚鼠治疗前、治疗后4周的皮肤油脂含量、血清白细胞介素-6(IL-6)与白细胞介素-8(IL-8)含量、CD8^+杀伤性T细胞比率。结果治疗后4周,模型组、他克莫司组与维生素D3组的总有效率为12.5%、75.0%和93.8%,差异有统计学意义(P<0.05)。维生素D3组与他克莫司组治疗后4周的皮肤油脂含量[(86.94±0.26)、(76.70±0.40)μg/cm^2]、CD8^+杀伤性T细胞比率[(28.14±2.18)%、(21.09±2.01)%]高于治疗前和模型组[(66.34±7.40)μg/cm^2、(13.22±1.48)%],且维生素D3组高于他克莫司组,差异均有统计学意义(P<0.05)。维生素D3组与他克莫司组治疗后4周的血清IL-6[(3.01±0.11)、(5.02±0.09)ng/L]与IL-8[(3.00±0.17)、(6.87±0.16)ng/L]含量低于治疗前和模型组[(9.17±0.14)、(11.67±0.84)ng/L],且维生素D3组低于他克莫司组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论维生素D3衍生物在激素依赖性皮炎豚鼠的应用能提高CD8^+杀伤性T细胞功能,抑制炎症因子的释放,有利于增加皮肤油脂含量,从而提高治疗效果。

自然杀伤性T细胞在肿瘤免疫治疗中的作用及机制

自然杀伤性T细胞(NKT cells)是一群细胞表面既有天然杀伤(NK)细胞受体,又有T细胞受体(TCR)的特殊T细胞亚群。经活化后的NKT细胞既可以作为效应细胞直接发挥杀伤肿瘤作用,也能激活多种免疫效应细胞间接实现抗肿瘤作用。研究表明,NKT细胞在机体抗肿瘤、免疫调控以及获得性免疫应答方面都具有重要的临床意义。

糖尿病性胃轻瘫CD8^+ CD28^+杀伤性T细胞含量及其临床意义

目的探讨CD8+CD28+杀伤性T细胞在糖尿病性胃轻瘫(DGP)患者胃肠动力障碍的作用。方法收集糖尿病性胃轻瘫患者分为观察组及对照组(n=28,n=26),对照组单纯给予莫沙必利;观察组在对照组基础上加用复方维生素U,观察胃排空时间及血糖水平,并用视觉模拟法(VAS)对DGP的临床表现改善程度进行评价;分别在治疗前后行胃镜检查并活检检测胃黏膜组织及外周血CD8+CD28+杀伤性T细胞的百分含量。结果 (1)治疗后观察组的胃排空时间明显短于对照组(P=0.026);(2)治疗前两组患者外周血CD8+CD28+杀伤性T细胞均在10%以内,显著低于正常人的(13.71±6.92)%;治疗后两组患者该细胞含量均不同程度升高,且治疗后观察组外周血及胃黏膜组织内CD8+CD28+杀伤性T细胞含量显著高于对照组;(3)治疗后两组的血糖水平较前显著下降,但无组间差异;(4)治疗后观察组患者上腹部胀痛、早饱、恶心/呕吐、反酸/嗳气等症状的VAS评分均明显低于观察组(P<0.05)。结论CD8+CD28+杀伤性T细胞在DGP发病机制起到重要作用,其缺乏可能是DGP患者胃肠动力障碍的一个重要因素。

六君子汤对脾虚痰湿型糖尿病胃轻瘫的胃动素、CD8+CD28+杀伤性T细胞的影响

目的:探讨六君子汤对脾虚痰湿型糖尿病胃轻瘫的胃动素、CD8+CD28+杀伤性T细胞的影响。方法:选取120例脾虚痰湿型糖尿病胃轻瘫患者随机分为对照组(n=60)与观察组(n=60),对照组给予枸橼酸莫沙必利分散片治疗,观察组在对照组基础上加用六君子汤治疗,观察两组治疗前后血清胃动素及免疫状态。结果:观察组治疗后的血清胃动素水平高于对照组(P<0.05),治疗后观察组的外周血样本与胃粘膜组织样本的CD8+CD28+杀伤性T细胞百分比均高于对照组(P<0.05)。结论:在脾虚痰湿型糖尿病胃轻瘫的治疗中采用六君子汤,能够提高平胃动素含量与CD8+CD28+杀伤性T细胞的百分比,具有较高的临床应用价值。

