白芍标准煎液指纹图谱及化学成分指认

目的建立白芍饮片标准煎液的指纹图谱,对白芍有效成分进行指认,以期为白芍饮片的质量控制及临床应用提供理论依据。方法收集10批白芍饮片,分别制备白芍标准煎液;采用超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)法建立白芍标准煎液的指纹图谱,以2012版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》进行指纹图谱相似度分析;通过与对照品比对、与文献核对质谱数据,对共有峰进行指认。结果经检测,10批白芍标准煎液指纹图谱共标定了22个共有峰,各峰分离度较好,各样品间相似度均>0.9;共指认出5个共有峰:儿茶素,芍药内酯苷,芍药苷,除虫菊素Ⅱ,苯甲酰芍药苷。结论该研究建立的指纹图谱方法精密度、重复性、稳定性良好,可为白芍饮片的质量评价提供理论参考。

基于指纹图谱和多成分含量测定的护肝解毒汤标准煎液量值传递研究

目的:建立护肝解毒汤标准煎液的指纹图谱及多指标成分含量测定方法,为其标准煎液及制剂的质量评价研究提供参考。方法:采用HPLC法结合中药色谱指纹图谱相似度评价系统,对15批护肝解毒汤标准煎液进行指纹图谱、相似度分析及共有峰的指认,并建立煎液中5种指标性成分的同时检测方法,计算各成分的转移率。结果:15批标准煎液指纹图谱相似度>0.90,有22个共有峰,对照品比对出绿原酸、葛根素、芍药苷、甘草素、落新妇苷、黄藤苷、盐酸小檗碱、五味子醇甲、黄柏酮、梣酮10个成分,15批标准煎液中绿原酸、葛根素、落新妇苷、盐酸小檗碱、五味子醇甲的转移率分别为48.26%~63.80%、20.30%~31.50%、28.24%~39.11%、2.89%~5.60%、13.51%~21.85%。结论:采用指纹图谱、出膏率及指标性成分含量测定相结合的模式,对护肝解毒汤标准煎液的量值传递过程进行分析,可初步拟定护肝解毒汤标准煎液的质量标准,为其后续新药开发及相关制剂的质量控制提供依据。

经典名方泻黄散标准煎液化学成分的UPLC-Q-TOF-MS分析

目的采用UPLC-Q-TOF-MS技术解析经典名方泻黄散标准煎液的化学成分表征,同时进行化学成分分类,对代表性成分进行分析。方法采用Acquity HSS T_(3)(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),柱温40℃。在正、负离子模式下采集泻黄散的质谱数据。通过Masslynx 4.1软件与对照品比对、质谱数据分析以及参考相关文献对泻黄散的化学成分进行分析和鉴定。结果从泻黄散中共分析和鉴定出107个化合物,包括黄酮类化合物45个,三萜类27个,单萜类11个,苯丙素类10个,色原酮6个,生物碱类5个以及其他类3个。结论研究结果为泻黄散的进一步药效物质基础研究及质量控制方法的建立提供了实验依据。

茯苓-泽泻药对配伍研究及其标准煎液对肾病模型大鼠的影响

目的:根据古代医典茯苓泽泻药对经方配伍规律开展肾病综合征药效筛选,为相关病症的中医临床方案和新药开发提供理论和实验参考。方法:查阅同时含有茯苓和泽泻的祛湿类经方信息,量化表达后分析“茯苓-泽泻”药对配伍规律。按《医疗机构中药煎药室管理规范》制备其经典比例标准煎液。将不同组别大鼠分别连续灌胃21 d后,采用代谢笼测定各组大鼠24 h尿量,采用酶标仪和全自动生化分析仪测定24 h尿蛋白(UP)、血清白蛋白(Alb)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、血尿素氮(BUN)和血清肌酐(SCr)指标,采用苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理变化。结果:茯苓和泽泻在祛湿类经典方剂中配伍出现频次最高比例为1∶1,3∶5,2∶1;与模型对照组比较,给药3周后盐酸贝那普利组和不同配伍药对组24 h尿蛋白量均显著降低,血清Alb水平明显升高(P<0.01);不同药对组均有显著降TG作用,且以药对1∶1和3∶5组为最优;1∶1给药组较其他配伍组更显著降低SCr和BUN(P<0.05),并对肾组织病理损伤有一定的修复作用。结论:茯苓-泽泻药对配伍各给药组均能够显著减少多柔比星肾病大鼠24 h尿蛋白量,升高血清Alb水平,降低TC、TG水平,改善BUN、SCr,以茯苓-泽泻1∶1混煎为佳。

