威猛（Vm－26）对Hela细胞染色体形成的影响

抗癌药物Ｖｍ－２６是一种拓朴异构酶（ＴｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅⅡ，ＴｏｐｏⅡ）及组蛋白Ｈｌ激酶的抑制剂。本文就其对Ｈｅｌａ细胞染色体形成的影响进行了观察。不同浓度的Ｖｍ－２６加入Ｈｅｌａ细胞培养液后４８小时，进行染色体制备，光镜观察。当Ｖｍ－２６的培养浓度在０．５－１．０μｇ／ｍｌ时，染色体的形成被阻断于分裂前期。当药物培养浓度于０．２５μｇ／ｍｌ时，可见有相当数量的细胞处于分裂前期，其胞核内具有不规则的染色质凝缩。另外，尚可见极少的分裂中期染色体集簇形成，但大都伴有染色体的结构异常。结果提示：Ｖｍ－２６可以通过抑制Ｈｅｌａ细胞染色体的形成，而影响细胞正常的分裂、繁殖。

早熟凝缩染色体(PCC)与荧光原位杂交(FISH)技术的结合

为便于对间期细胞染色体结构异常的识别,作者开展了对早熟凝缩染色体技术(PCC)与荧光原位杂交技术(FISH)二者相互结合起来的研究。作为模型,人外周血细胞在与诱导细胞——分裂期中国仓鼠孵巢细胞(CHO)融合后,形成了早熟凝缩的染色体。当使用人类全基因组DNA为探针做原位杂交时,仅见由人外周血细胞形成的PCC上被染上阳性荧光信号,CHO细胞染色体阴性。在使用人Y染色体特异性DNA探针作原位杂交时,结果不仅在男性外周上细胞核上,而且在一条由胞核演变的早熟凝缩染色体上,获得了特异性阳性荧光杂交信号。这一方法拓展了间期细胞遗传学的研究深度。

喉癌组织异黏蛋白和非染色体结构维持蛋白凝缩蛋白复合体Ⅰ亚单位H表达与临床病理特征及预后的关系

目的观察喉癌患者癌组织异黏蛋白(metadherin, MTDH)和非染色体结构维持蛋白凝缩蛋白复合体Ⅰ亚单位H(non-SMC condensinⅠcomplex subunit H, NCAPH)的表达变化,探讨其与临床病理特征及预后的关系。方法 81例喉癌患者均行手术切除治疗,取手术切除的癌组织和癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测癌组织和癌旁组织MTDH、NCAPH mRNA相对表达量;采用Pearson相关性分析喉癌患者癌组织MTDH与NCAPH表达的相关性;比较不同年龄、性别、临床分型、临床分期、分化程度、有无淋巴结转移的喉癌患者癌组织MTDH、NCAPH mRNA相对表达量;随访36个月,失访4例,77例喉癌患者根据癌组织MTDH、NCAPH mRNA相对表达量中位数分为MTDH高表达组(MTDH mRNA相对表达量≥162.73)56例和MTDH低表达组(MTDH mRNA相对表达量<162.73)21例、NCAPH高表达组(NCAPH mRNA相对表达量≥1.12)50例和NCAPH低表达组(NCAPH mRNA相对表达量<1.12)27例;采用Kaplan-Meier生存曲线分析MTDH与NCAPH高、低表达组患者3年总生存率。结果喉癌患者癌组织MTDH mRNA(162.73±23.59)、NCAPH mRNA(1.12±0.30)相对表达量均高于癌旁组织(91.10±14.27、0.39±0.13)(t=23.383,P<0.001;t=20.095,P<0.001);喉癌患者癌组织MTDH mRNA与NCAPH mRNA相对表达量呈正相关(r=0.733,P<0.001);临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、中低分化的喉癌患者癌组织MTDH mRNA(1.37±0.41、1.41±0.44、1.50±0.47)、NCAPH mRNA(179.55±29.43、182.37±27.22、208.91±28.76)相对表达量分别高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期(0.76±0.25、138.26±20.02)、无淋巴结转移(0.81±0.27、141.58±23.69)、高分化者(0.73±0.22、142.55±18.73)(P<0.05),不同年龄、性别、临床分型的喉癌患者癌组织MTDH、NCAPH mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。MTDH、NCAPH高表达组3年总生存率(80.35%、80.00%)均低于低表达组(95.24%、92.59%)(χ^(2)=4.108,P=0.029;χ^(2)=3.876,P=0.035)。结论喉癌患者癌组织MTDH、NCAPH表达升高,二者表达呈正相关;MTDH、NCAPH高表达者提示临床分期晚、有淋巴结转移、中低分化、预后差。

