基于模糊综合评价方法对枳椇果柄可食性的选优

于2019年起,在走访调查的基础上,对福建省闽西北3市13县的35株适口性较好的枳椇的成熟果柄,通过检测色泽、甜味、单果重和感官评价质感、涩味、风味等共6个指标,建立模糊综合评价体系,对35株枳椇果柄的可食性进行综合评价。研究结果表明,所建立的模糊综合评价方法评价枳椇果柄的选优技术确实可行;通过综合评价优选出:SW2、JO9、JN17、JL25、JL26、WY30为优株,SW1、SW3、SC7、JL27为较优良株,可作为优树母树加以保护,并通过无性繁殖方法加以扩繁,为进一步研究提供基础。

枳椇子多糖的酸提取工艺优化及其理化性质与抗氧化活性研究

为优化枳椇子多糖的提取工艺,并对其理化性质和抗氧化活性进行研究。该研究采用酸溶剂提取枳椇子粗多糖,经单因素考察和正交试验优化提取工艺参数,通过Sevag法除蛋白、DEAE-52阴离子交换柱对多糖进行分离纯化,得到枳椇子精制多糖。采用高效液相色谱、紫外光谱、傅里叶变换红外光谱、刚果红实验、碘-碘化钾和扫描电镜等方法对枳椇子多糖进行理化性质分析;对枳椇子多糖的体外抗氧化活性进行评价。结果表明,枳椇子多糖的最佳提取工艺为温度90℃,料液比为1∶100(g∶mL),时间2.5 h,盐酸浓度0.2 mol/L,在此条件下多糖得率为(4.07±0.07)%。经分离纯化后获得分子质量为3.03×10^(5)Da的均一性枳椇子精制多糖(Hovenia dulcis polysaccharide,HDP),HDP由甘露糖、氨基葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖组成,摩尔百分比为10.46%、1.44%、8.19%、9.79%、4.54%、4.61%,、38.02%、9.95%、13.01%。结构鉴定HDP为吡喃环型酸性多糖,具有无规则螺旋的空间构象且含有较多分支,并表现出片层状的微观形态。HDP清除ABTS阳离子自由基、DPPH自由基和羟自由基的IC_(50)值分别是0.867、1.178、2.112 mg/mL。该研究通过优化酸提枳椇子多糖工艺,获得一种精制的酸性多糖HDP,并揭示HDP具有潜在的抗氧化活性,该研究结果将为枳椇子多糖的功能食品开发提供理论依据。

枳椇子不同溶剂提取物对黄嘌呤氧化酶的作用及动力学研究

目的:探讨不同溶剂提取枳椇子对黄嘌呤氧化酶(XOD)的影响及其动力学模型,为研究高尿酸血症提供实验依据。方法:用水、50%乙醇、70%乙醇、95%乙醇提取枳椇子,测定各提取液中黄酮类成分的含量,采用紫外分光光度法分析不同溶剂提取液对XOD的作用及动力学模型。结果:枳椇子不同溶剂提取液对XOD均有抑制作用,其中50%乙醇提取液和70%乙醇提取液的抑制作用较强,其提取液中黄酮类成分含量也较高,抑制效果呈剂量依赖性;95%乙醇提取物黄酮总量较低,但也显示出较好的抑制作用。动力学分析显示,不同溶剂提取液对XOD的亲和力值α均大于1,70%乙醇提取液对XOD的亲和力值为134.40,更易与XOD结合,各提取液均表现为混合型抑制。结论:枳椇子提取液具有抑制XOD的作用,效果以50%乙醇提取液和70%乙醇提取液为著,95%乙醇提取物对XOD的抑制效果与提取液中的其他成分相关。枳椇子提取液的抑制作用类型属于混合型抑制,即竞争性-非竞争性抑制,且竞争性抑制占主导地位。