野菊花饮片、标准煎液、配方颗粒UPLC特征图谱相关性研究

目的:建立野菊花饮片、标准煎液、配方颗粒的UPLC特征图谱,并对其相关性进行评价。方法:采用UPLC法,Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸(B)溶液为流动相进行梯度洗脱,流速:0.3 ml·min^(-1);检测波长:335 nm;柱温:35℃;进样量:1μl;样品室温度:8℃。结果:分别建立了10批野菊花饮片、标准煎液、配方颗粒的特征图谱,并指认出绿原酸、蒙花苷等9个成分,野菊花配方颗粒、标准煎液、饮片的相似度均大于0.9。结论:野菊花饮片、标准煎液和配方颗粒中主要化学成分组成基本相同,建立的UPLC特征图谱方法可用于野菊花饮片及配方颗粒的质量控制。

忍冬藤饮片标准煎液质量评价研究

目的制备忍冬藤饮片标准煎液,并建立其质量控制方法。方法按照标准煎液制备要求制备15批忍冬藤饮片标准煎液,以绿原酸、咖啡酸、马钱苷作为定量检测指标,计算出膏率、含量和转移率,并建立超高液相色谱特征图谱分析方法。结果 15批忍冬藤饮片标准煎液的出膏率范围为6.44%～11.95%,绿原酸、咖啡酸、马钱苷含量范围分别为12.17～22.61 mg/g、2.75～5.12 mg/g、21.71～40.32 mg/g,转移率范围分别为28.13%～52.25%、53.93%～100.15%、40.04%～74.36%。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》软件进行分析和相似度评价,标定了10个共有特征峰,并指认绿原酸、咖啡酸、马钱苷3个色谱峰。通过与对照图谱比对,相似度均高于0.96。结论本研究建立的忍冬藤饮片标准煎液的质量评价方法准确、稳定、重复性良好,可为忍冬藤配方颗粒的质量控制提供参考。

女贞子标准煎液综合性评价

目的制备女贞子饮片标准煎液,并进行质量标准研究。方法制备16批不同产地女贞子饮片标准煎液,以特女贞苷为定量检测指标,计算转移率与出膏率,并建立其UPLC特征图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》软件进行分析。结果 16批女贞子标准煎液特女贞苷转移率为33.57%~56.91%,出膏率为23.20%~26.87%。UPLC特征图谱标定了10个共有峰,指认了其中1个峰。16批女贞子饮片标准煎液相似度评价结果显示其相似度均大于0.90。聚类分析将16批女贞子标准煎液分为2类;主成分分析提取出了3个主成分,其累积贡献率达92.73%。结论本研究可为女贞子标准煎液及其配方颗粒的质量控制提供参考。

四妙勇安汤标准煎液煎煮工艺的建立

目的建立四妙勇安汤标准煎液的煎煮工艺,为相关临床应用及制剂开发提供基础。方法正交试验考察药味浸泡时间、加水量、煎煮时间,单因素试验考察汤剂过滤方式,以哈巴苷、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、阿魏酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、安格洛苷C、哈巴俄苷、肉桂酸、甘草酸含量及出膏率为评价指标,确定煎煮工艺。结果煎煮工艺为准确称取处方各味饮片,混匀,加20倍量去离子水,置于陶瓷锅(加盖)中浸泡60 min,武火加热至沸腾,文火保持微沸煎煮60 min,2层纱布趁热过滤,60℃减压浓缩,定容至100 mL,各成分含量及出膏率稳定性良好(RSD<3.0%)。结论该方法稳定可行,能较好地保留四妙勇安汤有效成分,并保证其质量。

