基于TRAF2/AP-1信号通路探讨柴苓合剂对痰瘀互结MS-IR大鼠炎症因子影响

目的基于TRAF2/AP-1信号通路探讨柴苓合剂对痰瘀互结代谢综合征胰岛素抵抗(MS-IR)大鼠糖代谢、脂代谢、炎症因子的部分作用机制。方法48只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组和造模组。造模组大鼠采用高脂高糖饲料喂养,注射小剂量链脲佐菌素(STZ)(35 mg/kg),同时用物理刺激方法,建立痰瘀互结型MSIR大鼠模型。造模成功后将大鼠随机分为模型组,柴苓合剂低、中、高剂量组,西药组进行干预。给药各组分别进行柴苓合剂、吡格列酮干预治疗3周,空白组、模型组给予等体积的蒸馏水灌服。生化检测大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);ELISA法检测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;Western Blot检测肝组织TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达;HE染色切片,光学显微镜观察用药前后肝细胞损伤、肝细胞坏死、脂质堆积、炎症细胞浸润等情况。结果(1)糖代谢指标水平。与空白组相比,模型组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR水平均升高(P<0.01);与模型组相比,柴苓合剂低、中、高剂量组及西药组FBG、FINS、HOMA-IR水平均降低(P<0.01);与西药组比较,柴苓合剂高剂量组FBG、FINS、HOMA-IR水平差异无统计学意义(P>0.05);与柴苓合剂低剂量组比较,柴苓合剂高、中剂量组及西药组FBG、FINS、HOMA-IR水平均降低(P<0.01);与柴苓合剂中剂量组比较,柴苓合剂高剂量组及西药组FBG、FINS、HOMA-IR水平降低(P<0.01)。(2)脂代谢指标水平。与空白组相比,模型组大鼠甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)水平均升高(P<0.01);与模型组相比,柴苓合剂低、中、高剂量组及西药组TG、CHO水平均降低(P<0.01);与西药组相比,柴苓合剂中、高剂量组TG、CHO水平均降低(P<0.05,P<0.01),柴苓合剂低剂量组TG、CHO水平差异无统计学意义(P>0.05);与柴苓合剂低剂量组相比,柴苓合剂中、高剂量组TG、CHO水平均降低(P<0.01);与柴苓合剂中剂量组相比,柴苓合剂高剂量组TG、CHO水平均降低(P<0.01)。(3)TNF-α、IL-6水平。与空白组相比,模型组大鼠TNF-α、IL-6水平均升高(P<0.01);与模型组相比,柴苓合剂低、中、高剂量组及西药组TNF-α、IL-6水平均降低(P<0.01);与西药组相比,柴苓合剂低、中、高剂量组TNF-α、IL-6水平均降低(P<0.01);与柴苓合剂低剂量组相比,柴苓合剂中、高剂量组TNF-α、IL-6水平均降低(P<0.05,P<0.01);与柴苓合剂中剂量组相比,柴苓合剂高剂量组TNF-α、IL-6水平均降低(P<0.01)。(4)肝组织TRAF2/JNK/AP-1信号通路蛋白表达。与空白组相比,模型组大鼠肝组织TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达均上调(P<0.01);与模型组比较,柴苓合剂低、中、高剂量组及西药组肝组织TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达水平均降低(P<0.05,P<0.01);与西药组比较,柴苓合剂高剂量组肝组织TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达水平均降低(P<0.01),柴苓合剂低、中剂量组肝组织TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与柴苓合剂低剂量组比较,柴苓合剂高剂量组肝组织TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达水平均降低(P<0.01),柴苓合剂中剂量组肝组织AP-1蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),TRAF2、JNK蛋白表达水平均降低(P<0.01);与柴苓合剂中剂量组比较,柴苓合剂高剂量组TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达水平均降低(P<0.05,P<0.01)。结论柴苓合剂高剂量能显著改善痰瘀互结MS-IR大鼠糖代谢、脂代谢和炎症因子,其作用机制可能是柴苓合剂通过调控TRAF2蛋白作用于JNK蛋白,引起它的下游反应,又通过JNK的磷酸化作用于AP-1,释放炎症因子,从而TRAF2作用于JNK,然后磷酸化于AP-1使炎症因子降低有关。