人参枳椇子口服液的解酒保肝作用研究

目的:研究人参枳椇子口服液(GROL)的解酒保肝作用。方法:将50只小鼠随机分空白组、模型组、GROL高剂量组、GROL低剂量组和阳性药联苯双酯对照组,每组10只。灌胃给药4周后用50%乙醇一次灌胃建立小鼠急性醉酒模型,考察GROL对小鼠基本生理活动、小鼠血清及肝组织中相关指标,观察肝组织病理切片,评价其解酒保肝作用。采用乙醇诱导AML12肝细胞损伤模型,检测GROL干预后对乙醇刺激的AML12细胞上清液中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、活性氧(ROS)水平的影响。结果:GROL组小鼠醉酒时间显著延长,睡眠、醒酒时间显著缩短;血清中乙醇浓度、GPT、GOT水平显著降低;肝细胞损伤情况有所改善;GROL组肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)水平明显提高,丙二醛(MDA)含量明显降低。对体外培养的AML12肝细胞,GROL可以逆转乙醇引起的肝细胞ALT和AST活性的升高以及过度生成的ROS量。结论:GROL具有良好的防醉、解酒和保肝作用,其发挥作用的途径可能与促进体内乙醇代谢、增强内源性抗氧化酶的活性有关。

枳椇子黄酮的含量测定及其抗氧化作用的分子机制

为了测定枳椇子黄酮的含量并探究其抗氧化作用的潜在机制。本试验以枳椇子为原料,采用醇提法提取其黄酮成分,通过紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量,并进一步采用CavityPlus和分子对接分析枳椇子黄酮与超氧化物歧化酶(SOD)相互作用的位点、氨基酸残基和化学键。结果显示:枳椇子总黄酮含量为8.23 mg/g;枳椇子黄酮主要成分可能结合于SOD同源二聚体交界面且靠近锌离子的一凹陷区域,其5个主要成分,即双氢杨梅素、双氢槲皮素、槲皮素、双氢山萘酚和山萘酚与SOD的结合能范围为-8.5~-8.3 kcal/mol,且上述5个主要成分均与SOD的A链的Gly147和B链的Gly147有直接作用,并通过氢键、疏水作用力和静电作用力等非共价键相连。结果表明,枳椇子富含黄酮,可通过其黄酮成分与SOD直接结合以增加SOD活性,本试验为枳椇子抗氧化作用机制的研究及其产品的开发提供了科学依据。

枳椇子现代研究进展

枳椇子是我国传统的药食同源中药材,具有清热利尿、止渴除烦、解酒毒等功效。有多种化学成分从枳椇子里被分离得到,分别为生物碱、黄酮、葡萄糖、皂苷、有机酸类等成分。黄酮是枳椇子的主要活性成分,未来在枳椇子总黄酮的提取研究中发展空间巨大。现代药理研究显示,枳椇子具有保肝、抗癌突变、抗肿瘤、解酒毒、抗疲劳、增强综合体能、保护神经、利尿、甜味抑制、保健等多种活性。本文将从枳椇子的化学成分、提取黄酮的工艺及其药理作用等方面的研究进行了综述,为以后人们对枳椇子在临床上的合理用药和产品开发利用提供参考。

小陇山林区北枳椇繁育技术研究

本研究以小陇山林区北枳椇种子为试验材料,开展了北枳椇种子贮藏处理和育苗试验;观察了北枳椇苗木生长状况,研究了不同种子处理方法对北枳椇出苗率的影响,以期总结出北枳椇种子育苗技术要点,为本地区北枳椇良种选育及产业化经营提供借鉴和参考。