升陷汤标准煎液HPLC⁃ELSD特征指纹图谱建立及3种成分测定

目的建立升陷汤(黄芪、柴胡、升麻等)标准煎液HPLC⁃ELSD特征指纹图谱,并测定3种成分的含量。方法建立15批样品HPLC⁃ELSD特征指纹图谱,测定黄芪甲苷、知母皂苷BⅡ、桔梗皂苷D含量。结果15批样品特征指纹图谱中有6个共有峰,相似度大于0.9。黄芪甲苷、知母皂苷BⅡ、桔梗皂苷D分别在0.47~11.86、1.22~7.29、0.10~5.00μg范围内线性关系良好(r>0.9995),平均加样回收率分别为95.64%、97.42%、103.42%,RSD分别为1.82%、3.34%、2.06%。结论该方法准确、灵敏、稳定,可用于升陷汤标准煎液的质量控制。

基于指纹图谱和量值传递优化泻白散标准煎液制备工艺

目的在尊古的基础上结合现代技术,优选经方泻白散标准煎液制备工艺参数,为中药经典名方的研究提供参考。方法考证古籍中泻白散制备方法,通过高效液相色谱法测定指纹图谱相似度、地骨皮乙素、甘草苷和甘草酸量值传递转移率、浸出率等指标优选最佳工艺。结果泻白散标准煎液制备方法为取桑白皮、地骨皮各41.3g,甘草4.13g,粉碎过一号筛,加粳米10.5g,水1260mL,武火煎煮至沸腾后调至文火保持微沸,煎至880mL。用100目滤布进行固液分离,所得的滤液在60℃浓缩后冷冻干燥(T<-40℃,Vac<20Pa),即得泻白散标准煎液冻干粉。结论在还原经典的基础上,所确定的泻白散标准煎液的制备方法科学合理、稳定可行,为其质量标准的建立及复方制剂的开发研究奠定基础。

基于标准煎液的忘忧安神口服液量值传递相关性研究

目的:研究忘忧安神方饮片-标准煎液-口服液的物质群量值传递关系,评价忘忧安神口服液制备工艺的科学性和合理性。方法:制备10批忘忧安神方标准煎液及10批口服液,采用高效液相色谱法(HPLC)对10批忘忧安神方标准煎液及口服液进行指纹图谱检测及有效成分含量测定,并结合出膏率、有效成分转移率进行口服液制备过程中物质群的量值传递规律分析。结果:在饮片-标准煎液各生产环节间栀子苷、甘草苷、甘草酸、槲皮苷的平均转移率分别为77.35%、69.45%、57.95%、48.67%;在标准煎液-口服液中分别为83.60%、75.92%、75.08%、91.69%。10批忘忧安神方标准煎液及口服液与其各自对照指纹图谱的相似度均大于0.94,10批口服液指纹图谱与10批标准煎液对照指纹图谱的相似度均大于0.76。标准煎液-口服液出膏率平均传递率为63.54%。结论:采用指纹图谱、出膏率及指标性成分转移率相结合的模式,对忘忧安神口服液制备过程中的量值传递规律进行分析,建立了科学合理的忘忧安神口服液制备工艺评价方法,为口服液生产工艺过程的实施及复方制剂的质量评价研究提供参考。

