长春西汀注射液杂质谱研究

目的优化长春西汀注射液中有关物质的测定方法,并研究其杂质谱,明确杂质来源及其与生产工艺间的关系。方法采用HPLC法,色谱柱为ACE Excel C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.2 mol·L^(-1)乙酸铵溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温35℃,检测波长280 nm,测定7家企业生产的79批次长春西汀注射液中有关物质,采用UHPLC-Q-TOF对最大未知杂质结构进行推测,结合酸、碱、氧化、高温和氧化破坏试验及工艺分析和模拟灭菌工艺,确定检出杂质,归属杂质来源。结果优化后的检测方法,可对长春西汀杂质A、B、C、D、F及长春胺、苯甲醛和糠醛等8个已知杂质进行有效分离和测定。7家企业生产的长春西汀注射液均检出3~6种已知杂质和1~3种未知杂质,杂质A是最大已知杂质,结果中位数为0.22%~0.31%,最大未知杂质为长春西汀结构类似物,结果中位数为0.034%~0.082%,杂质总量结果中位数为0.53%~0.73%。不同厂家的杂质谱不尽相同。结论本法适用于长春西汀注射液中有关物质的测定和质量控制,工艺处方分析结果表明,糠醛和苯甲醛为辅料维生素C和苯甲醇氧化降解引入的杂质,杂质A、B、C、D、F和长春胺为工艺杂质,其中杂质A、F也是降解杂质。

在线二维高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法分析两性霉素B的杂质谱

建立了基于在线二维高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(2D HPLC-Q TOF/MS)的两性霉素B杂质谱分析方法。第一维液相色谱(^(1)D-LC)以XBridge Shield C18为色谱柱、甲醇-乙腈-4.2 g/L柠檬酸水溶液为流动相。第二维液相色谱(^(2)D-LC)以Xtimate C8为捕集柱,以含0.1%甲酸的10 mmol/L甲酸铵水溶液-乙腈(95∶5, v/v)为流动相进行捕集和脱盐;以Xtimate C8为色谱柱,以含0.1%甲酸的10 mmol/L甲酸铵水溶液-乙腈为流动相进行洗脱。该方法结合了在线稀释和多针捕集装置,实现了10个组分/杂质的高效分离,并通过四极杆飞行时间质谱实现了对不稳定组分/杂质的结构推断,解决了2D HPLC溶剂兼容性的难题,增加了分析通量,提高了2D HPLC的自动化能力,避免了两性霉素B与部分杂质在色谱分离过程中相互转化的问题,提高了检测灵敏度。利用该方法可以灵敏地对两性霉素B的杂质谱进行分析,所得到的研究结果对两性霉素B的生产工艺改进具有指导意义。

柱切换LC-MSn法分析阿莫西林钠克拉维酸钾原料的杂质谱

目的对阿莫西林钠克拉维酸钾复方原料中的杂质结构进行分析。方法采用BDS Hypersil C18色谱柱,以0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(pH6.0)-乙腈为流动相进行梯度洗脱分离杂质;对阿莫西林钠克拉维酸钾(5:1)原料进行强力实验,归属杂质来源;采用柱切换-LC/MSn技术采集杂质的质谱数据,根据青霉素类抗生素的质谱裂解规律和降解反应机理,推定相关杂质的化学结构。结果在原料中共检出并推断出11种杂质的化学结构,均为阿莫西林相关杂质,未检出与克拉维酸钾相关的杂质。结论采用柱切换-LC-MSn技术可快速推定阿莫西林钠克拉维酸钾复方原料中相关杂质的化学结构,为《中国药典》中该类药品标准的提高提供了基础数据。

在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱法检测头孢噻吩钠的杂质谱

建立了在线二维液相色谱-四极杆飞行时间质谱检测头孢噻吩钠杂质谱的方法,有效地解决了流动相中含不挥发性磷酸盐的色谱系统不适合用于液相色谱-质谱快速鉴定杂质的难题。一维高效液相色谱(HPLC)以Symmetry C18为色谱柱,以磷酸盐缓冲液(pH 2.5)和乙腈梯度洗脱;二维以ACQUITY UPLC BEH C18为色谱柱,以0.1%(v/v)甲酸水溶液和0.1%(v/v)甲酸乙腈溶液梯度洗脱。以HLB C18为捕集柱,用0.1%(v/v)甲酸水溶液进行捕集和脱盐,采用正离子模式采集数据。对头孢噻吩钠中6个杂质进行了结构鉴定,对其来源进行了分析,并进一步确证了《中国药典》2010年版对头孢噻吩钠杂质A认定有误。采用本方法可以快速、简便、灵敏地对头孢噻吩钠杂质谱进行检测。