玉蚕枳椇膏对醉酒及酒精肝大鼠的影响

目的 探讨玉蚕枳椇膏对醉酒及酒精肝大鼠的影响。方法 将36只SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、联苯双酯阳性对照组、低剂量玉蚕枳椇膏组(2g/kg)、中剂量玉蚕枳椇膏组(4g/kg)和高剂量玉蚕枳椇膏组(8g/kg),连续给予药物35d。给予药物后间隔4h,每7天,除了空白对照组外,都给予灌胃1mL/kg牛栏山二锅头。观察大鼠体重变化、平衡木行走、醉酒和醒酒时间等,考察对大鼠醉酒的影响。利用肝重指数、肝脏形态、苏木素-伊红染色,评价对大鼠肝脏的影响。结果 与模型对照组相比,中高剂量组大鼠平衡木行走更稳定些;醉酒时间显著延长;醒酒时间显著缩短;肝细胞结构紊乱、胞质脂肪空泡化以及细胞边界模糊等均有一定的改善。结论 中高剂量玉蚕枳椇膏对醉酒及酒精肝大鼠具有一定干预作用。

枳椇子总黄酮的抗氧化及降糖活性研究

枳椇子是一种传统药食同源资源,黄酮类化合物是其主要活性成分之一,具有多种生理功能,有关其降糖活性的研究却非常有限。以枳椇子总黄酮(SHTFs)为材料,通过自由基清除、还原能力和消化关键酶活性抑制等体外试验方法研究SHTFs的抗氧化活性和降糖活性。结果表明:在试验浓度范围内,SHTFs具有较高DPPH·自由基清除能力、羟基自由基清除能力和还原能力,其最大清除率和吸光度值分别为68.92%、99.15%和0.525;SHTFs对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为64.32%和96.10%。说明SHTFs具有较强的抗氧化和抑制消化关键酶的活性,表明枳椇子是一种具有应用潜力的降糖植物资源。

枳椇果梗与枳椇子体内外降血糖活性及其物质基础研究

枳椇是食药同源的传统食品或药品,具有降糖降压、醒酒护肝等功效。然而,枳椇果梗和种子的混用给其应用和检验带来诸多不便。为确定枳椇降血糖的确切活性部位,对果梗与种子的水和95%乙醇提取物在体外抑制α-葡萄糖苷酶的活性,以及在体内对链脲佐菌素(STZ)诱导的Ⅱ型糖尿病模型小鼠降血糖活性及其物质基础进行研究。结果表明:枳椇子醇提物(SEE)是种子抑制α-葡萄糖苷酶的主要活性物质,属于竞争型抑制剂,IC_(50)为0.97 mg/mL;枳椇果梗水提物(PWE)是果梗的主要活性物质,属于混合型抑制剂,IC_(50)为2.28 mg/mL。SEE和枳椇子水提取物(SWE)抑制α-葡萄糖苷酶活性均大于PWE和枳椇果梗醇提物(PEE)。动物实验表明:4种提取物都能不同程度地降低小鼠血糖,提高其糖耐量和体质量,而SEE降血糖效果最显著(P<0.01)。整体来看,降血糖活性顺序是SEE>SWE>PWE>PEE,枳椇子是枳椇降血糖的主要活性部位,其降血糖功效强于果梗。利用硅胶、C_(18)中压液相色谱、Sephadex LH-20柱色谱对枳椇子醇提物进行分离纯化,得到5个化合物。采用ESI-MS、~1HNMR、^(13)CNMR、HSQC和HMBC等方法确定化合物1~5分别是:槲皮素、二氢槲皮素、杨梅素、二氢杨梅素和槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。本研究结果为解决枳椇果梗和种子的混用问题提供了理论依据,为进一步开发利用枳椇资源提供了新途径。