保元汤标准煎液TLC鉴别方法的建立

目的建立保元汤标准煎液TLC鉴别方法。方法以人参皂苷Rb_(1)、Rg_(1)、Re,毛蕊异黄酮葡萄糖苷,甘草苷,肉桂酸,6-姜酚为对照品,分别表征组方药味人参、黄芪、甘草、肉桂、生姜。再考察样品前处理方法,并对展开剂、显色及检视条件、点样量、展距、温湿度条件等进行研究。结果标准煎液经固相萃取柱后,以正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5,10℃以下放置的上层液)为展开剂,在紫外光(254 nm)下检视黄芪;以10%硫酸乙醇溶液为显色剂,在105℃下加热至斑点显色清晰后,在紫外光(366 nm)下检视人参、甘草;经乙酸乙酯萃取后,以石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯-甲酸(10∶10∶1)为展开剂,碘熏显色,在紫外光(254 nm)下检视肉桂、生姜。目标物斑点清晰,无拖尾,缺方样品无干扰。结论该方法专属性强,重复性好,操作简单,结果直观,实现了保元汤标准煎液中所有药材的鉴别,同时为保证工业生产过程中原料的可追溯性及该方现代制备工艺的质量控制标准提供实验依据。

忘忧安神方标准煎液HPLC指纹图谱建立及4种成分含量测定

目的:建立忘忧安神方标准煎液(WAPSD)高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱及4种指标性成分栀子苷、甘草苷、槲皮苷、甘草酸含量测定方法,为忘忧安神方(WAP)的质量控制提供参考。方法:制备10批WAPSD,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)对WAPSD样品进行含量测定,建立10批WAPSD的HPLC指纹图谱,采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”软件对其进行相似度评价,对共有峰进行归属及指认。结果:栀子苷质量分数为36.84~55.86 mg·g^(-1),甘草苷质量分数为3.96~6.57 mg·g^(-1),槲皮苷质量分数为4.59~13.76 mg·g^(-1),甘草酸质量分数为16.48~21.40 mg·g^(-1),不同批次4种成分含量差异较大,说明不同批次的栀子、甘草、合欢花质量差异较大。建立了WAP的HPLC指纹图谱,10批WAPSD指纹图谱与对照图谱相似度均大于0.94;标定了36个共有峰,多数峰来源于黄花菜、甘草、栀子;指认了4个共有峰,分别为17号峰栀子苷、24号峰苷草苷、26号峰槲皮苷、35号峰甘草酸。结论:所建立WAPSD多指标成分测定及指纹图谱方法灵敏度高、准确性好、有较高稳定性,能体现WAP组分的整体特征,可为WAP后续开发及其成品制剂的质量控制提供参考。

五味消毒饮标准煎液指纹图谱的建立

目的建立五味消毒饮标准煎液的指纹图谱,并对其特征峰进行药材归属。方法制备16批次五味消毒饮标准煎液和单味药标准煎液,采用高效液相色谱法对其进行测定。色谱柱为YMC-Pack ODS-A(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃,检测波长330 nm,进样量20μL。结果共确定了13个共有峰,对每个共有峰归属到单味药材。16批五味消毒饮标准煎液HPLC指纹图谱相似度均大于0.99。结论该方法准确可靠,重复性和稳定性较好,可为五味消毒饮标准煎液的质量控制提供参考。

HPLC法同时测定半夏泻心汤标准煎液中黄芩苷和盐酸小檗碱含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定半夏泻心汤标准煎液中黄芩苷和盐酸小檗碱含量的方法。方法:采用Zorbax Eclipse SB-C18(250mm×4.6mm,5μm,S.N.USCL072720)色谱柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液(加入三乙胺调pH=2.5)梯度洗脱,流速为1.0mL·min(-1),检测波长为275nm,柱温为25℃,进样量为10μL。结果:黄芩苷和盐酸小檗碱检测浓度分别在45.0～180.01μg·mL^(-1)(r=0.9992)、4.7～18.7μg·mL(-1)(r=0.999 7)浓度范围内与峰面积积分线性关系良好;精密度、稳定性、重复性的RSD均<2.0%,平均加样回收率(n=6)分别为103.33%和101.31%,RSD分别为0.74%、1.46%。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于同时测定半夏泻心汤标准煎液中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量。