硫酸庆大霉素原料及其制剂杂质谱分析

目的探讨硫酸庆大霉素原料和注射液的的杂质控制策略。方法采用高效液相色谱法,分析硫酸庆大霉素原料和注射液的杂质谱,并比较其变化。结果硫酸庆大霉素原料和注射液性质稳定,破坏性实验和影响因素实验中均未产生新的杂质,原料杂质决定于菌株和发酵工艺,制剂过程中杂质谱无变化。结论通过对硫酸庆大霉素及其注射液杂质谱的研究,可以有目的的控制一些杂质,为质量控制提供参;同时可以分析其样品来源,为日常质量监督提供参考。

甲硝唑有关物质测定及杂质谱研究

目的建立甲硝唑原料药有关物质的高效液相色谱测定方法和杂质谱。方法采用Welch UltimateXBC_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-1.36 g·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(20∶80)为流动相;流速1 m L·min^(-1);检测波长:315 nm,主成分自身对照法测定有关物质。结果甲硝唑与有关物质具有良好的分离度,对近6年生产的20批样品进行了测定,均满足质量控制标准。杂质谱的研究能有效监控甲硝唑合成工艺和杂质变化情况。结论该方法简便、快速、灵敏,能有效控制甲硝唑原料药中有关物质,同时杂质谱研究有助于保证甲硝唑质量稳定性检测。

青霉素杂质谱分析方法的优化与转换

目的建立青霉素杂质谱HPLC分析方法,并将其转换成UPLC/UHPLC方法。方法以青霉素混合降解溶液为样品;首先分析《中国药典》(2010年版,ChP2010)方法甲醇-缓冲盐二元流动相色谱系统的缺陷;再利用实验设计理念,以响应曲面法(response surface methodology,RSM)的中心组合设计(central composition design,CCD)对色谱系统进行优化,满意度函数法确定最优色谱条件,并优化梯度洗脱条件;最后,利用软件对HPLC方法的流速、进样体积和梯度时间进行几何缩放,并通过色谱柱的选择,将其分别转换为UPLC方法和UHPLC方法。结果新HPLC方法:色谱柱为Capcell Pak C18 MGII(4.6mm×250mm,5μm),流速:1.0m L/min,进样体积:20μL;UPLC方法:色谱柱为Cortecs C18(2.1mm×100mm,1.6μm),流速:0.35m L/min,进样体积:2.0μL;UHPLC方法:Cortecs C18(4.6mm×150mm,2.76μm),流速:0.8mL/min,进样体积:10μL。3种方法的检测波长均为225nm,柱温均为34℃;流动相A均为磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾10.6g,加水至1000mL,用磷酸调pH至3.4)-甲醇(72:14,V/V),流动相B均为乙腈;均为梯度洗脱,但梯度洗脱表不同。结论 3个色谱系统的分离效果(出峰顺序和个数)相似。新HPLC方法可以分离出更多的降解杂质,并明显改善了青霉素峰的拖尾,缩短了分析时间。

注射用头孢西丁钠的杂质谱比较

目的通过对国内5个厂家生产的注射用头孢西丁钠的有关物质的全面分析,比较不同厂家产品的杂质谱及杂质降解途径的异同。方法采用《中国药典》2010年版二部收载的分析方法,考察长期稳定性试验条件(温度:25℃;相对湿度:60%)下样品中有关物质的变化情况,并结合强力破坏试验对样品中主要杂质的来源和降解途径进行研究。结果由于生产工艺的不同,5个厂家产品的杂质谱及杂质降解途径均不相同,但质量未显现出明显的差异。结论从杂质谱的角度研究有关物质,对于完善药品质量标准,保证临床用药的安全性,具有参考意义。

LC/MSn法快速分析拉氧头孢钠原料的杂质谱

目的采用LC/MSn技术推断拉氧头孢钠原料中杂质的结构。方法采用Shiseido TYPE UG80C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以0.01mol/L醋酸铵溶液-甲醇(99:1,V/V)作为流动相A,以0.01mol/L醋酸铵溶液-甲醇(70:30,V/V)为流动相B,进行梯度洗脱分离杂质。通过强力试验归属杂质的来源,在正离子模式下获取各杂质的质谱数据,结合头孢菌素的普遍质谱裂解规律和降解反应原理,解析相关杂质的结构。结果推断了12种杂质的化学结构,样品中未检出聚合物杂质。结论LC/MSn法可快速准确推断拉氧头孢钠原料中杂质结构,中国药典的拉氧头孢钠质量标准需要进一步提高。