枳椇属三萜类成分治疗非小细胞肺癌作用机制的网络药理学分析

目的基于网络药理学方法及分子对接技术探讨枳椇属三萜类成分治疗非小细胞肺癌的关键成分及作用机制。方法利用TCMSP数据库结合文献检索获得枳椇属三萜类化合物,根据Lipinski规则筛选出活性成分。使用Swiss Target Prediction数据库预测出枳椇属三萜类活性成分的作用靶点;使用GeneCards、OMIM、TTD和PharmGkb等疾病数据库收集非小细胞肺癌疾病相关靶点;取枳椇属三萜类活性成分的作用靶点与非小细胞肺癌疾病相关靶点二者的交集(共同靶点),作为枳椇属三萜类成分治疗非小细胞肺癌的潜在作用靶点。通过STRING数据库与Cytoscape(V3.8.2)软件构建潜在作用靶点的蛋白互作(PPI)网络,并筛选出核心靶点。使用R 4.0.3软件中的“clusterProfiler”程序包对核心靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。利用Ualcan数据库获得核心靶点在肺腺癌或肺鳞癌中的表达情况并进行相关分析;通过Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析核心靶点对非小细胞肺癌患者5年生存率的影响。联合使用AutoDock Vina及R软件对4个与非小细胞肺癌关联性较高的核心靶点分别与潜在活性成分进行分子对接验证。结果共筛选出枳椇属三萜类活性成分4个(Ceanothetric acid、Hovenic acid、Jujubogenin、Saponin H)及其作用靶点285个;筛选得到5916个非小细胞肺癌的疾病相关靶点;通过韦恩分析得到共同靶点186个,即枳椇属三萜类成分治疗非小细胞肺癌的潜在作用靶点。通过PPI分析、筛选出12个核心靶点:STAT3、SRC、PIK3CA、GRB2、MAPK3、MAPK1、AKT1、JAK1、JAK2、EGFR、MAPK14、IL2。潜在作用靶点涉及1161个生物过程条目、39个细胞组分条目、72个分子功能条目,KEGG信号通路主要包括EGFR酪氨酸激酶抑制剂抗性、癌症中PD-L1表达及PD-1检查点途径、JAK-STAT信号通路等。与正常肺组织相比,SRC的表达水平在肺腺癌和肺鳞癌中均明显升高(P<0.05),STAT3及GRB2的表达水平则明显降低(P<0.05);而PIK3CA在肺腺癌中的表达水平相较于正常肺组织明显降低(P<0.05),在肺鳞癌中的表达水平则明显升高(P<0.05)。SRC低表达、PIK3CA及GRB2高表达的肺癌患者5年生存率更高。4个活性成分与核心靶点STAT3、SRC、PIK3CA、GRB2的结合能力良好,其中Jujubogenin、Saponin H与PIK3CA存在极强结合能力。结论枳椇属三萜类成分通过多成分、多靶点、多通路治疗非小细胞肺癌,其机制可能与抗EGFR-TIKs耐药性及调节免疫功能的相关信号通路有关。

枳椇醋发酵阶段产物的抗氧化活性变化

采用液态深层发酵法酿造枳椇醋,以总酚含量、总黄酮含量、清除DPPH自由基能力、还原能力、总抗氧化能力为指标,研究枳椇醋不同发酵阶段产物抗氧化活性的变化。结果表明:总酚含量和清除DPPH自由基能力在枳椇醋酿造过程中增加;总黄酮含量在酒精发酵阶段减少,在醋酸发酵阶段增加;还原能力发酵前后相当;总抗氧化能力在酒精发酵中增强,在醋酸发酵中略减弱。

枳椇果梗多糖的提取工艺优化及其抗氧化性

为获得枳椇果梗多糖,并进一步评价其自由基清除及抑制生物大分子(蛋白质、脂质、DNA)氧化的能力。以枳椇果梗为试验材料,在单因素实验的基础上,结合正交试验及方差分析优化枳椇果梗多糖热水提取工艺条件;对所提多糖清除DPPH、ABTS+自由基能力进行测定;并利用Cu^(2+)/H_(2)O_(2)、FeSO_(4)、APPH分别诱导牛血清蛋白、亚油酸、鲱鱼精子DNA氧化,构建体外蛋白质、脂质、DNA氧化模型,对所提多糖体外抑制生物大分子氧化能力进行评价。结果表明:醇沉体积分数对枳椇果梗多糖的得率有显著性(P<0.05)的影响,最佳的热水提取工艺条件为:料液比1:25 g/mL,提取温度85℃,提取时间1 h,醇沉体积分数80%,此时多糖得率为3.06%±0.181%;且随着浓度的增大,所提多糖对自由基的清除和生物大分子的氧化抑制效果也逐渐提高,对DPPH自由基、ABTS+自由基清除IC_(50)分别为1.687、1.824 mg/mL,对牛血清蛋白羰基化、亚油酸过氧化和鲱鱼精子DNA氧化抑制IC_(50)分别为:13.84、10.88、74.70 mg/mL。研究结果可为枳椇果梗多糖的提取及在功能性食品中的应用提供参考。