老年结肠癌患者NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达变化和意义

目的探讨染色体凝缩蛋白复合物I(NCAP)D2、Krüppel样因子(KLF)5蛋白及跨膜受体蛋白Notch1 mRNA对老年结肠癌患者预后的预测价值。方法选取老年结肠癌患者85例,术中采集肿瘤组织和正常组织(距离肿瘤组织5 cm以上),Western印迹检测组织标本中NCAPD2、KLF5蛋白表达,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测组织标本中Notch1 mRNA表达。收集老年结肠癌患者的人口学特征和临床病理资料;以患者出院时日期为随访起点,进行3年随访,记录患者生存情况,分为预后良好组(生存),不良组(死亡)。结果老年结肠癌患者结肠癌组织中NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平明显高于正常组织(P<0.01)。NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平在不同病理分期、分化程度、淋巴结转移情况、远端转移情况的结肠癌患者差异均有统计学意义(P<0.01);其中,浸润程度T3~T4、有淋巴结转移、有远端转移的结肠癌患者NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平明显高于浸润程度T1~T2、无淋巴结转移、无远端转移的结肠癌患者(P<0.01);随着分化程度的降低,结肠癌患者NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平逐渐升高(P<0.01)。不良组NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平明显高于预后良好组(P<0.01)。构建受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平对老年结肠癌患者预后均具有较高的预测价值(P<0.01);各指标联合检测对老年结肠癌患者预后的预测价值最高。结论老年结肠癌患者肿瘤组织中NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA高表达,且与浸润程度、分化程度及转移情况密切相关,联合检测可用于患者预后评估。

结肠癌患者组织中NCAPD2、Lnc RNA NR2F1-AS1、Nup107表达及其与预后的关系

目的探究结肠癌患者组织中染色体凝缩蛋白复合物I的亚基D2(NCAPD2)、Lnc RNA核受体亚家族2F组成员1-反义RNA1(Lnc RNA NR2F1-AS1)、核孔蛋白107(Nup107)的表达及其与患者预后的关系。方法选择2017年6月至2019年6月在广州中医药大学第一附属医院及暨南大学附属广州市红十字会医院进行根治性切除术的60例结肠癌患者作为研究对象,术中采集患者的结肠癌组织标本和距离结肠癌组织>2 cm的癌旁正常组织标本。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法测定结肠癌组织和癌旁组织的Lnc RNA NR2F1-AS1表达水平,采用免疫组化SP法测定结肠癌组织和癌旁组织的NCAPD2和Nup107表达情况。比较结肠癌组织和癌旁组织的Lnc RNA NR2F1-AS1、NCAPD2、Nup107表达情况,同时比较Lnc RNA NR2F1-AS1、NCAPD2、Nup107不同表达患者的临床资料。采用COX回归模型分析Lnc RNA NR2F1-AS1、NCAPD2、Nup107表达对结肠癌患者预后的影响,采用Kaplan-Meier法绘制结肠癌患者的生存曲线,分析Lnc RNA NR2F1-AS1、NCAPD2、Nup107表达情况与结肠癌患者预后的相关性。结果结肠癌组织的Lnc RNA NR2F1-AS1相对表达量为1.09±0.28,明显低于癌旁组织的0.69±0.09,结肠癌组织的Lnc RNA NR2F1-AS1高表达率、NCAPD2阳性率和Nup107高表达率分别为55.00%、61.67%和70.00%,明显高于癌旁组织的26.67%、30.00%和31.67%,差异均有统计学意义(P<0.05);Lnc RNA NR2F1-AS1高表达和低表达患者、NCAPD2阳性患者和阴性患者、Nup107高表达患者和低表达患者在肿瘤分化程度、浸润程度、淋巴结转移和远端转移方面比较,差异均有统计学意义(P<0.05);COX回归分析结果显示,Lnc RNA NR2F1-AS1、NCAPD2和Nup107表达均是结肠癌患者预后的影响因素(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,Lnc RNA NR2F1-AS1高表达、NCAPD2阳性和Nup107高表达患者的中位生存期分别低于Lnc RNA NR2F1-AS1低表达、NCAPD2阴性和Nup107低表达患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Lnc RNA NR2F1-AS1、NCAPD2、Nup107的表达与结肠癌患者的肿瘤分化程度、浸润程度、淋巴结转移和远端转移等临床病理特征有关,三者可能共同参与了结肠癌的发生、发展,对患者的预后造成一定影响。