MEKC和HPLC检测头孢噻吩钠的杂质谱

目的针对现行药典HPLC系统的不足之处,分别采用优化后的反相HPLC系统和新建立的MEKC系统检测头孢噻吩钠的杂质谱。方法合成杂质A并采用ESI-MS、IR、1H-NMR和13C-NMR等对其进行结构确认;通过优化反相HPLC系统流动相的pH值和缓冲液浓度改善分离;建立MEKC系统和正相HPLC系统检测头孢噻吩钠的杂质谱。结果证实现行药典方法存在对头孢噻吩钠杂质A的误认和有关物质之间分离较差等缺陷;采用新建立的MEKC系统,发现头孢噻吩钠的市售品和对照品中均存在一个反相HPLC系统难以分离且含量最高可达1.5%的未知杂质。结论新建立的MEKC系统可对头孢噻吩钠的杂质进行更为有效而全面的检测。

毛细管区带电泳检测磷霉素的杂质谱

目的采用毛细管区带电泳(CZE)-间接紫外检测技术检测磷霉素的杂质谱。方法在CZE系统中采用同时含阳离子探针和阴离子探针的背景电解质,分别为无光吸收特征的阳离子组分和阴离子组分提供背景吸收并同时检测和筛查,以便得到磷霉素较为完整的杂质谱;为证实分离系统的专属性和有效性,分别采用杂质对照品、半制备HPLC和梯度洗脱HPLC-电喷雾离子阱质谱对杂质谱中的主要杂质进行了确认。结果采用该方法可将国外药典的HPLC系统难以分离的杂质与磷霉素分离,可从磷霉素的粗品中可分离出7个已知杂质和至少19个未知杂质,可检测在HPLC系统中难以检测的磷霉素的强保留杂质。结论该方法可应用于磷霉素的杂质谱检测。

国产盐酸多西环素原料中有关物质的结构鉴定及杂质谱考察

目的:鉴定盐酸多西环素原料中检出的有关物质结构,考察国产原料的杂质谱。方法:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(pH值适用范围应大于9);以醋酸盐缓冲液[0.25 mol.L-1醋酸铵-0.1 mol.L-1乙二胺四醋酸二钠-三乙胺(100∶10∶1),用冰醋酸或氨水调节pH值至8.8]-乙腈(85∶15)为流动相;柱温35℃;检测波长为280 nm,流速:1.0 mL.min-1;进样体积:20μL。用土霉素、美他环素、β-多西环素对照品色谱保留时间定位方法鉴定3个已知杂质,用文献方法分别制备了4-表多西环素和4-表-6-表多西环素,再采用色谱保留时间定位方法鉴定其他2个杂质,用制备薄层色谱制备2-乙酰-2-脱碳酰胺多西环素溶液(采用LC-ESI-IT-MS2法鉴定其结构)鉴定另外1个主要杂质。结果:典型样品色谱图中检出8个杂质峰,6个主要杂质按色谱出峰顺序分别为土霉素、4-表-6-表多西环素、4-表-多西环素、美他环素、β-多西环素、2-乙酰-2-脱碳酰胺多西环素;杂质谱考察结果显示,不同来源的国产盐酸多西环素的杂质谱相似,均检出美他环素、β-多西环素、2-乙酰-2-脱碳酰胺多西环素及另外两未知杂质,但大多未检出土霉素。结论:建立的方法适用于盐酸多西环素原料中杂质谱考察和有关物质检查。

乙酰螺旋霉素原料及其制剂杂质谱分析

目的探讨乙酰螺旋霉素原料和制剂的杂质控制策略。方法采用高效液相色谱法,测定国内乙酰螺旋霉素原料及制剂、日本原研制剂的有关物质。结果乙酰螺旋霉素原料和制剂性质稳定,原料杂质决定于合成工艺,制剂过程中杂质谱无变化。国内外制剂杂质谱差异较大。结论对乙酰螺旋霉素原料及制剂的杂质谱研究,推测杂质来源,可为其质量控制提供参考;采用SPSS软件聚类分析其制剂有关物质测定结果,推测制剂的原料来源,为日常质量监督提供参考。