青皮饮片标准煎液质量评价研究

目的:制备青皮饮片标准煎液,并建立其质量控制方法。方法:按照标准煎液制备要求制备10批青皮饮片标准煎液,建立UPLC特征图谱分析方法,以橙皮苷为定量指标,计算出膏率、含量和转移率。结果:10批青皮标准煎液的出膏率范围为19.9%~29.4%,橙皮苷含量范围为25.5~33.0 mg﹒g^-1,转移率范围为8.9%~11.1%。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012 版)》软件进行分析和相似度评价,标定了8个共有特征峰,并指认橙皮苷、川陈皮素共2个色谱峰。通过与对照图谱比对,相似度均在0.99以上。结论:本研究建立的青皮饮片标准煎液的质量评价方法准确可靠、稳定性、重复性良好,可为青皮配方颗粒及其他源于青皮水煎液的制剂的质量控制提供参考。

浅析标准煎液在中药复方研究进展中的作用

从中药标准煎液的概念、特点、建立方法的标准化等方面总结分析差异,对中药标准煎液与传统汤剂进行对比,研究分析化学成分、毒理活性、临床疗效等,分析影响标准煎液的质量评价的因素,为全面掌握中药复方标准煎液,为标准煎液在中药复方名方中的推广应用及研究经典名方物质基准提供借鉴。

中药标准煎液科学问题的探讨

该文在梳理中药配方颗粒发展历程与存在不足的基础上,提出中药标准煎液的概念,将其作为中药配方颗粒的模式标准,标化配方颗粒的生产过程及质量标准。按照"药材标准化、工艺规范化、生产智能化、质量标准化、包装规格化、仓储信息化"的原则统一标准;通过标准煎液和传统汤剂的化学成分、药理活性及临床疗效的研究进行一致性评价,阐释科学问题,旨在保证中药配方颗粒质量稳定、均一,临床应用安全、有效。

敦煌古医方大补肾汤标准煎液HPLC指纹图谱及多指标成分测定研究

目的建立敦煌古医方大补肾汤(Dabushen Decoction,DD)标准煎液的HPLC指纹图谱及指标成分含量测定方法,并探寻其量值传递规律。方法制备15批DD标准煎液,建立其HPLC指纹图谱,明确相似度及峰归属,测定指标成分5-羟甲基糠醛、甘草苷、肉桂酸、甘草酸、五味子醇甲的含量、全方出膏率及其转移率,分析饮片-标准煎液间的量值传递关系。结果15批DD标准煎液指纹图谱的相似度均大于0.9,标定了28个共有峰,并指认5个色谱峰(5-羟甲基糠醛、甘草苷、肉桂酸、甘草酸、五味子醇甲)。指标成分5-羟甲基糠醛为1.173~1.404 mg/g,转移率为36.09%~40.79%;甘草苷为2.159~3.413 mg/g,转移率为31.91%~37.41%;肉桂酸为0.317~0.614 mg/g,转移率为32.74%~40.64%;甘草酸为4.175~6.559 mg/g,转移率为20.95%~28.48%;五味子醇甲为0.225~0.275 mg/g,转移率为3.52%~4.29%;出膏率为22.24%~26.75%,转移率为93.14%~111.01%。结论采用指纹图谱、多指标含量及出膏率相结合的评价模式对DD标准煎液进行量值传递分析,科学合理,系统全面,可为后续DD的制剂开发和质量控制提供参考。

经典名方黄芪桂枝五物汤标准煎液化学成分的UPLC-Q-TOF-MS分析

采用UPLC-Q-TOF-MS技术解析经典名方黄芪桂枝五物汤标准煎液的化学成分。以Acquity HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)为色谱柱,0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,柱温40℃。在正、负离子模式下采集黄芪桂枝五物汤标准煎液的质谱数据。通过Masslynx 4.1软件结合SciFinder数据库、对照品比对、质谱数据分析及参考相关文献对黄芪桂枝五物汤标准煎液的化学成分分析和鉴定。共分析和鉴定出110个化合物,包括33个黄酮类化合物、14个单萜苷类化合物、8个三萜类化合物、8个姜辣素类化合物、17个苯丙素类化合物、12个有机酸类化合物、7个氨基酸类化合物以及11个其他类化合物。该研究结果为黄芪桂枝五物汤标准煎液的进一步药效物质基础研究及质量控制的建立提供了实验依据。