组蛋白去乙酰化酶3对恒定型自然杀伤性T细胞发育和功能的调控作用

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)缺失对恒定型自然杀伤性T细胞(iNKT)数量、发育表型和细胞因子产生功能的影响,确定HDAC3在iNKT细胞发育和功能发挥中的调控作用。方法:采用T细胞特异的hdac3基因敲除(HDAC3KO)及其野生型正常对照(WT)小鼠,每种小鼠各取3~5只,分离小鼠胸腺、脾脏、淋巴结和肝脏淋巴细胞,采用细胞表面抗体染色和流式细胞术检测HDAC3对iNKT细胞数量和发育表型的变化,实验至少重复3次。采用HDAC3KO小鼠及其同系B6.SJL小鼠,每种小鼠各取4~6只;提取以上2种小鼠骨髓细胞,混合后经尾静脉注入经γ射线照射的B6.SJL小鼠,以制备骨髓混合嵌合体模型,8周后流式细胞术检测不同骨髓来源iNKT细胞在胸腺的产生和发育,实验重复3次。选取HDAC3KO和WT小鼠,每种各取小鼠3~5只;采用iNKT细胞特异激活剂半乳糖神经酰胺腹腔注射4 h后,收集各组小鼠脾脏淋巴细胞和血清,分别采用细胞内染色、流式细胞术和酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测HDAC3作用下iNKT细胞因子水平,实验至少重复3次。结果:与WT小鼠比较,HDAC3KO小鼠胸腺和外周免疫器官中iNKT细胞比例和数量均明显降低(P<0.05),且HDAC3KO小鼠胸腺iNKT细胞中CD44-NK1.1-和CD44+NK1.1-细胞比例明显升高(P<0.05),而CD44+NK1.1+、CD122+、CD69+和DX5+细胞比例明显降低(P<0.05)。骨髓混合嵌合体实验,与正常B6.SJL小鼠来源的骨髓细胞比较,来源于HDAC3KO小鼠的骨髓细胞产生的iNKT细胞数量明显减少(P<0.05),同时iNKT细胞中CD44+NK1.1+细胞比例也明显降低(P<0.05)。细胞因子胞内染色和ELISA法检测,与WT小鼠比较,HDAC3KO小鼠iNKT细胞和血清中IFN-γ和IL-4水平均明显降低(P<0.05)。结论:HDAC3缺失通过内源性机制导致iNKT细胞数量减少,细胞发育成熟受阻;同时HDAC3缺失导致iNKT细胞因子产生功能明显降低。提示HDAC3在iNKT细胞的发育和功能发挥中具有重要调控作用。

稳定性自然杀伤性T细胞调节自身免疫性疾病作用机制的研究进展

研究证实，自然杀伤性T（NKT）细胞在多种自身免疫性疾病中参与免疫应答过程，但NKT细胞在调控系统调节致病性辅助T（Th）细胞方面的作用机制目前尚不完全清楚。近年来的研究发现，Th17细胞与多种自身免疫性疾病的发病有关，与以往的研究认为Th1、Th2亚群在自身免疫性疾病中起主要作用的结果有所不同，Th17亚群的作用可能比Th1更为重要。无论体外研究还是体内研究，稳定性NKT（iNKT）细胞都能抑制CD4’T细胞向Th1细胞和Th17细胞的分化，但抑制Th1细胞、Th17细胞分化的作用机制是不同的。就NKT细胞的概念、自身免疫性疾病中NKT细胞对Th1细胞、Th17细胞的调控作用的研究进展进行综述。

PD-1抗体抗癌新发现:杀伤性T细胞的抗肿瘤活性由树突状细胞启动

传统观点认为,PD-1抗体抗癌机制为PD-1抗体与T细胞上PD-1受体结合并直接激活T细胞启动免疫反应。然而,事情并非这么简单。最近,麻省总医院的GARRIS等在《Immunity》上发表的研究成果进一步解析了PD-1抗体抗癌的机制。该研究发现,当PD-1抗体与T细胞上PD-1受体结合后,由树突状细胞(dendritic cells,DCs)通过表达IL-12启动杀伤性T细胞的抗肿瘤活性。

自然杀伤性T细胞在肝脏疾病中的作用与机制研究进展

自然杀伤性T细胞(natural killer T cell,NKT cell)是一种非传统T淋巴细胞,既表达自然杀伤性细胞(natural killer cell,NK cell)的相关受体,也表达T细胞受体.近年来,不断有新的NKT细胞亚群被发现,不同亚群的结构、功能和调节机制不尽相同.在肝脏疾病中,活化的NKT细胞功能和作用复杂多变,其机制尚未十分明确,有待进一步研究.深入探讨NKT细胞在肝脏疾病中的作用及机制对延缓肝病病理进程至关重要.