葛根枳椇子洛神花本草酵素的解酒护肝作用研究

以葛根、枳椇子、洛神花为原料,通过益生菌发酵制备本草酵素。筛选菌种比例,分析酵素营养成分,并建立小鼠醉酒模型,考察小鼠醉酒后的醒酒时间、血液乙醇浓度、肝组织抗氧化酶活性含量的变化,探究酵素解酒护肝作用。结果表明,植物乳植杆菌(Lactobacillus plantarum)、罗伊氏粘液乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、鼠李糖乳酪杆菌(Lactobacillus rhamnosus)以5∶4∶1比例进行发酵,本草酵素中总酸、粗多糖、游离氨基酸、γ-氨基丁酸、多酚、总黄酮含量分别为21.29 g/kg、12.95 mg/g、3.61 mg/g、86.66μg/g、4.32 mg/g、0.06 mg/g。酵素实验组小鼠醉酒时间和醒酒时间明显缩短;酒后3 h内小鼠血液乙醇浓度显著降低(P<0.05);对比模型组和未发酵提取液组,中、高剂量组小鼠肝组织匀浆中乙醇脱氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽水平均显著升高,丙二醛含量显著降低(P<0.05),表明葛根枳椇子洛神花本草酵素具有解酒护肝功能。

枳椇子、葛花对小鼠酒精性肝损伤及胃溃疡的保护作用研究

目的 探究葛花和枳椇子提取物对小鼠急性酒精性肝损伤及胃溃疡的保护作用。方法 将60只小鼠适应性饲养,1周后随机分为5组(n=12),分别为模型组、空白组、葛花组、枳椇组、枳葛组。除空白组外,其余各组小鼠每日给予相应干预药物4h后用50%乙醇10g/kg灌胃,连续14d,末次乙醇灌胃6h后,将小鼠麻醉,取血清分别进行谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性检测,另取肝、胃组织进行病理组织学观察。结果 各给药组血清中ALT和AST均显著低于模型组(P<0.01),略高于空白组。枳椇子葛花组小鼠较模型组小鼠肝脏组织细胞形态结构较规则,细胞核形状规则且排列整齐,炎症细胞浸润明显减少。枳椇子葛花组小鼠胃部形态较模型组完整,细胞形态良好,胃黏膜断层或破裂情况明显减少。结论 枳葛提取液对小鼠酒精性肝损伤及胃溃疡有保护作用。

枳椇高粱共酿蒸馏酒酿造工艺优化及其特征风味物质和体外抗氧化活性

以枳椇和高粱为原料,中温大曲为发酵剂,通过单因素实验和正交试验对枳椇高粱共酿蒸馏酒进行工艺优化,利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS)结合气味活性阈值(OAV)对其风味组分进行检测分析,并探究其体外抗氧化能力。结果表明:枳椇高粱共酿蒸馏酒最佳发酵工艺为枳椇添加量20%、大曲添加量15%、发酵时间35 d,此时感官评分为93.91分,出酒率为40.21%,果香浓郁,酒味协调;优化后的枳椇高粱共酿蒸馏酒共检测出48种挥发性成分,其中20种挥发性物质OAV值>1,丁酸乙酯、辛酸乙酯、正己酸乙酯、愈创木酚等被认为是枳椇高粱共酿蒸馏酒特征风味物质。相较于纯高粱蒸馏酒,苯乙醇、2,3-丁二醇、9-癸烯酸乙酯、10-溴代癸酸乙酯等为枳椇高粱共酿蒸馏酒中特有的挥发性成分。体外抗氧化活性实验结果表明,枳椇高粱共酿蒸馏酒总酚含量、DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、总还原力均显著高于纯高粱蒸馏酒。本研究为枳椇酒工业化生产提供了科学参考,为新型保健蒸馏酒的开发提供了新思路。