结直肠癌中NCAPH、AGGF1及TM4SF1的表达及与预后的相关性

目的:探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中非染色体结构维持蛋白凝缩蛋白复合体I亚单位H(non-SMC condensin I complex subunit H,NCAPH)、G补缀FHA域血管新生因子1(angiogenic factor with G and FHA domains 1,AGGF1)及跨膜4L六家族成员1(transmembrane-4-L-six-family-1,TM4SF1)蛋白质表达之间的关系及临床意义。方法:收集145例CRC术后标本和30例癌旁正常黏膜组织标本,采用免疫组织化学法检测CRC和癌旁正常黏膜组织中NCAPH、AGGF1及TM4SF1蛋白质的表达情况,分析其表达与各种临床病理因素的关系以及三者之间的相关性。结果:在CRC和癌旁组织中,NCAPH、AGGF1及TM4SF1的阳性表达率分别为55.2%、53.1%、60.7%和3.3%、6.6%、0,差异均有统计学意义(均P<0.001)。3种蛋白质的表达均与CRC的组织学分化和TNM分期有关(均P<0.001);NCAPH和TM4SF1的表达均与CRC的淋巴结转移有关(均P<0.05);NCAPH和AGGF1的表达均与CRC组织脉管侵犯有关(均P<0.05);AGGF1和TM4SF1的表达均与CRC的肿瘤浸润深度有关(均P<0.01)。TM4SF1的表达分别与NCAPH和AGGF1的表达呈正相关(r值分别为0.311和0.517,均P<0.001);同时,AGGF1与NCAPH的表达亦呈正相关(r=0.291,P=0.001)。Kaplan-Meier生存分析表明:NCAPH、AGGF1及TM4SF1的表达上调均与患者的生存率有关,NCAPH、AGGF1及TM4SF1阳性的患者生存率明显低于三者阴性患者(均P<0.05)。多因素分析表明:TNM分期、NCAPH、AGGF1及TM4SF1的表达和肿瘤脉管侵犯均是影响CRC根治术后患者预后的独立因素(均P<0.05)。结论:CRC组织中NCAPH、AGGF1及TM4SF1的表达上调与CRC的分化程度、转移和预后等因素相关,这些指标的联合检测可能作为判断CRC进展及患者预后的重要指标。

NCAPH、AXL和YAP在喉癌中的表达及与预后的关系

目的观察非染色体结构维持蛋白凝缩蛋白复合体Ⅰ亚单位H(NCAPH)、受体酪氨酸激酶AXL和Hippo信号通路的转录共激活因子Yes结合蛋白(Y AP)在喉癌中的表达特征,探讨NCAPH、AXL和YAP的表达与喉癌临床病理因素和预后间的相关性。方法采用免疫组化的方法分别检测NCAPH、AXL和YAP在40例喉癌组织和40例声带息肉组织中的表达情况并比较各组间的差异性,分析目标蛋白的表达与各临床病理参数及其预后的关系,并进行生存分析。结果 NCAPH、AXL和YAP在喉癌组织中的表达均明显高于声带息肉组织,差异有统计学意义(均P<0.05);AXL和YAP在喉癌组织中的表达强度呈正相关(r=0.379,P<0.05);NCAPH、AXL和YAP在喉癌组织中的表达与临床分期、淋巴结转移、组织分化程度有关(均P<0.05),在年龄、解剖分区中差异无统计学意义(均P>0.05);NCAPH和YAP在喉癌组织中的表达强度与患者的生存状况有关(均P<0.05)。结论 NCAPH、AXL和YAP在喉癌中的表达对于喉癌预后判断有重要指导意义,联合检测NCAPH、AXL和YAP有望作为一组有实用价值的喉癌预后判断的客观指标。

NCAPH对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的:探讨非染色体结构维持蛋白凝缩蛋白复合体Ⅰ亚单位H(non-SMC condensinⅠcomplex subunit H,NCAPH)在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:从TCGA数据库获取原始数据,分析NCAPH在乳腺癌组织和正常乳腺组织中的表达情况,利用GEO数据库进行验证;HPA数据库分析NCAPH蛋白水平表达情况;Kaplan-Meier数据库分析NCAPH在乳腺癌病人预后中的作用;筛选NACPH基因干扰片段,通过划痕实验、Transwell实验检测敲低NCAPH基因对乳腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响。结果:TCGA数据库和GEO数据库分析均显示,NCAPH在乳腺癌组织中高表达(P<0.01);HPA数据库表明,乳腺癌组织中NCAPH蛋白水平高于乳腺正常组织。Kaplan-Meier数据库显示,NCAPH高表达明显降低乳腺癌病人生存率(P<0.01)。乳腺癌细胞株SKBR-3、MDA-MB-231、MCF-7的NCAPH mRNA表达水平与人正常乳腺上皮细胞株MCF-10A间差异有统计学意义(P<0.05);划痕实验及Transwell实验结果显示,干扰NCAPH明显抑制了乳腺癌细胞的迁移和侵袭(P<0.01)。结论:NCAPH在乳腺癌组织中高表达,与乳腺癌病人预后具有相关性,敲低NCAPH可明显抑制乳腺癌的迁移及侵袭能力。