高效液相色谱法测定加味柴苓合剂中黄芩苷的含量

目的制定加味柴苓合剂的含量测定方法。方法用高效液相色谱法测定加味柴苓合剂中黄芩苷的含量,采用ZORBAX Eclipse XDB C18柱(250 mm×4.6 mm,5μl);流动相为甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2);流速1.0ml·min-1;检测波长280 nm;柱温35℃。结果黄芩苷浓度的线性范围为33.04～198.24μg·ml-1,γ=0.9995,回收率为99.35%(RSD=1.17%)。结论本法方便、快速、准确,可用于加味柴苓合剂的质量控制。

柴苓合剂治疗婴幼儿秋季腹泻105例

目的 :评估柴苓合剂治疗婴幼儿秋季腹泻的疗效。方法 :16 5例患者随机分为两组 ,分别用柴苓合剂 (治疗组 )和西药常规治疗 (对照组 )。观察两组治疗前后临床症状、体征及相关指标变化情况。结果 :治疗 3天后 ,治疗组 10 5例中治愈 85例 (80 9% ) ,对照组 6 0例中治愈 2 3例 (38 3% ) ,治疗组总有效率 93 3% ,对照组总有效率为 6 6 7% ,治疗组疗效显著优于对照组(P <0 0 1)。结论 :柴苓合剂治疗婴幼儿秋季腹泻退热迅速、止泻时间快。

加味柴苓合剂的薄层鉴别及含量测定

目的:研究并建立加味柴苓合剂质量标准。方法:采用薄层色谱法对加味柴苓合剂中的虎杖、桂枝进行定性鉴别,用高效液相色谱法测定制剂中黄芩苷的含量,采用Alltech色谱柱,检测波长:274nm,流动相:甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶1),流速:1ml·min-1。结果:薄层斑点明显,且重复性好;黄芩苷在0.3635～3.635μg范围内与峰面积的线形关系良好,回归方程:回归方程:Y=4.3387×107X-3.6969×105,r=0.9997,平均回收率为99.7%,RSD为1.21%,可见制备工艺可行,质量可靠。结论:该法简便、准确,重现性好,可作为加味柴苓合剂质量控制方法。

RP-HPLC法测定加味柴苓合剂中的黄芩苷的含量

目的用RP-HPLC测定不同批号的加味柴苓合剂中的黄芩苷的含量,研究并建立加味柴苓合剂质量标准。方法采用HPLC测定黄芩苷的含量,Alltech色谱柱,检测波长:274nm,流动相:甲醇-水-冰醋酸(50∶50∶1),柱温:35℃,流速:1mL.min-1。结果黄芩苷在0.3635～3.635μg范围内与峰面积的线形关系良好,回归方程:Y=4.3387×107X-3.6969×105,r=0.9997,平均回收率为99.7%,RSD为1.21%,测定3个批号的加味柴苓合剂,黄芩苷的含量在3.73-3.98mg.mL-1。结论本方法简便、灵敏、准确。

柴苓定眩合剂中3种药材的薄层色谱鉴别

目的对柴苓定眩合剂鉴别方法进行研究。方法采用薄层层析法,对药品中所含的黄芩〔1〕、人参〔2〕和柴胡〔3〕进行鉴别。结果制定的鉴别方法排除了药品中其它成份对被检成份的干扰,专属性强,重现性好。结论本法可用于柴苓定眩合剂的质量控制。

柴苓定眩合剂中桂枝的薄层色谱鉴别

目的对柴苓定眩合剂鉴别方法进行研究。方法采用薄层层析法,对药品中所含的桂枝进行鉴别。结果制定的鉴别方法排除了药品中其它成份对被检成份的干扰,专属性强,重现性好。结论本法可用于柴苓定眩合剂的质量控制。