头孢西酮钠定量杂质谱研究

目的利用HPLC色谱杂质谱对头孢西酮钠中杂质进行定量分析和利用液质联用法初步推断主要杂质结构。方法采用18烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以磷酸盐缓冲液(50 mmol·L^(-1)磷酸水溶液,用三乙胺调p H4.0)-乙腈(体积比为85∶15)为流动相,检测波长278 nm,流速1.0 m L·min^(-1),柱温35℃,进样量10μL,检测头孢西酮钠杂质谱;通过HPLC-MS初步鉴定杂质。分别用自身对照法和系统指纹定量法对统一化杂质谱的杂质数目和分布情况以及杂质总含量进行评价。结果根据头孢西酮钠合成路线和HPLC-MS测定结果初步推断5个杂质的可能结构,并测定11个杂质含量。用系统指纹定量法对杂质谱的杂质数目和分布情况及杂质总含量的评价结果基本反应了杂质总量情况。结论系统指纹定量法对杂质数目和含量分布情况及杂质总量评价具有快速便捷的特点,《药物杂质谱数字化定量评价系统》5.0软件能快速计算杂质含量。

胶束电动色谱检测注射用哌拉西林钠三唑巴坦钠的杂质谱

目的针对现行HPLC方法的不足之处,采用胶束电动色谱技术检测注射用哌拉西林钠三唑巴坦钠的杂质谱。方法方法建立过程中分别采用压力辅助-胶束电动色谱和短端进样法对药品中的有关物质进行筛查,以便得到较为完整的杂质谱和分析目标;为证实分离系统的专属性和有效性,分别采用杂质对照品、半制备HPLC和梯度洗脱HPLC-电喷雾离子阱质谱对杂质谱中的主要杂质进行了确认。结果采用该方法,9个已知杂质、其他未知杂质、哌拉西林以及三唑巴坦之间均分离良好。新方法可对注射用哌拉西林钠三唑巴坦钠的杂质进行更为有效而全面的分离分析。结论该方法可应用于注射用哌拉西林钠三唑巴坦钠的杂质谱检测。

采用分析技术研究喹诺酮类药物的杂质谱

药物杂质影响药物质量和疗效,有必要掌握药物杂质的产生并采取一定的措施严格控制药品质量。喹酮类药物是临床上普遍采用的抗菌类药物,药物的副作用与杂质有一定的相关关系,掌握微量杂质的形成并避免药物副作用具有重要意义。采用高效液相色谱与质谱联用技术综合分析喹酮类药物的质谱数据,选择分析喹酮类药物的杂质裂解规律,以期对喹酮类药物的药物评价提供一定的支持。

依达拉奉注射液杂质谱分析

杂质控制是注射剂质量控制的重要指标之一,而杂质谱分析是建立合理可行的杂质检测方法的基础。本文结合依达拉奉制备方法、稳定性特征、依达拉奉注射液处方分析、原研厂产品介绍文件、国外药典等对依达拉奉注射液的杂质谱分析进行讨论,供相关研究者参考。

HPLC-DAD法对注射用头孢地嗪钠杂质谱的一致性分析研究

目的:采用HPLC-DAD法对国产、进口和自制注射用头孢地嗪钠的杂质谱的一致性进行对比分析。方法:采用C18色谱柱,以5 mmol·L-1乙酸铵溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱;流量为0.5 mL·min-1;DAD检测器,柱温为35℃;以面积归一化法计算各杂质含量,比较自制、国产和进口样品的杂质谱,同时对各对应杂质峰的紫外特征光谱图一致性进行比较。结果:杂质峰位置、数量、每个杂质的百分含量、紫外特征光谱图和总杂质量均显示三种样品的杂质谱完全一样。结论:三种样品的杂质谱是一致的。

注射用头孢硫脒杂质谱分析及质量控制

目的对头孢硫脒原料及制剂中杂质进行定性分析,比较原料晶型的异同。方法采用HPLC及柱切换HPLCMS方法对4个厂家头孢硫脒原料以及12个厂家注射用头孢硫脒杂质谱进行分析。采用粉末X-射线衍射方法对原料晶型进行分析。结果共检出6种主要杂质,并对杂质的结构及来源进行了分析,确认了关键指针性杂质。测定了不同厂家原料的晶型。结论对头孢硫脒杂质以及晶型的分析可用于监控原料及制剂降解情况以及工艺控制的合理性。

氯解磷定注射液的杂质谱

目的研究氯解磷定注射液的杂质谱。方法用高效液相色谱对2家企业41批样品进行杂质定量检测,根据液-质联用分析和定向合成确证杂质结构,采用质量平衡法标化杂质对照品并分别测定校正因子。对已获得对照品的杂质进行IC50细胞毒性评价。结果氯解磷定注射液的主要降解杂质为杂质A、C和F(氯解磷定的Z型异构体),其中杂质A的IC50值约为主成分的1/3,需重点检测和控制。结论通过对氯解磷定注射液杂质谱的研究,确定了氯解磷定的8个杂质并分析了杂质的来源与毒性,为质量控制提供参考。