不同产地枳椇子的检查、鉴别及含量分析

目的:建立枳椇子HPLC指纹图谱,比较不同产地枳椇子样品,并对其中特征性成分进行定性分析,鉴定不同产地枳椇子的真伪。方法:通过建立HPLC指纹图谱,对药材水分、总灰分、浸出物及成分进行测定,并进行相似度评价、聚类分析和主成分分析。结果:10批枳椇子样品均为正品,水分含量为8.57%~12.83%;总灰分含量为1.924%~3.915%;水溶性浸出物含量为4.26%~17.07%。通过建立其指纹图谱,确定了14个共有峰,指认了其中4个成分,分别为二氢杨梅素、二氢槲皮素、杨梅素、芦丁。结论:该方法操作简便,重复性好,可为评价枳椇子的质量提供依据。

枳椇子抑制黄嘌呤氧化酶关键质量属性研究

目的:研究枳椇子降尿酸作用的有效成分,为确定枳椇子降尿酸提取物关键质量属性提供依据。方法:用水、50%乙醇、70%乙醇及95%乙醇提取枳椇子药液后,分别采用单级萃取和多级萃取制备不同萃取部位,测定各部位黄酮类成分含量,考察各部位对黄嘌呤氧化酶的抑制作用。结果:除了95%乙醇提取液抑制黄嘌呤氧化酶的作用较弱外,其他三种溶剂提取液抑制作用均较好。单级萃取水饱和正丁醇部位、乙酸乙酯部位和石油醚剩余水部位对黄嘌呤氧化酶抑制率高,相应部位黄酮类成分含量也较高;多级萃取乙酸乙酯部位抑制率高,黄酮类成分的含量也较高。另外,无论单级萃取还是多级萃取,残留的水液仍然具有一定的黄嘌呤氧化酶抑制作用,而多级萃取残留的水液中无黄酮类成分。结论:枳椇子降尿酸的成分为极性较大的一类成分,黄酮类成分可以成为枳椇子降尿酸提取物的关键质量属性之一,还有极性大、水溶性好的抑制黄嘌呤氧化酶作用的成分需要继续研究。

不同遮光度对枳椇实生苗生长的影响

为探讨遮阳网不同遮光度对枳椇实生育苗生长的影响,该试验分别设置4种处理(即全光照、30%遮光度、50%遮光度、70%遮光度),并对枳椇实生育苗的发芽率、存活率、苗高、地径进行调查与分析。经方差分析和显著性检验,结果表明,不同遮光度对枳椇实生苗生长的影响均达到极显著水平,苗高生长以70%遮光度的D处理为最高,即148.6 cm;枳椇实生苗的发芽率、存活率、地径的生长均以50%遮光度的C处理为最高,分别为54.0%、85.8%和13.4 mm。同时,建议在枳椇实生苗生产实践中,尽量采用50%遮光度的遮阳网进行覆盖,以提高枳椇实生苗生长、苗木质量等级等。

枳椇茶酒工艺优化及其抗氧化活性分析

为提升发酵型茶酒品质,该文以枳椇和红茶为原料,以酒精度和感官评分为考察指标,通过单因素试验和正交试验优化制备工艺,并分析其抗氧化活性。结果表明,枳椇茶酒最佳酿造工艺为茶汤与枳椇果汁体积比1∶1、发酵温度30℃、酿酒酵母接种量1.5%。按该工艺酿造可获得亮黄透明、兼具枳椇果香与茶香的枳椇茶酒,酒精度为10.5%vol,多酚含量为1.32 mg/mL,枳椇茶酒样品使用量大于1.2 mL时DPPH自由基清除率大于90%,枳椇茶酒样品使用量大于1.4 mL时ABTS阳离子自由基清除率大于90%,感官评分达到94.9。