杀伤性T细胞来源的蛋白激酶在胰腺癌中的表达及临床意义

目的:检测分析杀伤性T细胞来源的蛋白激酶(TOPK)在胰腺癌组织中的表达及与临床病理特征和患者预后的关系。方法:采用免疫组织化学法检测组织芯片中70例胰腺癌组织(胰腺癌组)及10例正常胰腺组织(对照组)的TOPK蛋白表达,比较两组TOPK表达差异。依据胰腺癌组TOPK表达水平将其分为不/低表达(n=34)和中/高表达(n=36)两个亚组,比较两组胰腺癌患者性别、年龄、TNM分期、病理分级和类型等病理指征分布差异;绘制生存曲线,分析两亚组患者生存差异,回归分析影响胰腺癌预后的相关因素。结果:胰腺癌组TOPK蛋白1例不表达、33例低表达、31例中表达、5例高表达;对照组8例不表达、2例低表达,差异有统计学意义(P<0.01)。胰腺癌组不同水平TOPK蛋白表达只在不同TNM分期存在显著性差异(P<0.05),而在其它病理特征中未见明显差异(P>0.05);生存曲线显示TOPK中/高表达亚组患者平均生存期低于无/低表达亚组(P<0.01)。回归分析表明TNM高分期和TOPK蛋白高表达为胰腺癌的预后危险因素。结论:TOPK蛋白高表达可能是胰腺癌进展和预后不良的危险因素。

心肌梗死后树突状细胞调节自然杀伤性T细胞相关通路研究

目的探讨心肌梗死后树突状细胞调节自然杀伤性T细胞的相关通路。方法利用公共ArrayExpress数据库检索小鼠心肌梗死模型单细胞测序数据,然后通过生物信息学方法在转录水平挖掘树突状细胞在心肌梗死后的调控网络,从而进一步确定其调节自然杀伤性T细胞的通路。结果通过对小鼠模型不同时间点的单细胞测序数据进行聚类分析,共确定了7种免疫细胞:中性粒细胞、单核细胞Ⅰ和Ⅱ、B细胞、巨噬细胞、自然杀伤性T细胞及树突状细胞。细胞间通讯分析及受体-配体分析确定树突状细胞主要通过Selplg-Sell通路调节心肌梗死后自然杀伤性T细胞的浸润。结论树突状细胞在心肌梗死后免疫调节方面发挥重要作用,并通过Selplg-Sell通路调节自然杀伤性T细胞的浸润。

外周血双阴性T细胞、自然杀伤性T细胞及血清刺激性甲状腺球蛋白含量在预测分化型甲状腺癌术后^(131)I疗效中价值研究

目的探讨外周血双阴性T细胞(DNT)、自然杀伤性T细胞(NKT)及治疗前刺激性甲状腺球蛋白(ps-Tg)在预测分化型甲状腺癌(DTC)术后^(131)I治疗反应中的价值。方法选取2018年1—12月就诊于联勤保障部队960医院核医学科行^(131)I治疗的215例DTC术后患者为研究对象。根据2015版美国甲状腺学会指南将患者分为疗效满意(ER)组(n=121)、疗效不确切(IDR)组(n=59)、疗效不佳(IR)组(n=35);根据1年内复发情况将患者分为复发组(n=17)与无复发组(n=198)。比较不同疗效组间在性别、年龄、淋巴结转移、TNM分期等特征方面的差异。比较不同疗效组及不同临床转归组在DTC术后外周血DNT百分比、NKT百分比及ps-Tg水平表达的差异。采用Mann-Whitney U秩和检验分析DNT、NKT及ps-Tg水平与^(131)I治疗后临床转归ER组的关系,并采用受试者工作特征(ROC)曲线及最佳界值点评估各指标单独及联合检测对最佳治疗反应的预测价值。结果ER组、IDR组、IR组患者在性别、年龄方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05);在淋巴结分期、TNM分期方面比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。IDR组和IR组的DNT百分比、NKT百分比高于ER组,IR组ps-Tg高于IDR组、ER组,差异均有统计学意义(P<0.05)。复发组的DNT百分比、ps-Tg水平均高于非复发组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组NKT百分比比较,差异无统计学意义(P>0.05)。DNT和ps-Tg对最佳治疗反应ER的预测价值较高[曲线下面积(AUC)分别为0.748、0.776],界值点分别为7.15%、8.44 ng/ml;且两种检测指标的灵敏度、特异性比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。3种检测指标联合时预测价值最高(AUC=0.844,灵敏度93.6%,特异性66.6%)。结论中高危DTC患者术后^(131)I治疗前DNT百分比、NKT百分比可以预测临床转归,DNT和NKT升高可提示不良预后及高复发风险;DNT和ps-Tg单独检测预测最佳治疗反应的效能相当,DNT、NKT及ps-Tg三者联合检测可对最佳治疗反应达到较高的预测价值。

杀伤性T淋巴细胞抗肿瘤研究现状

机体免疫监视功能中起重要作用的是细胞免疫，起特异性杀伤肿瘤作用的是杀伤性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ），国内外对其抗肿瘤的研究很广泛。本文综述ＣＴＬ的特异性杀伤作用机理，体内外诱导、培养、扩增方法。

自然杀伤性T淋巴细胞数量分布变化与肝癌转移的相关性研究

目的探讨自然杀伤性T细胞的数量分布变化与肝癌转移的相关性。方法采用鼠抗人CD3、CD56单克隆抗体双重免疫法,正常肝脏组织及不同分期肝癌组织中自然杀伤T淋巴细胞的数量及分布情况,运用统计学分析自然杀伤性T淋巴细胞的数量分布变化与肝癌细胞迁移的相关性。应用SPSS20.0软件,所获数据采用方差分析和t检验。结果各分期肝癌组织中自然杀伤性T淋巴细胞的数量与正常肝组织内自然杀伤性T细胞的数量比较,P<0.0005,肝癌Ⅰa期-Ⅱa期与Ⅱb期-Ⅲb期的自然杀伤性T细胞数量比较,P<0.005。结论肝癌组织中自然杀伤性T细胞的数量依赖于组织被癌细胞侵袭的程度不同而分布不同,肝脏的微环境影响自然杀伤性T细胞的分化,自然杀伤性T细胞数量与肝癌转移具有相关性。

自然杀伤性T细胞与移植

自然杀伤性T细胞（NKT细胞）是一种免疫调节细胞，同时表达T细胞及部分NK细胞标志。NKT细胞可在α—GalCer刺激下体外大量扩增，呈TH0样细胞因子分泌，激活后可以产生IL-4、IFN-γ等细胞因子，并具有细胞毒性作用。NKT细胞在诱导移植耐受、调节移植物抗宿主病及移植物抗肿瘤效应等方面具有一定作用，应用前景广泛。

食管癌患者外周血中自然杀伤性T细胞含量的检测及其临床意义

目的研究食管癌患者外周血中自然杀伤性（NK）T细胞在手术前后的表达情况。方法采用流式细胞术（FCM）分析59例食管癌患者手术前后外周血中CD3、CD。CD56、CD8抗体的表达，研究NKT细胞及其亚群的表达情况及所占比例。结果随着CD3＋CD56＋CD8＋／CD；cD壶cD；的比值逐渐升高，Ⅲ～Ⅳ期食管癌患者的比例逐渐降低，ANOVA示组间差异有统计学意义（P〈0．05）；CD；CD；6CD；／CD；c聪CD；的比值与CD3＋CD56＋CD4＋成NKT细胞非线性相关；CD3＋CD56＋CD8＋；NKT细胞与NK细胞正相关，与CD3＋细胞负相关。结论CD3＋CD56＋CD8＋／CD3＋CD56＋CD4_的比值可能与肿瘤负荷有关，并且有助于判断食管癌患者的疾病程度及预后。

CD4杀伤性T细胞在肿瘤免疫中的作用

提起CD4^＋T细胞，人们通常会先人为主地认为CD4^＋T细胞就是辅助性T细胞，主要是由于过去研究发现CD4^＋T细胞在体液免疫和细胞免疫中主要发挥辅助增强作用。

抗白血病杀伤性T淋巴细胞特性及体外制备的研究进展

在白血病病人外周血及其骨髓中存在克隆性T细胞。这些克隆性T细胞是在白血病细胞相关抗原刺激作用下产生的呈某种或某些TCRVβ亚家族优势表达的CTL ,其中一些CTL能特异性识别和融解白血病细胞而对非白血病细胞无反应性。通过体外培养可以大量扩增该克隆性CTL。

c—Jun氨基末端激酶1对杀伤性T细胞抗病毒效应的影响

目的探讨病毒感染过程中，JNK1对杀伤性T细胞应答的调节作用。方法通过皮下途径对JNK1基因敲除小鼠（JNK1）给予鼠痘病毒（ECTV）感染，对其存活情况、靶器官（肝、脾）病毒增殖情况进行观察和检测，并与野生型（wr）小鼠进行比较；采用流式细胞技术，检测感染后不同时间点野生型（WT）小鼠和JNK1小鼠脾脏和淋巴结中细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的变化及效应；采用ELISA方法，检测感染后wT和JNK1。小鼠脾脏淋巴细胞IFN-1和IL-4的产生情况。结果JNK1基因敲除后，小鼠对ECTV的抵抗和清除能力明显下降，表现为总体病死率增加，靶器官内病毒滴度显著增高；较之WT小鼠，JNK1小鼠感染后CTL增殖能力明显降低的同时，伴随着产生IFN-y能力的下降。结论JNK1信号在ECTV感染中，对机体的抗病毒免疫应答，包括CTL的增殖和效应，可能起到重要的调节作用。